现代生物饵料培养学
绪论
第一章微藻培养（microalgae culture）
第二章轮虫培养（rotifer culture）
第三章卤虫培养（brine shrimp culture）
教材：成永旭等，生物饵料培养学，中国农业出版社，2005年8月第2版.
中文参考书
陈明耀等，生物饵料培养，中国农业出版社，1995年10月第1版.
梁英等，海水生物饵料培养技术，青岛海洋大学出版社，1998.
外文参考书：
1.Algal Culturing Techniques
Editor: Robert A. Andersen
Price: $84.95
Hardcover (精装本): 578 pages
Publisher: Academic Press (2005.1.21)
ISBN（书号）: 0120884267
注：海大图书馆有此书
2. Plankton Culture Manual
Editor: Frank H. Hoff and Terry W. Snell
Price: $70
Softcover (平装本): 183 pages
Publisher: Florida Aqua Farms (2007)
ISBN: 9780966296044
3. Handbook of Microalgal Culture: Biotechnology and Applied Phycology
Editor: Amos Richmond
Price: $333.99
Hardcover (精装本): 584 pages
Publisher: J, Wiley-Blackwell (2004.1)
ISBN: 9780632059539
4.Algae (2nd Edition)
Editor: James E. Graham / Lee W. Wilcox / Linda E. Graham
Price: $127.73
Hardcover (精装本): 584 pages
Publisher: Benjamin Cummings (2008.11.9)
ISBN: 9780321559654
注：海大图书馆有此书的第1版。
浮游生物学与生物饵料培养实验：
教材：梁英主编，《浮游生物学与生物饵料培养实验》,中国海洋大学出版社. 2009年7月第1版.
综述题目
1.微藻大规模培养方法的研究现状及前景
2.微藻种质保存的研究现状及前景
3.海洋药源微藻的研究现状及前景
4.利用微藻生产生物柴油的研究现状及前景
5.雨生红球藻的研究现状及前景
6.微藻毒素的研究现状及前景
7.微藻的应用概述
8.生物饵料研究最新进展
9.轮虫营养强化方法概述
10.卤虫应用前景概述
课程教学目标与基本要求
主要内容:
微藻、轮虫、卤虫等生物饵料的生物学特征、培养的基本技能和方法。
基本要求:
了解常用生物饵料的基本形态、生态特征
掌握生物饵料培养的基本技能与方法
达到能熟练运用所学知识与技能进行生产性培养的要求
为开展生物饵料方面的研究工作打下基础
绪论
第一节生物饵料培养学的基本概念
第二节生物饵料在水产养殖中的应用
第三节生物饵料培养未来发展方向
第一节生物饵料培养学的基本概念
一、生物饵料培养学的定义
饲料：饲养动物（禽、畜等）的食物。
饵料：鱼、虾、贝等水产动物的食物。
饵料生物:是指在海洋、江河、湖泊等水域中生活的各种可供水产动物食用的水生动、植物（微藻microalgae、轮虫rotifer、卤虫brine shrimp、桡足类copepod等）。
生物饵料（live food）: 是经过筛选的优质饵料生物，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活的饵料。微粒饲料（microdiet）：将不同营养物质加工，配合，制成相应生物饵料大小的颗粒饲料产品，称微粒饲料。
生物饵料培养学：是研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用性科学。
主要任务：
筛选优良生物饵料品种。
提高生物饵料培养水平。
研究和评价生物饵料的营养价值。
二、生物饵料培养学的主要研究内容
（一）生物饵料的筛选
筛选原则：
1．大小适中：不同的动物及同种动物的不同发育阶段对饵料大小的要求不同。
扇贝幼虫的早期阶段：等鞭金藻等个体小、游动缓慢的种类。
扇贝幼虫的后期阶段：扁藻、塔胞藻等个体较大，游动活泼的种类。
球等鞭金藻：多用于培养扇贝(scallop)、贻贝(mussel)等双壳贝类的幼虫(larvae)
角毛藻、杜氏藻：培养海参(sea cucumber)幼虫
小球藻、微绿球藻：多用于培养轮虫(rotifer)
2．方便养殖动物摄食：生物饵料在水中的运动速度与在水层中的分布情况，应便于养殖动物摄食。
微藻、轮虫：运动能力较弱——开口饵料
卤虫无节幼体、枝角类、桡足类：游动较快
扇贝幼虫：浮游生活，选用浮游生物饵料。
鲍鱼苗（稚鲍）：底栖生活，选用底栖生物饵料。
3．营养丰富
容易被养殖动物消化吸收，具有较高的营养价值，使养殖动物生长迅速。
营养价值：
（1）测定营养成分：
蛋白质（protein ），脂肪（lipid ）
碳水化合物（carbohydrate），维生素（vitamins）
脂肪酸（fatty acid），特别是高度不饱和脂肪酸High unsaturated fatty acid（HUFA）
气相色谱-质谱仪（GC-MS Gas Chromatography-Mass Spectrometer）：测脂肪酸
傅立叶变换红外显微镜（FT-IR spectroscopy - Fourier transform infrared spectroscopy）：可测蛋白质、脂肪、碳水化合物等的相对含量
（2）投喂效果实验：体长、体重增加的快慢等。
4．生物饵料及其代谢产物无毒或毒性很小，使养殖动物具有较高的成活率。例微囊藻和螺旋藻。
5．生物饵料的生命周期短，生长繁殖迅速。
6．对环境的适应能力强，易于大量培养(large-scale culture)，培养达到的密度大，产量高。
（二）生物饵料的大量培养技术研究
生物饵料的基本生物学资料：形态、分类、分布
种群的生理生态特证、生殖力、抗逆性
大量培养的技术性指标
（三）生物饵料的营养价值评价
筛选、定向培养、营养强化
第二节生物饵料在水产养殖中的应用
育苗
贝类育苗：微藻，常用硅藻类、金藻类和绿藻类。
鲍鱼（底栖种类）育苗：底栖硅藻。
甲壳类（虾、蟹等）育苗：微藻、轮虫、卤虫的无节幼体、桡足类等。
鱼类育苗：轮虫、卤虫的无节幼体、桡足类、枝角类、糠虾类等。
海参育苗：角毛藻、盐藻（杜氏藻）、底栖硅藻等。
养成
卤虫的成虫：是鱼、虾养成期的优质饵料。
光合细菌：是鱼、虾池塘的水质净化剂。
螺旋藻：蛋白质含量高于50%, 是人工配合饵料的理想添加剂。
第三节生物饵料培养未来发展方向
一、生物饵料培养的中长期目标
生物饵料规模化、稳定性、高密度培养技术
饵料的营养强化
新型生物饵料的筛选
富含HUFA微藻品系的筛选
生物饵料携带细菌数量的控制
生物饵料在自然条件下的人工培养和增殖，人工生态育苗
生物饵料的浓缩和保存
二、生物饵料培养的终极目标
苗种的饵料问题：水产苗种规模化和产业化的主要制约因素
微粒饲料的完全取代：全价微粒饲料
目前存在的问题：
要求的粒径小，加工工艺复杂，微粒饲料的均质性难以保证
营养成分在水中的稳定性难以保证
微粒饲料在水中的悬浮性难以保证
对鱼虾蟹幼体的营养需求了解较少
第一章微藻培养
第一节概述
第二节主要培养种类及其生物学
第三节影响微藻生长繁殖的因子
第四节微藻的培养液
第五节微藻的培养方式与设施
第六节微藻培养方法
第七节微藻在一次性培养中生长繁殖的特性
第八节藻种
第一节概述
一、微藻培养的发展概况
微藻（microalgae）: 指那些单细胞或数个细胞组成的微小藻类。
16世纪：墨西哥人将螺旋藻晒干制成食品。
19世纪末：开始进行微藻的培养，小球藻、栅藻等，作为植物生理学的材料。20世纪初：开始进行作为水产饵料的微藻培养。
第二次世界大战后：开展小球藻培养研究，代替粮食和饲料。
20世纪80年代末：开始进行微藻的异养培养（利用工厂的发酵设备）。
我国的微藻事业：
20世纪50年代后期：开展大规模小球藻培养。
70年代后期：将螺旋藻引入我国。
目前大规模培养的种类：螺旋藻、盐藻等。
微藻产业发展较快的国家：以色列、日本、泰国、美国等。
培养的主要种类：螺旋藻、盐藻、小球藻等。
目前国内外水产养殖中，常用的微藻隶属于7个门，几十个属。
二、微藻的应用概述
1 作为人类的营养食品和保健食品（螺旋藻、小球藻等）
2 作为药源生物资源（抗细菌、抗病毒、抗肿瘤、抗心脑血管疾病）
3 作为人类食品添加剂(调色、调味)
4 作为水产动物的饵料（鲜活微藻、贮存微藻）
5 用富含EPA/DHA的微藻强化轮虫、卤虫
6 作为水产动物饵料添加剂和禽、畜饲料添加剂
7 利用微藻提取EPA和DHA、色素、甘油等生物活性物质
8 废水处理
9 植物生长调节剂
10 作为生物柴油的原料（高效能源微藻）
11 微藻的危害(微藻毒素、赤潮等)
第二节微藻的培养种类概述
硅藻类：三角褐指藻、小新月菱形藻、牟氏角毛藻、纤细角毛藻、中肋骨条藻 绿藻类：亚心形扁藻、塔胞藻、盐藻、雨生红球藻、小球藻、微绿球藻
金藻类：球等鞭金藻、湛江等鞭藻、绿色巴夫藻
黄藻类：异胶藻
蓝藻类：钝顶螺旋藻
一、三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)
1.分类地位：
硅藻门/羽纹硅藻纲/褐指藻目/褐指藻科/褐指藻属
2.形态特征：
细胞梭形、三角形、卵形。
梭形细胞:长约20微米。
三出放射形细胞:臂长皆为6-8微米。
卵形细胞较少见，在平板培养基上培养可出现卵形细胞。
3.繁殖方式：
无性的二分裂繁殖。因无硅质壳，分裂时细胞不会缩小。
4.生态条件：
温度：生长适温5-25℃，最适温度10-20℃，超过25℃时停止生长，最终大量死亡。盐度：生存盐度9-92，最适盐度25-32。
光照强度：适应光照强度范围1000-8000lx，最适范围3000-5000lx，切忌阳光直射。酸碱度：适应的pH范围为7-10，最适pH 7.5-8.5 。
目前，三角褐指藻有多个品系(strains)，如
MACC/B114
MACC/B118
MACC/B221
MACC/B229
UTEX640
2038
品系不同，细胞的形态及营养成分都有差异，应用时可根据需要选择合适的品系。
MACC: Microalgae Culture Center in Ocean University of China
B: Bacillariophyta (硅藻门)
UTEX：The Culture Collection of Algae at the University of Texas at Austin (USA)
二、小新月菱形藻（Nitzschia closterium f.minutissima）
1.分类地位：
硅藻门/羽纹硅藻纲/管壳缝目/菱形藻科/菱形藻属
2.形态特征：
小新月菱形藻俗称“小硅藻”。
单细胞,细胞中央膨大,呈纺锤形,两端渐尖。
体长12-23微米，宽2-3微米。
细胞中央具一细胞核。
色素体2片，黄褐色，位于细胞中央细胞核两侧。
3.繁殖方式：
无性的二分裂繁殖。
4.生态条件：
温度：生长适温5~28℃，最适温度15℃~20℃，超过28℃时停止生长，最终大量死亡。
盐度：生存盐度18-61.5，最适生长盐度25-32。
光照强度：最适范围3000-8000lx，切忌阳光直射。
酸碱度：适应的pH范围为7-10，最适pH 7.5-8.5 。
三角褐指藻和小新月菱形藻：
培养较早，培养方法比较成熟。具有生长快、浓度高、容易培养、营养丰富的特点，是贝类和虾类幼体的良好饵料。
低温种（low temperature-tolerance species）, 25℃以上生长即受到严重抑制。
三、牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）
1.分类地位：
硅藻门/中心硅藻纲/盒形藻目/角毛藻科/角毛藻属
2.形态特征：
细胞：短圆柱形，壳面大都是椭圆形。壳环面呈长方形至四角形。
细胞小型，多数呈单细胞，有时2-3个组成群体。
角毛细长，约20-30微米。
色素体1个，呈片状，黄褐色
3.繁殖方式：
无性的二分裂繁殖。当环境不良时可形成休眠孢子，此外，也能形成复大胞子。
4.生态条件：
温度：高温种类，生长适温10-40℃，最适温度25℃-35℃。
盐度：半咸水种类，适宜盐度2.56-35，最适盐度22-26。
光照强度：适宜光照强度范围2000-15000lx，最适范围6000-10000lx。
