三氯乙酸
1液液萃取衍生气相色谱法
1.1范围
本标准规定了用气相色谱法测定生活饮用水及其水源水中一氯乙酸( MCAA)、一几氯乙酸(DCAA)和三氯乙酸(TCAA) 。
本法适用于生活饮用水及其水源水中一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸的测定。
本法最低检测质量:一氯乙酸( MCAA）二氯乙酸（DCAA) ,三氯乙酸(TCAA)分别为0.062 ng,0.025ng,0. 012 ng。若取水样25 mI.水样测定.则最低检测质量浓度分别为:5ug/L. 2ug/L，1ug/L.
1.2原理
在酸性条件下中PH小于5)，以含1,2二溴丙烷(1 , 2-DBP)内标的甲基叔丁基醚萃取水样，萃取液用硫酸酸化的甲醇溶液衍生，使水中卤乙酸形成卤代乙酸甲脂，用毛细管柱分离，电子捕获检测器（EC'D)测定。以相对保留时间定性，内标法定量。
1.3试剂和材料
1.3.1载气:高纯氮<9 999%)
1. 3. 2配制标准样品和试样预处理时使用的试剂和材料
1. 3.
2. 1氯化铵晶体。
1. 3.
2. 2无水硫酸铜。
1.3.
2.3硫酸钠晶体。
1.3.
2.4饱和碳酸氢钠溶液:取足量的碳酸氢钠用试剂级纯水溶解在50 mI.试剂瓶中，保持在瓶底有碳酸氢钠粉末。
1. 3.
2. 5 1 , 2一二溴丙烷（1-2-DBP）
1. 3.
2. 6硫酸(p = 1. 84g/mL)
1. 3.
2. 7硫酸一甲醇溶液(5+45):移取5 mL硫酸( 1.
3. 2. 6)缓慢地滴人预先装有45 mL 甲醇放在冰水浴中的100 mI.容器中，待温度冷却至室温后使用，临用现配。
1. 3.
2. 8无水硫酸钠。
1. 3.
2. 9甲基叔丁基醚(MtBE)，纯度>99%。
1. 3.
2. 10一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸标准品，纯度>99% .
1. 4仪器
1. 4. 1气相色谱仪
1.4.1.1电子捕获检测器。
1.4.1.2记录仪或工作站。
1. 4. 1. 3色谱柱:HP-5毛细管柱(30 mX0.25 mrnX0. 25 um)，或者相同极性的其他毛细
管柱。
1. 4. 2具塞采样瓶,50 mL。
1.4.3具塞萃取瓶,50 mL。
1. 4. 4具塞衍生瓶，16mL.
1.4.5加热块:孔径适合相应的衍生瓶。
1.4. 6微量注射器;5，10，25，100，250，1 000 uL。
1. 4. 7漩涡振荡器。
1. 5样品
1. 5. 1样品的稳定性:二氯乙酸在水中不稳定。
1.5.2水样采集和保存方法:先将5 mg氯化铵晶体(1.3.
2.1)于50 mI采样瓶(1.4.2)中(含量约为100 mg/L，对于高氯化的水应该增加氯化铵的量)，取满水样。自来水采集时，先打开水龙头，使水流中不含气泡,3 min-5 min后开始采集(注意不要让水溢出)，盖好塞子，上下翻转振摇使晶体溶解。于24 h内分析，4℃冰箱保存不超过7天;样品衍生液在一20C冰箱保存不超过7天。
1. 5. 3水样预处理
1. 5. 3. 1取25 ml水样倒人30 rnI.萃取瓶中( 1.1. 3) 0
1. 5. 3. 2萃取衍生:向水样中加人2 ml浓硫酸，摇匀;迅速加人约3g无水硫酸铜( 1. 3.
2. 2')摇匀;再加人约10 g无水硫酸钠（1.
3.2.3).摇匀;然后加人4mI_含内标(1, 2-DBP) 300 ug/ l的甲基叔丁醚，振荡，静止5 min。取上层清液3. 0 ml至另一16 ml衍生瓶中( 1.
4.4)，加人新鲜配置硫酸-甲醇溶液( 1. 3. 2. 7) 1mI，在}50℃加热块衍生120 min士10 min。取出衍生瓶，冷至室温后逐滴加人4 mI饱和碳酸氢钠溶液(1.3.2.1),盖上塞子，振荡并注意不断放气;最后，取上清液1ml-1. 5 mI.至萃取瓶中，加人少量无水硫酸钠(7.3.2.8),取2ul上清液进气相色谱分析。
1. 6分析步骤
1. 6. 1仪器调整
1.6.1.1进样口温度:200C
1. 6. 1. 2柱温:程序升温35C保持7 min, 5 0C /min至70C , 30C/min至250 C，保持5 min.
1. 6. 1. 3检测器温度:250C。
1.6. 1.4载气(N2)流量;1 ml/min
1.6. 2校准
1. 6.
2. 1定量分析中校准方法:内标法。
1.6.
2.2标准样品
A每次分析样品时，标准使用液需临时配制。标准样品和试样尽可能同时分析。
B标准样品的制备
a标准储备溶液:单一标准储备液，取纯度不小于99%的单一标准物质一氯乙酸，二氯乙酸和三
氯乙酸( 1, 3. 2. 10)6.4ul., 6.4ul和6.2ul分别滴人预先盛有5 mL左右甲基叔丁基醚（1.3.2.9)的10 m1.容量瓶中，振摇，定容，各溶液质量浓度均为1 mg/mL b标准使用溶液:分别取标准储备溶液（9, 1. 6. 2. 2Ba）, 1 000, 500, 250 uL滴入预先盛有5m1.左右甲基叔丁基醚的10 m1.容量瓶中，振摇，定容;混合后一氯乙酸，二氯乙酸和三氯乙酸的质量浓度
依次为100 mg/L.，5 0mg/L，25 mg/L。
c内标萃取液:取内标物质1 , 2-DBP ( 7 . 3. 2 . 5} 7. 8ul滴人预先盛有约2O mI甲基叔丁基醚（1. 3. 2. 9)的50mI容量瓶中，振摇，定容，内标储备溶液质量浓度为300 mg/L;再取50ul此储备溶液，
滴人预先盛有约20 mL甲基叔丁基醚的50 mI容量瓶中，振摇，定容，内标萃取液浓度为300ug/L
1. 6.
