微生物的培养和应用
【学习目标】
1、掌握培养基的分类、组成、功能及配制。
2、掌握无菌技术的内容和无菌操作技术。
3、研究培养基对微生物的选择作用
4、掌握分离、纯化特定微生物的研究思路和方法，掌握从土壤中分理处能够分解尿素的细菌并进行技术的操作过程。
【要点梳理】
要点一、微生物的实验室培养
1、培养基：
（1）培养基的配制原则
①目的要明确（根据微生物的种类、培养目的等）。如培养基可由简单的无机物组成，生产用培养则可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定培养基必须加入已知化学成分的物质。
②营养要协调。注意各种营养物质的浓度和比例。
③pH要适宜。各种微生物适宜生长的pH范围不同。如细菌、放线菌和真菌生长的最适pH分别为：6.5～7.5、
7.5～8.5和5.0～6.0。
（2）培养基的种类和用途
（3）选择培养基和鉴别培养基应用实例
（4）培养基中的营养要素
要点诠释：
①微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常用的氮源是铵盐、硝酸盐。
②对异养微生物来说。含C、H、O、N的化合物既是碳源．又是氮源。
③有些培养基不需要添加生长因子，生物自己能合成；而绝大多数微生物培养需要加入生长因子，原因是它们缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。
2、无菌技术
（1）无菌技术的概念
在微生物培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，其主要技术是无菌操作。无菌技术是指通过一定物理、化学的手段，防止实验室培养物被外来微生物污染，保持微生物的纯培养的技术，其中包括在微生物的分离、转接、保存等过程中防止其他微生物污染的手段。无菌技术主要围绕如何避免杂菌污染展开的，主要包括以下几方面：
①对实验操作的空间，操作者的手和衣着，进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近或接种箱内进行。
④应避免已经灭菌处理的材料用具与周围其他物品相接触。
（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法见下表：
注意：灭菌所依据的原理基本上都是使菌体内的蛋白质和核酸发生变性，从而达到杀菌的效果。
（3）消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。
①煮沸消毒法：在100℃煮沸5 min～6 min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢。
②巴氏消毒法：在70℃～75℃煮30 min或在80℃煮15 min。可以杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的营
养成分不被破坏。
③化学药剂消毒：使用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。
④紫外线消毒。
要点二、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌
1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
（1）培养基需冷却至50℃左右时开始倒平板
①原因：琼脂是一种多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。
②估计培养基温度的方法：培养基从灭菌锅中取出冷却一段时间后用手触摸，感觉上以刚不烫手为准。（2）平板倒置原因：平板皿盖上会凝结水珠，培养基表面的温度也较高，平板倒置后，既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
（3）注意事项：倒平板时不要将培养基溅在皿盖与皿底之间，否则此培养基不能用来培养微生物。
2．纯化大肠杆菌
可以选用下述方法，在牛肉膏蛋白胨固体培养基上纯化大肠杆菌。
（1）平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面（如图所示）。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。
培养基表面平行或分区划线
划线时要注意：
①几次灼烧接种环及目的：
a．取菌种之前灼烧的目的：杀死接种环上原有的微生物。
b．每次划线之前灼烧的目的：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少。
c．划线结束灼烧的目的：杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
②从第二次以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
（2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
稀释涂布平板的操作比较复杂，且各个细节均需保证“无菌”，应特别注意：
①酒精灯与培养皿的距离要合适。
②吸管头不要接触任何其他物体。 ③吸管要在酒精灯火焰周围使用。
要点三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1. 实验原理
（1）以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选尿素分解菌；有些微生物能产生并分泌脲酶，降解环境中的尿素做为其生长的氮源。
（2）尿素分解菌的鉴定——酸碱指示剂法
酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色范围是pH6.4～8.2，在酸性情况下呈黄色，碱性情况下呈红色
（3）液体稀释涂布平板法测定微生物活菌数目 2.培养基
LB 全营养细菌培养基配方：蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂糖 尿素培养基配方：葡萄糖、NaCl 、K 2HPO 4 、尿素、琼脂糖、酚红
要点诠释：琼脂糖和琼脂一样都是作为凝固剂来使用的，不要误以为是和葡萄糖一样提供碳源的。只是因为琼脂里还含有含氮的物质会对实验的结果造成影响。
3.实验流程
要点四、分解纤维素的微生物的分离 1.纤维素酶的作用机理
纤维素1
x C C +????