酸碱度：适应的pH范围为6.4-9.5，最适pH 8.0-8.9 。
四、纤细角毛藻（Chaetoceros gracilis）
1.分类地位：
硅藻门/中心硅藻纲/盒形藻目/角毛藻科/角毛藻属
2.形态特征：
细胞小型，多呈单细胞，有时2~3个细胞组成链状，大小5~7×4微米(角毛长30~37微米)。
本种是1988年从美国Solar Energy Institute引进的，并已在国内育苗场推广应用。
3.繁殖方式：
一般是无性二分裂繁殖，在不良环境下可形成休眠孢子。
4.生态条件：同牟氏角毛藻。高温种类。
牟氏角毛藻和纤细角毛藻可以作为海参(sea cucumber)、甲壳类(crustaceans) 等幼体的饵料。
耐高温种类(high temperature-tolerance species) ，适合夏季培养。
五、中肋骨条藻（Skeletonema costatum）
1.分类地位：
硅藻门/中心硅藻纲/圆筛藻目/骨条藻科/骨条藻属
2.形态特征：
细胞为透镜形或圆柱形，直径为6-7微米。
壳面圆而鼓起，着生一圈细长的刺，与临细胞的对应刺组成长链。刺的数目为8-30条。
色素体通常2个，位于壳面各向一面弯曲。
3.繁殖方式：
一般为无性的二分裂繁殖。复大孢子是经过卵配形成的。复大孢子的形成与温度、盐度和光照有关。
4.生态条件：
温度：生长适温10~34℃，最适温度20℃~30℃。
盐度：生存盐度7-50，最适生长盐度25-30。
光照强度：适应范围500-10000lx。
酸碱度：最适pH 7.5-8.5。
中肋骨条藻：广温广盐种类，是对虾幼体、缢蛏、牡蛎等的优良饵料。
六、亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis）
1.分类地位：
绿藻门/绿藻纲/团藻目/衣藻科/扁藻属
国外多使用另一分类系统，该系统根据细胞前端的凹陷独立为一纲，即：
绿枝藻纲Prasinophyceae
四片藻属Tetraselmis因此扁藻属Platymonas与四片藻属Tetraselmis 为同属异名。
扁藻的形态特征：
2.形态特征：
单细胞，正面观为卵形、椭圆形或心形。
具4条等长的顶生鞭毛(flagella) ，约等于或略短于体长。
色素体大，呈杯状(cup-shaped) ，内有一个蛋白核(pyrenoid) 。
眼点(eyespot) 1个，细胞核1个。
我国作为饵料培养的种类还有青岛大扁藻，比亚心形扁藻大。
3.繁殖方式：
无性繁殖，细胞纵分裂成两个（少数情况下四个）子细胞。当环境不良时，能形成休眠孢子，椭圆形，一个或两个。
4.生态条件：
温度：生长适温7~30℃，最适温度20℃~28℃。对低温的适应能力强，对高温的适应能力差。
盐度：生存盐度8-80，最适生长盐度30-40。
光照强度：适应范围1000-20000lx，最适范围5000-10000lx。
酸碱度：适应的pH范围为6-9，最适pH 7.5-8.5。
七、塔胞藻(Pyramidomonas sp.）
1.分类地位：
绿藻门/绿藻纲/团藻目/盐藻科/塔胞藻属
2.形态特征：
单细胞，细胞呈倒卵形，少数为半球形。
细胞前端具一圆锥形凹陷，由凹陷中央向前伸出4条鞭毛。
色素体杯状，基部有一个蛋白核。
细胞单核，位于细胞的中央偏前端。
细胞裸露，不具细胞壁(Cell wall)。
3.繁殖方式：
主要为纵分裂繁殖。
4.生态条件：同扁藻。
扁藻和塔胞藻适应力较强，生长繁殖迅速，较容易培养，是亲贝和许多贝类后期幼虫的良好饵料。
八、盐藻（Dunaliella spp.）
1.分类地位：
绿藻门/绿藻纲/团藻目/盐藻科/盐藻属（杜氏藻属）
2.形态特征：
单细胞，无细胞壁( no cell wall) ，体形变化大，通常为梨形、椭圆形等。
具两条等长顶生鞭毛(two equal flagella) ，比藻体约长1/3。
色素体杯状，内有一个蛋白核。
一般细胞长12-21微米，宽约6-13微米。
3.繁殖方式：
主要为无性纵分裂繁殖。在环境不良时进行有性生殖。
4.生态条件：
温度：最适温度20℃~35℃。
盐度：最适盐度60-70。
光照强度：最适范围4000-8000lx，切忌阳光直射。
酸碱度：对pH适应性强，可在高pH的碱性条件下生长，最适pH 7.0-8.5 。
盐藻细胞内能储存大量经济价值较高的甘油和β-胡萝卜素等有机化合物，可通过大量培养杜氏藻提取β-胡萝卜素。
九、雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)
1.分类地位：
绿藻门/绿藻纲/团藻目/红球藻科/红球藻属
2.形态特征：
单细胞，细胞为椭圆形到卵形。
细胞壁与原生质体之间有一定间距，充满胶状物质。
两条等长鞭毛，约等于体长。
环境不良时，产生厚壁孢子，积累大量的虾青素。
淡水种。
3.繁殖方式：
环境适宜时，游动细胞以无性繁殖方式产生2、4、8个游孢子。经一定时间的生长发育，游孢子突破孢子囊壁释放出来，成为新的游动细胞。
4.生态条件：
温度：生长适温20~28℃，超过30℃时生长受到抑制。
盐度：淡水种。
光照强度：最适光强1500lx左右，高于2000lx则抑制其生长。
酸碱度：最适pH 7.8左右。
雨生红球藻：含大量的虾青素（细胞干重的2%）
是目前已知的虾青素含量最高的微藻
虾青素的用途：
虾青素是鲑鳟鱼饲料中必不可少的成分
作为天然抗氧化剂应用于食品、医药、化妆品。
十、小球藻（Chlorella s pp.）
1.分类地位：
绿藻门/绿藻纲/绿球藻目/小球藻科/小球藻属
2.形态特征：
单细胞，小型，细胞直径2-12μm。
细胞球形或椭圆形。
色素体一个，周生，杯状或片状。
大多数淡水生活，少数海水中生活。
3.繁殖方式：
当细胞分裂时，原生质体分裂为2、4、8、…个似亲孢子，等到母细胞壁破裂，似亲孢子就释放出来。4.生态条件：
温度：生长适温10~36℃，最适温度25℃-30 ℃。
盐度：适应盐度范围广。经驯化可在淡水及盐度为45的海水中生长繁殖。
光照强度：最适范围3000-10000lx。
酸碱度：适应的pH范围为5.5-8.0。
小球藻蛋白质含量丰富，可生产保健食品。在水产上，小球藻多用于培养轮虫
十一、微绿球藻（Nannochloris oculata）
1.分类地位：
绿藻门/绿藻纲/绿球藻目/绿球藻科/微绿球藻属
2.形态特征：
细胞球形，直径2-4微米。
色素体一个，淡绿色，侧生。
眼点一个，圆形，淡橘红色。
无蛋白核，有淀粉粒1-3个，侧生。
细胞壁极薄，幼年细胞看不到，在-分裂之前才变明显。
3.繁殖方式：
二分裂繁殖，细胞分裂为2个子细胞。
4.生态条件：
温度：生长适温10~36℃，最适温度25~30℃。
盐度：适宜盐度范围4-36。
光照强度：最适光照强度为10000lx左右。
酸碱度：最适pH 7.5-8.5 。
微绿球藻多用于培养轮虫
十二、球等鞭金藻（Isochrysis galbana）
1.分类地位：
金藻门/金藻纲/等鞭金藻科/等鞭金藻属
2.形态特征：
单细胞，细胞裸露，椭圆形、卵形、球型等。
具2条等长鞭毛(two equal flagella)
色素体1-2个。
贮藏物为油滴和白糖素，白糖素位于细胞后端。
3.繁殖方式：
主要为无性的二分裂繁殖。环境不良时形成特殊的孢囊-内生孢子。
4.生态条件：
球等鞭金藻有三个常见的生态品系
球等鞭金藻3011(高温品系high temperature-tolerance species )
球等鞭金藻8701(低温品系low temperature-tolerance species )
球等鞭金藻塔溪堤品系（Tahitian Isochrysis galbana），简称塔溪堤，最初从塔溪堤（南太平洋的一个岛屿）养殖水体分离筛选而得，属高温品系。
十三、湛江等鞭金藻（Isochrysis zhanjiangensis）
1.分类地位：
金藻门/金藻纲/等鞭金藻科/等鞭金藻属
2.形态特征：
多为卵形或球形，大小为6~7×5~6微米。
具有两条等长的鞭毛，从细胞前端伸出。
色素体两片，侧生，金黄色。
细胞核位于两片色素体之间。
一个或几个白糖素颗粒, 位于细胞后部。
3.繁殖方式：
主要为无性二分裂繁殖。
4.生态条件：
温度：生长适温9~35℃，最适温度25℃~32℃。
盐度：生存盐度10-50，最适生长盐度22.7-35.8。
光照强度：最适范围5000-10000lx。
酸碱度：最适pH 7.5-8.5 。
球等鞭金藻和湛江等鞭金藻可以作为扇贝（scallop）、牡蛎（oyster）等多种双壳类（bivalves) 幼虫（larvae）的饵料，效果良好。
大多数等鞭藻富含DHA。
十四、绿色巴夫藻（Pavlova viridis）
1.分类地位：
金藻门/金藻纲/巴夫藻属
2.形态特征：
绿色巴夫藻，又称3012，是1982年从山东海阳县的海水样品中分离而得。
无细胞壁（cell wall），正面观呈圆形，侧面观为椭圆形或倒卵形。
细胞大小为6.0×4.8×4.0微米。
具2条不等长的鞭毛和1条附鞭。
色素体一个，裂成2大叶围绕着细胞。
绿色巴夫藻的群体细胞呈淡黄绿色至绿色。
绿色巴夫藻可用于海湾扇贝（Bay scallop）和中国对虾育苗中，效果良好。
3.繁殖方式：
主要为无性二分裂繁殖。
4.生态条件：
温度：生长适温10~35℃，最适温度15℃~30℃。
盐度：生存盐度5-80，最适生长盐度10-40。
光照强度：最适范围4000-10000lx。
酸碱度：最适pH 7.5-8.5 。
十五、异胶藻（Heterogloea sp.）
1.分类地位：
黄藻门/黄藻纲/异球藻目/异胶藻属
2.形态特征：
细胞长圆形或椭圆形。长4~5.5微米，宽2.5~4微米。
色素体1个，片状侧生，占藻体大部分，呈黄绿色。
藻液颜色随着培养时间的延长从绿色变成黄色、土黄色。
可作为牡蛎(oyster)、贻贝(mussel)、菲律宾蛤仔(clam)、泥蚶(mud clam) 等幼体的饵料。
3.繁殖方式：
主要为无性二分裂繁殖。
4.生态条件：
温度：生长适温8~35℃，最适温度15℃~33℃。
盐度：生存盐度13-32。
光照强度：适应范围1000-8000lx。
酸碱度：最适pH 7.5-8.2 。
十六、钝顶螺旋藻（Spirulina platensis）
1.分类地位：
蓝藻门/蓝藻纲/颤藻目/螺旋藻属
2.形态特征：
藻体淡蓝绿色，细胞圆柱形。
藻体为单列细胞组成的不分支的丝状体，丝状体外无胶质鞘。
藻丝螺旋状卷曲。
无异形胞和厚壁孢子(No heterocysts and resting spores) 。
海、淡水中均有分布。
3.繁殖方式：
主要为无性二分裂繁殖，有时也以藻殖段繁殖。
4.生态条件：
分布广，适应能力强，最初生长于热带高温的碱水湖里，喜高温、高碱和强光。实验室长期培养藻丝易变直。
温度：生长适温15~40℃，最适温度35℃~37℃。
盐度：可在淡水中培养，也可驯化后在盐度为35的海水中生长。
光照强度：最适范围30000-35000lx。
酸碱度：最适pH 8.5-10.5 。
螺旋藻营养丰富、蛋白质含量高（达50%以上）容易消化、采收方便，多作为营养保健品。在水产上，螺旋藻可作为鱼、虾饲料添加剂。
第三节影响微藻生长繁殖的因子
一、光照（Light）
二、温度（Temperature）
三、盐度（Salinity）
四、营养盐（Nutrients）
五、二氧化碳（Carbon dioxide）
六、pH（酸碱度Acidity）
七、生物因子（Biotic factors）
一、光照（Light）
1. 光源
太阳光（主要）
人工光源（补充光源）
常用的人工光源有:
日光灯(fluorescent lamp)
白炽灯(incandescent lamp, not recommended)
金属卤素灯(metal halide lamp)
2. 光质
在植物的光合作用中，光质(light spectrum)和光量(light intensity)都是重要的。
光质：就是不同波长的光线，在太阳光光谱中，可分为3个主要部分，波长由短到长分别为紫外线、可见光（400-700nm）和红外线。
光合有效辐射(photosynthetically active radiation PAR) ：400-700nm
3. 光在藻细胞悬浮液中的穿透
光线进入藻液中，由于藻细胞的吸收和散射，随着深度的增加，光照强度迅速降低。
Light intensity plays an important role, but the requirements vary greatly with the culture depth and the density of the algal culture.
