10年7月18日星期日雨 按照陈老师说的，我们今天开始做黄酮分离的预试实验，大家每人各取20g粉碎过的蕨菜，包扎好放在干燥的索氏提取器中。接好在铁架台上，最上面接冷凝管，中间接所氏提取器，下面接平底烧瓶，接口一定要配套，是磨口的。蕨菜粉末袋要包好装在连通管顶的下端，以便于每次冷凝下来的水都能覆盖满粉末，从而充分浸泡，脱色。然后在冷凝管进水雨出水管口接上橡皮管，进水管橡皮管另一端套紧水龙头管口，等水浴锅温度上升到近50度才打开水龙头放水。 接下来迅速往烧瓶里倒入其2/3~3/4的乙醚，我快速倒了乙醚。那刺鼻味简直让人窒息，加之有毒，易爆炸，使人麻醉，我是百般小心，才避免了它的危害。倒完乙醚立刻将烧瓶接好，乙醚瓶要立刻盖紧，以防挥发。 脱脂装置开始正常运行了，注意水浴锅内水不能过少，温度保持
原样。只要等着其流出液体变为无色即可。过了好几个小时，终于完了，关掉水浴锅，取下装置，将乙醚包紧，留着处理。滤纸包仍置于所氏提取器中，放在空气流通的地方让其干燥。 中文名称： 旋转蒸发器 英文名称： rotary evaporator 定义： 一种快速液体样品浓缩的装置。样品在球形的玻璃容器中加热、减压，并不断地旋转增大蒸发表面积，加快蒸发速度。 所属学科： 生物化学与分子生物学(一级学科) ；方法与技术(二级学科) 普通蒸馏最大的不同就是通过旋转，增大溶剂的蒸发面积，使蒸发更加顺畅！ 现在的旋转蒸发仪也可以进行减压蒸馏，通过减压，还可以补充蒸发的液体而不需要用方法: 1.高低调节:手动升降,转动机柱上面手轮,顺转为上升,逆转为下降. 电动升降,手触上升键主机上升,手触下降键主机下降. 2.冷凝器上有两个外接头是接冷却水用的,一头接进水,另一头接出水,一般接自来水,冷凝水温度越低效果越好.上端口装抽真空接头,接真空泵皮管抽真空用的. 3.开机前先将调速旋钮左旋到最小,按下电源开关指示灯亮,然后慢慢往右旋至所需要的转速,一般大蒸发瓶用中,低速,粘度大的溶液用较低转速.烧瓶是标准接口24号,随机附500ml,1000ml两种烧瓶,溶液量一般不超过50%为适宜. 注意事项: 1.玻璃零件接装应轻拿轻放,装前应洗干净,擦干或烘干. 2.各磨口,密封面密封圈及接头安装前都需要涂一层真空脂. 3.加热槽通电前必须加水,不允许无水干烧. 4.RE-52B必须使(19)拧入保险孔内保险,以免损坏烧瓶. 5.如真空抽不上来需检查 (1)各接头,接口是否密封 (2)密封圈,密封面是否有效 (3)主轴与密封圈之间真空脂是否涂好 (4)真空泵及其皮管是否漏气 7月19日星期一晴 天气好转，经过一夜的烘干，我的蕨菜包是完全干了。所以可以重新组装装置进行提纯。重新找了一个冷凝管和圆底烧瓶，用橡皮
食 品 科 技 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 2011年 第36卷 第7期 提取物与应用 · 201 · 罗宇倩1，郭 辉1，胡林福2，施林巍2，钱俊青1* (1.浙江工业大学药学院，杭州 310014； 2.浙江竹类资源生物技术研究开发中心，安吉 313300) 摘要：为了有效利用竹叶中黄酮类物质，研究采用不同的方法(DPPH法、邻苯三酚自氧化法(325 nm)和 Fenton法)评价了竹叶黄酮的抗氧化活性，以Vc和茶多酚为阳性对照品。结果表明：竹叶黄酮清除超氧负离子自由基和DPPH自由基的能力比茶多酚强，其EC 50相应为11.7 μg/mL和18.3 μg/mL，分别是Vc的约1.2倍和3.4倍；竹叶黄酮在清除羟自由基效果与茶多酚相当，EC 50 为0.58 mg/mL，比Vc效果好。因此竹叶黄酮具有很强的抗氧化能力，值得深入研究其生理功能及开发利用价值。 关键词：竹叶；黄酮；抗氧化性 中图分类号：TS 202.3 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2011)07-0201-03 Antioxidant activity of ? avonoids from bamboo leaves LUO Yu-qian 1, GUO Hui 1, HU Lin-fu 2, SHI Lin-wei 2, QIAN Jun-qin 1* (1.College of Pharmacognosy of Zhejiang University of Technology Hangzhou 310014; 2.Biological Technology R&D Center of Bamboo Resources, Anji 313300) Abstract: The antioxidant activity of total flavonoids from bamboo leaves was determined by various assays, including DPPH