浙江大学
硕士学位论文
多杀菌素产生菌基因组重排育种研究
姓名：林赛珍
申请学位级别：硕士
专业：生物化工
指导教师：金志华
20070501
３０１６ｕ／ｍｌ，增长６５．３％，而传统的诱变育种方法达到此目标，通常需耗时３～４年筛选２５０００～３００００株菌才能实现。它和经典诱变育种相比有着较大的优势，它无需对生物系统有充分的认识和了解就可以对不同的优良性状进行组合而优化代谢途径，能快速改进可菌种表型。由此可见，采用基因组重排方法进行育种，具有用孢子、菌丝的细胞融合、诱变育种不可替代的优越性。
１．２．２基因组重排原理
基因组重排技术是分子定向进化在全基因组水平上的延伸，它将重组的对像从单个基因扩展到整个基因组，进行基因组重排首先需要有一个含有各种不同正突变的基因组库，随后通过原生质体融合将这些正突变菌株的全基因组进行随机重组，并筛选目的性状进一步改进的菌株来进行下一轮基因组重排，这样通过循环多轮的随机重组可以快速、高效的选育出表型得到较大改进的杂交菌种。原生质体融合进行基因组重排的示意图见图１．３。
图１．３基因组重捧示惹图
Ｆｉｇｕｒｅ１．３Ｓｃｈｅｍａｔｉｃｄｉａｇｒａｍｏｆｇｅｎｏｍｅｓｈｕｆｆｌｉｎｇ
原生质体研究始于１９世纪末，直到２０世纪五六十年代才开始采用酶法大量制备植物和微生物原生质体。原生质体是细胞去除了坚韧细胞壁后对渗透压极为敏感的球质体，最外层是裸露的细胞质膜，失去了细胞壁的原生质体，染色体ＤＮＡ在诱变剂作用下，更易引起死亡突变，敏感性提高吲。菌种的敏感性越高，诱发突变的机会越大。因此，用原生质体代替孢予、菌丝细胞作为诱变育种的材