At higher depths and cell concentrations the light intensity must be increased to penetrate through the culture
(e.g. 1000lx is suitable for small flasks, 5000-10000lx is required for larger volumes).
4.光强
光量：是指光线总强度而言，称光照强度。
光照强度用照度计(lx light meter)测定，其单位是勒克司（lx）。
在植物生理研究领域及国外：光照强度常用 mol photons.m-2.s-1表示, 即每秒钟在每平方米面积上接受的
微摩尔量子光量。用量子辐射计、双辐射计、光量子计等测量。
1 μmol photons.m-2.s-1≈50lx
适光范围：是指生物能进行正常生长繁殖的光照强度范围。
饱和光照强度：光合作用或细胞分裂速率达到最大值时的光照强度称为最适光照强度或称饱和光照强度。补偿光照强度：适光范围的低限，称为补偿光照强度（光补偿点）。在这样的光照强度下，藻类呼吸作用消耗的氧气量与光合作用放出的氧气量恰好相等，细胞只能维持基础代谢不能生长。
5. 光周期（Photoperiod）
光照周期12L:12D，光暗周期14 h:10 h，16:08 light: dark cycle
饱和白昼现象：在较强的光照强度和较长的日照时间下，日照时间虽然增加，生长率并不再增加，这种现象称为饱和白昼现象。
光抑制（photoinhibition）: 过强和过长时间的光照会引起光抑制，使叶绿素发生光解而褪色。
Too high light intensity (e.g. direct sun light, small container close to artificial light) may result in photoinhibition.
6.间歇光的作用：用强光间歇照射时，和间歇照射时间总和相等的连续照射相比较，同化效果要大很多。
二、温度（Temperature）
适温范围：是指微藻能进行正常生长繁殖的温度范围。
最适温度范围：是指微藻生长繁殖最快、生命活动最旺盛的温度范围。
最低适应温度（低限）
最高适应温度（高限）
认为高温对生物体的破坏是化学性的，低温对生物体的破坏是机械性的，微藻对低温的忍耐性较强，可利用低温对微藻进行保种。
若温度超出最低适温和最高适温，生物的生命活动就要受到影响。例如：骨条藻的适温范围为8—32℃，最适温度范围20—25℃，适温低限和适温高限分别为8℃和32℃。
常见低温种类：三角褐指藻、小新月菱形藻等。
常见高温种类：角毛藻、湛江等鞭藻、等鞭藻3011等。
The optimal temperature for phytoplankton cultures is generally between 20 and 24℃, although this may vary with the species and strains cultured. Most commonly cultured microalgal species tolerate temperatures between 16 and 27℃. Temperatures lower than 16℃will slow down growth, whereas those higher than 35℃are lethal(有害的、致命的) for a number of species.
三、盐度（Salinity ）
水是一种富含各种盐类的溶液，地球上不同水域的水，含盐量的差别很大。
淡水水域：0.01~0.5
半咸水：0.5~16.0
海水水域：16.7~47.0
超盐水域：47.0以上
大洋水和径流降水较少的海区：35左右。
盐度单位：ppt (parts per thousand)
海水盐度对微藻的影响也有适盐范围、最适盐度范围、适盐高限和适盐低限等。以骨条藻为例，其适盐范围为7—50，最适盐度范围为25—30，适盐低限和适盐高限分别为7和50 。
四、营养盐（Nutrients）
大量元素（macronutrients）
微量元素（trace metals）
维生素（vitamins）
络合物（Chelators ）
土壤抽取液（soil extract）
微藻生长必需的每一种元素浓度：
最低量（低限）：低于最低限，对生长繁殖起抑制作用
最高量（高限）：超出高限，对微藻产生毒害作用影响其生长繁殖，甚至使微藻死亡。危害比前者更为严重。
需要特别注意的是，微量元素的适量和致毒量之间的幅度很小。
Many reactive micronutrient metals, such as copper and zinc, are toxic at elevated concentrations. For these metals, optimal growth occurs at intermediate concentrations, below which growth rate is limited and above which growth is inhibited.
五、二氧化碳（carbon dioxide）
光合作用的反应式：CO2+H2O→（CH2O）+ O2
培养微藻的水环境中，二氧化碳呈现各种形式：
游离的二氧化碳（CO2）
碳酸氢盐（HCO3－）
碳酸盐（CO32－）
碳酸（H2CO3）
各种存在形式在水中可互相转化。反应式为：
CO2+H2O?H2CO3?H++HCO3—?2H++CO32—
培养微藻过程中主要采用以下措施补充二氧化碳：
（1）通过搅拌增加水与空气的接触面，使空气中的二氧化碳溶于培养液中。
（2）通入普通空气（含二氧化碳0.03%），通过微小气泡增加水和空气的接触面，使空气中的二氧化碳溶入培养液中。
（3）通入含1%—5%二氧化碳的混合空气，效果好，但要防止过量致毒。
（4）向培养液中添加碳酸氢钠（容易引起沉淀）。
六、pH（酸碱度Acidity）
天然海水：pH值8.1-8.3
人工海水：一般调整为8.2左右
七、生物因子（Biotic factors）
促进生长：某些微藻（如日本星杆藻、骨条藻等）必须在有细菌存在的条件下才能生长良好。
抑制生长：吞食、寄生和抗生等。
第四节微藻的培养液
一、培养液的成分
二、常用微藻培养液配方
三、培养液的配制
Concentrations of cells in phytoplankton cultures are generally higher than those found in nature. Algal cultures must therefore be enriched with nutrients to make up for the deficiencies in the seawater.
一、培养液的成分
大量元素（macronutrients)
微量元素（trace elements）
维生素（vitamins）
络合物（chelators）
土壤抽取液（soil extract）
1．大量元素（macronutrients）
氮（N）、磷（P）、铁（Fe）、钾（K）、
镁（Mg）、硫（S）、钙（Ca）、硅（Si）
氮（N）硝酸钠和硝酸钾
磷（P）磷酸二氢钾，磷酸二氢钠。
铁（Fe）柠檬酸铁
硅（Si）硅酸钠。
Redfield 比值N:P≈16:1
若N:P≈30，则P为限制性元素
N:P≈5，则N为限制性元素
大量元素母液（Stock solutions of macronutrients）
Separate stock solutions of each macronutrient should be prepared at a concentration of 1000-fold of the final concentration so as to use 1 ml per 1000 ml of medium.
Phosphate stock solutions should never be stored in the polyethylene（聚乙烯）bottles because phosphate ions are strongly adsorbed onto polyethylene.
Silicate stock solutions should be stored in nonvitreous（非玻化的）material (e.g., Teflon-lined（聚四氟乙烯）, polyethylene, or polycarbonate（聚碳酸酯）because of dissolution of silicic acid from glass vessels.
If silica-free experiment is required, none of the stock solutions can be held in glass.
2. 微量元素（Trace elements）
微藻培养液中常用的微量元素有以下几种，其用量一般为0.5-50ppb。
锌（Zn）---硫酸锌（ZnSO4.4H2O）
铜（Cu）---硫酸铜（CuSO4.5H2O）
锰（Mn）---氯化锰（MnCl2.4H2O）
钼（Mo）---钼酸钠（Na2MoO4.2H2O）
钴（Co）---氯化钴（CoCl2.6H2O）
3. 维生素（Vitamins）
Three vitamins—vitamin B12，B1 and biotin（生物素，维生素H）are usually used for culture of microalgae.
Many algae need only one or two of the vitamins, but there seems to be no harm caused by adding a nonessential.
The general order of vitamin requirements for algae is vitamin B12 > B1 > biotin.
Trace metals and vitamins are usually prepared as stock solutions of high concentrations to permit weighing of easonable amounts.
4. 土壤抽取液（Soil extract）(p85)
In the simplest media, only nitrogen and phosphorus and soil extract are added to NW (Natural seawater).
Erdschreiber is an example of such a medium, and it has been used successfully to grow various planktonic and benthic species.
Some culture collections still use soil extract to maintain some species (Plymouth), but it is seldom used in physiological experiments when a defined medium is preferred.
5. 络合物（Chelators）:
乙二胺四乙酸（EDTA）或其钠盐Na2EDTA
EDTA or Na2EDTA are added to keep iron (Fe) in solution and to keep free ionic metal（金属离子）concentrations at nontoxic levels.
However, EDTA has been noted to inhibit the growth of some oceanic species.
For routine use in culture media, nitrilotriacetic acid (NTA,次氮基三乙酸) and citric acid(柠檬酸)are less effective than EDTA, but they are used sometimes in experimental work.
