中药指纹图谱
中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统
孙国祥,智雪枝,张春玲,董鸿晔(沈阳药科大学药学院,沈阳 110016)
摘要:目的 介绍 中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3 0 的组成框架和核心内容。方法 该软件能给出 指纹峰特征技术参数; 色谱指纹图谱潜信息特征判据参数即以色谱指纹图谱指数F和色谱指纹图谱信息量指数I及色谱指纹图分离量指数RF等综合性指标为核心挖掘色谱指纹图谱的潜信息特征; 色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数; 色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数,能计算以上4类参数用于中药信息质量控制研究。结果 给出 指纹峰特征技术参数15个; 色谱指纹图谱潜信息特征判据参数42个; 色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数32个,其中定性相似度15个,定量相似度17个,使用时仅需32个参数的1到4个即可; 色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数25个,用以上4类参数可构建详实的中药数字化指纹图谱,能清晰准确地反映和控制中药质量。结论 中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3 0 是进行中药数字化指纹图谱研究的重要有效工具,其114个指标基本构成了数字中药质控的核心,是中药现代信息质量控制的一种最佳技术和合理选择。
关键词: 中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3 0 软件;数字化指纹图谱;指纹峰特征技术参数;信息质量控制;数字中药;色谱指纹图谱潜信息特征判据参数;色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数;全定性相似度和全定量相似度质控体系
中图分类号:R284,O23 文献标识码:A 文章编号:1672-2981(2007)06-0549-07
Digitized evaluation system for super-information characteristics
of chromatographic fingerprintsin in traditional Chinese medicine
SU N G uo-x iang,ZH I Xue-zhi,ZH A N G Chun-ling,DON G H ong-y e(Colleg e of P har macy,S heny ang Pharmaceu-tical Univer sity,S heny ang110016)
Abstract:Objective T o intr oduce bo th the co nst ruct ion frame and t he cor e techniques of the so ftw are Digit ized Ev a-l uatio n Sy stem for Super-infor matio n Character istics o f the T raditio nal Chinese M edicine(T CM)Chr omatog r aphic Fin-
g erpr int s3 0 .Methods T he so ftwar e published: t he character istic technique parameter s o f finger print peaks;
the dig itized criter ion parameter s o f potential cha racteristic infor mation o f chro matog raphic finger prints,in w hich the po tent ial infor mation of chr omato gr aphic finger pr ints w as mined by dig ital cor e parameter s such as the chro matog raphic finger pr int index,and the chromat og raphic fing erprint infor matio n index,and the chr omato gr aphic finger pr int resolu-t ion index; the qualitative similarity and quantitat ive similarity cr iterion par ameters;and the unified cr iterion pa-r ameters of the relativ e char acter istics of chr omato gr aphic finger pr ints,etc,w hich can calculate the4par amet ers to ser ve as the cr iter ia fo r the info rmation quanlity contro l for T CM.Results We published 15of the character istic technique parameter s of finger print peaks; 42o f the dig itized criterio n parameter s of potential character istic infor na-t ion of chro matog raphic fing erprints; 32of the qualitative similar ity and quantitative sim ilar ity cr iterion parameter s, 1to4of w hich may lead to a definite result;and 25o f the unified cr iter ion parameters of the r elativ e character istics of chr omato gr aphic finger prints t o ser ve as the bases that co nstr ucted the digit ized finger pr ints,which clearly and tho r-o ug hly reflected and contro lled the quanlity o f T CM.C onclusion T he soft war e Dig itized Evaluation System fo r Su-per-info rmation Char acter istics of the T raditio nal Chinese M edicine Chr omato gr aphic Fing erpr int s3 0 is an impo rtant and effect ive to ol t o deter mine the dig itized finger pr int of T CM.Its114parameter s co nstr uct the impor tant co re tech-niques o f T CM dig itized fing erprints,and it is the best technique and the most pro per quanlity contro l method for mo d-er n T CM.
基金项目:国家自然科学基金重大研究计划项目(No 90612002)。
作者简介:孙国祥,男,博士,副教授,硕士生导师,从事中药指纹图谱学体系及其信息学研究,T el:(024)23986286,E-mail:gx-s wm w ys@163 com。
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Key words:D ig itized Evaluation System for Super-infor matio n Char acteristics of the T raditio na l Chinese M edicine Chr omatog ra phic Fing erprints3 0;dig itized finger pr ints;character istic technique par ameters o f finger print peaks; qualit y contro l by info rmatio n;digital T CM;digitized criterion par amet ers of potential char act eristic info rmatio n o f chr omatog r aphic fing erprints;unified criterio n par ameters o f the r elativ e characterist ics of chr omatog ra phic fing er-pr int;qualit y contro l sy stem by o ver all qualitat ive similar ities and o verall quantit ative similar ities
在我国,中药指纹图谱技术经过近10年的快速发展,从理论到实践应用都取得了长足进步。中药指纹图谱也作为中药质量控制里程碑意义的技术得到广泛认同,从最初多数的否定之声到越来越多的科研数据都证明这一技术的可行性、可控性、可操作性和可应用性而变为引起广泛重视的技术。因此它诞生于生产实践又为实践所证明,能够客观、全面、真实地反映和控制中药质量,真正能够保证中药安全、有效、稳定可控等基本要求。中药指纹图谱不仅能够揭示中药化学成分复杂性和分布的特征性,而更重要的是揭示中药化学成分分布比例和含量特征、潜在的生物活性和药效量化特征,能满足天然药物创新研究和生产实践所必备的基本要求。广泛、丰富和高度自动化的现代分析仪器技术能消除环境和操作中各种因素对指纹系统稳定性和重现性变动的影响,获得指纹图谱已不是难题,但指纹信息评价和获取、以及深层次数据挖掘却难以简便、快速、高效地进行。目前,分析中药指纹图谱特征信息时更多地采用了原始基础性方法,效率低且方法单一,获得有用信息量极少。面对研究中获得的海量数据让人有无所适从、束手无策的感觉,表现为对花费大量人力和物力获得的中药指纹图谱数据的评价和数据挖掘工作的浅尝辄止而放弃或抛弃有非常重要价值的控制中药质量的重要信息数据。孙国祥等在承担国家药典委员会中药注射剂指纹图谱研究课题过程中,提出了色谱指纹图谱指数理论[1-3]、色谱指纹图谱信息量指数理论[4]和中药指纹图谱的宏观定性定量评价理论[5-12]以及指纹图谱数据挖掘理论和统一化理论[13-17]与方法,并且开展了广泛的研究工作,形成系统性宏观控制中药质量的数字化指纹图谱方法,提出了中药指纹图谱学学科体系[18],把中药指纹图谱从一门技术提升到一个学科体系来研究必将极大地促进其发展。目前,正在承担了国家自然科学基金重大专项课题开展8个中药指纹图谱在线专家系统研究。为适应和满足中药色谱指纹图谱技术应用的准确性、便捷性、高效化和计算机软件化,孙国祥等以Microsoft Visual https://www.doczj.com/doc/1711526308.html,2003开发了基于Windows界面的 中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3 0 软件,将实验数据的积分信号直接调入该软件中,可即刻获得中药数字化色谱指纹图谱的114个信息参数的计算结果。这些参数能提供十分详细的中药质量变异信息,为理想地控制中药质量提供了重要的信息判定依据。本文就这一软件的基本功能进行详细介绍,希望这一软件能在中药创新研制和生产实践中信息质量控制方面发挥有益的重要作用。
1 提供15个指纹峰特征技术参数
指纹峰特征技术参数是标定指纹图谱峰信息的基本特征和本质属性指标,用以描述指纹系统整体特征概貌。给出了 色谱峰保留时间、峰高、半峰宽、理论塔板数、峰面积和峰面积百分数等基础信息; 以单参照物峰体系确定的相对时间和相对峰面积; 以统一化参照物峰确定的统一化相对时间和统一化相对积分[1]; 以双参照物峰体系确定的洗脱动量数和折合相对积分,表观分子量和表观保留指数等参数[17]; 代表指纹峰对相似度贡献大小的方向余弦平方值[17]。具有3类型参照物体系标定指纹系统的基本特征属性。考察和研究系统指纹峰特征技术参数变动差异能够及时发现中药质量变异或检测系统是否稳定(见图1~4,表1)。
图1 色谱图匹配和相似度计算画面,样品(S1~S10)对照指纹图谱(NH)
Fig1 M atchin g chromatogram and the calcu lation of similarities, Sample(S1~S10)and the referen ce fingerprin t(NH
)
图2 色谱峰与谱图控制命令画面
Fig2 Diagram of chromatographic peak contr ol an d ch rom atogram con tr ol
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图3 指纹图谱潜信息特征参数和统一化参数计算画面
Fig3 Calculation diag ram of characteristic in formation and unified chromatograph ic
parameters
图4 指纹图谱相似度分析命令画面
Fig4 Diagram of similarity analyses for chromatographic finger-
prints
2 提供色谱指纹图谱潜信息特征42个判据参数[1-18]
中药化学成分的复杂性决定了中药色谱指纹图谱分析结
果的复杂性,必须采用多维数据处理的方法和理论,对大量
信息提取、加工、精练和挖掘,才能从多维数据角度揭示中
药指纹图谱所具有的潜信息特征。色谱指纹图谱潜信息特征
判据参数是从大量的、分散的、多侧面的色谱数据中挖掘出
的对中药创新研究和质量控制有效的、新颖的、潜在有价值
的特征数据。把考察参数变化的指纹图谱变异研究进而变为表1 系统指纹峰特征技术参数和物理意义
T ab1 C haracter istic tec hniq u e par am eters of fingerp rint p eaks an d th eir p hys ical m eanin g
编号(No.)