radical-scavenging, self-oxidation of 1, 2, 3-phentriolassay method(325 nm) and Fenton reactions. The results showed that ? avonoids from bamboo leaves have very strong scavenging capabilities for superoxide anion and DPPH free radical, their EC 50 values are 11.7 μg/mL and 18.3 μg/mL respectively, and are approximately 1.2 times and 3.4 times as much as that of vitamin C respectively. The scavenging capability of bamboo leaves ? avonoids for hydroxyl radical is stronger than that of vitamin C, weaker than tea polyphenol, and its EC 50 is 0.58 mg/mL.Key words: bamboo leaves; ? avonoids; antioxidation 收稿日期：2010-11-07 ﹡通讯作者基金项目：浙江省制药工程重中之重开发基金项目。 作者简介：罗宇倩(1986—)，女，湖南株洲人，硕士研究生，研究方向为天然药物的提取与纯化以及药理研究。 淡竹叶和淡竹沥是中医一味传统的清热解毒药，早已为我国人们所认识。竹叶中黄酮类物质是主要活性物质，含量平均在2%，主要为黄酮糖苷[1]，分别是荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷，以及木犀草素苷、洋芹苷和黄酮苷类。竹叶黄酮具有明显的抗脂质过氧化[2-3]、清除羟自 由基和调节血脂功能及抗过敏、抗炎、抗菌、抗突变、抗肿瘤、抗溃疡、抗病毒、保护心血管疾病[4-5]及保肝等生理活性，是一类极具开发前景的天然有机抗氧化剂[1,6-8]。 我国竹叶资源丰富，因此充分开发利用竹叶中的黄酮类成分具有十分重要的现实经济意义。 竹叶黄酮的抗氧化活性研究
大学生创业计划书——赣南脐橙种植及推广 一、项目名称：赣南脐橙种植和推广 二、产品特点以及功能 1.地理分布 无自然生长，全国有赣南大地上有分布。 2.生态环境 生于山坡和农田及村庄和实验基地，海拔最高达 800米。也常栽培。湖南也有分布。在北美洲也有脐橙分布。在我国，，南到广东、海南，湖南均有分布，故农谚讲：“寻乌蜜桔甲 天下，赣南脐橙传四方”。 3.脐橙特性 生脐橙的一生，从种子生根发芽或嫁接苗接穗初次发芽开始，生长发育，开花结果，盛果丰产，最后衰老死亡的整个生命活动中，由于树龄的变化及生长发育特点各异,通常可将脐橙果树的一生分为四个生物学年龄时期，即营养生长期、生长结果期、盛果期、衰老更新期。充分了解各期的特点及其差异，有利于采取正确的栽培管理措施，达到提早结果，延长盛果期，推迟衰老，从而获得更高的经济效益。 一、营养生长期 从种子萌发或接穗初次发芽开始，树冠骨架初步形成，到首次开花结果，为营养生长期。这个时期的主要特征:树体离心生长旺盛，根系和树冠迅速扩大，逐步形成骨架；枝条向上生长，分枝角度较小，树体的纵向生长较横向生长快；萌芽早，停止生长迟，生长势强；新梢生长量大，枝长节稀，一般年抽梢3～4次。营养生长期的长短，即幵始结果的早迟，与品系、砧木类型有关，特别是与栽培管理技术关系极大。 这一时期的主要栽培措施：要在选用良种和适宜砧木的基础上，十分注意精选接穗，培育壮苗；高标准建园；加强土壤深耕熟化和肥水管理，加速营养生长；采用绑、拉、扶、撑
等手段，开张分枝角度，培养健壮的树冠骨架;合理修剪，多留枝叶，为早结丰产和持续高产打下基础。 二、生长结果期 脐橙从幵始结果到大量结果以前的这段时期，称为生长结果期。这是从营养生长占优势发展为营养生长与生殖生长逐渐趋于平衡的过渡时期。其主要特点：骨干枝逐渐形成，树体离心生长由强逐渐减弱，后期骨千枝生长缓慢；结果枝逐渐增多，结果部位由最初的中下部开始，逐步进入全面结果；树冠和根系都迅速扩大，枝条开张角度增大，抽枝数量增多，长度变短，充实而粗壮;初结果时果实较大，果皮较厚，果味较酸，汁多味淡，耐贮性较差，随着结果量的增加，果实品质逐步提高，表现出固有的特征。 这一时期栽培上的主要任务是：在保证树体健壮生长的基础上，大量增加侧枝，扩大绿叶层。同时迅速提高产量、品质，夺取早期丰收。这一时期，营养生长和生殖生长之间的矛盾较为尖锐，若栽培管理不善，易造成平衡失调。或营养生长过旺，导致严重落花落果，影响花芽形成；或生殖生长过度，大量开花结果，削弱了营养生长，造成树势早衰、低产。