2.
3. 工作曲线的制备
分别取标准使用溶液（1.6.2.2 Bb)0,5,10,20,40ul至装有25 mI一纯水的萃取瓶中，配制后工作曲线的质量浓度:MCAA为0,25,50,100,200ug/L,DCA A为0,12.5,25,50,100 ugL,TCAa为
0,6. 25.12. 5,25,50 ug/L。按1.5.3.2方法进行萃取、衍生、分析。以标准物质峰面积与内标物质峰面积比值为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制工作曲线。
1.6.3试验
1. 6. 3. 1进样
A进样方式:直接进样。
I3进样量:2 ul
1.6.3.2记录:用标样核对，记录色谱峰的保留时间及对应的化合物。
1. fi. 3. 3色谱图考察
A标准色谱图:_见图4
氯乙酸标准色谱图
B 定性分析
a 各组分出峰顺序:MCAA ，DCAA ，1,2-DBP ,TCAA .
b 保留时间:1MCAA 6. 2 min,DCAA10.4 min ，1，2-DBP 11.0min TCAA 15. 2min C 定量分析
按式(5)计算被分析物的质量浓度。 P=(R-R 0)/K 式中:
p 一被分析物的质量浓度，单位为微克每升ug/L) , K-一一工作曲线的斜率;
R-一被分析物质峰面积与内标峰面积比值; R 0一作曲线的截距。 1. 7结果表示 1. 7. 1定性结果
根据标准色谱图各组分的保留时间，确定水样中组分的名称和组分的数目: 1.7.2定盘结果
1. 7.
2. 1含量的表示:根据式(6)算各组分的质量浓度，以微克每升(ug/L_)计。
8.1检出限（见表3）
仪器检出限：DL=
K SD
3= ug/L 方法检出限：MLD=m
V
DL = = ug/L
DL-仪器检出限ug/L ； V-定容体积 mL ； m-取样量，g 。 检查出限= ug/L
8.2精密度（见表21）
六次平行结果标准偏差 %。 9结论
9.1相对标准偏差：%
9.2 仪器检出限：氯乙酸=ug/L
方法检出限：氯乙酸=ug/L
表1
氯乙酸标准曲线
C(ug/L) A
表2
表3
编号 1 2 3 4 5 6 吸光度（A ） C(ug/L )
平均值 RSD%
编号 空白
样1
样2
样3
样4
吸光度（A ） C(ug/L )
空白平行 C(ug/L )
仪器检出
DL =
K
SD
3= ug/L
限
方法检出
限MLD =
m
V
DL*
= ug/L
三氯乙酸 1液液萃取衍生气相色谱法 1.1范围 本标准规定了用气相色谱法测定生活饮用水及其水源水中一氯乙酸( MCAA)、一几氯乙酸(DCAA)和三氯乙酸(TCAA) 。 本法适用于生活饮用水及其水源水中一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸的测定。 本法最低检测质量:一氯乙酸( MCAA）二氯乙酸（DCAA) ,三氯乙酸(TCAA)分别为0.062 ng,0.025ng,0. 012 ng。若取水样25 mI.水样测定.则最低检测质量浓度分别为:5ug/L. 2ug/L，1ug/L. 1.2原理 在酸性条件下中PH小于5)，以含1,2二溴丙烷(1 , 2-DBP)内标的甲基叔丁基醚萃取水样，萃取液用硫酸酸化的甲醇溶液衍生，使水中卤乙酸形成卤代乙酸甲脂，用毛细管柱分离，电子捕获检测器（EC'D)测定。以相对保留时间定性，内标法定量。 1.3试剂和材料 1.3.1载气:高纯氮<9 999%) 1. 3. 2配制标准样品和试样预处理时使用的试剂和材料 1. 3. 2. 1氯化铵晶体。 1. 3. 2. 2无水硫酸铜。 1.3. 2.3硫酸钠晶体。 1.3. 2.4饱和碳酸氢钠溶液:取足量的碳酸氢钠用试剂级纯水溶解在50 mI.试剂瓶中，保持在瓶底有碳酸氢钠粉末。 1. 3. 2. 5 1 , 2一二溴丙烷（1-2-DBP） 1. 3. 2. 6硫酸(p = 1. 84g/mL) 1. 3. 2. 7硫酸一甲醇溶液(5+45):移取5 mL硫酸( 1. 3. 2. 6)缓慢地滴人预先装有45 mL 甲醇放在冰水浴中的100 mI.容器中，待温度冷却至室温后使用，临用现配。 1. 3. 2. 8无水硫酸钠。 1. 3. 2. 9甲基叔丁基醚(MtBE)，纯度>99%。 1. 3. 2. 10一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸标准品，纯度>99% . 1. 4仪器 1. 4. 1气相色谱仪 1.4.1.1电子捕获检测器。 1.4.1.2记录仪或工作站。 1. 4. 1. 3色谱柱:HP-5毛细管柱(30 mX0.25 mrnX0. 25 um)，或者相同极性的其他毛细
三氯乙酸化学品安全技术说明书 第一部分：化学品名称 化学品中文名称：三氯乙酸 化学品英文名称：trichloroacetic acid 中文名称2：三氯醋酸 英文名称2： 技术说明书编码：971 CAS No.：76-03-9 分子式：C2HCl3O2 分子量：163.40 第二部分：成分/组成信息 有害物成分含量CAS No. 三氯乙酸≥98.5% 76-03-9 第三部分：危险性概述 危险性类别： 侵入途径： 健康危害：吸入本品粉尘对呼吸道有刺激作用，可引起咳嗽、胸痛和中枢神经系统抑制。眼直接接触可造成严重损害，重者可导致失明。皮肤接触可致严重的化学性灼伤。口服灼伤口腔和消化道，出现剧烈腹痛、呕吐和虚脱。 环境危害： 燃爆危险：本品可燃，具腐蚀性、刺激性，可致人体灼伤。 第四部分：急救措施 皮肤接触：立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗至少15分钟。就医。 眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟。就医。 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。 食入：用水漱口，给饮牛奶或蛋清。就医。 第五部分：消防措施 危险特性：受高热分解产生有毒的腐蚀性烟气。具有较强的腐蚀性。 有害燃烧产物：一氧化碳、二氧化碳、氯化氢。 灭火方法：采用雾状水、泡沫、二氧化碳灭火。 第六部分：泄漏应急处理 应急处理：隔离泄漏污染区，限制出入。建议应急处理人员戴防尘面具（全面罩），穿防酸碱工作服。不要直接接触泄漏物。小量泄漏：用洁净的铲子收集于干燥、洁净、有盖的容器中。也可以将地面洒上苏打灰，然后用大量水冲洗，洗水稀释后放入废水系统。大量泄漏：用塑料布、帆布覆盖。然后收集回收或运至废物处理场所处置。