?→酶酶纤维二糖?????→葡萄糖苷酶
葡萄糖 纤维素酶是一种复合酶，由三种酶组成：C 1酶、C x 酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第
三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖，只有在这三种酶的协同作用下，纤维素才能被彻底水解成葡萄糖。 2.纤维素分解菌的筛选 （1）筛选原理
纤维素+刚果红→红色复合物，刚果红不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 （2）筛选方法：刚果红染色法。
在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红——纤维素的复合物就无法形成，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 3.分离分解纤维素的微生物的实验设计
分离分解纤维素的微生物的实验流程示意图如下图所示：
【典型例题】
类型一：培养基的配制和微生物的营养
例1、（2014 全国大纲卷）某同学在①、②、③三种条件下培养大肠杆菌，这三种条件是：
①以葡萄糖为碳源的培养基，不断补充培养基，及时去除代谢产物
②以葡萄糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物
③以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物
根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下：
假设三种培养基中初始总糖量相等，则①、②、③三种条件依次对应的趋势图是
A.甲、乙、丙
B.乙、丙、甲
C.丙、甲、乙
D.丙、乙、甲
【答案】C
【解析】以葡萄糖为碳源的培养基，不补充培养基，不除去代谢产物，随着营养物质的消耗和次级代谢产物的积累，大肠杆菌的生长环境不断恶化，生存阻力增大，因此种群数量达到稳定期后会出现衰亡期，故甲图对应②，反之丙图则对应①；若培养基里加入葡萄糖和乳糖，大肠杆菌先利用葡萄糖，葡萄糖消耗完以后，大肠杆菌会经过短期的调整，诱导合成乳糖苷酶，接着继续分解利用乳糖，最后衰亡，因此乙图对应③，故选C答案。【点评】本题考查微生物种群数量变化的相关实验。
【举一反三】：
【变式一】
（2015 江苏卷）做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是（）
A. 高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
B. 倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
C. 为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D. 用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上
【答案】D
【解析】高压灭菌加热后，先切断电源，使灭菌锅温度降至100摄氏度以下，压力表的指针归零，再打开锅盖，A错误。倒平板时，培养皿打开缝隙即可，不能完全打开，B错误。接种环需冷却后再挑取菌落，C错误。
土壤取样选择培养梯度稀释
将样品涂布到鉴别纤维素
分解菌的培养基上
挑选产生透
明圈的菌落
类型二：无菌操作技术和接种技术
例2、细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 ( )
A．接种针、手、培养基B．高压锅、手、接种针
C．培养基、手、接种针 D．接种针、手、高压锅
【答案】C
【解析】高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。微生物培养过程中的无菌操作包括消毒和灭菌两大类，分别又有各种不同的方法。对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
【点评】此题考查学生对无菌技术的掌握。
【举一反三】：
【变式一】
下列操作与灭菌无关的是（）
A．接种前用火焰灼烧接种环
B．接种前用酒精擦拭双手
C．将平板倒置，放入培养箱中培养
D．接种在酒精灯的火焰旁完成
【答案】C
【变式二】
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是（）
①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
【答案】A
【变式三】
关于平板划线操作正确的是（）
A．使用已灭菌的接种针、培养皿，在操作过程中不再灭菌
B．打开含菌种的试管，需通过火焰灭菌，取出菌种后，需马上塞上棉塞
C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D．最后将平板倒置，放在培养箱中
【答案】D
【解析】在平板划线时，已灭过菌的接种针在每次划线后，都必须用灼烧灭菌法灭菌，以防杂菌污染，A错；盛有菌种的试管在打开或重新塞棉塞前，都需通过火焰灼烧灭菌，B错；在划线过程中，培养皿盖应打开一条缝隙，进行接种，接种完毕后，迅速盖上培养皿盖，以防止杂菌污染，C错；平板凝固后，须将平板倒置。
类型三：利用选择培养基筛选菌株的实验方法和步骤
例3、探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。
实验原理
农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下。只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。
材料用具
农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的大试管若干。无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。
方法步骤
（1）倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在________操作。
（2）制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1 mL，转至9 mL无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰________cm处。
（3）涂布。按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布________个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布________个平板。
（4）培养放人恒温箱内，在适宜温度条件下培养3 d～4 d。一般每隔________小时统计一次，选取________时的记录作为结果，这样可以防止________。
（5）细菌的计数。当菌落数目稳定时，选取菌落数在________的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是________。（稀释度是105）