二、常用微藻培养液配方
F/2培养基（F/2 Medium）
(Guillard and Ryther 1962, Guillard 1975)
This is a common and widely used general enriched seawater medium designed for growing coastal marine algae, especially diatoms.
The concentration of the original formulation, termed “f Medium” (Guillard and Ryther 1962), has been reduced by half (Guillard 1975). If silicate is not required, omit to reduce precipitation(沉淀).
F/2 Medium（前：国内教材p79；后：Algal culturing techniques）
硝酸钠（NaNO3) 74.8mg（75mg）
磷酸二氢钠（NaH2PO4） 4.4mg（5mg）
硅酸钠（Na2SiO3.9H2O）8.4~16.7mg（30mg）
F/2微量元素溶液1ml
F/2维生素溶液1ml
消毒海水1000ml
附I：F/2微量元素溶液配方（前：国内教材p79；后：Algal culturing techniques）
柠檬酸铁（FeC6H5O7.5H2O） 3.9g
乙二铵四乙酸钠（Na2EDTA） 4.35g
氯化锰（MnCl2.4H2O）178mg（180mg）
硫酸锌（ZnSO4.4H2O）23mg
氯化钴（CoCl2.6H2O）12mg（10mg）
硫酸铜（CuSO4.5H2O）10mg（9.8mg）
钼酸钠（Na2MoO4.2H2O）7.3mg（6.3mg）
纯水（dH2O）1000ml
附II：F/2维生素溶液配方
维生素B120.5mg
维生素H (生物素) 0.5mg
维生素B1100mg
纯水1000ml
维生素B1 1支2ml, 含维生素B1 100mg
维生素B12 1支1ml, 含维生素B12 0.5mg
生产上用硅藻培养液配方
硝酸钠（NaNO3）50g-80g（或15g硝酸钠+20g尿素）磷酸二氢钠或钾（NaH2PO4）4-8g
硅酸钠（Na2SiO3） 4.5-5g
柠檬酸铁（FeC6H5O7）0.5g-1g
消毒海水1m3
适合生产上培养三角褐指藻、小新月菱形藻和角毛藻。
生产上用金藻培养液配方
硝酸钠（NaNO3）50g-80g（或30g硝酸钠+15g尿素）磷酸二氢钠或钾（NaH2PO4）4-8g
柠檬酸铁（FeC6H5O7）0.5g-1g
维生素B1 100mg
维生素B12 0.5mg
消毒海水1m3
适合生产上培养等鞭金藻3011、8701和湛江等鞭金藻等。
生产上用绿藻培养液配方：
硝酸钠（NaNO3）60g
尿素18g
磷酸二氢钠或钾（NaH2PO4）4-8g
柠檬酸铁（FeC6H5O7）0.5g-1g
消毒海水1m3
适合生产上培养扁藻、塔胞藻等
三、培养液的配制
实验室及生产上培养一级藻种用的营养盐：用试剂级（reagent grade chemicals ），将各种元素分别配成母液(Concentrated solutions)，用时吸取一定量即可。
生产上大规模培养的营养盐：用农用肥料(agricultural fertilizers)或工业肥料。
配成母液，用时取一定量即可。
按配方称取，加消毒水溶化后倒入池中。
培养液灭菌或消毒：
主要元素的母液及微量元素母液：
高压灭菌或用滤膜过滤（实验室）
煮沸消毒（生产上）
维生素溶液：
对容器和水分别进行消毒或灭菌
滤膜过滤。
Vitamins
Vitamins are normally added aseptically (无菌的) (through a 0.2 m filter) after the medium has been autoclaved. Vitamins maintain maximum potency if they are filter sterilized (0.2-μm filtration) rather than
autoclaved.
康威培养液
Autoclaving may cause decomposition（分解）of some vitamins, but it is thought that some algae may be able to use some of these decomposition products.
Vitamin stocks may be frozen for long periods without noticeable degradation（降级、退化）, and the stocks may be refrozen after each use.
These three vitamin stocks may be combined into a single working solution for a 1,000-fold dilution.
第五节微藻的培养方式与设施
一、微藻培养方式
1.纯培养、单种培养、混合培养
是按培养的纯度来划分的。
纯培养（axenic culture or bacteria-free culture）：即无菌培养,是指排除了细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。
纯培养要求有无菌室、超净工作台等设备条件，容器、工具、培养液等必须严格灭菌。
单种培养（unialgal culture）：在培养过程中不排除细菌存在的一种培养方式，称为单种培养。
混合培养(mixed culture)：各藻种混杂在一起的培养方式。例如水样采集后单一藻种分离前的预备培养。
2. 封闭式培养与开放式培养
是按照藻液与外界的接触程度划分的。
封闭式培养（closed culture）
开放式培养（open culture）
封闭式培养：三角烧瓶、细口瓶、矿泉水桶、塑料薄膜袋、白色塑料桶（大白桶）、光生物反应器等。
开放式培养：以水泥池开放式培养为主。
3. 一次培养、连续培养和半连续培养
是按采收方式划分的。
一次培养（Batch culture）：在一定的容器中，配成培养液，把少量的藻种接种进去，然后在适宜于藻类生长的环境条件下培养，经过一定时间（5-7天），待藻液达到一定的密度后，便一次性采收或作进一步扩大培养。
半连续培养（Semi-continuous culture）：是指在一次培养的基础上，当藻类细胞达到一定密度后，每天收获一部分浓藻液，并加入新的培养液继续培养。
科研上: 保持细胞密度和营养盐浓度相对恒定.
生产中: 每天的收获量根据育苗的需要及藻液的生长情况确定。
连续培养（Continuous culture）
一般在室内进行，采用自动控温、人工光源、封闭式通气培养。
恒浊培养：保持藻液细胞密度恒定。
恒化培养：保持藻液营养盐浓度恒定。
在培养容器内，新的培养液不断流入，达到一定密度的培养液不断流出。
细胞密度：由光电仪器自动监测（光密度值）。
4. 一级培养、二级培养和三级培养
是按培养的规模和目的来划分的。
（1）一级培养（藻种培养）：
目的：保种和供应藻种。
室内进行，封闭式不充气一次性培养法。
培养容器：100-5000毫升的三角烧瓶（conical flask）、细口瓶、矿泉水桶等。
瓶口：用消毒的纸、纱布或脱脂棉包扎，有时在外面再包上锡纸（铝箔，aluminum foil）。
（2）二级培养（中继培养）
目的: 扩种，培养较大量的高密度藻液，供应生产性培养接种使用。
培养容器和培养方式：
0.3-1.0方的白色塑料桶：封闭式充气一次性培养
塑料薄膜袋：一般用透明薄膜制成，大小不等。采用封闭式充气一次性培养
0.5-1.0方的小型水泥池：开放式培养
（3）三级培养（生产性培养）
目的：大量培养，供给育苗中的饵料。
培养容器和培养方式：
大型水泥池：室内或室外：开放式充气培养
大型玻璃钢水槽：室内或室外：开放式充气培养
塑料大袋：封闭式充气培养
光生物反应器：封闭式充气培养
5．自养培养、异养培养和兼养培养
是按碳的主要来源和能量来源划分的。
自养培养（autotrophic culture）：是一种传统的培养方式，是利用光能、以二氧化碳为主要碳源进行的培养。
异养培养（heterotrophic culture）：以可利用有机碳（葡萄糖、醋酸盐等）作为唯一碳源和能源进行的培养，具有易进行高密度的纯种培养、可实现培养条件的自动控制等优点。
兼养培养（mixotrophic culture）：是介于自养培养和异养培养之间的一种培养方式。是利用光能，以可利用有机碳（葡萄糖、醋酸盐等）作为碳源进行的培养。
二、微藻培养设施
1.观察室：配备显微镜、血球计数板、计数器、天平、常用的其它仪器、工具、药品等。可以进行藻种的检查、分离，药品的称量和配制等。
2.清洗消毒室
配备有清洗水池、消毒池(盆)、烘箱、高压灭菌锅、电炉、电磁炉、液化气灶等设备。
可以供少量海水、培养基、容器、工具消毒。
3.一级保种室
作用：主要用于一级藻种的培养和保存。
要求室内光线充足，最好配备人工光源。
通风良好，室温最好可调整。
室内主要设施为培养架（木、铝合金、钢筋水泥结构，2-4层）或光照培养箱。
主要培养容器：
三角烧瓶：100 ~ 5000 mL
细口玻璃瓶：1万~2万mL
矿泉水桶：18.9L
4.二级培养室
作用：用于藻种的二级培养（中继培养）。
要求光线充足，通风良好，四周宽敞。
配备控温设施及充气设施。
主要培养容器：
《饵料生物培养学》教学大纲 一、课程性质与任务 本课程是海水养殖专业课。它主要研究各类饵料生物的生物学特点、营养成分及其培养技术。生物饵料具有营养丰富、大小适口、摄食方便、易于消化、保护水质等优点，故被广泛应用于海水养殖，尤其是各类苗种的繁育中。 通过对本课程的学习，要求学生掌握以下内容： 1.相关的基本概念和基本理论； 2.了解各类饵料生物的特点和培养方法； 3.了解这一学科目前的发展状况、生产中使用的设备和设施； 4.扎实掌握各类饵料的培养技术； 5.强自学能力、创造性能力和系统思维能力的培养、要具备一定的开发新饵料品种和新培养技术的能力。 二、课程的内容与基本要求 （一）理论课程内容 1、绪论 （1）掌握饵料的基本概念。 （2）了解海产动物养殖饵料来源的途径。 （3）了解饵料生物学的发展史、趋势及今后的任务。 2、光合细菌的培养 （1）了解光合细菌概述及在水产中的应用。 （2）了解光合细菌生物学。 （3）掌握光合细菌的菌种分离和菌种保藏技术。 （4）掌握光合细菌的培养。 3、单细胞藻类的培养 （1）了解培养种类及其生物学。 （2）掌握单细胞藻类的培养方式、方法和设备。 （3）了解单细胞藻类在一次培养中生长繁殖的特征。 （4）掌握单细胞藻类的培养液的配制。 （5）掌握藻种的分离、培养和保藏方法。 （6）掌握敌害生物的防治 4、褶皱臂尾轮虫的培养 （1）了解褶皱臂尾轮虫种类及其生物学。 （2）掌握褶皱臂尾轮虫的培养。 5、卤虫的培养