1884 异恶酰草胺ixoxaben(草案) 1885 苯噻酰草胺mefenacet(草案) 1886 溴丁酰草胺bromobutide(草案) 1887 氯甲酰草胺clomeprop(草案) 1888 氟氯草胺nipyralofen(草案) 1889 氯硫酰草胺chlorthiamide 1890 丁咪酰胺isocarbamide 1891 乙氧苯草胺ethobenzanid 1892 甲磺草胺sulfentrazone 1893 唑嘧磺草胺flumetsulam 1894 唑草胺CH 900 1895 丙炔氟草胺flumioxazin(草案) 1896 磺草唑胺metosulam 1897 敌草腈dichlobenil 1898 碘苯腈ioxynil 1899 辛酰碘苯腈ioxynil octanoate 1900 溴苯腈bromoxynil 1901 辛酰溴苯腈bromoxynil octanoate 1902 苯草酮methoxyphenone(JMAF) 1903 稗草烯tavron 1904 敌草快diquat 1905 百草枯paraquat 1906 野燕枯difenzoquat 1907 恶草酮oxadizon 1908 灭草唑methazole(BSI) 1909 氯草敏chloridazon 1910 溴莠敏brompyrazon 1911 氟草敏norflurazon 1912 醚草敏credazine(JMAF) 1913 除草定bromacil 1914 环草定lenacil 1915 特草定terbacil 1916 杀草强amitrole 1917 乙氧呋草黄ethofumesate 1918 苯草灭bentranil 1919 灭草松bentazone 1920 苄草唑pyrazoxyfen(草案) 1921 吡唑特pyrazolate(草案) 1922 氟啶草酮fluridone 1923 氟硫草定dithiopyr(草案) 1924 呋草黄benfuresate(草案) 1925 环嗪酮hexazinone
《第四军医大学学报》2001年22期 三氯乙酸对蛋白质结构稳定性的影响 郭立安,阎哲,张晓楠,武丽华 【作者单位】：第四军医大学中心实验室陕西西安710033 (郭立安;阎哲;张晓楠);第四军医大学中心实验室陕西西安710033(武丽华) 【关键词】：蛋白质;电泳;三氯乙酸;蛋白质结构 【基金】：陕西省科技发展计划攻关课题 ( No.95 K11-8) 【分类号】：Q503 【DOI】：cnki:ISSN:1000-2790.0.2001-22-040 【正文快照】： 0 引言 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)是蛋白质化学中最常用的研究技术之一 ,常用于检测蛋白质的纯度和测定蛋白质的分子量 .当生物样品的浓度很低或样品中盐浓度>0 .1mol· L- 1 ,需要对待测样品溶液进行浓缩或除盐 .最常用的方法是三氯乙酸 (TCA)沉淀法 .实验中我们观察到TCA对蛋白质的结构稳定性有较大的影响 ,它可使蛋白质分子间相互聚集或断裂成碎片 ,干扰分析结果的准确性 .本研究选取了几种蛋白质 ,使用TCA沉淀 ,然后在不同时间进行电泳分析和活性测定 ,探讨TCA对蛋白质结构稳定性的影响 .1 材料和方法1.1 材… 三氯乙酸沉淀法对蛋白质结构影响 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是蛋白质化学中最常用的研究技术之一，常用于检测蛋白质的纯度和测定蛋白质的分子量.当生物样品的浓度很低或样品中盐浓度>0.1mol?L-1 ，需要对待测样品溶液进行浓缩或除盐.最常用的方法是三氯乙酸（TCA）沉淀法.实验中我们观察到TCA对蛋白质的结构稳定性有较大的影响，它可使蛋白质分子间相互聚集或断裂成碎片，干扰分析结果的准确性.本研究选取了几种蛋白质，使用TCA沉淀，然后在不同时间进行电泳分析和活性测定，探讨TCA对蛋白质结构稳定性的影响. 1 材料和方法 1.1 材料 三氯乙酸、丙酮均为分析纯试剂，由西安化学试剂厂.丙烯酰胺、双丙烯酰胺、考马斯亮兰G-250、十二烷基硫酸钠（SDS）、牛血清白蛋白（BSA）、胰蛋白酶（Try）、木瓜蛋白酶（Pap），华美生物工程公司.人血清白蛋白（HSA）、尿激酶（UK）、重组人α干扰素（rhIFN-α），由本研究室纯化.Bio-Rad mini-gel 电泳仪，Sorvall高速离心机，Shimadzu CS-9000型双波长薄层扫描仪. 1.2 方法 分别将BSA，HSA，UK，rhIFN-α，Try，Pap用双蒸水配制成100mg?L-1 的溶液，每一种蛋白质溶液分成6份，每份1mL.将每一份样品同时作以下处理:加入100%TCA0.1mL，混匀，冰浴30分钟;离心，小心弃去上清液;沉淀以丙酮洗涤三次，然后让丙酮挥发干净，放入4℃保存.