参数
(parameter)
名称
(name)
英文名称
(E nglish name)
物理意义
(physical mean ing)
1P.No.峰号Peak nu mber描述共有指纹峰编号顺序
2t R/min保留时间Retention tim e描述指纹峰绝对峰位情况
3H峰高Peak h eight描述指纹峰绝对峰高大小
4W1/2半峰宽Peak w idth描述指纹峰绝对半峰宽大小
5N理论塔板数Th eoretical plates描述指纹峰计算的理论柱效大小
6A i峰面积Peak area描述指纹峰绝对积分大小
7A i%峰面积百分值Percent of p eak area描述指纹峰绝对积分归一化值大小8RT相对保留时间Relative rentention time描述指纹峰相对峰位情况
9RA相对峰面积Relative peak area描述指纹峰相对积分大小
10r t统一化相对时间Unified relative retention time描述指纹峰相对峰位情况
11r a统一化相对积分Unified relative peak area描述指纹峰相对积分大小
12cos2Y i方向余弦平方Square cosine of component描述该指纹峰对定性相似度贡献大小13I x表观保留指数Apparent reten tion index描述指纹峰相对峰位大小
14M x表观分子量Apparent m olecular w eight描述指纹表观相对分子量大小
15 洗脱动量数Elution force index表观描述洗脱指纹时相对动量大小
16 折合相对积分pseu do relative peak area表观描述指纹峰相对折合积分大小
追溯产生变异的中药质量研究,最终构成了中药色谱指纹图谱的特征判据质控方法。本软件给出了如表2所示的42个从整体上描述色谱指纹图谱潜信息特征判据参数,分为5类: .系统基本特征参数(6个):单因素直接获得参数,描述系统的简单性特征; .系统分离特征参数(7个):二因素相关联参数,描述系统的有效分离特征; .系统指纹成分分布与含量参数(15个):描述峰信号大小、含量分布特征和均化性; .系统绝对综合指数(5个):描述系统总信号强弱、均化性、分离率、以及信息量综合大小; .系统相对综合指数(9个):描述系统获得总信号强度、均化性、分离率、信息量的时间效率或样品化学信息率大小。用此42个数字化特征参数可判断不同种类药材或制剂的指纹图谱差异、也可比较同种药材或制剂批间质量差异。可实现从多维数据角度、多侧面、全方位揭示色谱指纹图谱的特征性与变异性,其中多数指标可作为试验条件的优化目标函数。中药质量的微小变异能够通过此42个指标清晰反映出来,更为重要的是本软件能为进行中药组方与配伍研究提供重要的信息参量变化晴雨表。通过对大量数据的精确分析进行评价和揭示数据背后的质量变异而作为中药信息质控的依据,因此本软件是实现数字中药质量控制的重要方法工具。
3 提供色谱指纹图谱15个定性相似度和17个定量相似度判据参数[5-12]
孙国祥[10]等将中药指纹图谱的相似度评价划分为定性相似度和定量相似度评价2个侧面真实地符合指纹图谱的特点,提出了中药色谱指纹图谱全定性相似度和全定量相似度质控体系[14],用定性相似度S F和比率定性相似度S F构成全定性相似度法,彻底地解决了中药指纹图谱定性相似度
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表2 色谱指纹图谱潜信息特征判据参数和物理意义
T ab2 D igitiz ed criterion param eters of potential character istic infor mation of c hrom atograp hic fin gerpr int and th eir p hys ical m eanin g
编号(No.)参数
(para)
名称
(name)
物理意义
(phy sical meaning)
类别
(type)
1 检测波长表征指纹峰紫外吸收状况 2n指纹峰总数揭示共有峰容量大小 3m基线分离峰对儿数直观反映分离情况
4 有效分离率揭示系统分离好坏
5 指纹信号均化系数为(1,1,1, ,1)与(A1,A2,A3, ,A n)夹角余弦 6A_geo几何平均峰面积简要揭示指纹信号大小 7A_avg算术平均峰面积揭示指纹信号大小
8 几平峰面积比率A0越趋与A相等( 越接近1)时均化性越好
9 色谱空间占用率揭示指纹峰的色谱空间利用率大小
10 A i总积分面积和揭示各成分的总信号及对应总体含量大小 11A1%(i)第1强峰归一化面积揭示第1强峰积分百分值大小(峰号) 12A2%(i)第2强峰归一化面积揭示第2强峰积分百分值大小(峰号) 13A3%(i)第3强峰归一化面积揭示第3强峰积分百分值大小(峰号) 14A4%(i)第4强峰归一化面积揭示第4强峰积分百分值大小(峰号) 15A5%(i)第5强峰归一化面积揭示第5强峰积分百分值大小(峰号) 16A6%(i)第6强峰归一化面积揭示第6强峰积分百分值大小(峰号) 17A7%(i)第7强峰归一化面积揭示第7强峰积分百分值大小(峰号) 18A8%(i)第8强峰归一化面积揭示第8强峰积分百分值大小(峰号) 19A1 A2 A3三强峰比例揭示重要指纹成分的比例含量 20H_avg平均峰高从总体上揭示指纹信号强弱 21W_avg共有峰平均峰宽可揭示指纹系统总体柱效情况 22N最强峰柱效约为系统最低柱效 23 R i总分离度和揭示系统总分离情况 24R_avg平均分离度简要揭示系统分离状况 25 分离度均化系数揭示(1,1,1, ,1)和(R1,R2,R3, ,R n)夹角余弦大小 26T/min末指纹峰保留时间揭示分析方法的时间效率 27Q/mg表观进样量表征化学成分含量高低,越小产生越大信号为佳 28F色谱指纹图谱指数揭示指纹系统信号强弱、均化性和有效分离率大小 29Fr色谱指纹图谱相对指数揭示总信号强弱、均化性、分离率、信息量和效率 30Fr(t)时间校正指数揭示总信号强弱、均化性、分离率和时间效率 31Fr(q)表观进样量校正指数揭示总信号强弱、均化性、分离率和成分信息量大小 32S指纹图谱总熵值揭示指纹系统绝对信息量大小 33I色谱指纹图谱信息量指数揭示总信号强弱、均化性和信息量大小 34I r色谱指纹图谱相对信息量指数揭示总信号强弱、均化性、信息量和效率 35I r(t)时间校正信息量指数揭示总信号强弱、均化性、信息量和时间效率 36I r(q)进样量校正信息量指数揭示总信号强弱、均化性、信息量和样品化学信息量 37 两种指数比值揭示两种指数的比值大小 38RF色谱指纹图分离量指数揭示分离度关联信号强弱、均化性和分离率大小 39RF r色谱指纹图相对分离量指数揭示分离度关联信号强弱、均化性、分离率和效率大小 40RF r(t)时间校正分离量指数揭示分离度关联信号强弱、均化性、分离率和时间效率 41RF r(q)进样量校正分离量指数揭示分离度关联信号强弱、均化性、分离率和信息效率 42TZ色谱指纹图分离数揭示系统指纹峰的理论最大容量
评价问题,用模长百分比W%与宏观含量相似度R%、投影含量相似度C%与定量相似度P%、平均质量百分数M%与含量相似度Q%、校正平均质量百分数M F%与校正含量相似度Q F%分别构成第一、二、三、四级全定量相似度法。规定全定性相似度>0 9为必要条件;任选一组全定量相似度控制在85%~120%(药材)和90%~110%(制剂)且组内相差不超过10%为合格,建立了系统的中药指纹图谱的宏观定性和定量评价新体系。其中以全定性相似度和第二级全定量相似度组合所构成的双定性双定量相似度法是这一体系方法的最合理的集中代表。孙国祥[5]等建立了定性定量评价功能兼备的中药色谱指纹图谱乘方相似度评价法,具有很实用的特点。本软件给出了如表3所示的15种定性相似度法和17种定量相似度法[5](包括了现有文献中绝大多数评价方法),使用时应根据需要选择其中1~4个参数进行评价即可。从宏观定性和宏观定量2个方面兼顾评价中药色谱指纹图谱所体现的中药质量是中药质控的最合理选择和完善发展的必然方法。
4 提供色谱指纹图谱相对统一化特征25个判据参数[17]
为解决不同仪器采用相同方法检测同一样品的指纹图谱比较问题和消除仪器间系统误差或自身系统差别,孙国祥等
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表3 色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数及物理意义
T ab3 Q u alitati ve si milarity an d qu an titative sim ilarity cr ite rion p aram eters of c hrom atogr ap hic fin gerpr int an d th eir p hys ical m eanin g
编号(No )参数
(para.)