（1）了解卤虫的种类及其生物学。 （2）掌握卤虫的培养。 6、桡足类的培养 （1）了解桡足类种类及其生物学。 （2）掌握桡足类的培养。 7、糠虾的培养 （1）了解糠虾的种类及其生物学。 （2）掌握糠虾的培养。 （二）课程应达到的基本要求 a、要求学生掌握理论课程中基本知识、基本概念和基本理论。 b、要求有较强的基本动手能力。 c、要求在一定程度上了解饵料生物培养知识应用的基本现状。 d、要求具有一定的运用饵料生物培养的知识来分析和解决问题的能力。 三、学时分配 理论教学 内容学时 绪论 2 光合细菌的培养8 单胞藻的培养10 褶皱臂尾轮虫的培养10 卤虫的培养12 桡足类的培养 2 枝角类的培养 2 糠虾的培养 2 水生环节动物的培养 6 饵料生物的营养与评价10 合计66 实验教学 内容学时 实验一：光合细菌培养 2 实验二：微藻的分离培养 2 实验三：卤虫的孵化 2 合计 6
渔业发展领域全日制农业硕士专业学位研究生培养方案 （年修订）专业代码： 一、培养目标及要求 （一）培养目标 渔业发展领域农业硕士是与该领域任职资格相联系的专业学位，培养具备从事渔业生产、教育、科技研发、技术推广、管理等工作的技能，服务渔业、渔民和渔村的应用、复合型高层次人才。 （二）培养要求 本领域分为水产品安全与质量控制、水产苗种工程、水产生物技术、水产饲料工程、水生动植物疫病防控、渔业资源与环境等个方向，培养要求如下： .掌握中国特色社会主义理论，具有良好的思想政治觉悟；拥护党的基本路线、方针和政策；树立科学发展观，为我国经济建设和社会发展服务。 .掌握系统的渔业基础理论和专业知识以及相关的管理、人文和社会科学知识，具有较宽广的知识面，较强的专业技能、实践技能和技术传授技能，具有创新意识、创业能力，能够独立从事渔业、渔民、渔村发展中的技术和管理工作。 .能熟练运用计算机等现代信息技术手段。掌握一门外国语，基本能够阅读本领域的外文资料。 二、招生对象及入学考试 （一）招生对象 招生对象为具有国民教育序列大学本科学历（或本科同等学力）人员。 （二）入学考试 入学考试由参加全国研究生入学考试初试和学校组织的复试组成。 三、学习方式及学习年限 采用全日制学习方式，学习年限一般为年。 四、培养方式 (一)采取课程学习、实践训练、论文研究相结合的培养方式 建立稳定的农业硕士渔业发展领域专业学位研究生校外实践基地，加强研究生的实践训练，促进实践与课程教学和学位论文工作的紧密结合，注重在实践中培养研究生解决实际问题的意识和能力。 (二)实行双导师制 实行校内、校外双导师制。入学第一学期内成立导师组，其中需包括一位校外实践导师，校外实践导师应具有丰富的实践经验并有高级技术职称，重点参与实践过程、项目研究等环节的指导工作。第一导师是落实研究生各培养环节的责任人。 五、课程设置及培养环节 紧密围绕培养目标设置课程体系和培养环节，加大实践课程的比重。教学内容要增强理论与实际的联系，突出案例分析和实践研究。总学分不少于学分，其中理论课程学分不少于学分，实践训练学分。 同等学力或跨专业攻读农业硕士专业学位的研究生，应补修相关领域本科阶段的主干课程～门，成绩不计入总学分。 （一）课程设置 .公共学位课（学分） （）政治理论课学分 （）英语学分 （）现代农业创新与乡村振兴战略学分 .领域主干课（学分）
名词解释 天然饵料：是指生活在海洋、江河、湖泊等各种水体中可供水产动物食用的水生动植物、动植物尸体、有机碎屑和细菌繁凝体， 即栖息于自然界中捕食者饵料的总称。 饵料生物：指成为饵料的生物的总称。是指在海洋、湖泊等水域中自然生活的各种可供水产动物食用的水生生物。 水产饵料生物：指与增养殖和渔场形成有关的饵料生物。主要是指在海洋、江河、湖泊等水域中生活的各种可供水产经济动物摄食的水生动植物，包括光合细菌、藻类、高等植物、浮游动物、底栖动物以及蚯蚓和陆生昆虫等 最高度：超过最高度时生物就不能生存 最低度：低于最低度时生物就终止生命活动 最适度：广义——指生物能正常生活的范围，狭义——指生命活动最旺盛的范围 吸收光谱：表示某种藻的各种色素对光谱吸收曲线的总和。 作用光谱：各色素所吸收的光波对光合作用发生效率的光谱。 生物因子：污染生物对培养藻类的影响和培养藻类的关系作为一种环境因子,那么该种污染生物就称为生物因子。 种：生物分类上的基本单位 品种：同一种生物个体，受环境影响会形成一些性状差异，具有各种性状差异的个体被区分开，称“品种” 单种培养：分离培养的藻种虽然只有一种，但还混杂细菌的生长。
纯种培养：分离培养的藻种，仅只有藻种一种，而且无其它生物混杂。生殖态：由无性个体或非生殖个体向有性个体或生殖个体转变的过程。 群浮：指性成熟时，雌雄沙蚕浮于水面。每月两次峰值，最高峰都在大潮汐来临前2-4d 婚舞：雌雄异沙蚕体相伴做卷曲状、圆形的游动，开始速度较慢，以后加快，可持续数小时，游动达高峰时，雄体先排精，雌体产卵。 简答 二、水产饵料生物培养学: 研究以水产饵料生物为培养对象的一门科学 学习本课程的目的和意义： 目的：用人工控制的方法生产更多的活饵料。 意义：为水产动物的人工育苗和幼体提供充足的饵料，为人类提供食粮。 饵料生物培养的基本原则： 1、培养生物种的选择 2、确定培养基的种类和成分 3、对所生产饵料的采集方法。 作为培养饵料生物必须具备什么条件： 1、个体大小适合养殖动物的摄食 2、在水中的运动速度和分布情况
生物饵料复习 生物饵料：特指经过人工筛选的、可进行人工培 养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。 混交雌体：是指通过混交生殖的方式繁殖子代的 雌性轮虫，生殖细胞的形成过程中有减数分裂。 混交卵：混交雌体经过减数分裂产生单倍体卵， 又称需精卵。 卤虫卵孵化率：指每克卤虫卵能过孵化出的无节 幼体的只数。 饵料生物：是指生活在海洋、江河、湖波等水域 中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、 植物。水域中生活的可供水产动物食用的水产动、植物。 连续培养：指在接种后，根据培养液中藻密度或 营养盐度的消耗量，连续采收藻细胞和添加营养 盐的藻类培养模式。 单性生殖：又称孤雌生殖、非混交生殖、指母本 在繁殖后代的过程中，无需父本配子的参与，母 本的卵细胞经有丝分裂形成胚胎。 生物饵料培养学：主要研究生物饵料的筛选，培养及其营养价值评价的一门应用学科。 1自然界中的光合作用有两种：第一种是（产 氧）光合作用，是蓝细菌和植物所有的光合作 用；第二种是（不产氧）的光合作用。 1、光合细菌获得代谢所需的能量的形式有三种：光照 厌气条件下，通过（光合磷酸化作用）获得能量，黑暗厌气条件下，通过（脱氧作用与发酵作用）获得能量，黑暗有氧条件下，通过（呼 吸作用）获得能量。 2、光合细菌的培养方式有（全封闭式延期光照培 养）和（开放式微气光照培养）两种，前者主要用于小规模培养，后者可用于生产性大规模培养。 3、在轮虫消化道前端，有一重要器官（咀嚼囊）， 该器官是高度变形的咽喉，有很厚的肌肉壁，内有发达的（咀嚼器），有咀嚼和研磨食物的功用。 4、根据培养过程中人为控制程度，轮虫的培养可分为 （精养）和（粗养）。按培养和收获的特点，可分（一次性培养）、（半连续培养）和（大面积土池培养）。 5、成功进行轮虫半连续培养的关键是控制好（轮 虫的采收量）及（培养用水水质）之间的平衡。 6、种轮虫的保存有两种方式，一是以（活体轮 虫）的形式保存，一是以（轮虫休眠卵）的形式保存。 7、土池培养轮虫的日常管理工作的核心是维持（水 体中轮虫和单胞藻）的动态平衡，因此，控制（轮虫密度）和（合理施肥）很重要。 8、培养轮虫的主要饵料有三类，（单胞藻）、 （酵母）和（微生物团絮）。 10、卤虫在水产上的应用形式主要有：（初孵无节幼体），（卤虫去壳卵），（卤虫中后期肉体及成体）等。
填空题： 1.在所有卤虫品系的脂肪酸组成中几乎没有_DHA__，所以对卤虫必须进行营养强化。 2.微藻藻种保藏的基本条件是_低温和弱光__。 3.光合细菌培养基灭菌的方式有_常压蒸汽灭菌和过滤灭菌__和高压蒸汽灭菌。 4.“绿水育苗”是指在育苗过程中利用__微藻___的育苗方式。 5.微藻基因工程育种是引入__外源基因__在微藻内表达以改良微藻遗传品质的方法。 6._褶皱臂尾_轮虫在海水鱼虾蟹苗种培育过程中应用最为广泛。 7.在开放式培养螺旋藻时，施用__碳酸氢铵__可以杀死藻液中的轮虫和原生动物，还可以作为肥料。 名词解释： 1.营养强化:指针对生物饵料的营养缺陷，有意识地通过其摄食特定食物进行改善和补偿，达到营养平衡和满足鱼虾幼体发育的 需求。 2.诱变育种: 是指人为地利用物理的或化学的因素，诱发微藻产生遗传变异，通过对突变体的选择和鉴定，培育出有利用价值 的新品种或新的种质资源 3.单种培养: 指在培养过程中不排除细菌存在的一种培养方式 4.生物饵料:指经过筛选的优质饵料生物，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活的饵料。 5.指数生长期: 指微藻细胞迅速地生长繁殖，细胞数目以几何级数增加的时期. 判断题: 1、所有卤虫卵都是在低盐度下有较高的孵化率。 X 2、小新月菱形藻的最佳培养生态条件和应用途径与三角褐指藻相似。√ 3、角毛藻在低盐度下比高盐度下生长好。√ 4、褶皱臂尾轮虫对低氧含量甚至短时间缺氧的耐受力很强，因此，在高密度培养时，不需要充氧。X 5、微藻对二氧化碳的需要量大，但给微藻培养液过量通入二氧化碳，会对微藻产生毒害作用。√ 6、实验室小型培养微藻，海水的消毒通常采用有效氯消毒。X 7、不同光合细菌体内的颜色在固定的培养条件下具有特征性，因此，每个菌种的颜色不会随着培养条件的变化而发生变化。X 8、刚产出的卤虫休眠卵就具有较高的孵化率。X 9、目前培养的桡足类主要是隶属于猛水蚤目和哲水蚤目的种类。√ 10、轮虫的营养价值与所摄食的饵料有关。√ 选择题: 1、标准的血球计数板盖上盖玻片后，一个大格所在区域的体积是__C_____。 A: 1mm3B: 10mm3C: 0.1mm3D: 0.1mL 2、敌害生物对微藻培养的危害作用主要有_D___。 A:掠食 B:通过分泌有害物质对微藻起抑制和毒害作用 C:竞争营养盐 D: A+B 3、土池培养浮游动物饵料时，采用施放___C______肥料培育浮游植物较佳。 A:无机肥B:有机肥C:无机肥+有机肥D:粪肥 4、红螺菌科光合细菌的获能方式有__D__。 A:光合磷酸化B:氧化磷酸化 C:呼吸作用D: A+B+C 5、用藻类二次强化培养轮虫所需的时间一般至少要在_A___以上。 A:6-12小时B:24-36小时 C:36-48小时D:1-3小时 6、分布于咸水中的枝角类是__A__。 A:蒙古裸腹溞 B:大型溞 C:多刺裸腹溞 D:鸟喙尖头溞 7、在轮虫培养过程中，若以酵母为饵料进行培养，则适宜的轮虫接种量是_C___。 A:0.1个/ml～0.5个/ml B:1个/ml C:14个/ml～70个/ml D:200个/ ml 8、采用酒精对皮肤和器皿表面进行消毒时，常采用的浓度是___C______。 A: 40-45‰B: 60-65‰C: 70-75‰D:80-85‰ 9、在下列藻类中，最佳培养条件为高温、强光和强碱性的是__A__。 A:极大螺旋藻 B:湛江等鞭金藻 C:中肋骨条藻 D:小球藻 10、生产上螺旋藻的培养方式是_A___。