食品中三氯乙酸残留量气相色谱法的测定 三氯乙酸(trichloroacetic acid)是一种重要的有机物合成的中间体,广泛应用于工业生产中。但是近期研究表明,长时间接触三氯乙酸可导致神经系统障碍、引起神经炎、损伤肝脏机能、导致癌症甚至死亡〔1〕。直接食用三氯乙酸则会损害身体健康。三氯乙酸的测定方法很多〔2,3〕,但是对食品中三氯乙酸快速检测方法较少。因此,本文采用毛细管气相色谱法对食品中的三氯乙酸进行检测。结果表明,采用气相色谱法测定食品中的三氯乙酸,方法简便、快捷、灵敏度较高。现报告如下。实验部分 (1)仪器:HP5890Ⅱ型气相色谱仪,附有氢火焰离子检测器(FID);N20XX色谱工作站;AE-240电子天平;DK-98-1恒温水浴锅。(2)样品及试剂:果冻;浓硫酸(北京化工厂);甲醇(天津市康科德科技有限公司);无水硫酸钠(天津市康科德科技有限公司);10%NaCl溶液;实验用水为二次去离子水。(3)色谱条件:色谱柱:HP INNOWAX(30 m×0?53 mm×1?0μm);色谱柱温度:100℃保持1 min,5℃/min程序升温至150℃,保持5 min;进样口温度:250℃;检测器温度:300℃;载气:N2,流速:6?0 ml/min。(4)实验方法:①对照品试样制备:称取三氯乙酸0?05 g(精确到0?0001 g),加入到100 ml容量瓶中,用蒸馏水溶解并定容,混匀,作为对照品贮备液。取对照品储备液1?0 ml,置具塞比色管中,依次加入浓硫酸0?8 ml,甲醇1?0 ml混匀,放入60℃恒温水浴1 h〔4〕,取出冷却后,加入10%NaCl溶液5 ml、正己烷1?0 ml振荡萃取,静止分层,取出有机相,用少许无水硫酸钠脱水,作为对照品试样。②供试品试样制备:称取0?1 g(精确到0?000 1 g),置具塞比色管中,依次加入浓硫酸0?8 ml,甲醇1?0 ml混匀,放入60℃恒温水浴1 h,取出冷却后,加入10%NaCl溶液5 ml、正己烷1?0 ml振荡萃取,静止分层,取出有机相,用少许无水硫酸钠脱水,作为供试品试样。结果与分析 (1)系统适用性试验:取对照品储备液1?0 ml,置具塞比色管中,进行酯化、萃取。按上述色谱条件进行系统适用性考查,测得三氯乙酸的理论塔板数为5 000。(2)标准曲线:取对照品储备液0?2,0?5,1?0,2?0,4?0,6?0 ml,分别
化学品安全技术说明书 化学品中文名：三氯乙酸; 三氯醋酸 化学品英文名：trichloroacetic acid; trichloroethanoic acid 企业名称： 生产企业地址： 邮编: 传真: 企业应急电话： 电子邮件地址： 技术说明书编码: √纯品混合物 有害物成分浓度CAS No. 三氯乙酸76-03-9 危险性类别：第8.1类酸性腐蚀品 侵入途径：吸入、食入、经皮吸收 健康危害：吸入本品粉尘对呼吸道有刺激作用，可引起咳嗽、胸痛和中枢神经系统抑制。眼直接接触可造成严重损害，重者可导致失明。皮肤接触可致严重的化 学性灼伤。口服灼伤口腔和消化道，出现剧烈腹痛、呕吐和虚脱。 环境危害：对水生生物有毒作用。 燃爆危险：可燃，其粉体与空气混合，能形成爆炸性混合物。 皮肤接触：立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗20～30分钟。如有不适感，就医。 眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗10～15分钟。如有不适感，就医。 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。呼吸、心跳停止，立即进行心肺复苏术。就医。 食入：用水漱口，给饮牛奶或蛋清。就医。
危险特性：受高热分解产生有毒的腐蚀性烟气。具有较强的腐蚀性。 有害燃烧产物：一氧化碳、氯化氢。 灭火方法：采用雾状水、泡沫、二氧化碳灭火。 灭火注意事项及措施：消防人员必须穿全身耐酸碱消防服、佩戴空气呼吸器灭火。尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。 应急行动：隔离泄漏污染区，限制出入。建议应急处理人员戴防尘口罩，穿防酸碱服。 穿上适当的防护服前严禁接触破裂的容器和泄漏物。尽可能切断泄漏源。用 塑料布覆盖泄漏物，减少飞散。勿使水进入包装容器内。用洁净的铲子收集 泄漏物，置于干净、干燥、盖子较松的容器中，将容器移离泄漏区。 操作注意事项：密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴导管式防毒面具，戴化学安全防护眼镜，穿防酸碱工 作服，戴橡胶耐酸碱手套。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆 型的通风系统和设备。避免产生粉尘。避免与氧化剂、碱类接触。搬运时要 轻装轻卸，防止包装及容器损坏。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应 急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。 储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。包装密封。应与氧化剂、碱类分开存放，切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。储区应备有合 适的材料收容泄漏物。 