名称
name
物理意义
(p hysical meaning)
Sup All ran ge
1SF定性相似度定性描述化学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0,1] 2r相关系数定性描述复学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0,1] 3S F'比率定性相似度定性等权描述化学成分数量和比例,大、小峰等权No[0,1] 4S r差异角相似度定性描述化学成分数量和分布比例,大、小峰等权Yes[0,1] 5S p'调平角相似度定性描述化学成分数量和分布比例,大、小峰等权No[0,1] 6S b相似性比定性描述化学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0, ] 7S-nr尼尔系数定性描述化学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0,1] 8S-nir改进尼尔系数定性描述化学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0,1] 9S-mp M in kow ski系数定性描述化学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0,1] 10S-m1颜色相似度定性描述化学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0,1] 11S-ch差和比相似度定性描述化学成分数量和分布比例,大峰掩蔽小峰Yes[0,1] 12S ro差异欧氏相似度定性描述化学成分数量和分布比例,大、小峰等权Yes[0,1] 13S-g x乘方相似度定性描述化学成分数量和分布比例,大、小峰等权No[0,1] 14S-g xp样权乘方相似度定性描述化学成分数量和分布比例,突出样峰权重No[0,1] 15S-g xq对权乘方相似度定性描述化学成分数量和分布比例,突出对峰权重No[0,1] 16S gx s定量乘方相似度定量描述总化学成分宏观含量,大、小峰等权No[0,1] 17S gx sp样权定量乘方相似度定量描述总化学成分宏观含量,突出样峰权重No[0,1] 18S gx sq对权定量乘方相似度定量描述总化学成分宏观含量,突出对峰权重No[0,1] 19d%欧氏距离百分比定量描述总化学成分宏观含量,大峰掩蔽小峰Yes[0, ] 20R%宏观含量相似度定量描述总化学成分宏观含量,大、小峰等权Yes[0, ] 21P%定量相似度定量描述总化学成分宏观含量,大、小峰等权Yes[0, ] 22C%投影含量相似度定量描述总化学成分宏观含量,大峰掩蔽小峰Yes[0, ] 23 C%投影含量相对误差定量描述总化学成分宏观含量,大、小峰等权Yes[- , ] 24W%模长百分比定量描述总化学成分宏观含量,大峰掩蔽小峰Yes[0, ] 25Q%含量相似度定量描述总化学成分宏观含量,大、小峰等权No[0, ] 26Q F%校正含量相似度定量描述总化学成分宏观含量,大、小峰等权No[0, ] 27M%平均质量百分数定量描述总化学成分宏观含量,大、小峰等权No[0, ] 28M F%校正平均质量百分数定量描述总化学成分宏观含量,校正分布比例No[0, ] 29M p%样权平均质量百分数定量描述总化学成分宏观含量,突出样峰权重No[0, ] 30M Fp%样权校正平均质量百分数定量描述总化学成分宏观含量,校正分布比例No[0, ] 31M q%对权平均质量百分数定量描述总化学成分宏观含量,突出对峰权重No[0, ] 32M Fq%对权校正平均质量百分数定量描述总化学成分宏观含量,校正分布比例No[0, ]
建立了统一化中药色谱指纹图谱的特征判据参数包括:平均相对时间,平均相对积分,峰等距系数,RA统一化相对时间均值,RA统一化相对时间和峰后等距系数,前等距RA 统一化相对时间均值,后等距RA统一化相对时间均值,RT 扩展率,RT统一化相对积分和,RT统一化相对积分均值, RA扩展率、积分速率指数和,平均积分速率指数,峰体指数和、平均峰体指数、扩展比、积分效率指数、色谱指纹图谱定点指数,色谱指纹图谱定信号指数、指纹相对空间占用率、相对时间斜率因子、RT对峰号的相关系数、等距系数比率和定信号定点参数比值等25参数。色谱指纹系统统一化特征判据参数可划分为4类: .描述系统基本特征的判据参数(r t、r a、 、k、r、 和 ,为双因素直接获得参数),7个参数用来揭示统一化色谱指纹图谱和指纹峰相对特征变化特性规律; .描述系统指纹峰定点性质参数(F a/t、V,v,g):4个参数描述在假设各指纹峰都在末指纹峰位置时相对积分的变化规律; .描述系统指纹峰定信号性质参数(F t/a、、B、、、f、 、p和 ):9个参数描述在假设各指纹峰与最大指纹峰信号都相等时相对时间的变化规律; .描述系统指纹峰动力参数(E、e和 、 及q):5个参数描述综合信号强度和时间因变量大小。 和 为新增比值参数。上述4类统一化参数总计25个,通过对指纹峰积分、保留时间的统一化变换和对定信号、定点位置条件下的特征描述,实现对静态图谱的动态化考察和揭示色谱指纹系统的固有特征,是研究和判定中药质量变化、变异的重要中药信息质量控制方法之一,在解决多仪器间指纹图谱比较方面有独到优势。
5 中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3 0 软件的特殊功能
中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3 0 软件使用极为便捷,将实验的数据信号首先进行积分处理后直接调入该软件中,能按峰号自动匹配或按域值自动匹配(1s内完成),输入检测波长和表观进样量可即刻获得中药数字化色谱指纹图谱的114个参数的计算结果。这些参数能提供十分详细的中药质量变异信息,为理想地控制中药质量提供了重要的信息判定依据,该软件是进行数字化指纹图谱研究的最理想和最佳工具。这些参数主要揭示化学指纹的质量变异特征,若同时结合药效活性规律研究,参数数值的变异必然引起药效的变化。因此,该软件也是研究谱效学的强
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表4 色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数和物理意义
T ab4 Un ifie d c riterion param eters of relative ch aracteris tic s of ch rom atograp hic fin gerpr in t and th eir m eanin g
编号(No )参数
(para)
名称
(name)
物理意义
(phy sical meaning)
类别
(type)
1rt_avg统一化平均相对时间<0 5说明指纹峰集中在前部分,反之在后部分 2r a_avg统一化平均相对积分<0 5说明指纹峰多数小于最大峰,反之亦反 3 峰等距系数相对时间间距向量与(1,1, ,1)夹角余弦 4b_avg RA统一化相对时间均值值越大表明指纹峰后移越多或原信号越小 5B RA统一化相对时间和值越大表明多数指纹峰后移越多或原信号越小 6 '峰后等距系数后移相对时间间距向量与(1,1, ,1)夹角余弦 7b_avg'前等距RA统一化相对时间均值描述在等距条件下RA统一化相对时间大小 8b_avg''后等距RA统一化相对时间均值描述在后等距条件下RA统一化相对时间大小 9f RT扩展率描述指纹峰定点信号时的系统相对时间的扩增倍数 10V RT统一化相对积分和值越大,多数峰RA达到1越费时或位于谱图前面 11v_avg RT统一化相对积分均值值越大,多数峰RA达到1越费时或位于谱图前面 12g RA扩展率越大说明RT=1时越难,指纹峰集中在谱图前边 13E积分速率指数和描述各指纹峰出峰快慢和信号大小 14e_avg平均积分速率指数描述系统总体指纹峰出峰快慢和信号大小
15 峰体指数和描述指纹峰被洗脱的难易
16 avg平均峰体指数描述系统总体指纹峰被洗脱的难易 17p扩展比描述系统定信号放大是定点信号放大的倍数大小 18q积分效率指数描述系统指纹峰总体积分效率的高低,越大越好 19F a/t色谱指纹图谱定点指数综合分离率、均化性、等距性RT统一化相对积分总值 20F t/a色谱指纹图谱定信号指数综合分离率、均化性、等距性RA统一化相对积分总值 21 指纹相对空间占用率描述系统中指纹峰对色谱空间的相对利用率 22k相对时间斜率因子描述指纹峰相对保留时间增加速率,越大,后面峰RT大 23r RT对峰号的相关系数描述指纹峰相对保留时间增加速率,越大,后面峰RT大
24 等距系数比率描述指纹峰定信号移动前后等距系数的变化大小
25 定信号定点参数比值描述指纹系统定信号参数是定点参数的倍数
有利工具,它能将中药中许多复杂的化学和生物活性特征的综合信息转变为量化的数字,实现中药数字化、定量化信息质量控制[19-25]。该软件还有以下特殊功能: 对指纹图谱进行剪切,开展融合指纹图谱的科学研究,真正实现建立中药指纹图谱的信息最大化原则; 能够进行相似度变异分析,考察在每一个指纹峰丢失情况下系统定性定量相似度变化及信息指数变化; 提供每一批样品的定性相似度的分解值,每个指纹峰相对于对照指纹峰的百分含量; 能作出多种形式的立体指纹图谱和统一化指纹图谱,便于数据的比较和科技成果的发表; 将每次样品评价结果可存于已知样品的数据库中,建立数据库系统,避免重复性研究; 可利用中药指纹图谱进行中药各种制剂的长期稳定性研究; 可对中药对照指纹图谱进行时间跨度的校正; 可用于中药材,提取物投料时控制研究; 可提供每一指纹峰生成时的统计数据,进行精密度、稳定性和重复性数据的统计评价; 适合中药企业利用指纹图谱对产品进行质量内控,随时监控生产中可能出现的质量变异。
6 结论