（6）预期结果。相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数________（填“多于”或“少于”）无氮培养基上的数目。理由是________。
【答案】
（1）酒精灯火焰旁
（2）1～2
（3）3 1
（4）24 菌落数目稳定因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
（5）30～300 5×107
（6）多于无氮培养基上可以生存和繁殖的只是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类的生存
【解析】考查微生物的分离及计数。要分离自生固氮菌，采用选择培养基分离的方法，缺乏氮源的培养基可用来分离自生固氮微生物，而其他微生物因缺乏氮源不能生长。实验步骤一般是：配制无氮培养基→灭菌→倒平板→系列稀释→涂布平板→培养→观察并计数。实验中要注意无菌操作和设计对照实验等。
【点评】本题考查微生物分离实验中对照实验的设计。
【举一反三】：
【变式一】
用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（）
A．涂布了2个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238
C．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是2l、212和256，取平均值163
D．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
【答案】D
【解析】在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B 不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单用3个平板的计数值来求平均值。
2020届微生物学期末考试经典题目 题库整理 判断题 1.内毒素是G-菌的外壁物质。( √ ) 2.抗生素的抗微生物效果一般低于消毒剂和防腐剂。( × ) 3.血球计数板可以检测酵母培养液中所有酵母细胞个数，而平板倾注法只能测定活细胞个 数。( √ ) 4.在细菌生长曲线中，稳定期的细胞数目处于稳定，是因为此期细胞不再增殖。( × ) 5.做固体培养基常加2%琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是1%。( × ) 6.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的 稀释度进行计数。( × ) 7.细菌中紫外线引起的突变是由于相邻鸟嘌呤分子彼此结合而形成二聚体的突变。( × ) 8.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物，唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生 物。( × ) 9.自发突变是指那些实验室中由于加入诱变剂所发生的突变。( × ) 10.内生菌根的真菌可进入根的皮层间隙和细胞内部，在根外较少，不形成菌套。( √ ) 11.英国科学家罗伯特?虎克在观察标本中观察到了一段线状的细菌。( × ) 12.所有的微生物都能利用氨态氮作为氮源。( × ) 13.发酵是微生物以无机物作为最终的电子受体的生物氧化过程。( × ) 14.蓝细菌是好氧细菌，通过糖酵解过程，利用光能产生它们的糖类。( × ) 15.固氮酶只有在严格厌氧条件下才有活性，所以固氮菌均为厌氧菌。( × ) 16.Hfr菌株与F-菌株接合后会使F-菌株转性变为F+菌株。( × ) 17.Parastism是指一种微生物生活在另一生物体表面或体内并对后者产生危害作用的现象。 ( × ) 18.大肠杆菌存在与否常作为判断水源是否被粪便污染的一个重要指标。在鉴定该菌时V.P (V oges Proskauer)实验和M.R (Methyl Red)实验结果应该是，前者为阳性，后者为阴性。 ( × ) 19.在培养根瘤菌时常加1/200000的结晶紫抑制G+细菌的生长。( √ ) 20.所有的原核微生物都具有鞭毛。( × ) 21.真菌中除环状质粒外还有线状质粒存在。( √ ) 22.在没有高压蒸汽灭菌设备情况下，不可能进行培养基质的彻底灭菌。( × ) 23.烟草花叶病毒的2130个壳粒反向缠绕成杆状病毒粒子。( × ) 24.促进扩散是微生物吸收营养物质的主要机制，通过特异性载体蛋白可将营养物质进行逆 浓度梯度运行。( × )
医学微生物学考试试卷（A） (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（A卷/B卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、Ａ型选择题 （由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共90个选择题） 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构，无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁： A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合，干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合，干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述，错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生（都是阳性） B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900～1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后，菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色 C.紫色和无色 D.无色和无色 E.无色和紫色 9.革兰染色法是最常用的一种染色法，其实际意义不包括:
(完整word版)微生物学期末考试试题 亲爱的读者： 本文内容由我和我的同事精心收集整理后编辑发布到文库，发布之前我们对文中内容进行详细的校对，但难免会有错误的地方，如果有错误的地方请您评论区留言，我们予以纠正，如果本文档对您有帮助，请您下载收藏以便随时调用。下面是本文详细内容。 最后最您生活愉快 ~O(∩_∩)O ~ 试题A总22页第1页
微生物学教程试卷A 一、名词解释（每小题4分，共5小题20分） 1.无菌技术在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。 2.菌落固体培养基中，单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团是菌落 3.平板是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式，是冷却凝固后固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面称作平板。 4.发酵发酵是指在无氧条件下，底物脱氢后产生的还原力[H]不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。 5.培养基人工配制的、适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物用的混合营养基质。 二、填空题（每空0.5分，共6小题12分） 旋形 试题A总22页第2页