接触限值： MAC(mg/m3): 未制定标准PC-TWA（mg/m3）: 未制定标准 PC-STEL（mg/m3）: 未制定标准TLV-C(mg/m3): - TLV-TWA(mg/m3): 1ppm TLV-STEL(mg/m3): 监测方法：无资料。 工程控制：密闭操作，局部排风。提供安全淋浴和洗眼设备。 呼吸系统防护：空气中浓度超标时，建议佩戴过滤式防毒面具(半面罩)。 眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。 身体防护：穿防酸碱工作服。 手防护：戴橡胶耐酸碱手套。 其他防护：工作场所禁止吸烟、进食和饮水，饭前要洗手。工作完毕，淋浴更衣。注意个人清洁卫生。 外观与性状：无色结晶，有刺激性气味，易潮解。 pH值: 无意义熔点(℃): 57.5
华泰联合证券有限责任公司关于江苏丰山集团股份有限公司 部分募集资金投资项目延期的核查意见 华泰联合证券有限责任公司（以下简称“华泰联合证券”）作为江苏丰山集团股份有限公司（以下简称“丰山集团”、“公司”）持续督导工作的保荐机构，根据《证券发行上市保荐业务管理办法》《上海证券交易所股票上市规则》和《上海证券交易所上市公司募集资金管理办法》等有关法律法规的规定，对丰山集团部分募集资金投资项目延期的情况进行了核查，核查情况如下： 一、募集资金的基本情况 公司经中国证券监督管理委员会《关于核准江苏丰山集团股份有限公司首次公开发行股票的批复》（证监许可〔2018〕1338号）文核准，并经上海证券交易所同意，由主承销商华泰联合证券采用直接定价方式，全部股份通过网上向社会公众投资者发行，不进行网下询价和配售。网上最终发行股票数量为2,000万股，每股面值人民币1.00元，每股发行价格为人民币25.43元，共计募集资金508,600,000.00元。扣除承销费和剩余保荐费后的募集资金464,826,000.00元（含部分暂未支付的发行费用），已由华泰联合证券于2018年9月12日汇入丰山集团募集资金监管账户。上述募集资金到位情况经公证天业会计师事务所(特殊普通合伙)验证，并出具苏公W[2018]B096号《验资报告》。 二、募集资金使用情况 截至2020年8月31日，公司首次公开发行股票募集资金的使用情况如下：
三、部分募投项目延期的具体情况 （一）年产800吨精喹禾灵及年产500吨喹禾糠酯原药生产线技改项目 1、项目简介 本项目计划投资17,050万元，购置生产、检测及其他辅助设备，在公司现厂区内新建年产800吨精喹禾灵及年产500吨喹禾糠酯原药生产车间及附属配套设施。 2、项目建设周期 本项目由公司自行组织实施。本项目计划在12个月内建成，计划前期准备1-2个月完成可研编制审批，第3-5个月完成设计，第5-9个月完成土建施工，第4-9个月完成设备采购制作，第9-11个月完成设备安装调试，第12个月试车投产。 3、项目投资计划 本项目计划投资总额为17,050万元，拟投入募集资金17,050万元。 （二）年产700吨氰氟草酯、300吨炔草酯原药生产线技改项目 1、项目简介 本项目计划投资16,500万元，购置生产、检测及其他辅助设备，在公司现厂区内新建年产700吨氰氟草酯、300吨炔草酯原药生产车间及附属配套设施。 2、项目建设周期 本项目由公司自行组织实施。本项目计划在18个月内建成，计划前期准备1-2个月完成可研编制审批，第3-6个月完成设计，第5-12个月完成土建施工，第4-12个月完成设备采购制作，第12-15个月完成设备安装调试，第16-18个月试车投产。 3、项目投资计划
三氯乙酸 （1）化学品及企业标识 化学品中文名：三氯乙酸；三氯醋酸 化学品英文名：trichloroacetic acid；trichloroethanoic acid 分子式：C2HCl3O2 相对分子量：163.4 （2）成分/组成信息 成分：纯品 CAS No：76-03-9 （3）危险性概述 危险性类别：第8.1类酸性腐蚀品 侵入途径：吸入、食入、经皮吸收 健康危害：吸入本品粉尘对呼吸道有刺激作用，可引起咳嗽、胸痛和中枢神经系统抑制。眼直接接触可造成严重损害，重者可导致失明。皮肤接触可致严重的化学性灼伤。口服灼伤口腔和消化道，出现剧烈腹痛、呕吐和虚脱。 环境危害：对水生生物有极高毒性，可能在水生环境中造成长期不利影响。 燃爆危险：可燃，其粉体与空气混合，能形成爆炸性混合物。 （4）急救措施 皮肤接触：立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗20-30分钟。如有不适感，就医。眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗10-15分钟。如有不适感，就医。 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。呼吸、心跳停止，立即进行心肺复苏术。就医。 食入：用水漱口，禁止催吐。尽量饮水。给饮牛奶或蛋清。就医。 （5）消防措施 危险特性：受高热分解产生有毒的腐蚀性烟气。具有较强的腐蚀性。 有害燃烧产物：一氧化碳、氯化氢 灭火方法：用雾状水、泡沫、二氧化碳灭火 灭火注意事项及措施：消防人员必须穿全身耐酸碱消防服、佩戴空气呼吸器灭火。尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。