水产动物疾病学综合实验安排 第一天第二天第三天第四天第五天 上午现场调查 给药方法操作： 泼洒法 挂袋挂篓 口服法鱼苗鱼种检查 成鱼检查 收集 锥体虫并染 色 染色： 锚头鳋、 中华鳋、 鲺 考试 下午鱼类甲壳动物病及 其病原体的观察 收集锚头鳋、中华鳋等 成鱼检查 收集车轮虫、锚 头鳋、中华鳋、 鱼虱等 收集车轮虫 并染色 染色交寄生虫染 色切片标本
水产动物疾病学综合实验指导 一、实验目的与要求： 1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要，使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能，同时培养学生的创新、创业及社会服务能力，成为水产养殖行业防病治病的技术人才。 2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点；能较准确地诊断水产动物疾病。 3. 能正确地使用渔药，能有效地防治水产动物疾病。 二、实验内容： 1. 现场调查； 2. 渔药使用：泼洒法；挂袋挂篓法；口服法； 3. 显微镜诊断疾病； 4. 寄生虫标本的收集与染色； 三、实验操作及其步骤： 1.现场调查： 池塘是水生动物生存的基础，疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外，首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因，及时发现和正确判断病鱼提供依据。 ①调查发病养殖水体环境和发病史 发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂，工厂是否排放污（废）水，这些污（废）水是否含有对鱼类有毒的物质，是否经过处理后排放等。同时，还要着重强调调查养殖水体情况，了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘
后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大，同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度，以及所采用的防治方法和效果等。 ②了解池塘水质状况 水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素，水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病，在水温为25~30℃时传染性最强，32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带，每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大，流行的时间也更长些。有些寄生虫病，如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病，而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病，通常在20℃以下发病，属于低温季节的流行病。 A.谁的酸碱度（pH）由于高密度养殖，池塘有机质多氢离子浓度微偏高 （pH偏低），易发生水霉病。酸性水也常常引起嗜酸性卵甲藻病的暴发。在氢离子浓度较低（pH较高）的盐碱养殖水体，水温较低时易大量繁殖三毛金藻，分泌毒素，致使池鱼中毒死亡。 B.溶解氧水中含氧量的多少关系到养殖生物的生长和生存，同疾病的发生 有明显的相关性。正常池塘的溶解氧含量要求4毫克/升，最低不能低于1毫克/升，对于各种不同的鱼类和不同的生长阶段，因其生理需求不一样而对溶氧的需求不同。溶解氧长时间过低会影响鱼类生长，降低鱼体的抗病能力，同时为病原菌的繁殖，生长创造了条件。 C.检测水质对发病水体进行水的pH、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐、磷酸盐、 硬度、化学耗氧量的分析，了解水质的基本营养盐变化情况，对可能因环境因子致病的因素应根据具体情况选择分析。 ③调查饲养管理情况 A.了解鱼种放养情况: 放养数量过多就会出现相互拥挤、摄食不足、生长不良 的现象，导致养殖生物体对疾病的抵抗能力降低，有利于病原菌的感染和传播。夏花培育至冬片鱼种一般亩放养量为7000~10000尾。 B.了解投饲和施肥状况: 投喂的饲料不新鲜或不按照“四定”投喂，鱼类很容 易患细菌性肠炎病。夏天在池塘内施用不经发酵的有机肥，易使池塘水质恶化、缺氧、并促使致病菌核寄生虫大量繁殖。
《水产养殖专业》淡水养殖方向人才培养方案 一、学制与招生对象 学制：全日制三年专科 招生对象：普通高中、职业高中、中等职业学校毕业生 二、培养目标 本专业培养适应社会主义市场经济需要，德、智、体、美全面发展，具有良好的思想品德和职业道德，掌握水产饲料的营养与饲料加工知识；了解鱼类的品种，掌握鱼类的生理特点及生物学特性；掌握鱼病的预防、诊断与治疗知识；掌握各种鱼类的养殖技术；掌握水生微生物的检测技术；掌握渔业经济管理知识等知识与技能，具备特种水产养殖、鱼类的繁殖操作、鱼类饲料的配制、加工能力；具备鱼病的预防、诊断、治疗能力；具备鱼网的编织与修补能力；鱼的捕捞操作能力；渔业生产经营、管理能力等。获得执业兽医师（水生生物学）、水产养殖工等中级职业技术等级标准，在畜牧水产局、畜牧水产所、水产科技站、水产种苗繁殖基地、饲料公司、鱼药公司、生物科技有限公司等相关企事业单位从事鱼苗繁殖、渔场管理、水质监测、饲料生产及销售、鱼药生产及销售、水产品研发与销售工作的高级技能应用型人才。 三、培养面向岗位或岗位群 职业岗位典型工作任务 1、水产种苗繁育、养殖场1、鱼苗繁育； 2、渔场的管理 2、饲料相关企业 1、饲料生产、研发； 2、饲料的销售； 3、饲料的品控和质检 3、水产养殖相关的事业单位1、畜牧水产局；2、畜牧水产所；3、水产科技站 4、渔药相关企业1、鱼药的生产、研发；2、鱼药的销售 5、水生生物疾病诊断与防治单位1、水产疾病诊断、防治 6、水产品加工企业1、水产品的加工；2、相关保健品的研发 7、自创实体从事与水产养殖相关的生产和经营 四、培养要求 （一）知识要求 1、具有马列主义、毛泽东思想、邓小平理论及本行业法规、法律及规范的基本知识； 2、具有大学专科层次的文化基础知识，有比较合理的复合知识结构；
生物饵料培养学复习内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
生物饵料复习 生物饵料：特指经过人工筛选的、可进行人工培养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。 混交雌体：是指通过混交生殖的方式繁殖子代的雌性轮虫，生殖细胞的形成过程中有减数分裂。 混交卵：混交雌体经过减数分裂产生单倍体卵，又称需精卵。 卤虫卵孵化率：指每克卤虫卵能过孵化出的无节幼体的只数。 饵料生物：是指生活在海洋、江河、湖波等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物。水域中生活的可供水产动物食用的水产动、植物。 连续培养：指在接种后，根据培养液中藻密度或营养盐度的消耗量，连续采收藻细胞和添加营养盐的藻类培养模式。 单性生殖：又称孤雌生殖、非混交生殖、指母本在繁殖后代的过程 中，无需父本配子的参与，母本的卵细胞经有丝分裂形成胚胎。 生物饵料培养学：主要研究生物饵料的筛选，培养及其营养价值评价的一门应用学科。 1自然界中的光合作用有两种：第 一种是（产氧）光合作用， 是蓝细菌和植物所有的光合作用； 第二种是（不产氧）的光合作用。 1、光合细菌获得代谢所需的能量的形 式有三种：光照厌气条件下，通过（光合磷酸化作用）获得能 量，黑暗厌气条件下，通过（脱 氧作用与发酵作用）获得能 量，黑暗有氧条件下，通过 （呼吸作用）获得能量。2、光合细菌的培养方式有（全封 闭式延期光照培养）和
（开放式微气光照培养）两种，前者主要用于小规模培养，后者可用于生产性大规模培养。3、在轮虫消化道前端，有一重要器官 （咀嚼囊），该器官是高度 变形的咽喉，有很厚的肌肉壁，内有发达的（咀嚼器），有咀嚼和研磨食物的功用。 4、根据培养过程中人为控制程度，轮 虫的培养可分为（精养）和 （粗养）。按培养和收获的 特点，可分（一次性培 养）、（半连续培养）和（大面积土池培养）。5、成功进行轮虫半连续培养的关键是 控制好（轮虫的采收量） 及（培养用水水质）之间的平衡。 6、种轮虫的保存有两种方式，一是以 （活体轮虫）的形式保存， 一是以（轮虫休眠卵）的形式保存。 7、土池培养轮虫的日常管理工作的核 心是维持（水体中轮虫和单胞 藻）的动态平衡，因此，控制 （轮虫密度）和（合理施肥）很重要。 8、培养轮虫的主要饵料有三类， （单胞藻）、（酵 母）和（微生物团 絮）。 10、卤虫在水产上的应用形式主要有：（初孵无节幼 体），（卤虫去壳卵），（卤虫中后期肉体及成体）等。 5、我国的卤虫资源非常丰富，主 要集中在我国的（西北内陆 盐湖）和（华北盐 田）。分布于前者的卤虫
《甲壳类、贝类养殖学》考试大纲 一、教材 《虾蟹类增养殖学》王克行主编中国农业出版社 《海水贝类养殖学》王如才主编中国海洋大学出版社 《名特水产动物养殖学》曹克驹主编中国农业出版社（河蚌育珠部分） 二、试卷结构及比例 1、题型比例 单项选择题占10%（10）；多项选择题占15%（5）；名词解释占15%（5）；简答题占30%(6)；论述题占30%（2）。 2、内容比例 专业基础知识占30%； 水产养殖的基本技能占40%（注：具体的养殖参数不列入考试范围）； 与水产养殖生产密切有关的基本理论占30%。 三、主要考查知识点 第一章甲壳类养殖学绪论 1、甲壳类、贝类养殖学定义。 研究虾蟹类、贝类养殖理论与应用技术 以增加水产资源与产量为目的，研究经济虾蟹类、贝类的生存、生长、繁殖的内在规律，及其与环境条件的关系，以及人工地满足这些条件的技术措施。 2、甲壳类、贝类养殖品种与国内养殖概况(学名，分类地位，生产特性， 养殖方式，养殖产量组成)，重点是对虾分类。 (1)发展甲壳类增养殖的意义 ①有重要的经济价值（食用、药用、工业用） ②有优秀的养殖性能(生长快、周期短、食谱广) ③适合我国的养殖生产环境(种质、苗种、空间） （2）分类:节肢动物门-甲壳动物亚门-软甲纲-十足目 （3）养成生产 粗养方式 Extensive 半精养方式 Semi-intensive 精养方式 Intensive
超精养方式 Ultra-intensive