4.根据营养物质在机体中生理功能的不同，可以将它们分 无机盐，生长因子，水 三、选择题（每小题1分，共10小题10分） 1. 产生假根是（）的形态特征。 A.根霉 B.酵母菌 C.青霉 D.曲 霉 2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是（）。 A.蛋白质 B.肽聚糖 C.脂多糖 D.磷壁酸 3.微生物从糖酵解途径获得（）ATP分子。 总22页第3页
微生物学基础知识培训教材 一、什么叫微生物？ 微生物是指一类体积微小、结构简单，大多是单细胞的，肉眼看不见的，必须用光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍、甚至几万倍才能观察到的微小生物的通称。 二、微生物有哪些特征？ 1. 个体小、作用大； 2.. 分布广、种类多； 3. 繁殖快、代谢强； 4. 易变异。 三、微生物分为哪几类？ 四、微生物的功能： 1、致病：引起人及动植物病害。 2、致腐、致霉：破坏工农业产品及人类生活用品。 3、参与自然循环：微生物分解有机物，产生二氧化碳释放于大气之中。 4、用于生产食品、药物、化工原料、饲料等。 5、其它：开采石油、天然气和煤，细菌治矿；污水处理等。 五、各类微生物的大小、形态、繁殖条件： 六、什么叫灭菌？ 用物理或化学方法，把物体上所有的致病和非致病的微生物以及细菌的芽胞全部杀死，称为灭菌。 灭菌后的物品即为无菌状态。 七、什么叫无菌？ 完全不存在活的微生物。（注：无菌状态是绝对的，不存在不同程度的无菌状态） 八、什么叫无菌室？ 指环境空气中悬浮微生物量按无菌要求管理，满足无菌生产要求的洁净室 九、什么叫消毒？ 用物理或化学的方法杀灭物体上的病原微生物。 十、什么叫热原？ 热原是微生物的代谢产物。 热原的组成：热原是微生物的一种内毒素。内毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物，其中脂多糖是内毒素的主要成分，具有特别强的热原活性。 十、热原有哪些性质？ 原核细胞型：细菌、放线菌、螺旋体、支原体、 衣原体、立克次氏体六类 真核细胞型：真菌、原虫、单细胞藻三类 非细胞型 ：病毒一类
1. 耐热性； 2. 滤过性； 3. 水溶性； 4. 不挥发性； 5. 其它：热原能被强酸、强碱所破坏，也能被强氧化剂如KMNO4或H2O2所钝化，超声波也能破坏热原。 十一、污染热原的途径有哪些？ 1.从溶剂中带入； 2. 从原料中带入； 3. 从容器、用具、管道和装置带入； 4. 制备过程中的污染； 5. 从输液器带入。 十二、除去热原的方法： 1.高温法； 2. 酸碱法； 3. 吸附法：用活性炭进行吸附； 4. 离子交换法； 5. 凝胶滤过法； 6. 用反渗透法通过三醋酸纤维膜除去热原。 十三、物理灭菌方法有哪些？ 十四、化学消毒法有哪些？ 化学消毒法是用化学药品来杀灭病原微生物或抑制微生物的发育与繁殖。用于杀灭病原微生物的化学药物称为消毒剂； 用于抑制微生物发育与繁殖的化学药物称为防腐剂或抑菌剂。
1.细菌特殊构造包括、、、等。（本题2分） 2.溶源性细胞在正常情况下有大约10 -5 细胞会发生现象，这是由于少数溶源细胞中的变成了的缘故。（本题分） 3.营养物质可以通过、、和四种方式进入细胞。（本题2分） 4.控制有害微生物措施中杀灭的方法有和，常用和方法，抑制的方法有和。（本题3分） 5.证明遗传物质的基础是核酸的三个著名的实验为、、。（本题分） 6.微生物基因重组的方式包括、_____、_____和。（本题2分） 1.纯培养是其中（）的培养物。 A.只有一种微生物 B.只有细菌生长所需的一种营养物 C.除主要微生物外只有一种微生物 D.没有代谢废物 2.实验室常用的培养细菌的培养基是（）。 $ A. 马铃薯培养基 B. 牛肉膏蛋白胨培养基 C.高氏一号培养基 D.麦芽汁培养基 3.己糖单磷酸支路和ED途径是进行（）替换的一个机制。 A.微生物中DNA合成 B.光合生物中的光合作用 C.某些种类微生物中的能量代谢 D.化学渗透作用 4.微生物代谢中，硝酸盐和硫酸盐可作为电子受体是在（）。 A.无酶时 B.无ATP时 C. 有细胞色素时 D. 无氧时 5.由于控制微生物的目的，灭菌一词指的是（）。 A.除去病原微生物 B.降低微生物的数量 ? C.消灭所有的生物 D.只消灭体表的微生物 6.紫外线辐射主要作用于微生物的（）。 A. 核酸 B.酶类 C. 糖类 D.细胞壁 7.青霉素族的抗生素主要用于抗（）。 A.病毒 B.真菌 C.革兰氏阴性菌 D.革兰氏阳性菌 8.所有下述特征皆适合质粒，除了（）之外。 A.它们是自我复制的DNA环 B.它们有10～50个基因 C.它们是细菌存活所必需的成分 D.它们是接合所必需的成分 9.接合时F因子进入受体细胞，受体细胞（）。 A.经历裂解 B.快速繁殖 C.变成供体细胞 D.发育出线粒体 — 10.研究不同微生物群落及其环境之间的关系的是（）。 A.微生物进化 B.微生物生态学 C.微生物生理学 D.微生物生物化学 四、判断题（每小题1分，共10小题10分）
微生物学基础知识试题 及答案 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
微生物学基础知识试题 部门姓名成绩 一. 判断题 1、消毒可以杀灭物体上的所有微生物，而灭菌只杀死物体上的病原微生物。（×） 2、微生物数量多、分布广，但繁殖不快，适应性不强。（×） 3、多数细菌的最适培养温度时30~35℃. （√） 4、药品中存在微生物并不一定会引起药品变质。（×） 5、洁净区中的所有操作均不应大幅度或快速动作。（√） 6、一个不锈钢托盘擦拭得非常光亮，因此它不存在微生物污染。（×） 7、药品中添加抑菌剂，可以杀灭含有的全部微生物。（×） 8、常用于消毒的乙醇浓度为70%~75%。（√） 9、酵母菌为多细胞真菌。（×） 10、洁净室（区）的工作人员不能化妆，但可以戴戒指和项链。（×） 二. 填空题 1. 细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺旋菌三类，多以二分裂方式繁殖。 2. 洁净室（区）应定期消毒。使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。 消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。 3. 细菌的生长曲线包括四个生长时期为延滞期、对数期、稳定期、衰亡期。 4. 形体最微小，结构最简单的微生物是病毒。