（6）泄漏应急处理 应急行动：隔离泄漏污染区，限制出入。建议应急处理人员戴防尘口罩，穿防酸碱服，戴橡胶耐酸碱手套。穿上适当的防护服前严禁接触破裂的容器和泄漏物。尽可能切断泄漏源。用塑料布覆盖泄漏物，减少飞散。勿使水进入包装容器内。用洁净的铲子收集泄漏物，置于干净、干燥、盖子较松的容器中，将容器移离泄漏区。 （7）操作处置与储存 操作注意事项：密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴导管式防毒面具，戴化学安全防护眼镜，穿防酸碱工作服，戴橡胶耐酸碱手套。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。避免产生粉尘。避免与氧化剂、碱类接触。搬运时要轻装轻卸，防止包装及容器损坏。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。 储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。包装密封。应与氧化剂、碱类分开存放，切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。储区应备有合适的材料收容泄漏物。（8）接触控制/个体防护 监测方法：无资料 工程控制：密闭操作，局部排风。提供安全淋浴和洗眼设备。 呼吸系统防护：空气中浓度超标时，建议佩戴过滤式防毒面具（半面罩）。 眼睛防护：戴化学安全防护眼镜 身体防护：穿耐酸碱工作服 手防护：戴橡胶耐酸碱手套 其他防护：工作场所禁止吸烟、进食和饮水，饭前要洗手。工作完毕，淋浴更衣。注意个人清洁卫生。 （9）理化特性 外观与性状：无色晶体，有刺激性气味，易潮解。 PH值：无意义 熔点（℃）：57.5 沸点（℃）：197.5 相对密度（水=1）：1.63 相对蒸气密度（空气=1）：5.65 饱和蒸气压（kPa）: 0.13（51℃）
氯代吡啶类除草剂开发应用现状 前言 随着世界人口持续增长，人类生活品质不断提高，高效、安全农药已经成为世界农药的发展方向，解决粮食安全问题的有力保障和人类社会和谐发展的需要。近20年来，农药开发中最有成效的是众多杂环化合物被开发为超高效农药。而在杂环化合物中，含氮杂环化合物，尤其是吡啶衍生物又是最为突出的，不但有杀菌剂、杀虫剂，而且有高效的除草剂，这为化学农药的发展开拓了新天地。 早在17世纪末至18世纪初欧洲人已开始使用含吡啶的天然产物烟草浸出液作为杀虫剂，后经分析确认有效成分为烟碱。然而真正合成的吡啶类农药则是1955年英国ICI公司开发的除草剂敌草快（diquat）和1958年开发的百草枯（paraquat），到目前仍有较好的市场。 随着有机合成技术和农药活性分子设计技巧的发展及农业生产对新型农药的需求，从60年代后期多种吡啶类农药相继问世，比如道化学公司开发的毒莠定、绿草定、氟草烟等，这些产品都属于取代吡啶类除草剂，因其化学结构，统一划归为“氯代吡啶类除草剂”。这类除草剂有着相似的化学结构，都属于激素类除草剂，除草活性高，主要防治阔叶杂草，随着杂草的演替，这类产品应用范围越来越广，销量逐年攀升。鉴于该市场情况，本文将对“氯代吡啶类”除草剂的开发应用现状介绍如下： 一、简介
二、开发应用现状 1.氯氟吡氧乙酸 作用特点：氯氟吡氧乙酸是内吸传导型苗后除草剂。药后很快被植物吸收，使敏感杂草出现典型激素类除草剂的反应，植株畸形、扭曲。在耐药性植物如小麦体内可结合成轭合物失去毒性，从而具有选择性。温度对其除草的最终效果无影响，但影响其药效发挥的速度。一般在温度低时药效发挥较慢，可使植物中毒后停止生长，但不立即死亡；气温升高后植物很快死亡。在土壤中淋溶不显著，大部分分布在0－10厘米表土层中，有氧的条件下，在土壤微生物的作用很快降解成2－吡啶醇等无毒物，在土壤中半衰期较短（10-15天），不会对下茬阔叶作物产生影响。 产品登记： 95%氯氟吡氧乙酸异辛酯原药——陶氏益农公司、利尔化学股份有限公司、江苏中旗化工有限公司、河北万全力华化工有限公司等13家企业 20%氯氟吡氧乙酸（288克/升氯氟吡氧乙酸异辛酯）乳油——利尔化学股份有限公司、陶氏益农公司、江苏中旗化工有限公司、山东绿霸化工有限公司等65家企业25%氯氟吡氧乙酸（360克/升氯氟吡氧乙酸异辛酯）乳油——利尔化学股份有限公司
三氯乙酸 1. 化学品及企业标识 化学品中文名称：三氯乙酸 化学品英文名称：trichloroacetic acid 中文名称2：三氯醋酸 英文名称2：trichloroethanoic acid 主要用途：用于制聚苯乙烯、合成橡胶、离子交换树脂等。 2. 危险性概述 2.1 危险性类别：第8.1 类酸性腐蚀品。 2.2 侵入途径：吸入、食入、经皮吸收 2.3 健康危害：吸入本品粉尘对呼吸道有刺激作用，可引起咳嗽、胸痛和中枢神经系统抑制。眼直接接触可造成严重损害， 重者可导致失明。皮肤接触可致严重的化学性灼伤。口服灼伤口腔和消化道，出现剧烈腹痛、呕吐和虚脱。 2.4 环境危害：对水生生物有毒作用。 2.5 燃爆危险：本品可燃，具腐蚀性、刺激性，可致人体灼伤。 3. 成分/组成信息纯品■混合物□ 主要成分CAS RN 含量(%) 三氯乙酸76-03-9 98.5 4. 急救措施 4.1 皮肤接触：立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗至少15 分钟。就医。 4.2 眼睛接触：立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15 分钟。就医。 4.3 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。 