因此需要充实养分和水分，保持健壮的生长势，同时采取必要的促花、保果措拖，通过疏果调节着果量，维持平衡。 生长结果期的长短，受生态环境和栽培措施的影响而异。采用密植栽培管理的，3 ~ 5年生长结果期后即进入盛果期；稀植园可长达5～10年。 三、盛果期 盛果期是脐橙大量结果时期。这一时期以结果为主，树冠和根系的离心生长趋向停止。树冠扩大到最大，骨干枝生氏缓慢，小侧枝大量抽生，大量开花结果，产量达到最高峰。小侧枝不断交替发生，早先抽生的出现枯死，树冠叶幕逐渐向外推移，树冠内部的大骨干枝则逐渐光禿裸露。树冠上下内外各部之间或各枝序之间，常产生交替结果现象。 盛果期是营养生长和生殖生长相对平衡的时期。这一相对平衡维持时期越长，盛果期就越长，这是栽培者所希望的。但由于大量结果，树体营养的积累和消耗的矛盾很大，容易造成“大小年”结果现象，倘形成恶性循环，对脐橙生产损失极大。所以，加强管理，注意调节营养生长与开花结果的矛盾，防止“大小年” 结果，防止早衰，延长盛果期年限，夺取高产稳产，是这一时期的主要任务。 栽培措施方面，宜适时施重肥，保证足够的营养供应，促使连年结果；注意病虫害和自然灾害的防治，保护叶片，提高同化器官功能；适当疏剪和更新侧枝，防止树冠郁蔽和早衰。密植园宜适时疏移和间伐，保持足够的光照，继续丰产稳产。 四、衰老更新期 盛果期后，当产量明显下降，骨干枝先端开始干枯，即已进入衰老更新期，经过几次更新直至死亡。这个时期的主要特征: 产量下降，果实变小;生长势越来越弱，骨干枝先端的小侧枝大量干枯死亡，树冠绿叶层逐渐缩小;枝梢发生次数少，极易大量落花落果，出现隔年结果；树冠内瞠发生-定数量的徒长枝，向心生长明显。
文章编号:1000-5641(2002)01-0090-06 八种天然黄酮类化合物的抗氧化构效关系 陈季武, 朱振勤, 杭 凯, 杨晓宁 (华东师范大学生命科学学院,上海 200062) 摘要:采用H 2O 2-CTMAB -Luminol 化学发光体系和Fe 2+诱发脂蛋白PU FA 过氧化比色体系,研究了八种高纯度的天然黄酮类化合物清除H 2O 2、LO ?和LOO ?的构效关系。结果表明,这八种天然黄酮类化合物都能有效地清除H 2O 2、LO ?和LOO ?。根据其清除作用和化学结构分析,得出如下结论:B 环上羟基是清除H 2O 2、LO ?和LOO ?的主要活性基团,A 环上羟基是清除H 2O 2、LO ?和LOO ?的重要基团,并且B 环上羟基相邻清除作用就大大增强;糖甙对清除 H 2O 2、LO ?和LOO ?也有贡献。 关键词:黄酮类化合物; 抗氧化; 构效关系中图分类号:Q505 文献标识码:A 黄酮类化合物是泛指两个芳环(A 与B )通过三碳链相互连接构成的一系列化合物。大多数以植物为原料的中药都含有黄酮类化合物。现已发现黄酮类化合物具有众多生理功能 和药用价值,如保护心脑血管、抗菌消炎、抗辐射和抗肿瘤等[[1-4],其中引人注目的是其抗氧化作用,使该研究成为热门课题之一。由于极高纯度的黄酮类化合物来源及技术等限制,对黄酮类化合物抗氧化的研究主要集中于效用上,对其构效关系进行研究甚少。鉴于黄酮类化合物在药学、保健品、食品和化妆品等方面已有的和潜在的应用前景,有必要对其构效关系进行研究。为此,采用H 2O 2-CTMAB -Luminol 发光体系和Fe 2+诱发的脂蛋白PU 2FA 过氧化的比色体系,研究了八种纯度高达97%以上的天然黄酮类化合物清除H 2O 2、LO ? 和LOO ?的构效关系。 1 材料与方法 1.1材料1.1.1 试剂 鲁米诺系Sigma 产品,十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB )系B IB 进口分装,其余试剂均系国产分析纯。1.1.2 药物 槲皮素系Fluka 产品,纯度为99%;金丝桃甙、泽漆新甙、芸香甙、山奈素和橙皮甙均由中科院上海药物研究所朱大元教授惠赠,纯度达98%以上;茶多酚购自浙江农业大学茶叶系;黄芩甙由上海中药一厂提供,纯度高达97%以上。 收稿日期:2001-02 作者简介:(1956-),男,副教授. 第1期2002年3月 华东师范大学学报(自然科学版) Journal of East China Normal University (Natural Science ) No.1 Mar.2002