5. 微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子等。 6.酵母菌最最主要的繁殖方式是芽殖。 7. 大肠杆菌在合适的生长条件下， ~20 分钟便可繁殖一代 三、选择题 1 不属于细胞生物的微生物（ B ） A、细菌 B、病毒 C、真菌 D、放线菌 2 抗生素产生菌中，其主要产生菌是（ C ） A、真菌 B、酵母菌 C、放线菌 D、病毒 3. 细菌的测量单位。( B ) B.μm 4. 酵母菌在自然界中分布很广，尤其喜欢在的环境中生长。( A ) A.偏酸性且含糖较多 B.偏酸性且含糖较少 C.偏碱性且含糖较多 D.偏碱性且含糖较少 5. 真菌生长最适的温度为℃。( B ) A. 16～22， B. 23～28， C. 30～35， D. 28～35 6. 下列不属于辐射灭菌的是。( D ) A.紫外线灭菌法 B.电离辐射灭菌法 C.微波灭菌法 D.高压蒸汽灭菌法 7. 细菌液体培养过程中哪一个阶段细菌数以几何级数增加（ B ） A、延迟期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 8. 波长为的紫外线最具有杀菌作用。（ C ）
微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。 1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。 第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。
微生物学教程试卷A 一、名词解释（每小题4分，共5小题20分） 1.无菌技术在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。 2.菌落固体培养基中，单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团是菌落 3.平板是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式，是冷却凝固后固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面称作平板。 4.发酵发酵是指在无氧条件下，底物脱氢后产生的还原力[H]不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。 5.培养基人工配制的、适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物用的混合营养基质。 1. 产生假根是（）的形态特征。 A.根霉 B.酵母菌 C.青霉 D.曲霉 2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是（）。 A.蛋白质 B.肽聚糖 C.脂多糖 D.磷壁酸 3.微生物从糖酵解途径获得（）ATP分子。 A.2个 B.4个 C.36个 D.38个 4.处于对数生长期的细菌其特点是（）。 A.生长缓慢 B.生长迅速 C.大多数死亡 D.繁殖代时长
5.深层穿刺接种细菌到试管半固体培养基中（）。 A.可以观察细菌是否能运动 B.除去代谢废物的一个机会 C.增加氧气 D.增加钾和钠离子的数目 6.加压蒸汽灭菌锅灭菌参数是（）。 A.100℃,30min B. 180℃,10min C. 121℃,20～30min D. 160℃,60min 7.霉菌适宜生长的pH范围为（）。 A.＜4.0 B.4.0-6.0 C.6.5-8.0 D.8.0 8.str R是（）的一种菌株。 A.丙氨酸营养缺陷型菌株 B. 抗链霉素突变株 C.异亮氨酸营养缺陷型菌株 D. 抗庆大霉素突变株 9.微生物是生产以下食品时的一个重要因素，除了（）之外。 A.酸菜 B. 朝鲜泡菜 C.纯牛奶 D.酸奶 10.苏云金孢杆菌作为（）广泛用于现代生物学中。 A.乳酸菌 B.干酪和干酪产品的生产者 C.水系统的净化者 D. 生物杀虫剂 四、判断题（每小题1分，共10小题10分） 1.溶菌酶抑菌机理是抑制革兰氏阳性菌肽聚糖合成。（×） 2.在固体培养基中，琼脂的浓度一般为2%。（√） 3.ED途径是微生物所特有的底物脱氢途径。（√） 4.对于化能异样微生物来说，碳源可作为能源。（√） 5.高压蒸汽灭菌方法适用于一切物品和培养基的灭菌。（×） 6.微生物最适生长温度是一切生理过程中的最适温度。（×） 7.组成微生物细胞的化学元素来自微生物生长所需要的营养物质。（√） 8.原核生物只存在有性繁殖过程。（×） 9.自发突变具有不对应性和稀有性的特点。（√） 10.在可见光照下可以对微生物进行紫外线诱变而达到育种目的。（×） 五、简答题（共4小题28分） 1.革兰氏染色原理是什么？ (本题10分) 答：G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红色。 2.简答嗜盐菌产能方式及过程？ (本题6分)
G M P微生物学基础知识及洁净区管理培训试 题含答案 文档编制序号：[KK8UY-LL9IO69-TTO6M3-MTOL89-FTT688]
新版GMP微生物学基础知识及洁净区管理培训试题 姓名部门得分 一、填空题（40*1.5） 1.微生物类群十分庞杂，主要包括立克次体、、、、螺旋体、枝原体、衣原体与等，还包 括显微藻类和原生动物。 2.在药品生产过程中，应按GMP要求不断进行各项微生物卫生学监测。例如：对洁净室空 气中的、、的监测；对无菌设备清洁灭菌的验证等。 3.在药品生产中，导致药品的微生物污各种要素包括：厂房环境的、制药用水、、、。 4.在药品生产中，由于操作人员操作不注意或个人卫生情况欠佳，微生物可通过、、以及 衣服、、等各种渠道转移给药物制剂。因此，进入洁净生产区的人员不得、和佩带、严格按操作规程穿戴并。 5.控制微生物的物理因素主要有：、、、、渗透压、、等，对微生物生长能起到抑制作用 或杀灭作用。在药品GMP卫生管理上可以归纳为、、。 6.减少空气中微生物数量的方法有多种，其中常用的有3种方法：、 和。 7.对制药用水的消毒方法除应用于水的本身消毒以外，还必须包括水系统中的 、的消毒问题。 8.我司对洁净区的地面及清洁设备进行消毒所用的消毒剂为：、及，每月轮换。 9.微生物污染会使药品出现：变色、、、沉淀，产生有毒有害物质，致使药品。对人体而 言可能造成：、中毒、 、甚至死亡。 二、名词解释（3*5）
消毒： 灭菌： 防腐： 三、简答题 1．简述微生物的五大特征及生长繁殖所需的条件。（10分） 2.人是药厂中最不清洁的成分最大的污染源，请结合以下数据，分析可采取哪些有效措施来降低和控制由人员引发的微生物污染。（15分） 人的皮肤上平均每平方厘米含有10万个细菌，而且繁殖速度惊人，刚洗过的皮肤，在几小时之内细菌就可恢复到原来的数量。 一般人每个喷嚏的飞沫含有4500-150000个细菌；感冒患者一个喷嚏含有多达8500万个细菌。 1.细菌、放线菌、真菌（霉菌、酵母菌）、病毒 2.浮游菌、沉降菌 3.空气、操作人员、物料、设备 4.手、咳嗽、喷嚏、头发、化妆、饰物、洁净服、洗手消毒 5.温度、辐射作用、过滤、干燥、超声波、防腐、消毒、灭菌。 6.空气洁净技术采用的过滤、化学消毒方法、紫外线照射方法 7.设备、管道 8.醋酸洗必泰、新洁尔灭 9.变味、浑浊、感染、发热、过敏、中毒 名词解释 消毒：利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的一种措施，它可以起到防止污染或防止感染或传播的作用。并不一定能杀死细菌的芽胞。
2015-2016学年微生物学期末考试A卷-答案-(1)(1)