中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3 0 软件以孙国祥等提出的70多个参数为核心,附加重要色谱参数和文献中相关参数,历时4年多研制成功,集中了目前国内外中药色谱指纹图谱的最先进控制技术和方法。因此这一软件代表着中药色谱指纹图谱最先进的数字化技术。软件中使用的指标均避免了复杂数学处理方法,解决问题时力争简易化和可操作性及实用性原则。为建立数字化指纹图谱提供了大量特征信息数据,通过对其精确分析进行评价可揭示数据背后的质量变异而作为中药信息质控的依据。因此,该软件作为研究中药数字化指纹图谱最佳的技术工具,适应中药信息质控的要求,也是数字中药现代质量控制的一种重要技术工具和强有力的技术载体与平台。
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(收稿日期:2007 08 17;修回日期:2007 08 17)
藏药蕨麻高效液相色谱指纹图谱研究
侯陆星1,2,蔡光明1*,张雅铭1,黄媛3,张卓勇2(1.解放军第302医院全军中药研究所,北京 100039; 2.首都师范大学化学系,北京100037; 3.沈阳药科大学,沈阳 110016)
摘要:目的 建立蕨麻药材H PL C指纹图谱分析方法。方法 采用K ro masil C18(4 6mm 250mm,5 m)色谱柱,以乙腈-水梯度洗脱,流速:1 0mL min-1,检测波长:208nm,柱温:30 。结果 共有9个共有峰。共有峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD均<3%,符合指纹图谱相关要求。结论 此方法准确、可靠。该指纹图谱能够用于蕨麻药材的鉴定及质量评价。
关键词:蕨麻;高效液相色谱法;指纹图谱
中图分类号:R284 O23 文献标识码:A 文章编号:1672-2981(2007)06-0555-04
HPLC Fingerprint of Potentilla anserine anserina
HOU Lu-xing1,2,CAI Guang-ming1*,ZHAN G Ya-ming1,HU AN G Yuan3,ZH ANG Zhuo-y ong2(1.I nstitute of Chi-nese M ater ia Medica,N o 302H osp ital of the PL A,Beij ing100039;2.D ep ar tment of Chemistry,Cap ital N or mal U-niver sity,Beij ing100037;3.Sheny ang Phar maceutical Univer sity,Sheny ang110016)
A bstra ct:Objective To establish the method of fingerpr int analysis of Potentilla anser ina by HPL C.Methods Kromasil C18
(4 6mm 250mm,5 m)column was used.T he mobile phase was composed of acetonitr ile and w ater with a linear grad-i
ent elution.T he flow rate was1 0mL min-1w ith DAD detected at208nm..T he column temperature was30 .R esults Nine peaks were g ained on the HPL C fing er print.T he RSDs of r elative retentio n time and area of common peaks which ex is-ted in all samples w ere less than3%.T he results were in accor dance w ith the request of finger pr inting.Conclusion T his
基金项目: 十五 国家科技攻关计划 西部开发科技行动 重大项目,No 2004BA901A250。
作者简介:侯陆星,硕士,主要从事中药制剂及分析研究,T el:(010)66933324,E-mail:houlux ing810620@163 com。 *通讯作者:蔡光明,男,研究员,硕士生导师,主要从事中药制剂及分析研究,T el:(010)66933323,E-mail:cgm1004@vip sina com。
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中药色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范 (版本 2004 A) （2004 A） 一．简介 1．版本介绍： 本软件系统包括两个应用版本：研究版（2004 A）和检验版（2004 B）。研究版主要用于科学研究工作，具有生成对照图谱功能。检验版侧重于色谱指纹图谱的检验工作，不具有生成对照图谱的功能。 2．系统运行环境要求： (1). 最低配置：主频533 以上，内存64M，硬盘剩余最小空间100M，操作系统98以上，屏幕分辨率800×600。 (2). 推荐配置：以上，内存128M，硬盘空间20G，操作系统2000以上，屏幕分辨率1024×768 二．安装方法 点击后，进入安装程序，如果无其他特殊需要，可以直接点击至安装结束。 图 1 三．功能 本软件系统包括文件导入，数据库管理，谱图处理，分析检验和帮助等功能。安装完本系统后，运行“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”执行程序，进入登陆界面（图2），这时需要用户输入用户名和相应的密码（现暂无设置密码）。点击确定进入启动界面（图3），三秒钟后自动进入本系
统运行主界面。 图2 图3
图4 系统主界面中，文件信息区显示文件的路径名称等信息，绘图区显示相应的色谱指纹图谱的图形。 1 文件打开 （1）打开文件（全谱导入）（图5）： 图5 本系统支持三种格式文件的导入：(即*)文件，文本文件（*）和(*)格式文件的导入（图5）。为了方便用户的使用，附录中给出了主要色谱工作站的（，，和）数据格式的文件导出介绍。 （2）导出文件（保存图谱） 本系统支持将导入的图谱数据文件以文本文件（*）导出保存（图6）。 绘图区 文件信息区
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)
关于印发《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的通知 国药管注[2000]348号 2 年 8 月 1 5 日 发 布 各省、自治区、直辖市药品监督管理局：为加强中药注射剂质量管理，我局在《关于加强中药注册管理有关事宜的通知》(国药管注［2000］157号) 中要求“中药注射剂应固定药材产地，建立药材和制
剂的指纹图谱标准，具体要求另行发布”。据此，我局在组织专家论证的基础上制定了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》，现予发布，并就有关事宜通知如下：一、新的中药注射剂指纹图谱标准复核，临床试验用药品，其药材和制剂的指纹图谱标准由省级药品检验所复核；生产用药品，其制剂的指纹图谱标准由中国药品生物制品检定所进行二次复核。二、已批准生产的中药注射剂，其质量标准若缺乏内在质量控制指标和无严格工艺条件，应提高和完善并起草试行标准，在此基础上制订药材和制剂的指纹图谱标准，试行标准起草管理要求同《中药仿制药品试行标准管理规定》，此项工作由国家药典委员会组织实施。三、已批准多家生产的中药注射剂，各生产厂家可根据实际情况单独或联合起草药材和制剂的指纹图谱。联合起草工作由国家药典委员会牵头组织进行。四、已批准生产的中药注射剂，其药材和制剂的指纹图谱标准复核由省级药品检验所进行，需二次复核的品种由国家药典委员会组织完成。五、制定指纹图谱所需的对照品(单一化合物或提取物)，由生产单位向中国药品生物制品检定所提供对照品原料及有关技术资料，经标
定合格后统一发放。附件：《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》国家药品监督管理局二○○○年八月十五日中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。如原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。(一)指纹图谱的检测标准包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。有关项目的技术要求如下： 1.名称、汉语拼音按中药命名原则制定。 2.来源 包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。动、植物药材均应固
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。 一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求 中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。如原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。 (一)指纹图谱的检测标准 包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。有关项目的技术要求如下： 1.名称、汉语拼音 按中药命名原则制定 2.来源 包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。 3.供试品的制备