黄酮类化合物生物活性的研究进展 王 慧 （山东博士伦福瑞达制药有限公司，山东 济南 250101） 摘 要：黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一类多酚化合物，有许多潜在的药用价值。现就黄酮类化合物抗肿瘤、抗心血管疾病、抗氧化抗衰老、抗菌抗病毒、免疫调节等作用的研究进展作一综述，以期为开发利用该类药物提供参考。关键词：黄酮类化合物；生物活性；综述文献 中图分类号：R282.71 文献标识码：A 文章编号：1672-979X （2010）09-0347-04 收稿日期：2010-05-31 作者简介: 王慧（1974-），女，山东临沭人，主管药师，从事质量控制工作 E-mail : wanghui0602@https://www.doczj.com/doc/1d7678680.html, Progress in Bioactivity of Flavonoids WANG Hui (Shandong Bausch & Lomb Freda Phar. Co., Ltd., Jinan 250101, China ) Abstract: Flavonoids are polyphenols widely found in nature and they have many potential medicinal values. This paper reviews the progress in anti-tumor, anti-cardiovascular disease, anti-oxidation and anti-aging, antibacterial and antivirus, immunological regulation of flavonoids, which can provide the references for the development and utilization of flavonoids. Key Words: flavonoids; bioactivity; review 黄酮类化合物是一类低分子植物成分，具有C6-C3-C6 基本构型，为植物体多酚类代谢物。主要分为黄酮及黄酮醇类、二氢黄酮及二氢黄酮醇类、黄烷醇类、异黄酮及二氢异黄酮类、双黄酮类，以及查尔酮、花色苷等[1]。黄酮类化合物独特的化学结构使其对哺乳动物和其它类型的细胞有重要的生物活性。黄酮类化合物有高度的化学反应性，例如清除生物体内的自由基；又有抑制酶活性、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎症、抗过敏、抗衰老、抗心血管疾病糖尿病并发症等药理作用，且无毒无害。黄酮类化合物还是茶及黄芩、银杏、沙棘等众多中草药的活性成分。因此受到广泛关注，研究进展很快。1 黄酮类化合物的理化性质 黄酮类化合物多为晶体且有颜色，少数如黄酮苷类为无定形粉末，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性外，余者则无。黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有差异，一般游离态苷元难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂。其中，黄酮、黄酮醇、查儿酮等平面型分子因堆砌较紧密，分子间引力较大，故更难溶于水；而二氢黄酮及二氢黄酮醇等系非平面型分子，排列不紧密，分子间引力较小，有利于水分子进入，水溶解度稍大[2]。 2 黄酮类化合物的生物活性2.1 抗肿瘤活性 黄酮类对多种肿瘤细胞有明显的抑制作用，主要表现在抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预信号转导、影响细胞 [11] Denyer S P, Baird R M. Guide to microbiological control in pharmaceuticals and medical devices[M].2nd ed. Boca Raton: CRC Press, 2006: 325-326. [12] Mao k, Masafumi U, Takeshi K, et al Evaluation of acute corneal barrier change induced by topically applied preservatives using corneal transepithelial electric resistance in vivo [J].Cornea , 2010, 29(1): 80-85. [13] Noecker R. Effects of common ophthalmic preservatives on ocular health[J]. Adv Ther , 2001, 18: 205-215. [14] Kostenbauder H B. Physical factors influencing the activity of antimicrobial agents// Block S S. Disinfection, Sterilization and Preservation[M]. 3rd ed. PhiladelpHia: Lea and Febiger, 1983: 811-828. [15] Berry H, Michaels I. The evaluation of the bactericidal activity of ethylene glycol and some of its monoalkyl ethers against Bacterium coli [J]. J Pharm Pharmacol , 1950, 2: 243-249.