4.4 食入：用水漱口，给饮牛奶或蛋清。就医。 5. 消防措施 5.1 危险特性：受高热分解产生有毒的腐蚀性烟气。具有较强的腐蚀性。 5.2 有害燃烧产物：一氧化碳、二氧化碳、氯化氢。 5.3 灭火方法：采用雾状水、泡沫、二氧化碳灭火。 5.4 灭火注意事项及措施：消防人员必须穿全身耐酸碱消防服、佩戴空气呼吸器灭火。尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。 6. 泄漏应急措施 应急处理：隔离泄漏污染区，限制出入。建议应急处理人员戴防尘面具（全面罩），穿防酸碱工作服。不要直接接触泄漏物。 小量泄漏：用洁净的铲子收集于干燥、洁净、有盖的容器中。也可以将地面洒上苏打灰，然后用大量水冲洗，洗水稀释后放入废水系统。大量泄漏：用塑料布、帆布覆盖。然后收集回收或运至废物处理场所处置。 7. 操作处置与储存 7.1 操作注意事项：密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴导管式防毒面具，戴化学安全防护眼镜，穿防酸碱工作服，戴橡胶耐酸碱手套。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。避免产生粉尘。避免与氧化剂、碱类接触。搬运时要轻装轻卸，防止包装及容器损坏。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设
30 除草剂市场的明日之星——三氯吡氧乙酸 三氯吡氧乙酸是一种吡啶氧羧酸类除草剂，内吸传导型，低毒，属激素类除草剂，由植物的叶面和根系吸收，并在植物体内传导到全株，造成其根、茎、叶畸形，维管束被栓塞或破裂，植株逐渐死亡。禾本科作物对其具有一定的耐药性。三氯吡氧乙酸适用于禾本科作物如小麦、玉米、高粱等田地防除阔叶杂草，非耕地防除阔叶杂草和木本植物，森林造林前除草灭灌，维护防火线，林业改造等。目前国内三氯吡氧乙酸登记原药产品17个；混剂产品与草甘膦复配的有12个，剂型以可湿性粉剂为主；单剂产品9个，剂型是乳油、水剂，靶标均登记在森林和非耕地防除阔叶杂草、灌木，制剂登记含量32%～70%。 三氯吡氧乙酸单剂或与草甘膦的混剂用于灭荒，单剂产品由于受除草谱限制的原因，使用不会广泛，而混剂或者组合制剂效力则加倍。跟其他激素类除草剂品种一样，三氯吡氧乙酸与草甘膦混合，极大地提高了除草速度，扩大了除草范围，并且规避了一些消减药效的因素。三氯吡氧乙酸与草甘膦的混剂在灭荒方面尤其是对灌木丛、大型葎草、藜、苘麻等阔叶植物的防除效果有质的提高，耐低温性也大幅提升。因其属激素类除草剂，在部分果园、园林中使用有严格的技术要求。另外，因为它的残效期较长，建议喷雾设施要与其他药剂使用有所区分。 三氯吡氧乙酸防除小麦田阔叶杂草，对小麦安全性非常高，同氯氟吡氧乙酸、氟氯吡啶酯一样，除在小麦拔节和扬花两个敏感时期禁用，其余生育期均可正常喷施。由于登记靶标所限及本身特性，一般与双氟磺草胺混用，杀草谱扩大，杀草速度提升，耐低温性更强。笔者预计，近两年三氯吡氧乙酸与双氟磺草胺或其他药剂用于小麦田防除高抗性阔叶杂草的配方登记会出现。 玉米田阔叶杂草现有药剂及其组合能基本解决，并且还有灭草松、辛酰澳苯腈、噻酮磺隆等在寻求突破。因无三氯吡氧乙酸在玉米田、高粱田的实际应用，所以还需要进一步实践摸索。另外，针对三氯吡氧乙酸的防除草谱及本身特性，可用于禾本科草坪防除阔叶杂草，这也使其应用空间扩大。 三氯吡氧乙酸在麦田高抗性播娘蒿、猪殃殃、婆婆纳等杂草较难防除的情况下应运而生；当前灭生性除草剂市场尚无领军产品，三氯吡氧乙酸与草甘膦的混剂效果好、耐低温，有望在这一领域发挥作用；在尖叶草坪上的应用也使其前途光明。据此，笔者认为，三氯吡氧乙酸是除草剂领域的明日之星，部分领域或大有作为。 口/ 郭建国/市场/
TCA/ 丙酮沉淀法 1、油菜黄化突变体蛋白质组分析：两种蛋白质提取方法比较 取叶片400 mg(去叶脉)置于研钵中，加入0.1 g PVP于液氮中碾成粉末．转入2.0 ml 离心管中并加入1.5 ml 于-20℃预冷的提取液(含10% TCA 和0.07% DTT 的丙酮溶液)， -20℃沉淀过夜．于4℃，20 000 g 离心1 h，弃上清．沉淀悬浮于1.5 ml -20℃预冷的丙酮溶液(含10% TCA 和0.07%DTT)中，-20℃沉淀过夜．同上离心，重复洗涤沉淀3～4 次至蛋白质为乳白色．最后将沉淀真空冷冻干燥成干粉，于-80℃冰箱保存备用． 2甘蓝型油菜根系可溶性蛋白的提取及双向电泳体系的优化称取0. 5 g 根样于液氮预冷的研钵中, 加液氮研磨至粉 状，将粉末移至10 mL 离心管中, 加入10 倍体积的提取液( 10% T CA/ 丙酮，1 mmol/ L 苯甲基磺酰氟( PMSF) , 0. 07% 2-巯基乙醇) , 涡旋震荡1 min, - 20℃静置2 h 或 过夜。然后在4℃下35 000 r/ min 离心15 min, 弃上清。 所得沉淀再用预冷的丙酮清洗3~ 5 次, - 20℃下冷 冻干燥备用。 3、适于水稻根、叶、悬浮细胞总蛋白质分析的高分辨率双向电泳方法 取1~ 2 g 材料于液氮中充分研磨, 加入10 mL 预冷的含10%三氯乙酸( TCA) 、0 . 07%DT T 的丙酮, 充分混合后-20℃