应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。 4.参照物的制备 制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。 5.测定方法 包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。应根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。建议优先考虑色谱方法。对于成分复杂的中药材，必要时可以考虑采用多种测定方法，建立多张指纹图谱。以色谱方法制定指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板、试剂、测定条件等必须固定；以光谱方法制定指纹图谱，相应的测定条件也必须固定。 6.指纹图谱及技术参数 （1）指纹图谱 根据供试品的检测结果，建立指纹图谱。采用高效液相色谱法和气相色谱法制定指纹图谱，其指纹图谱的记录时间一般为1小时；采用薄层扫描法制定指纹图谱，必须提供从原点至溶剂前沿的图谱；采用光谱方法制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定提供全谱。对
中药注射剂指纹图谱研究的技术要求 (草案) 为了加强中药注射剂的质量管理，确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下。需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。 一、注射剂用中药材指纹图谱研究的技术要求 中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。如原药材需经过特殊炮制(如醋制、酒制、炒炭等)，则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。 (一)指纹图谱的检测标准 包括名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。有关项目的技术要求如下： 1.名称、汉语拼音 按中药命名原则制定。 2.来源 包括原植、动物的科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等，矿物药包括矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。动、植物药材均应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法，矿物药应固定产地和炮制、加工方法。供试品的取样参照《中国药典》2000年版中规定的中药材的取样方法，以保证供试品的代表性和均一性。 3．供试品的制备 应根据中药材中所令化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。对于仅提取其中某类或数类成分的中药材，除按化学成分的性质提取各类成分制定指纹图谱外，还需按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱，用以分析中药材与注射剂指纹图谱的相关性。
4．参照物的制备 制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所合成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。 5．测定方法 包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。应根据中药材所合化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法。建议优先考虑色谱方法。对于成分复杂的中药材，必要时可以考虑采用多种测定方法，建立多张指纹图谱。以色谱方法制定指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板、试剂、测定条件等必须固定；以光谱方法制定指纹图谱，相应的测定条件也必须固定。 6．指纹图谱及技术参数 (1)指纹图谱 根据供试品的检测结果，建立指纹图谱。采用高效液相色谱法和气相色谱法制定指纹图谱，其指纹图谱的记录时间一般为l小时；采用薄层扫描法制定指纹图谱，必须提供从原点至溶剂前沿的图谱；采用光谱方法制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定提供全谱。对于化学成分类型复杂品种，必要时可建立多张指纹图谱。 指纹图谱的建立：根据10批次以上供试品的检测结果所给出的相关参数，制定指纹图谱。 (2)共有指纹峰的标定 采用色谱方法制定指纹图谱，必须根据参照物的保留时间，计算指纹峰的相对保留时间。根据10批次以上供试品的检测结果，标定中药材的共有指纹峰。色谱法采用相对保留时间标定指纹峰，光谱法采用波长或波数标定指纹峰。 (3)共有指纹峰面积的比值 以对照品作为参照物的指纹图谱，以参照物峰面积作为1，计算各共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值；以内标物作为参照物的指纹图谱，则以共有指纹峰中其中一个峰(要求峰面积相对较大、较稳定的共有峰)的峰面积作为1，计算其它各共有指纹峰面积的比值。各共有指纹峰的面积比值必须相对固定。中药材的供试品图谱中各共有峰面积的比值与指纹图谱各共有峰面积的比值比较，单峰面积占总峰面积大于或等于20％的共有峰，其差值不得大于土20％；单峰面积占总峰面积大于或等于10％，而小于20％的共有峰，其差值不得大于土25％；单峰
（一）建立指纹图谱的一般原则 中药指纹图谱的建立，应以系统的化学成分研究和药理学研究为依托，体现系统性、特征性和稳定性三个基本原则。唯此，才能保证指纹图谱的标准化、规范化、客观化，从而便于推广和应用。 1.系统性是指指纹图谱中反映的化学成分应包括该中药有效部位所含大部分成分，或指标性成分的全部，如中药两头尖中抗肿瘤的有效成分为皂苷类化合物，则其指纹图谱应尽可能地反映其中的皂苷类成分；银杏叶的有效成分是黄酮类和银杏内酯类，则其指纹图谱可采用两种方法，针对这两类成分分别分析，达到系统全面的目的。 2.特征性是指指纹图谱中反映的化学信息（如保留时间）应具有较强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征性地区分中药的真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。如北五味子的HPLC指纹图谱和TLC指纹图谱，不仅包括多种的五味子木脂素类成分，而且具有许多未知类成分，这些成分的峰位顺序、比值在一定范围内是固定的，并且随药材品种不同而产生差异，依此可以很好地区别其来源、产地，判别药材的真伪优劣。 3.稳定性是指所建立的指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用程度，即不同操作者、不同实验室所重复做出的指纹图谱应在所允许的误差范围内，以体现其通用性和实用性。因而要求包括样品制备、分析方法、实验过程、数据采集、处理、分析等全过程都要规范化操
作，同时，还应建立相应的评价机构，对其进行客观评价。 （二）建立指纹图谱的一般步骤 1.方案设计与思路 （1）研究对象的确定 在调研有关文献、新药申报资料(质量部分和工艺部分)及其它研究结果的基础上，尽可能的详尽地了解药材、中间体及成品中所含成分的种类及其理化性质，综合分析后找出成品中的药效成分或有效成分，作为成品和中间体指纹图谱的研究对象，即分析检测目标。 例如，黄芪含黄酮、皂苷及多糖三类有效组分，黄芪多糖注射液及其中间体的指纹图谱则以多糖为研究对象，黄芪原药材的指纹图谱应把黄酮、皂苷及多糖作为研究对象。 复方注射剂应根据君臣佐使的原则，以君药、臣药中的有效成分作为指纹图谱的研究对象，佐使药中的成分可采用其它指纹图谱方法进行辅助、补充研究。 （2）研究方法的选择 研究方法应根据研究对象的物理化学性质来选择。大多数化合物可采用HPLC。例如黄芪中黄酮、皂苷、多糖等。挥发性成分应采用GC。例如鱼腥草中的鱼腥草素、土木香中的土木香内酯、异土木香内酯和二氢土木香内酯等。某些有机酸经甲酯化后亦可用GC分析。采用上述方法难以分离检测的成分，可考虑使用TLC和CE。
说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规范中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。本指南未能概括的内容，通过实践可自行补充调整，但申报资料或复核资料中须有相应的说明和申述。指南中的"色谱指纹图谱"指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。光谱指纹图谱将另行规定。 一、供试品收集 供试品收集是研究指纹图谱最初也是最关键的步骤，由于不可能对一个药材的所有样本进行试验，而且生长环境条件对药材代谢产物有影响，所以要收集有代表性的供试品。收集不少于10批供试品的含义是指样本的数和量要有足够的代表性。 (一) 原料药材：在药材的化学成分与中医临床疗效的之间的关联尚未能阐明的现阶段，基本上是在承认其传统的功能主治及临床验证的基础上进行指纹图谱的实验研究。原料药材的指纹图谱主要是反映其自然状态的内在质量情况，研究其指纹图谱是以此作为选择原药材投料或混批提取的依据，同时作为研究注射剂成品指纹图谱相关性的基础。由于自然条件的变化，药材个体之间指纹图谱的差异是正常的，在品种鉴定无误的基础上，力争药材有较为固定和稳定的来源，个体之间的指纹图谱主要特征大致相似即可，使成品指纹图谱特征的稳定有起码的保证。 药材的"批" 不是工业生产的"批"，是指相互独立的供试品，即不能将同一地点或同一渠道同一时间获得的供试品分成若干份供试品，以保证试验结果的代表性。由于收集药材供试品受主观和客观的条件限制，供试验的供试品严格讲均没有统计学的意义，所以供试品数越多越好，10批是最低的要求。供试品应保证其真实性，应有完整采样原始记录，内容包括： ?药材名称 ?供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。 ?收集时间（购买时间）及收集人 ?货源情况调查（货源是否充足和稳定） ?基原鉴定及鉴定人：产地或GAP基地收集的药材结合植物形态鉴定品种。 如缺原植物，由熟练的专业人员凭性状或显微特征鉴别。如近缘品种、难以区分的野生品种（如白花蛇舌草、蒲公英），应在指纹图谱研究中仔细比较，如获得的指纹图谱相似度很高，也可应用，但须明确记录。并在今后实施GAP时确定一个品种，如指纹图谱相似度很低，则须确定品种，改为栽培品使用。商品混乱的品种（如陈皮）产区的选择应缩小范围，并结合资源选用药典收载品种中的一种。复方制剂中的君药及处方量大的药材必需重点注意品种的鉴定，以避免今后执行指纹图谱过程中出现难以预料的困难。