华中师范大学2015—2016学年第一学期 期末考试试卷（A ）卷 课程名称 微生物学 课程编号 21310014 任课教师 杨继红 刘金林 许敏 蒋金辉 一、名词解释 （每小题2分，共10分） 1. 二元培养物 只含有二种微生物，而且是有意识的保持二者之间的特定关系的培养物即二元培养物。 2. LPS LPS （脂多糖）是位于G-细菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质，由类脂A 、核心多糖和O-特异侧链 3 部分组成。 3. 生长因子 生长因子是指那些微生物生长所必需且需要量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。 4. 同步生长 是通过获得同步培养物的手段。使微生物细胞群体内的各个个体都处于同一细胞分裂周期的特殊生长状态。 5. 氧化磷酸化 物质在生物氧化过程中形成NADH 和FADH 2可通过位于线粒体内膜或细菌质膜上的 专业： 年级 学生姓名 学号 序号
电子传递系统传递给氧气或其他氧化型物质，在这个过程中偶联着ATP的合成，这种产生ATP的方式成为氧化磷酸化。 二、选择题（每小题1分，共25分） ，并提出生命来自于生命的胚种学说的科学家是（B）。 A. 列文虎克 B. 巴斯德 C. 科赫 D. 伊万诺夫斯基 2. 列文虎克自制的显微镜与当前常用的普通光学显微镜的主要差异在于 （ A ）。 A. 镜头 B. 光源 C. 聚光器 D. 样品制备 3. 革兰氏阳性菌细胞壁特有成分为（A）。 A. 磷壁酸 B. 肽聚糖 C. 脂多糖 D. 周质空间 4. 赋予芽孢皮层高渗透压特性的物质是（A）。 A. DPA-Ca B. 小酸溶性芽孢蛋白 C. DAP D. 疏水性角蛋白 5. 下列物质中不是构成革兰氏阳性菌肽聚糖亚单位的组分是（D）。 A. N-乙酰胞壁酸 B. 氨基酸短肽 C. N-乙酰葡萄糖胺 D. 磷壁酸 6. 下列属于“能量寄生型”的微生物是（ B ）。 A. 支原体 B. 衣原体 C. 立克次氏体 D. L-型细菌 7. 下列微生物中能产生“帚状体”样分生孢子的是（A）。 A. 青霉 B. 曲霉 C. 根霉 D. 毛霉 8. Staphylococcus aureus、Bacillus subtilis经革兰氏染色后，菌体分别呈（D）。 A. 红色、红色 B. 红色、蓝紫色 C. 蓝紫色、红色 D. 蓝紫色、蓝紫色 9. 酵母菌进行有性繁殖时可形成（D）。 A. 接合孢子 B. 孢囊孢子 C. 分生孢子 D. 子囊孢子 10. 不符合支原体特征的是（ D ）。 A. 无细胞壁 B. 一般以二等分裂方式进行繁殖
第一模块微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。
第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。 （1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。 （2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。 （3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。 细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。 2. 细菌的繁殖 二分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。 细菌生长速度很快，一般约20min分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。 3. 细菌的菌落 单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。 二. 真菌
微生物学基础知识试题(答案) 部门姓名成绩 一. 判断题（每题2分，共20分） 1. 常用于消毒的乙醇浓度为70%~75%。（√） 2. 酵母菌为多细胞真菌。（×） 3. 洁净室（区）的工作人员不能化妆，但可以戴戒指和项链。（×） 4. 消毒可以杀灭物体上的所有微生物，而灭菌只杀死物体上的病原微生物。（×） 5. 微生物数量多、分布广，但繁殖不快，适应性不强。（×） 6. 药品中存在微生物并不一定会引起药品变质。（×） 7. 洁净区中的所有操作均不应大幅度或快速动作。（√） 8. 一个不锈钢托盘擦拭得非常光亮，因此它不存在微生物污染。（×） 9.药品中添加抑菌剂，可以杀灭含有的全部微生物。（×） 10.多数细菌的最适培养温度时30~35℃. （√） 二. 填空题（每空2分，共40分） 1. 细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺旋菌三类，多以二分裂方式繁殖。 2. 洁净室（区）应定期消毒。使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。 消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。 3. 细菌的生长曲线包括四个生长时期为延滞期、对数期、稳定期、衰亡期。 4. 形体最微小，结构最简单的微生物是病毒。 5. 微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子等。 6.酵母菌最最主要的繁殖方式是芽殖。 7. 大肠杆菌在合适的生长条件下， ~20 分钟便可繁殖一代 三、选择题（每题2分，共16分）
1 不属于细胞生物的微生物（ B ） A、细菌 B、病毒 C、真菌 D、放线菌 2 抗生素产生菌中，其主要产生菌是（ C ） A、真菌 B、酵母菌 C、放线菌 D、病毒 3. 细菌的测量单位。( B ) B.μm 4. 酵母菌在自然界中分布很广，尤其喜欢在的环境中生长。( A ) A.偏酸性且含糖较多 B.偏酸性且含糖较少 C.偏碱性且含糖较多 D.偏碱性且含糖较少 5. 真菌生长最适的温度为℃。( B ) A. 16～22， B. 23～28， C. 30～35， D. 28～35 6. 下列不属于辐射灭菌的是。( D ) A.紫外线灭菌法 B.电离辐射灭菌法 C.微波灭菌法 D.高压蒸汽灭菌法 7. 细菌液体培养过程中哪一个阶段细菌数以几何级数增加（ B ） A、延迟期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 8. 波长为的紫外线最具有杀菌作用。（ C ） A、100~200nm B、150~250nm C、200~300nm D、250~300nm 四. 多项选择题（每题3分，共24分） 1. 微生物的特征有。（ ABCD ） A.体积小面积大 B.吸收多转化快 C.生长旺繁殖快 D.适应强变异频 2. 适用于干热灭菌的物品有。（ AB ） A.玻璃器皿 B.瓷器 C.糖类、明胶 D.饮用水 3. 属于原核细胞型微生物的有。（ AC ） A.细菌 B.酵母菌 C.放线菌 D. 流感病毒 4. 细菌的基本结构有。（ ABC ） A.细胞壁 B.细胞质 C.核物质 D.芽孢 5. 0.1％新洁尔灭消毒的作用机制是：（ BD ）
卫生和微生物学基础知识培训考核试题 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT
卫生和微生物学基础知识培训考核试题答案 一、填空（每空：3分，共51分） 1.微生物共分为几种：原核:细菌、放线菌、螺旋体、支原体、立克次氏体、衣原体。真核:真菌。非细胞类:病毒。 2.洁净车间（100级）洁净要求： 尘粒最大允许数（≥μm，3500个/m3），沉降菌（个/皿）：≤（1）， 3.培养基最好新配使用，一时用不完的可放在冰箱内保存，一般在（2～8）℃，普通琼脂或肉汤培养基一般不超过（一周） 4.任何培养基都必须按照规定的条件制备使用，不得随意改变（使用方法）。 5.洁净工作区在开始工作前，应提前运行至少（300）分钟。 6.盛装微生物的容器应经（高压或干热灭菌）消毒。 7.洁净区内操作时，动作要（稳、轻、少）；不做与操作无关的动作和不必要的交谈。 8.大肠埃希菌是（革兰氏阴性菌），金黄色葡萄球菌是（革兰氏阳性菌），革兰氏阳性菌是蓝紫色，革兰氏阴性菌是黄色。 9.洁净区（室）沉降菌监测应在洁净区（室）尘埃粒子数监测（合格后）进行。 10.已清洁烘干（或晾干）的器具、容器到下一次使用的间隔时间，不能超过（3）天， 三、简答题（第1题14分，第2题35分） 1.洁净区的废弃物应如何处理 参考答案：洁净区的废弃物应及时装于洁净的不产尘的塑胶袋中，密闭放在指定地点，在生产结束时清除出洁净区，放于相应类别的废料堆放处，塑胶袋一并掉弃。 2.生产区内员工个人卫生管理应做到哪些参考答案： （1.随时保持个人清洁卫生，做到勤剪指甲、勤理发、剃须、勤洗衣服、勤洗澡。
卫生和微生物学基础知识培训考核试题答案 一、填空（每空：3分，共51分） 1.微生物共分为几种：原核:细菌、放线菌、螺旋体、支原体、立克次氏体、衣原体。真核:真菌。非细胞类:病毒。 2.洁净车间（100级）洁净要求： 尘粒最大允许数（≥0.5μm，3500个/m3），沉降菌（个/皿）：≤（1）， 3.培养基最好新配使用，一时用不完的可放在冰箱内保存，一般在（2～8）℃，普通琼脂或肉汤培养基一般不超过（一周） 4.任何培养基都必须按照规定的条件制备使用，不得随意改变（使用方法）。 5.洁净工作区在开始工作前，应提前运行至少（300 ）分钟。 6.盛装微生物的容器应经（高压或干热灭菌）消毒。 7.洁净区内操作时，动作要（稳、轻、少）；不做与操作无关的动作和不必要的交谈。 8.大肠埃希菌是（革兰氏阴性菌），金黄色葡萄球菌是（革兰氏阳性菌），革兰氏阳性菌是蓝紫色，革兰氏阴性菌是黄色。 9.洁净区（室）沉降菌监测应在洁净区（室）尘埃粒子数监测（合格后）进行。 10.已清洁烘干（或晾干）的器具、容器到下一次使用的间隔时间，不能超过（3）天， 三、简答题（第1题14分，第2题35分） 1.洁净区的废弃物应如何处理？ 参考答案：洁净区的废弃物应及时装于洁净的不产尘的塑胶袋中，密闭放在指定地点，在生产结束时清除出洁净区，放于相应类别的废料堆放处，塑胶袋一并掉弃。 2.生产区内员工个人卫生管理应做到哪些？参考答案： （1.随时保持个人清洁卫生，做到勤剪指甲、勤理发、剃须、勤洗衣服、勤洗澡。 （2.工作前洗干净手，不涂化妆品，上岗时不佩戴饰物、手表。 （3.离开工作场地（包括就餐、上厕所）必须脱掉工作服装。 （4.不携带个人物品进入生产区及实验室，不在生产区及实验室内吃东西。生产区内饮水间要干净、整齐，对生产不造成污染。 （5.洁净室内随时注意保证手的清洁，注意消毒，手在消毒后不再接触与工作无关的物品，
医学微生物学考试试卷（A ）（附答案） （ 临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科 ） 班级 学号 姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写 上班级、姓名和试卷类型（A 卷/B 卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交， 否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成， 共 150 个选择题， 请按题目要求， 在备选答案中选择一个最佳答案， 并在答题卡上将相应的字母涂黑， 做在试卷上 无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、A 型选择题 （由一题干和5个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共 1. 哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A. 疯牛病 B. C. 结核病 D. E.体癣 2. 细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是 A. 单细胞 B. C .对抗生素敏感 D. E. 仅有原始核结构，无核膜 3 .革兰阳性菌细胞壁： A. 肽聚糖含量少 B. C. 对溶菌酶敏感 D. E. 有蛋白糖脂外膜 4. 青霉素杀菌机制是 : A. 干扰细胞壁的合成 B. 质合成 C. 影响核酸复制 D. 质合成 E. 损伤细胞膜 5. 有关“细菌鞭毛 ”的叙述，哪一项是错误的 A. 与细菌的运动能力有关 B. 许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C. 在普通光学显微镜下不能直接观察到 D. 可用于细菌的鉴定 E. 将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛 6. 有关 “芽胞”的叙述，错误的是 : A. 革兰阳性菌和阴性菌均可产生 B. 不直接引起疾病 C. 对热有强大的抵抗力 D. 代谢不活跃 E. 通常在细菌处于不利环境下形成 7. 用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为 : 梅毒 沙眼 二分裂方式繁殖 有由肽聚糖组成的细胞壁 缺乏五肽交联桥 所含脂多糖与致病性有关 与核糖体 50S 亚基结合，干扰蛋白 与核糖体 30S 亚基结合，干扰蛋白 90 个选择题）
质量中心微生物检验员统一考试题答案 部门：姓名：得分： 一、填空题：（50分，每空1分） 1、无菌生理盐水灭菌条件为（121）℃高压灭菌（15）分钟。 2、牛奶菌落总数检测方法中，待琼脂凝固后，将平板翻转，（36±1）℃培养（48±2）小时。 3、根据对样品污染状况的估计，选择2个-3个适宜稀释度的样品匀液，液体样品可包括原液，在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取（1ml）样品匀液加入两个无菌平皿内。 4、大肠菌群是指一群在（36）℃条件下培养48小时，能（发酵乳糖），（产酸产气）的需氧和兼性厌氧革（兰氏阴性无芽胞杆菌）。大肠菌的MPN是指（基于泊松分布）的一种间接方法。 5、大肠菌群的证实试验中，凡(BGLB肉汤管产气)，即可报告为大肠菌群阳性。 6、粪大肠杆菌主要包括（大肠埃希氏菌），也包括少量的（克雷伯氏菌）。 7. 胆盐可抑制（革兰氏阳性菌），湟绿是（抑菌抗腐剂），可增强队革兰氏阳性菌的抑制作用。 8.大肠杆菌平板计数选择菌落数为（10—100）的平板，暗室中（360nm—366nm）波长紫外灯照射下，计数平板上发（浅蓝色）荧光的菌落。 7、夹膜对于细菌来说的功能是起（保护）作用，鞭毛的功能是（借助鞭毛的转动而运动）。 