下放置1 h, 35 000×g 下离心15 min。在沉淀中加入10 mL 预冷的含0. 07% DT T 的丙酮, 充分混合, - 20℃下放置1 h, 12 000×g 下离心15 min, 重复该步骤2~ 3 遍。沉淀冷冻干燥( FREEZE DRYER 4. 5, LABCONCO, 美国) 后放于- 75℃下, 或直接进行下一步提取。取适量样品粉末, 按20μL/ mg 的比例加入蛋白裂解液( 9 mol/ L 尿素, 4% CHAPS,1%IPG 缓冲液, 1%DTT , 35 mmol/ L Tr is) , 30℃ 水浴1 h, 并不时振荡, 12 000×g 下离心10 min。上清液中加入4 倍体积的预冷丙酮, 于- 20℃下放置至少2 h, 4 000× g 下离心10min, 沉淀用水化缓冲液( 8 mol/ L 尿素, 2% CHAPS, 20mmol/ L DTT, 0. 5%IPG 缓冲液) 溶解, 重复该步骤1~ 2 遍。样品溶液存于- 75 下或直接用于电泳。4、TCA －丙酮沉淀法提取聚合草叶蛋白的研究 低温下将0．5 g 干叶粉或1 g 鲜叶充分研磨后转入离心管，称净重。加3．4 mL 丙酮溶液［－20℃，含10%( W/V) TCA 和0．07% ( V/V) 巯基乙醇］，涡旋振荡，－20 ℃放置2 h，5000 r/min，4℃离心40 min，弃上清，加入2 mL 含0．07%巯基乙醇的丙酮，－20 ℃放置1 h，离心重复洗涤沉淀至无色，沉淀经真空冷冻干燥。
附录A三氯乙酸浸提的总氮测定方法 A.1 原理 利用三氯乙酸作蛋白质沉淀剂，将酶解饼粕中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀，并将其中的活性小肽和游离氨基酸用酸溶解出来，经离心、过滤、消化、蒸馏、用凯氏定氮法测水溶性总氮。 A.2 试剂及仪器 100ml烧杯，20ml移液管，30ml量杯，干过滤装置，15%三氯乙酸溶液（TCA溶液），4000 r/min的离心机。 A.3 方法 A.3.1 将待测样品经过研磨过80目筛，准确称取样品3.6g于100ml烧杯中，加入15%（三氯乙酸）溶液30ml，混合均匀。将溶液转入100ml容量瓶内定容，在4000 r/min下离心10 min 后，取全部上清液，用干的滤纸过滤，同时设定空白。 A.3.2 取滤液20ml置于1000ml烧瓶内，加浓硫酸15ml，置于消化炉上小心加热，待泡沫消失后加热270℃～320℃之间，消煮两小时后，冷却后每半小时滴加双氧水1ml左右，直至溶液透明为止，继续加热两小时，冷却备用。取50ml的2%硼酸溶液加入指示剂2～3滴吸收液。往1000ml烧瓶内加400ml水，再加入40%NaOH溶液150ml，塞好瓶盖，在密闭条件下蒸馏至馏出液为中性时取下吸收器（一般吸收液到150 ml～200ml时为中性）。 A.3.3 吸收液用0.1mol/L盐酸标准溶液滴定变红为终点，记录消耗的体积，同时测定空白。然后计算出总氮的含量。 A.3.4 三氯乙酸浸提的氮数值以%表示，按公式(A.1）计算： C(V-V0)×0.014×100×5 三氯乙酸浸提的氮（%）=--------------------------------……………………………(A.1） M×（1-N） 式中： V——滴定样品消耗盐酸的体积，ml V0——滴定空白消耗盐酸的体积，ml C——盐酸的标准浓度，mol/l 0.014——和1.0ml盐酸标准液相当的氮的质量，g 5——样品吸取倍数 M——样品质量，g N——样品的含水量。
1二氯乙酸三氯乙酸 1.1 液液萃取衍生气相色谱法 1.1.1范围 本标准规定了刖气棚色谱法测定牛活饮用水及其水源水中一氯乙酸(MCAA)、二氯乙酸（TCAA）和三氯乙酸( TCAA)。 本法适用于生活饮用水及其水源水中一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸的测定。 本法最低检测质量；一氯乙酸(MCAA)、二氯乙酸(DCAA)、三氯乙酸(TCAA)分别为0.062 ng,0.025 ng、0.012 ng。若取水样25 mL水样测定，则最低检测质量浓度分别为：5.0μg /L、2.0μg /L、1.0μg /L。 1.1.2原理 在酸性条件下(pH<0.5)，以含1，2-二溴丙烷(1，2-DBP)内标的甲基叔丁基醚萃取水样，萃取液用硫酸酸化的甲醇溶液衍生，使水中卤乙酸形成卤代乙酸甲酯，用毛细管柱分离，电子捕获检测器(ECD)测定。以相对保留时间定性，内标法定量。 1.1.3试剂和材料 1.1.3.1截气：高纯氮(99. 999%)。 1.1.3.2配制标准样品和试样预处理时使用的试剂和材料 1.1.3. 2.1氯化铵晶体。 1.1.3. 2.2无水硫酸铜。 1.1.3. 2.3硫酸钠晶体。 1.1.3. 2.4饱和碳酸氢钠溶液：取足量的碳酸氢钠用试剂级纯水溶解在50 mL试剂瓶中，保持在瓶底有碳酸氢钠粉末。 1.1.3, 2.5 1，2-二溴丙烷(1，2-DBP)。 1.1.3. 2.6 硫酸(ρ20=1.84 g/mL)。 1.1.3. 2.7硫酸一甲醇溶液(5+45)：移取5 mL硫酸(9．1． 3.2.6)缓慢地滴入预先装有45 mL甲醇放在冰水浴中的100 ml。容器中，待温度冷却至室温后使用，临用现配。 1.1.3. 2.8无水硫酸钠。 1.1.3. 2.8 甲基叔丁基醚(MtBE)，纯度>99%。 1.1.3. 2.10一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸标准品，纯度>99%。 1.1.4仪器 1.1.4.1 气相色谱仪 1.1.4.1.1 电子捕获检测器。 1.1.4.1.2记录仪或工作站。