中药指纹图谱和特征图谱的区别是什么?各有什么意义? 区别:中药材或中成药经过适当处理后 , 利用现代信息采集技术和质量分析手段得到的能够显现中药材或中成药性质的图像、图形、光谱的图谱及其数据 , 称为中药指纹图谱。它可以较全面地反映中药所含化学成分的种类与数量 , 进而反映中药的质量和中医用药所体现的整体疗效 ; 现阶段中药的有效成分大多尚未明确 , 中药指纹图谱的整体性和模糊性正好符合中药质控的要求 , 较之单一成分或指标成分的质控方法 , 更具有科学性和全面性;中药特征图谱是指中药材经过适当的处理后 , 采用一定的分析手段和仪器检测得到 , 能够标识其中各种组分群体特征的共有峰的图谱。它是一种综合的、可量化的鉴别手段 , 可用于鉴别中药材的真伪 , 评价中药材质量的均一性和稳定性。中药特征图谱可分为化学 (成分特征图谱和生物特征图谱。 意义:中药材多为植物的干燥器官 , 由于复杂的自然环境、社会状况以及我国历史上科技发展不平衡等多种原因 , 造成了中药材在应用方面的复杂性。同一名称的中药材可能来自不同基源的植物。同一基源的中药材由于产地不同、采收季节和生长年限不同而存在差别。一些中药材 , 特别是名贵药材 , 常可见到伪品与正品相混淆。由于以上因素的存在 , 使得不同来源的同种中药材其化学组成有可能相同 , 也有可能不同 , 这就必然影响到中医的临床疗效和中药的实验研究 , 并影响以其为原料生产出的中成药的化学组成 , 从而影响其质量和疗效。此外 , 我国中成药品种繁多 , 中成药生产过程中各工艺环节的稳定性等多种因素对产品的化学组成也具有重要的影响。从现有的中药内在质量控制现状来看 , 还存在很多问题需逐步解决。其中 , 最突出的问题之一就是中药整体化学特征的表征。因此建立中药指纹图谱对于更加客观地从整体上评价中药的内在质量具有重要意义。同样,建立准确有效的鉴别中药材方法——中药特征图谱,对于我国中药资源丰富 , 但长期以来 , 缺乏系统的整理和归类 , 导致中药商品混乱 , 中药材同名异物、同物异名的现象屡有发生 , 甚至出现有以假充真 , 以次充好的情况具有重要意义。
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中药指纹图谱的不同方法特点及应用 作者：赵德玉， 毕桂宏 作者单位：辽阳市中医院,辽宁,辽阳,111000 刊名： 中华中医药学刊 英文刊名：CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 年，卷(期)：2007,25(3) 参考文献(21条) 1.ROY Upton高效薄层色谱在美国草药典中的应用[期刊论文]-中药新药与临床药理 2001(03) 2.谢培山中药色谱指纹图谱鉴别的概念、属性、技术与应用[期刊论文]-中国中药杂志 2001(10) 3.钱浩泉;李彩君;谢培山高良姜及其近缘植物挥发油成分的气相色谱指纹图谱研究[期刊论文]-中药新药与临床药理 2001(03) 4.凌大奎气相色谱保留指纹谱用于中药材鉴别的研究 1995(04) 5.苏薇薇中药指纹图谱及计算机信息处理[期刊论文]-世界科学技术-中医药现代化 2001(03) 6.丁建弥用随机扩增多态DNA(RAPD)技术鉴定野山人参[期刊论文]-中成药 2001(01) 7.徐朝辉同种不同产地牛蒡子DNA指纹图谱特征研究[期刊论文]-中草药 2001(06) 8.袁湘林基体辅助激光解析电离飞行时间质谱用于中草药黄芪的鉴别的研究[期刊论文]-药物分析杂志 2001(01) 9.孙素琴;白雁道地山药红外指纹图谱和聚类分析的鉴别研究[期刊论文]-光谱学与光谱分析 2003(02) 10.秦海林何首乌和掌叶大黄唐古特大黄的1H-NMR指纹图谱解析 1999(11) 11.秦海林核磁共振氢语法鉴别黄连的研究[期刊论文]-药学学报 1999(01) 12.秦海林核磁共振氢语法鉴别黄连的研究[期刊论文]-中草药 2000(01) 13.周俊国中药蛇床子的粉末X衍射分析[期刊论文]-中草药 1999(01) 14.胡平;罗安国;王如期中药菟丝子的高效毛细管电泳法鉴别 1997(07) 15.张朝辉;范国荣;徐国钧12种海马、海龙药材高效毛细管电泳法鉴别 1998(05) 16.沈平女襄高速逆流色谱(HSCCC)技术与色谱指纹谱[期刊论文]-中成药 2001(05) 17.Fang xingchun;Yin xia;xiang Bingren Classification of Chinese TriditionalMedicine-Shanyao Pyrolysis/High Resolution GC/Pattern Recognition 1990(02) 18.粟晓黎;林瑞超;王兆基中药鬼臼毒性成分HPLC/UV指纹图谱分析方法研究及与威灵仙、龙胆HPLC图谱比较[期刊论文]-中成药 2000(12) 19.施超欧;陶萍丹参注射液主要成分HPLC及LC-MS定性分析[期刊论文]-世界科学技术-中医药现代化 2001(05) 20.颜王贞;林巧玲黄连薄层扫描指纹图谱研究 1993(06) 21.李信炯黄连薄层扫描指纹图谱研究 1987(01) 本文链接：https://www.doczj.com/doc/1711526308.html,/Periodical_zyyxk200703091.aspx
中药的质量是其疗效的关键所在。长期以来，人们多是凭借经验，从药材的外观形态、气味以及一些简单的物理、化学现象来判断其真伪。虽然起到一定的作用，但常常有很大的主观性和片面性。随着现代分子生物学技术的发展，中药材指纹图谱技术在中药材质量控制中显示了越来越广阔的应用前景。 (1)中药指纹图谱的概念和分类“指纹”(fingerpint)鉴定来源于法医学，每个人的指纹在微小的细节构造中各有不同，依据这些差异，通过“比对”方式，可以确定鉴别每个人的特征。随着生物技术的发展，提出了DNA指纹图谱分析，主要是通过DNA指纹图谱，对人、动物、植物等生命体进行鉴别鉴定，乃至亲子鉴定等，扩大了指纹分析的含义，其意义主要表现在两个方面：一是成为指纹图谱。指纹是以图像形式表现，而DNA指纹图谱是一些DNA片段所构成的条带图谱。二是分析目的有所扩展，既可以像指纹分析一样作个体“唯一性”的鉴定，又可以鉴别确定整个物种的“唯一性”(多个个体之间的共性)，还可以用作亲子鉴定，即判断个体之间的亲缘关系等。中药指纹图谱则和DNA指纹图谱又有所不同。 1)中药指纹图谱的概念：中药指纹图谱(fingerprinting)借用DNA 指纹图谱发展而来，最先发展起来的是中药化学成分色谱指纹图谱，特别是高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。HPLC具有很高的分离度，可把复杂的化学成分进行分离而形成高低不同的峰组成一张色谱图，这些色谱峰的出峰位置和高度(或峰面积)分别代表了不同的化学成分和及其含量，整个色谱图表征了该样品所含化学成分的多少和量的
大小。 如前所述，中药指纹图谱不同于法医学中的DNA指纹图谱。常规意义下的指纹强调的是绝对的“个体特异性”，据此可对任何犯罪嫌疑人指证和控罪。恰恰相反，中药指纹图谱赖以鉴别中药的药材真伪和质量优劣所要强调的却是作为药用植物物种的“共有特征性”。更值得指出的是，常规意义的“指纹”分析的依据主要是来源于先天的遗传，而中药药用化学成分的指纹图谱分析依据却主要来源于该植物物种后天的代谢产物，且大多为植物的次生代谢物。它对后天的生长环境的依赖性很强，远比纯先天性遗传的“指纹”脆弱得多，故有中药“道地性”和“最佳采集时间”之说。然而，植物的代谢过程仍受其物种先天遗传的影响，所以，利用中药药用化学成分的色谱指纹图谱是完全可以对不同药材种属进行鉴别，对同种药材质量优劣进行评价的。 谢培山先生对中药色谱指纹图谱给出了以下定义：中药色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的色谱鉴定手段。借以鉴别真伪，评价原料药材、半成品和成品质量均一性和稳定性。其基本属性是“整体性”和“模糊性”。 2)中药指纹图谱的分类：狭义的中药指纹图谱是指中药化学(成分)指纹图谱。广义的中药指纹图谱则可按测定手段和应用对象进行不同的分类。 （ⅰ）按测定手段分类：中药指纹图谱按测定手段可分为中药化学(成分)指纹图谱和中药生物指纹图谱。①中药化学(成分)指纹图谱
中药指纹图谱 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。 目录 1简介 2意义 3特点 4分类 1. 4.1 按应用对象分类 2. 4.2 按测定手段分类 5特性 6构建方法 7分析、技术 1. 7.1 化学指纹图谱 2. 7.2 色谱指纹图谱 3. 7.3 X射线衍射法 4. 5. 1. 2. 3.