第二章虾蟹类养殖生物学 1、形态结构特点，主要生理器官 （1）虾形动物 体修长，腹部发达 ①游泳虾类 ②爬行虾类 (2)蟹形动物， 多扁平, 腹部不发达或退化。 结构模式： 头部6节, 胸部8节, 腹部7节。 除最前端体节具一对复眼，末端尾节无附肢外，每节上有一对附肢。 步足，共五对，四对至第八对胸部附肢。 2、对虾生殖系统组成、结构和功能（精荚、开放式纳精囊、封闭式纳精囊、 性腺）。 内部器官 －雄性(精巢、输精管、精荚囊） －雌性(卵巢、输卵管） 外生殖器 －雄性(交接器、雄性腹肢）
《生物饵料培养学》实验讲义 王珺冯永勤 海南大学海洋学院 2010年6月
目录 实验一单细胞藻浓度的测定 (1) 实验二单细胞藻培养的容器、工具及用水的消毒 (3) 实验三单细胞藻培养液--母液的配制 (5) 实验四单细胞藻一级培养 (7) 实验五轮虫的分离与培养 (9)
实验一单细胞藻类浓度的测定 【实验目的】 1.掌握用血球计数板计数单细胞藻类的方法。 2.掌握使用分光光度计进行单细胞藻类计数的原理、方法。 【实验原理】 1. 制作工作曲线。取一定量的单胞藻液，稀释成5个梯度，分别用分光光度计测定其吸光度（O.D.），并用血球计数板测定相应藻液的藻细胞个体浓度，由于藻细胞浓度与吸光值的大小成正比关系，根据各组数据绘出吸光度-藻细胞浓度的相关曲线，即工作曲线。 1.1 血球计数板计数的原理 血球计数板是一块比普通载玻片厚的载玻片特制而成的，板的中部有一“H”形的凹沟，在凹沟包围的上、下两块地方比凹沟外的两条高起的边低0.1mm，在此部的中央划线为一具有准确面积的大小方格，在其中分为九个方格，每一大方格的面积是1mm2，在四角的大格又分为16个中格，在中央的大格分为25个中格，每一中格分为16个小格，共400个小格；另外一种计数板的中央大格分为16个中格，每一中格分为25个小格，总数400个小格，加盖玻片后，每一大格即形成一个体积为0.1mm3的空间。 2．测定被测藻液的吸光度。 3．根据工作曲线查出藻液相应吸光度的藻细胞浓度。 【实验用品】 一、实验器材 分光光度计、显微镜、电子天平、干燥箱、血球计数板、计数器。 二、试剂 鲁哥氏液。 三、实验材料 25或50ml比色管（每组6支）、吸管、擦镜纸、单胞藻液500ml、待测藻液500ml、10ml 移液管（每组6支）、50ml试剂瓶、消毒海水500ml、蒸馏水。 【实验步骤】 一、分光光度计计数法 1. 制作工作曲线 取单胞藻液20ml置于比色管中，并稀释成5个浓度梯度（建议第一浓度是第二浓度的2倍，依次类推），以培养液作为参比，用分光光度计分别测定其吸光度（O.D.），并用血球计数板测定相应藻液的藻细胞个体浓度，由于藻细胞浓度与吸光值的大小成正比关系，根据5组数据绘出吸光度-藻细胞浓度的相关曲线，即工作曲线。 1.1 用培养液作为参比，分别测定相应的5个浓度梯度藻液的吸光度（绿色的藻类一般选择的波长为720-750nm；金藻门藻类、硅藻门藻类一般选择的波长为420nm）。 1.2 用血球计数板分别计数工作曲线用的藻细胞浓度。 1.2.1 把血球计数板及盖玻片擦洗清洁、平放在桌上、并盖好盖玻片。 1.2.2摇匀工作曲线用的藻液，用一支干净的平口微吸管吸取藻液，迅速把吸管放在计数板旁的盖玻片边缘处，轻压橡皮头，使藻液流入计数板内（如果样品是有运动能力的种类，则
复习题第一章绪论 一、名词解释 1.生物饵料： 特指经过人工筛选的、可进行人工培养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。 2.饵料生物： 是指生活在海洋、江河、湖泊等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物。水域中生活的可供水产动物食用的水产动、植物。（微藻、轮虫等）。 3.冰鲜饵料： 4.生物饵料培养学： 主要研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用学科。二、简答题 1.生物饵料培养学的主要任务。 2.优良生物饵料的特点。答： 1、对水环境的影响：使用生物饵料，对养殖水体的水质影响较小。 2、营养组成：生物饵料的营养丰富，能满足水产动物的营养需求。 3、规格多样：生物饵料的大小可满足养殖对象的需求，不同生物饵料可组合成系列饵料，满足养殖对象不同生长阶段的具体需求。 4、可消化性好：大多数水产动物喜食生物饵料，而且容易消化。自身含消化酶，可弥补幼体消化能力的不足。 5、可获得性佳：大多数水产动物能方便的摄食生物饵料，可针对养殖对象的运动和栖息习性，选择运动能力和分布水层都适合培养对象的种类。 3.生物饵料与配合饲料相比所具有的优点。 生物饵料作为养殖水产动物（主要是苗种培育阶段）的饵料，与人工配合饵料相比，具有如下优点： 1、对水环境的影响：使用生物饵料，对养殖水体的水质影响较小。微生物及植物性生物饵 料，同时有改善水质的作用，动物性的生物饵料是活的生物，一般不会影响到养殖水体的水质，而使用人工配合饵料对水质的影响则不同。 2、营养组成：生物饵料的营养丰富，能满足水产动物的营养需求。生物饵料大多含未知的 生物活性物质，对养殖对象的生长有利；可筛选特定的生物饵料，满足特定培养对象的营养需求；可通过改变培养条件来改善或强化生物饵料的营养价值。 3、规格：生物饵料的大小可满足养殖对象的需求，不同生物饵料可组合成系列饵料，满足 养殖对象不同生长阶段的具体需求。而人工微粒子配合饵料（小于300微米）的研究还有待提高。 4、可消化性：大多数水产动物喜食生物饵料，而且容易消化。自身含消化酶，可弥补幼体 消化能力的不足。 5、可获得性：大多数水产动物能方便的摄食生物饵料，可针对养殖对象的运动和栖息习性， 选择运动能力和分布水层都适合培养对象的种类。 4.区别“清水育苗”和“绿水育苗”含义。为什么“绿水育苗”得到普遍认可？ 5. 为什么说生物饵料培养仍是今后鱼虾蟹幼体育苗的主要饵料途径? 因为生物饵料培养的目的不仅仅是为了鱼虾蟹贝的育苗生产，而各地鱼虾蟹贝育苗的生产也不可能
水产饵料生物培养复习题 （课程代码322070） 一、名词解释 水产饵料生物：指与增养殖和渔场形成有关的饵料生物。主要是指在海洋、江河、湖泊等水域中生活的各种可供水产经济动物摄食的水生动植物，包括光合细菌、藻类、高等植物、浮游动物、底栖动物以及蚯蚓和陆生昆虫。 生物饵料：指经过筛选的优质的，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活 的饵料生物。 冬卵：轮虫、枝角类等某些浮游动物混交雌体在年轻时与雄虫交配，混交卵与精子结合成的受精卵形成的厚壳卵。可抵抗干燥、低温等不良环境，需经一定的休眠期才能发育，且总是发育为非混交雌体。 夏卵：又称非混交卵。指轮虫、枝角类等某些浮游动物非混交雌体产出的卵。卵形，壳薄而光滑。 纯培养：是无菌培养，指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。 半连续培养：又称间收培养，是在一次性培养的基础上，当培养的藻液达到一定密度后，每天采收一部分，收获量根据需要及藻液的生长情况而定，并加入新的营养液，继续培养。相对生长下降期：细胞生长繁殖的速度与指数生长期比较，逐步下降，但细 胞数目仍在增加。 指数生长期：指单细胞藻类细胞迅速地生长繁殖，细胞数目以几何级数增加。桡足幼体：桡足类的一个幼体期，身体明显分节。经第1－5桡足幼体阶段后发育为成体。 无节幼体：节肢动物甲壳纲（包括枝角类和桡足类）的发育绝大多数都要经过变态，初孵化的幼体不分节，具3对附肢。又称六肢幼体。 赤潮：某些藻类在海水中大量繁殖而使水体呈现色彩，并且分泌毒素的这一现象叫赤潮。轮虫：轮虫是一群小性的多细胞动物，通常体长只有100-200微米。轮虫的头部前端扩大成盘状，其上方有一由纤毛组成的轮盘，是运动和摄食的器官。消化道的咽部特别膨大，形成肌肉很发达的咀嚼囊，内藏咀嚼器。体腔两旁有一对原肾管，其末端为焰茎球。 接种：就是把含藻种的藻液接入到新配好的培养液中的整个操作过程。 饵料生物：指成为饵料的生物的总称。是指在海洋、湖泊等水域中自然生活的各种可供水产动物食用的水生生物。
绪论 1.生物饵料特指经过人工筛选的、可进行人工培养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。生物饵料可分为植物性生物饵料（光合细菌及单细胞藻类）和动物性生物饵料（轮虫、卤虫、枝角类等）两类。 2.饵料生物是指生活在海洋、江河、湖泊等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物，如：细菌、酵母、单细胞藻类，轮虫，卤虫、等。 3.生物饵料培养学是主要研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用学科。 4.生物饵料培养学的主要内容和任务：生物饵料的筛选；生物饵料规模化或大量培养技术研究；生物饵料的营养价值评价。 5.优良生物饵料所应具备的条件：①生物饵料的个体大小必须适合养殖对象的摄食；②生物饵料在水中的运动速度与在水层中的分布情况，应便于养殖动物的摄食；③生物饵料的营养价值高，容易被养殖对象消化吸收；④生物饵料及其代谢产物无毒或毒性小，不危及养殖对象的健康；⑤生物饵料的生命周期短，生长繁殖迅速；⑥生物饵料对环境的适应能力强，易于大量培养。 6.生物饵料的优点：①对养殖水体的水质影响较小，且有改善水质的作用；②营养丰富，含未知的生物活性物质，能满足水产动物的营养需求；③规格多样，满足养殖对象不同生长阶段的具体需求； ④容易被消化，自身含消化酶，可弥补幼体消化能力的不足；⑤可获得性佳。 7. 什么是清水育苗和绿水育苗，为什么绿水育苗得到广泛认可？ 第二章光合细菌的培养 1. 光合细菌是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称。其最本质的特点是能在厌氧和光照条件下进行不产氧的光合作用。 2. 水产上使用的光合细菌多为红螺菌科的菌种。水产上应用价值大的红螺菌科的红假单胞菌属 3. 光合细菌的色素主要有菌绿素a，b，c，d，e及类胡萝卜素。菌绿素是光合细菌进行光合磷酸化，将光能转变成化学能的媒介，而类胡萝卜素的主要作用是捕获光能（天线色素）及起光氧化的保护剂作用（防止菌绿素受光氧化损伤）。 4. 光合细菌的色素主要存在细胞内的载色体或绿色包囊中，载色体或绿色包囊是光合细菌进行光合磷酸化的部位（细胞器）。 5. 载色体存于与红螺菌科和着色菌科，由细胞膜陷入细胞质内而形成，并与细胞膜相连。绿色包囊存在于绿杆菌科和绿色丝状菌科，分散附着于细胞膜下面，是一个独立的球形细胞器。 6. 光合细菌菌种的分离的步骤：（1）采样。根据光合细菌生长所需的条件，有选择的采集含光合细菌的水样和土样。一般在有机物污染严重，缺氧的环境中采样；（2）富集培养。光合细菌分离成功的关键，在于选择适宜的富集和分离的培养基，提供符合光合细菌生长需要的厌氧环境，适宜的温度（25--35℃），一定的光照（5000—10000lx）。一般采用液体富集培养基，重复多次富集培养；（3）分离纯种。将富集后的菌液进行固体培养基涂布或划线培养，挑取单菌落，重复多次分离，可得纯培养。
水产养殖学专业专科升本科（函授）考试 《饵料生物培养》试卷（必修，A卷） （考试时间：90分钟，满分：100分） 用题年级、专业（班级）：2008级 一、名词解释：（每小题3分，共15分） 1.生物饵料 2.混合培养 3．指数生长期 4.平板分离法 5.光合细菌