8、金黄色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直径为（2mm—3mm），颜色呈（灰色到褐色），边缘为（淡色），周围为一（混浊带），在其外层有一（透明圈）。一般认为（血浆凝固阳性）的金黄色葡萄球菌菌株有致病力。 9、甲基红试验方法，取适量琼脂培养物接种于缓冲葡萄糖蛋白胨水，36℃±1℃培养2d—5d。滴加甲基红一滴，立即观察节ugo。（鲜红色）为阳性，(黄色)为阴性。 10、沙门氏菌生化试验中，自选择性琼脂平板上挑取两个以上典型或可疑菌落，分别接种（三糖铁琼脂）、（赖氨酸脱羧酶试验培养基）、（营养琼脂平板）。 11、用于微生物染色的染色剂主要有三种：（酸性染色剂）（碱性染色剂）（复合染色剂）。 12、影响微生物生长的物理因素（温度）、（辐射）、（超声波）、（过滤）、（渗透压）等。 13、假单胞杆菌主要污染源为（水源）、（再污染）。 14、药品按纯度分为（优级纯）（分析纯）（化学纯）（实验试剂）（生物试剂）。 15、嗜冷菌计数培养基的保质期是（三年）。 16、微生物的分类依据主要是（形态特征）、培养特征、（生理特征）及（血清反应）等。 二、选择题（30分，每题2分） 1、球菌可分为（ABCDE ）。 A、微球菌 B、八迭菌 C、双球菌 D四联球菌 E、链球菌 2、分解蛋白的菌包括：(ABD) A、蜡样芽孢杆菌 B、枯草杆菌 C、大肠杆菌 D微球菌 3、酸败乳和初乳PH一般在（C）以下，
新版GMP微生物学基础知识及洁净区管理培训试题 姓名部门得分 一、填空题(40*1、5) 1.微生物类群十分庞杂,主要包括立克次体、、、、螺旋体、枝原体、 衣原体与等,还包括显微藻类与原生动物。 2.在药品生产过程中,应按GMP要求不断进行各项微生物卫生学监测。例如:对洁净室空气中 的、、的监测;对无菌设备清洁灭菌的验证等。 3.在药品生产中,导致药品的微生物污各种要素包括:厂房环境的、制药用 水、、、。 4.在药品生产中,由于操作人员操作不注意或个人卫生情况欠佳,微生物可通过、、 以及衣服、、等各种渠道转移给药物制剂。因此,进入洁净生产区的人员不得、与佩带、严格按操作规程穿戴并。 5.控制微生物的物理因素主要有: 、、、、渗透压、、 等,对微生物生长能起到抑制作用或杀灭作用。在药品GMP卫生管理上可以归纳 为、、。 6.减少空气中微生物数量的方法有多种,其中常用的有3 种方法: 、 与。 7.对制药用水的消毒方法除应用于水的本身消毒以外,还必须包括水系统中的 、的消毒问题。 8.我司对洁净区的地面及清洁设备进行消毒所用的消毒剂为: 、及, 每月轮换。 9.微生物污染会使药品出现:变色、、、沉淀,产生有毒有害物质,致使药 品。对人体而言可能造成: 、中毒、 、甚至死亡。 二、名词解释(3*5) 消毒: 灭菌: 防腐: 三、简答题 1．简述微生物的五大特征及生长繁殖所需的条件。(10分)
2、人就是药厂中最不清洁的成分最大的污染源,请结合以下数据,分析可采取哪些有效措施来降低与控制由人员引发的微生物污染。(15分) ?人的皮肤上平均每平方厘米含有10万个细菌,而且繁殖速度惊人,刚洗过的皮肤,在几小时之内细菌就可恢复到原来的数量。 ?一般人每个喷嚏的飞沫含有4500-150000个细菌;感冒患者一个喷嚏含有多达8500万个细菌。 1.细菌、放线菌、真菌(霉菌、酵母菌)、病毒 2.浮游菌、沉降菌 3.空气、操作人员、物料、设备 4.手、咳嗽、喷嚏、头发、化妆、饰物、洁净服、洗手消毒 5.温度、辐射作用、过滤、干燥、超声波、防腐、消毒、灭菌。 6.空气洁净技术采用的过滤、化学消毒方法、紫外线照射方法 7.设备、管道 8.醋酸洗必泰、新洁尔灭 9.变味、浑浊、感染、发热、过敏、中毒 名词解释 ?消毒:利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的一种措施,它可以起到防止污染或防止感染或传播的作用。并不一定能杀死细菌的芽胞。 ?灭菌:指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施。灭菌后的物体不再有可存活的微生物。灭菌比消毒要求高,包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物与非病原微生物。 ?防腐就是在某些化学物质或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生长的一种措施,它能防止食物腐败或防止其她物质(如药剂)霉变。细菌一般不死亡。 简答: *生长繁殖条件 *(1) 充足的营养物质(碳源、氮源、无机盐、水) *(2) 适宜的酸碱度
1.机体免疫系统功能正常情况下，对自身成分不应答，称为：免疫耐受 2.机体的中枢免疫器官是：以上A+B 3.与载体蛋白耦联后可获得免疫原性的物质是：半抗原 4.超抗原：可以多克隆激活某些T细胞 5.血清中能形成五聚体，相对分之质量最大达19S的Ig是：IgM 6.血清中半衰期最长的Ig 是IgG 7.SIGA的J链合成细胞是黏膜下浆细胞 8.灭活B3B的补体调节因子是：I因子 9.参与机体特异性免疫的补体激活途径是：经典激活途径 10.经典途径中各补体成分激活的顺序是：C142356789 11.下列不参与旁路激活途径的补体成分是：C4 12.细胞因子的作用表现为：以上均是 13.被FDA批准用于治疗乙型肝炎的细胞因子是：IFN—a 14.识别抗原肽、提成抗原的表面功能分子是：MHC分子 15.参与包细胞与内皮细胞喝血小板粘附的黏附分子是：P选择素 16.MHC分子中不构成AG结合槽的结构域是：I类分子的a3 17.与HLA-B27阳性关联的是：强直性脊柱炎 18.NK细胞表面具有鉴别意义的标志是：CD3-、cd56+cd16+ 19.下列淋巴细胞中，不属固有免疫细胞的是：abT细胞 20.胞质区含有ITAM基序的CD分子是：CD3 21.能与MHCI类分子结合的CD分子是：CD8 22.与mig共同组成BCR复合物的是：CD79a和CD79b 23.在阴性选择中，被删除的细胞是：与MHCI或Ⅱ类分子/自身肽高亲和力结合的SP细胞 24.固有免疫细胞所不具备的应答特点是：经克隆扩增喝分化后，迅速产生免疫效应 25.能显著刺激初始型T细胞的APC是：DC 26.不表达MHCⅡ类分子的是：FDC 27.naiveTcell是：未接触过Ag的成熟T细胞 28.向T细胞提供第二活化信号的重要共刺激分子是：CD28、B7 29.能启动抑制性信号的配对作用分子是：LFA-1/ICAM-2 30.对脂筏描述错误的是：静息B细胞脂筏中有大量BCR复合物 31.高浓度时能多克隆激活B细胞的是：TI-1抗原 32.关于ITAM描述错误的是：基本结构为I/VxYxxL 33.对抗原至免疫耐受描述错误的是：静脉注射单体抗原不易至免疫耐受 34.那些细胞表达高亲和力的FceRI：肥大细胞、嗜碱性粒细胞 35.能使胎儿Th+红细胞发生溶解破坏的抗体是：双价免疫IgG 36.下列那一项属于Ⅳ型超敏反应：结核菌素皮肤试验阳性 37.刺激机体产生类风湿因子的抗原是：变性IgG 38.以下哪类疾病是由于MHCⅡ类分子表达缺陷引起的：裸淋巴细胞综合征 39.双抗体夹心法检测甲胎蛋白的固相包被物是：AFP抗体 40.可利用抗CD20靶向治疗的是：B细胞淋巴瘤 1.机体免疫系统识别和清除突变细胞的功能称为：免疫监视 2.属于外周免疫器官的是：脾、淋巴结、黏膜相关淋巴组织 3.异嗜性抗原的本质是：共同抗原