1简介 以指纹图谱作为中药（天然药物）提取物及其制剂的质量控制方法，已成为目前国际共识，各种符合中药（天然药物）特色的指纹图谱控制技术体系正在研究和建立。美国食品药品管理局（FDA）允许草药保健品申报资料中提供色谱指纹图谱；世界卫生组织（WHO）在1996年草药评价指导原则中也规定，如果草药的活性成分不明确，可以提 中药指纹图谱倡导者谢培山教授 供色谱指纹图谱以证明产品质量的一致；欧共体在草药质量指南中亦称，单靠测定某种有效成分考查质量的稳定性是不够的，因为草药及其制剂是以整体为活性物质。色谱指纹图谱尤其是薄层色谱的鲜明的指纹图谱是很有用的。国外指纹图谱的应用，目的在于解决成分复杂，有效成分不明确的植物药质量检测和产品批次间质量差异的问题。其中德国研制的银杏叶提取物制剂是一个突出的例子。他们应用指纹图谱制定了相应的标准，该图谱体现了制剂所含的33个化学成分（主要为黄酮类和内酯类）和各自的含量。经化学成分和药效相关性研究，发现约24%银杏黄酮和约6%银杏内酯组成的提取物具有最佳疗效。此外，采用“混批勾兑”法，可使最终产品质量稳定，指纹图谱重现性良好，含量浮动范围为5%左右。 20世纪70年代我国已有学者尝试使用TLCS对中成药进行分析，因主客观条件的限制，技术和时机的不成熟，没有得到公认；20世纪90年代《中国药典》增设了中药化学对照品和对照药材，为中药指纹图谱的研究奠定了基础。随着色谱技术的迅速发展和检测能力的显著增强，为指纹图谱的研究和应用提供了良好的技术保证。目前我国已对中药注射剂做出了必须用指纹图谱进行检测的规定，同时提出了具体的技术要求；在中药材规范化生产实施过程中指纹图谱亦有较广泛的应用。 但是作为一项新技术，中药指纹图谱在实际应用中还面临许多问题，只有进一步加强中药材种植加工和中成药生产贮存的规范化；中药化学成分和中药药理研究的系统化和标准化；以及技术上多学科的渗透，才能保证中药质量的稳定，进而保证中药指纹图谱的建立. 2意义
摘要：指纹图谱技术在食品的质量控制中起着重要的作用。本文主要介绍了高效液相色谱指纹图谱在蜂蜜研究中的应用，以期为蜂蜜的鉴定、质量控制及标准的制定等方面工作奠定基础。 关键词：蜂蜜高效液相色谱指纹图谱 蜂蜜是一种传统的天然保健食品。它是由蜜蜂采集植物的甜味分泌物，通过蜂蜜自身的消化，转化作用及蜜蜂通过气流干燥作用，使水分从花蜜中含６０％以上降低到２０％以下。一般蜜蜂从采集花蜜到酿制为成熟蜜，正常情况下需要３～５ｄ时间［１］［２］。 糖类是蜂蜜的主要的成分，其中有单糖、双糖、低聚糖和多糖，单糖中的葡萄糖和果糖占蜂蜜总糖的５５％～７５％，而双糖和三糖的含量因蜜源种类的不同而变化。此外，蜂蜜还含有多种蛋白质、氨基酸、脂肪酸、维生素及人体所必须的矿物质及微量元素，营养十分丰富［２］［３］。多年来的科学研究与医学临床都证明，蜂蜜具有促进食欲、改善肠胃功能、促进消化吸收、镇静安神、提高肌体免疫能力，促进儿童生长发育等功效；它不仅对婴幼儿、运动员、老人及体弱多病者、重体力劳动者、高强度脑力工作者来说是一种直接有效的营养补充来源，而且对治疗烧伤、烫伤、溃疡愈合、促进伤口愈合及心血管病的辅助治疗等方面来说有很好的疗效［４］｛５］。 蜂蜜作为一种营养丰富、易被人体吸收的天然食品在国内外市场上深受消费者欢迎。为规范蜂蜜市场，保证消费者的利益，我国于１９８２年和２００２年分别颁布了蜂蜜行业标准和推荐性国家标准；但是目前就蜂蜜质量来说，全国各地在蜂蜜生产、流通中仍存在很多不规范的环节，更甚的是出现许多人为掺杂假使的行为，而当前的国家标准不能满足快速、准确的检测需要。 高效液相色谱指纹图谱技术已经广泛的应用于食品行业，特别是药物化学中的中药指纹图谱已经取得了重大的进展。在蜂蜜市场较为混乱且没有准确、快捷的检测方法的情况下，期望建立蜂蜜的高效液相色谱指纹图谱成为必然的趋势。 １．指纹图谱的含义 “指纹（Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ）”识别技术起源于１９世纪末２０世纪初的犯罪学和法医学。作为一种综合、宏观的和可量化的鉴别手段的指纹图谱，是指经过适当的处理后，采用一定的分析手段如光谱或图谱，得到能够标示该样品特征的色谱或光谱的谱图或图象。在完整地呈现出色谱的特征“面貌”的前提下，表达了对照品与待测样品指纹图谱的相似性，用以产品真伪鉴别，评价其质量的均一性和稳定性。 蜜源植物的花蜜是蜂蜜的主要来源，由于同种蜜源植物具有整体的遗传相似性，因此，同一种类的单一花蜜在成分上也具有相似性。同时，经采集、酿造后的成熟蜂蜜其成分除糖类的含量有明显变化外，来源于蜜源植物的次生代谢物质等微量活性成分一般不会发生较大的变化，这使指纹图谱技术应用于蜂蜜种类和真伪鉴别成为可能。借助于现代分析技术对蜂蜜中主要特征功效成分信息以图形（图像）的方式进行表征并加以描述，这就是蜂蜜指纹图谱的内涵［１８］。 ２．指纹图谱的种类 指纹图谱已广泛的应用于食品品种和质量的鉴别，其根据测定方法的不同，大体分为色谱指纹图谱、光谱指纹图谱和ＤＮＡ指纹图谱。其中，以高效液相色谱指纹图谱应用最为广泛。 ２．１色谱指纹图谱 色谱技术种类繁多，是获得指纹图谱的最常用的方法。其中，高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）是应用最多的一种方法，６０％～７０％的有机物均可应用，具有高压、高速、高效、高灵敏度等特点，是所有光谱色谱分析中最适合绘制指纹图谱的方法。近２０多年来，随着仪器和柱技术、样品预处理技术的发展成熟及仪器的日益普及，ＨＰＬＣ作为食品中的营养成分、功能因子、食品添加剂及污染物的一种快速、准确、易于自动化的检测手段，在食品分析中的应用发展很快；高效液相色谱－质谱（ＭＳ）联用，能够将未知成分的各峰进行归属；当前，高效液相色谱已经用于蜂蜜某些糖分的定量与定性的常规分析；反相液相色谱在类黄酮成分分析方面也有很多的报道［６］。 薄层色谱（ＴＬＣ）法出现于１９５６年，具有操作简单，展开剂组成灵活多样，色谱后衍生方便，可以提供色彩斑斓 蜂蜜高效液相色谱指纹图谱的研究进展 西南大学食品学院王文静
. 中药指纹图谱和特征图谱的区别是什么？各有什么意义？ 区别：中药材或中成药经过适当处理后,利用现代信息采集技术和质量分析手段得到的能够显现中药材或中成药性质的图像、图形、光谱的图谱及其数据, 称为中药指纹图谱。它可以较全面地反映中药所含化学成分的种类与数量,进而反映中药的质量和中医用药所体现的整体疗效; 现阶段中药的有效成分大多尚未明确,中药指纹图谱的整体性和模糊性正好符合中药质控的要求,较之单一成分或指标成分的质控方法, 更具有科学性和全面性；中药特征图谱是指中药材经过适当的处理后,采用一定的分析手段和仪器检测得到,能够标识其中各种组分群体特征的共有峰的图谱。它是一种综合的、可量化的鉴别手段,可用于鉴别中药材的真伪,评价中药材质量的均一性和稳定性。中药特征图谱可分为化学(成分)特征图谱和生物特征图谱。 意义：中药材多为植物的干燥器官, 由于复杂的自然环境、社会状况以及我国历史上科技发展不平衡等多种原因, 造成了中药材在应用方面的复杂性。同一名称的中药材可能来自不同基源的植物。同一基源的中药材由于产地不同、采收季节和生长年限不同而存在差别。一些中药材, 特别是名贵药材, 常可见到伪品与正品相混淆。由于以上因素的存在, 使得不同来源的同种中药材其化学组成有可能相同, 也有可能不同, 这就必然影响到中医的临床疗效和中药的实验研究, 并影响以其为原料生产出的中成药的化学组成, 从而影响其质量和疗效。此外, 我国中成药品种繁多, 中成药生产过程中各工艺环节的稳定性等多种因素对产品的化学组成也具有重要的影响。从现有的中药内在质量控制现状来看, 还存在很多问题需逐步解决。其中, 最突出的问题之一就是中药整体化学特征的表征。因此建立中药指纹图谱对于更加客观地从整体上评价中药的内在质量具有重要意义。同样，建立准确有效的鉴别中药材方法——中药特征图谱，对于我国中药资源丰富,但长期以来,缺乏系统的整理和归类,导致中药商品混乱,中药材同名异物、同物异名的现象屡有发生,甚至出现有以假充真,以次充好的情况具有重要意义。 .