二、填空题（每空0.5分，共10分） 1.在我国，水产养殖上常用的单细胞藻类主要有绿藻门、（）、（）和（）的种类。 2.藻种室是进行藻种的（）、（）及（）的场所。 3.指数生长期藻类的生长效率，与藻的（）、（）及（）有关。 4.藻种分离工作包括（）、（）及（）三步骤。 5.褶皱臂尾轮虫繁殖的适宜光照强度范围为（）。 6. 轮虫一般采用（）的方式进行保种。 7.卤虫在水产上的应用形式主要有：（）、（）、（）及（）。 8. 评判卤虫卵营养价值高低的基本方法有两：（）、（）。 三、判断正误(认为正确的,在题后（）内打错误的打"×"。每小题1.5分,共15分) 1.单细胞藻类接种后延缓期的长短，很大程度上决定着随后培养的成败。接种后延缓期越长，接种培养成功的可能性越大。（） 2.接种时保证藻种的浓度达到一定的数量，选择偏低浓度接种。（） 3. 培养密度对脂肪酸的影响可能是通过影响光强而作用的，随着藻密度的增加，培养基内的平均光强减少，因而改变了脂肪酸组成。（） 4. 不同微藻的氨基酸组成基本一致，而且基本都能满足摄食微藻的动物营养需求。（） 5．实验室藻种的长期保藏，通常是把藻种接种在固体和液体的双相培养基上，接种一次可保藏3到5年。（） 6.褶皱臂尾轮虫雌雄异体的，一般常见的是雄体。（） 7.褶皱臂尾轮虫，一般而言，温度高，寿命短；温度低，寿命长。（） 8.轮虫一次性培养的培养周期为10d～15d，培养的密度一般可达200个/ml～600个/ml。（） 9.土池捕捞的轮虫在投喂前要清洗干净，最好用高剂量的高锰酸钾消毒后再投喂到育苗池。（）
生物饵料培养学备课讲义 绪论 一、基本概念： 饲料：特指饲养陆生动物（家畜、家禽等）的食物。 饵料指鱼、虾、蟹、贝等水产动物的食物，水产上应用的所谓配合饲料严格称为配合饵料或人工饵料。 饵料生物和生物饵料 饵料生物（prey food ）是指生活在海洋、江河、湖泊等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物，如：细菌、酵母、单细胞藻类，轮虫，卤虫、等。 生物饵料（living food）特指经过人工筛选的、可进行人工培养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。生物饵料可分为植物性生物饵料（光合细菌及单细胞藻类）和动物性生物饵料（轮虫、卤虫、枝角类等）两类。 生物饵料培养学（live food cultivatology）:主要研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用学科。主要内容和任务：1）生物饵料的筛选；2）生物饵料规模化或大量培养技术研究；3）生物饵料的营养价值评价。 二、优良生物饵料所应具备的条件 1、优良生物饵料所应具备的条件 饵料生物要成为优良的生物饵料，必须具备以下条件： 1、生物饵料的个体大小必须适合养殖对象的摄食。不同的动物及动物的不同发育阶段，其 口径的大小不一样，所要求的饵料的大小也不一样，饵料过大，养殖对象不能吞咽；饵料过小，养殖对象不摄食或摄食效率低，从而引起养殖对象生长停滞或死亡。如，暗纹东方豚开口饵料为轮虫（大小150—250微米），用卤虫无节幼体（500微米左右）或单细胞藻类皆不适口。 2、生物饵料在水中的运动速度与在水层中的分布情况，应便与养殖动物的摄食。 3、生物饵料的营养价值高，容易被养殖对象消化吸收。 4、生物饵料及其代谢产物无毒或毒性小，不危及养殖对象的健康。 5、生物饵料的生命周期短，生长繁殖迅速。 6、生物饵料对环境的适应能力强，易于大量培养。 三、生物饵料的优点及水产上的地位 生物饵料作为养殖水产动物（主要是苗种培育阶段）的饵料，与人工配合饵料相比，具有如下优点： 1、对水环境的影响：使用生物饵料，对养殖水体的水质影响较小。微生物及植物性生物饵
2.饵料生物：是指生活在海洋、江河、湖泊等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物。水域中生活的可供水产动物食用的水产动、植物。（微藻、轮虫等）。 6.培养优良生物饵料所应具备的条件。答 1、个体大小适合养殖对象摄食。 2、运动速度与分布水层便于养殖对象摄食。 3、营养价值高，容易被养殖对象消化吸收。 4、代谢产物无毒或毒性不危及养殖对象的健康。 5、生命周期短，生长繁殖迅速。 6、环境的适应能力强，易于大量培养，密度大，产量高。 10.连续培养：指在接种后，根据培养液中藻密度或营养盐的消耗量，连续采收 藻细胞和添加营养盐的藻类培养模式 ( C )4.实验室小型培养单胞藻，海水的消毒通常采用下列哪种方法？ A、烘箱干燥消毒； B、有效氯消毒； C、煮沸消毒； D、高锰酸钾消毒。 ( B )9.藻类培养过程中，一般选择在什么时间接种？ B、A、清晨5～8点；B、上午8～10点； C、下午4～6点； D、晚上 1.小球藻有较厚的(细胞壁)，不易被鱼虾幼体所消化，很少直接用于投喂鱼、虾、贝的幼体。小球藻通常用于培养(动物性生物饵料)，也广泛用于鱼类和甲壳类育苗中(水色及水质)的调控 3.亚心形扁藻是我国培养最早，应用很广泛的一种优良的海产单胞藻类饵料。 广泛应用于(贝类)育苗中。 6.在单细胞藻类的一次性培养中，藻类的生长繁殖表现出一特定的模式曲线，自接种后，藻类的生长繁殖可分成五个时期，依次为(延缓期，(__指数生长期)，(相对生长下降期____)，(静止期_)和死亡期。 9. 微藻开放式培养和封闭式培养的优缺点 ①开放式培养优点：建池简单，投资少，可利用光温适宜但不宜种植传统农作物的地 区或产量低的荒漠、盐碱沙地等。生产操作简单；缺点：CO2供应不足，温度不易控制，水分蒸发严重，光能利用率低，占地广大。易污染，生产不稳定，产量和质量难以保证。②封
水产动物疾病学实验指导 王文彬编 湖南文理学院生命科学学院 二〇〇八年十一月 目录 实验1 常见渔用药物的识别及给药方法 (1) 实验2 渔用氯制消毒剂有效氯的测定 (4) 实验3 水产动物常见病原体标本的观察 (7) 实验4 鱼用土法疫苗的制作及使用 (9) 实验5 鱼病的系统检查与诊断 (11) 实习指导 (13) 实验1. 常用渔药的识别及给药方法 一、实验目的 1. 识别常用渔药，了解并掌握各种药品的主要特性与基本用途； 2. 训练渔药的正确使用方法； 3. 通过给药方法的操作训练，培养学生实验动手能力。 二、实验内容 1. 常用渔药的识别； 2. 操作给药方法——注射法和药浴法； 3. 鱼苗、鱼种对几种常用渔药的毒性及忍受力试验（有兴趣的同学选做）。
三、材料与仪器用品 1. 实验材料： 活的鱼苗鱼种（鲤、鲫或黄颡鱼、黄鳝）。 常用渔药：聚维酮碘（PVP-I）、氯霉素、土霉素、（复方）新诺明、诺氟沙星、漂白粉、漂粉精、强氯精、防消散、优氯净、氯胺-T、晶体敌百虫、福尔马林、高锰酸钾、硫酸铜、硫酸亚铁、硫双二氯酚（别丁）、孔雀石绿、亚甲基蓝、沸石、呋喃唑酮（痢特灵）等。 2. 实验用品： 水族箱、搪瓷脸盆、瓷碗、烧杯、量筒、注射器、玻璃皿，吸管，吸水纸等。 四、实验原理与方法 （一）渔药的种类 药物是指对机体产生某种生理生化影响，并在疾病的治疗、预防和诊断方面有一定效果的化学物质。渔药(fishery drugs的种类从现有资料看，国内外大致有300种以上。Nelson Herwig（1979）收载了276种，不包括某些改善机体代谢技能的促生长药和饲料添加剂等。按药物的作用对象，并结合其他形式可将渔药分为以下十大类： 1. 抗病毒药：如聚乙烯吡咯烷酮碘（PVP-I）、免疫制剂等。 2. 抗细菌药：如抗菌素、磺胺类、呋喃类、抗菌中草药等。 3. 杀真菌剂：如孔雀绿、亚甲基蓝、制霉菌素等。 4. 杀藻类药：如生石灰、硫酸铜等。 5. 消毒防腐剂：醛类：福尔马林； 氧化剂：高锰酸钾； 卤素类：漂白粉、次氯酸钙（漂粉精）、三氯异氰尿酸（强氯精、鱼安）、二氯异氰尿酸（防消散）、二氯异氰尿酸钠（优氯净）、氯胺-T； 染料类：孔雀石绿、亚甲基蓝、吖啶黄； 表面活性剂：新洁尔灭等。
江苏农林职业技术学院 2016级水产养殖专业实施性人才培养方案 第一部分专业人才培养标准与要求 一、专业领域 适用于水产养殖技术专业。 二、入学要求 高中毕业生或具有同等学力者。 三、学习年限 3学年。 四、培养目标及规格 （一）培养目标 培养德、智、体全面发展的适应社会主义市场经济建设需要的具备水产动物增养殖科学、水产动物病害防治、水产动物营养与饲料工程及水生态环境工程等方面的基本理论、基本知识和基本技能，掌握养殖水体水质检测与调控、鱼类人工繁殖、（鱼、虾、蟹等）水产动物苗种培育和成体养殖等专业技能，能在与水产养殖生产和经营、水产养殖技术服务等相关领域和部门从事技术、经营和管理等工作的，德、智、体、美等方面全面发展，具有良好职业道德和法制观念的高级技术技能型专门人才。 （二）人才规格 1、职业道德 （1）具备良好政治思想素质、道德品质和法律意识； （2）牢固树立人与自然和谐发展的生态理念； （3）具备人文科学素养、良好的生活习惯，健康的身体和良好的心理素质； （4）具备吃苦耐劳、积极进取、爱岗敬业的工作态度和严谨科学的工作作风； （5）具备勤于思考、善于动手和勇于创新的精神；
（6）具有良好的交往能力、团队精神和主动服务“三农”的意识； （7）具有正确的就业观和自觉的创业意识。 2、职业技能 （1）熟练掌握主要养殖鱼类、甲壳类、贝类的人工育苗、育种和成体的集约化养殖等生产环节的关键技术； （2）掌握水产养殖水域水质分析和调控的专业技能； （3）掌握水产养殖动物疾病的诊断和防治的专业技能； （4）掌握鱼类营养及饲料加工的基本理论知识，具备鉴别饲料品质、饲料配方制作的专业能力； （5）掌握水产品保鲜技术、水产品加工、观赏鱼养殖等方面专业技能； （6）初具文献检索、资料查询的能力和一定的科学研究与技术开发能力； （7）有一定的调查研究与决策、组织与管理、口头与文字表达能力，具有独立获取知识、信息处理和创新的基本素质。 3、职业知识 （1）具备水产经济动物的增养殖技术和苗种繁育的基本知识； （2）具备养殖水化学、水产动物生物学等专业基础知识； （3）具备常见水产养殖动物病害的诊断和防治措施等相关知识； （4）掌握水产动物营养需求和配方设计、饲料加工技术、水产品保鲜技术、水产品加工和观赏鱼养殖等方面的基本知识； （5）具备内陆水域、浅海、滩涂的渔业资源和环境调查与规划的基本方法，了解现代化养殖工程、海洋渔业和水产品加工利用的基本知识； （6）了解有关水产资源保护、水产养殖、捕捞和渔政等方面的方针、政策和法规；了解水产品贸易的有关法规； 五、就业方向 面向农牧渔业、水环境及渔业资源保护、水产品检验检疫和市场管理等工作；能够在渔业生产企业、饲料企业、水族馆、观赏渔业等行业从事生产、产品开发、营销、管理工作或自主创业。 1、各级水产局、水产站； 2、各类水产养殖企业； 3、水产研究所、水环境监测与环境保护部门； 4、饲料生产与水产品加工生产企业； 5、水产品、饲料、鱼药营销企业； 6、其它与水产养殖行业有关的岗位。