（医疗药品管理）中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版系统帮助A
中药色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范 (版本2004A) SOPofSimilarityevaluationsystemforchromatographicfingerprintofTC M（Version2004A） 目录 一、软件系统的功能简介： 二、附录1：附常用色谱工作站AIA（*.cdf）格式文件的导出 三、附录2：本软件涉及术语的注释，新增功能和常见问题及解答
一．简介 1．版本介绍： 本软件系统包括两个应用版本：研究版（2004A）和检验版（2004B）。研究版主要用于科学研究工作，具有生成对照图谱功能。检验版侧重于色谱指纹图谱的检验工作，功能简化，不具有生成对照图谱的功能。 2．系统运行环境要求： (1).最低配置：CPU主频533MHz以上，内存64M，硬盘剩余最小空间100M，操作系统Windows98以上，屏幕分辨率800×600。 (2).推荐配置：PVI以上CPU，内存128M，硬盘空间20G，操作系统Windows2000以上，屏幕分辨率1024×768 二．安装方法 点击setup.exe后，进入安装程序，如果无其他特殊需要，可以直接点击下一步至安装结束。 图1 三．功能 本软件系统包括文件导入，数据库管理，谱图处理，分析检验和帮助等功能。安装完本系统后，运行“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”执行程序，进入登陆界面（图2），这时需要用户输入用户名和相应的密码（现暂无设置密码）。点击确定进入启动界面（图3），三秒钟后自动进入本系统运行主界面。若用户不想在启动界面等待三秒钟，可以直接点击启动界面（图3），这样可以快速进入系统主界面（图4） 图2 图3
中药指纹图谱是指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段和仪器检测得到的，能够标示该中药及其制剂中的各种组分群体特性的共有峰的图谱。通过指纹图谱整体特征峰的相对保留时间及含量或比例的制定和比对，可有效地控制中药材及中药产品质量，保证产品质量的相对稳定。目前，指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。 实施中药指纹图谱难免会有一个提高、完善的过程。从技术上说，中药指纹图谱的建立是完全可行的，但在实际应用中，还要解决诸多问题。中药指纹图谱研究的技术要点主要有以下几个方面。 ■中药材来源及样品处理 对制作指纹图谱的动、植物药材必须做到固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法。对矿物药应固定产地和炮制、加工方法，这是制定合格指纹图谱的先决条件。对供试样品的取样应注意样品的代表性与均匀性，以保持实验室取样与实际生产应用药材一致。除此之外，还必须做到组方和用量固定，生产工艺稳定。 ■检测方法 作为一张合格的指纹图谱必须具有特征明显、专属性强、重现性好的特点，而且要求做到操作和应用方便。目前最常采用的制备中药指纹图谱的检测方法有光谱法和色谱法。光谱方法如紫外光谱和红外光谱在实际应用中能提供识别的信息较少，往往当同类化合物其取代基团发生变化时，对应的光谱却难以体现出来，建议尽量不要采用。 色谱法最大特点在于可进行复杂组分的成分分离，特别是新的高效、通用检测器的发展和引入，使得采用色谱法检测可得到足够多的图谱识别信息，是目前制备指纹图谱的主流方法。尤其是薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC)技术已成为3种公认常用的指纹图谱分析手段。其中特别又以HPLC分离效率高、分析速度快、样品适应性广、检测器种类多、灵敏度高、稳定性、重复性好而备受推崇，成为制备指纹图谱的首选方法。 参照物的选择：以色谱法制备得到的特征指纹图谱识别信息，主要是色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值。因此，在图谱测定中必须选择合适的参照物，以起到辨认和评价色谱指纹图谱特征的指引作用。 常用的参照物可采用对照品或内标物。采用内标物作为参照物时，要求其化学性质应能适合与供试品相同或相似的色谱分离检测条件。这在实际分析中往往难以满足，尤其较复杂的指纹图谱往往难以选择到保留时间合适的内标物插入图谱中。因此，在实际应用中一般尽量选择容易获取的，一个以上注射剂中的主要活性成分或指标成分作为参照物，以考察指纹图谱的稳定程度和重现性，并有助于色谱的辨认。同时，也可初步了解图谱中各色谱峰成分的性质。 高效液相色谱试验条件选择：色谱指纹图谱一次进样记录时间—般为60分钟，有时甚至需要记录更长时间。因此，要求实验使用的高效液相色谱仪器系统，尤其是高压恒流泵和检测器应具有良好的稳定性和可靠性，以减少漂移。同时，应有特别的措施保证仪器系统的清洗和维护。
中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版系统帮 助A 集团文件发布号：（9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-
中药色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范 (版本 2004 A) SOP of Similarity evaluation system for chromatographic fingerprint of TCM （Version 2004 A） 目录 一、软件系统的功能简介： 二、附录1：附常用色谱工作站AIA（*.cdf）格式文件的导出 三、附录2：本软件涉及术语的注释，新增功能和常见问题及解答
一．简介 1．版本介绍： 本软件系统包括两个应用版本：研究版（2004 A）和检验版（2004 B）。研究版主要用于科学研究工作，具有生成对照图谱功能。检验版侧重于色谱指纹图谱的检验工作，功能简化，不具有生成对照图谱的功能。 2．系统运行环境要求： (1). 最低配置：CPU主频533 MHz以上，内存64M，硬盘剩余最小空间 100M，操作系统Windows 98以上，屏幕分辨率800×600。 (2). 推荐配置：PVI以上CPU，内存128M，硬盘空间20G，操作系统Windows 2000以上，屏幕分辨率1024×768 二．安装方法 点击后，进入安装程序，如果无其他特殊需要，可以直接点击下一步至安装结束。 图 1 三．功能 本软件系统包括文件导入，数据库管理，谱图处理，分析检验和帮助等功能。安装完本系统后，运行“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”执行程序，进入登陆界面（图2），这时需要用户输入用户名和相应的密码（现暂无设置密码）。点击
中药指纹图谱操作指南 说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。本指南未能概括的容，通过实践可自行补充调整，但申报资料或复核资料中须有相应的说明和申述。指南中的"色谱指纹图谱"指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。光谱指纹图谱将另行规定。一、供试品收集供试品收集是研究指纹图谱最初也是最关键的步骤，由于不可能对一个药材的所有样本进行试验，而且生长环境条件对药材代产物有影响，所以要收集有代表性的供试品。收集不少于10批供试品的含义是指样本的数和量要有足够的代表性。(一) 原料药材：在药材的化学成分与中医临床疗效的之间的关联尚未能阐明的现阶段，基本上是在承认其传统的功能主治及临床验证的基础上进行指纹图谱的实验研究。原料药材的指纹图谱主要是反映其自然状态的在质量情况，研究其指纹图谱是以此作为选择原药材投料或混批提取的依据，同时作为研究注射剂成品指纹图谱相关性的基础。由于自然条件的变化，药材个体之间指纹图谱的差异是正常的，在品种鉴定无误的基础上，力争药材有较为固定和稳定的来源，个体之间的指纹图谱主要特征大致相似即可，使成品指纹图谱特征的稳定有起码的保证。
药材的"批" 不是工业生产的"批"，是指相互独立的供试品，即不能将同一地点或同一渠道同一时间获得的供试品分成若干份供试品，以保证试验结果的代表性。由于收集药材供试品受主观和客观的条件限制，供试验的供试品严格讲均没有统计学的意义，所以供试品数越多越好，10批是最低的要求。供试品应保证其真实性，应有完整采样原始记录，容包括： 药材名称 供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。 收集时间（购买时间）及收集人 货源情况调查（货源是否充足和稳定） 基原鉴定及鉴定人：产地或GAP基地收集的药材结合植物形态鉴定品种。如缺原植物，由熟练的专业人员凭性状或显微特征鉴别。如近缘品种、难以区分的野生品种（如白花蛇舌草、蒲公英），应在指纹图谱研究中仔细比较，如获得的指纹图谱相似度很高，也可应用，但须明确记录。并在今后实施GAP时确定一个品种，如指纹图谱相似度很低，则须确定品种，改为栽培品使用。商品混乱的品种（如皮）产区的选择应缩小围，并结合资源选用药典收载品种中的一种。复方
中药指纹图谱的特点作用及发展趋势的探讨 河南省开封市医学科学研究所（475003）王慧敏摘要：中药质量的评价需要用综合的、宏观的、非线性的分析观念来适应。本文就中药采取指纹图谱模式控制质量的意义、作用和发展趋势作一探讨。 关键词：质量控制中药指纹图谱 一：中药是中华医学的重要组成部分，可大致分为中药材、中药注射剂和复方(包括中成药)三大类。组分极其复杂和“多靶点”作用是其主要特点。中药的品质优劣直接决定药效，这对于中医药作用机理研究和临床疗效意义重大，故其质量评价和控制一直受到医药工作者重视。中药质量评价不能简单应用西药质量评价的模式。中药成分复杂，不同于西药，若像评价西药那样，只对主要成分进行含量测定，得到的结论往往不能客观准确，同时这也背离了中医理论整体用药和“多靶点”作用的思想；若对所有成分进行分离鉴别，难度很大，不符合简便、快速、准确的现实要求。中药指纹图谱是近几十年来兴起的国际公认的用于评价中药质量的技术手段。尤其近几年，其出色的中药鉴别及质量评价能力在研究实践中得到充分的证明。它立足于中药成分，却又不拘束于以往中药成分分析检测的常规思路，而是借助于各种分析测试手段收集中药成分的相关数据信息，再利用数学和统计学的方法对数据进行提取加工，最后得出鉴定结论。其结果准确、客观，操作简便、迅速。
二：1.中药的质量控制大致上有两种取向，一种是模仿化学合成药物的质量控制模式，即以已知的某一单一活性成分或有效成分为控制质量的指标，给以定性和定量的分析，借以判断药品是否“合格”。但是中药的作用却不是多种成分活性的简单相加，尤其是复方制剂更是如此，因为中医理论强调辨证论治，随证加减，强调因人、因时、因地而异，而且常常是从整体上发挥作用，具有明显的非线性（Non-linearity）和不确定性（Uncertainty）特点。因此模仿西药质量控制的模式解决中药质量控制问题越来越显露出它的不足，因为不可能用线性分析的思维和手段解决非线性性质的问题。而需要用综合的、宏观的、非线性的分析观念来适应。 2.在现阶段指纹图谱就是适应这一特点的另一种质量控制模式，它从色谱（或波谱）的指纹图谱的整体特征来综合地鉴别真伪，加上一定的量化参数还可以大致评价中药产品质量的稳定性和一致性。据此判断原料、半成品、成品的质量相关性、一致性和稳定性。应用到原料药材的筛选、生产工艺的优化、成品质量的稳定考察、市场商品的质量监控，所表达的质量信息远比测试单一成分要丰富的多。从深层意义来看，指纹图谱所反映的是中药的整体质量信息，体现了中药作用的整体性和模糊性特点。 3.在药效及临床验证确认的前提下，经过严格试验获得