喷施竹叶黄酮对小白菜产量\品质及矿质元素含量的影响 摘要:采用土培法,研究喷施25~200 mg/L竹叶黄酮对小白菜产量?品质及矿质元素含量的影响?结果表明,竹叶黄酮喷施浓度为50 mg/L时,对小白菜促生长效果最佳,并显著改善其品质,其中产量?株高?最大叶面积和SPAD值分别较未喷施处理增加33.3%?12.3%?41.4%?5.1%;叶片中可溶性糖?可溶性蛋白质?全N?全P?全K 含量也分别增加54.8%?22.8%?14.7%?17.9%?21.5%?此外,当喷施浓度为25 mg/L 时,小白菜的VC含量和全P?全K含量均较其他浓度处理高,分别比未喷施处理增加31.0%?19.2%?22.8%?竹叶黄酮喷施浓度高于100 mg/L时,对小白菜产量?品质和矿质元素含量的促进效果不明显?综合来看,当竹叶黄酮的喷施浓度为50 mg/L 时,对小白菜产量与品质的改善效果最佳? 关键词:竹叶黄酮;小白菜;产量;品质;全氮;全磷;全钾 Effect of Spraying Bamboo Leaves Flavone on the Yield, Quality and Mineral Element Contents of Chinese cabbage Abstract: Soil culture was used to study the effects of spraying 25~200 mg/L bamboo leaves flavone on the yield, the quality and the mineral element contents of Chinese cabbage. The results showed that 50 mg/L bamboo leaves flavone had the best growth-promoting effect on Chinese cabbage, and could improve the quality significantly. There were increases in yield, plant height, maximum leaf area and SPAD value of Chinese cabbage by 33.3%, 12.3%, 41.4% and 5.1% respectively, and the contents of soluble sugar, protein, total N, total P and total K were also increased by 58.8%,22.8%,14.7%,17.9% and 21.5% respectively. In addition, the contents of vitamin C, total P and total K of Chinese cabbage were the highest in 25 mg/L of bamboo leaves flavone treatment, the rate of increase was 31.0%, 19.2% and 22.8% respectively. However, 100 mg/L or more of bamboo leaves flavone had no obvious promotion effects on the yield, the quality and the mineral element contents of Chinese cabbage. In summary, 50 mg/L of bamboo leaves flavone had the best promoting effects on the yield and the quality of Chinese cabbage. Key words: bamboo leaves flavone; Chinese cabbage; yield; quality; total N; total P; total K 竹叶黄酮是20世纪90年代新开发的以高山野生淡竹叶为原料的一种植物类黄酮制剂,其功能因子为黄酮甙,并以黄酮碳甙为主[1],具有优良的抗自由基?抗氧化?抗衰老?抗菌?抗病毒及保护心脑血管?防治老年退行性疾病等生物学功效?近年来在天然功能性食品添加剂和医药保健品领域崭露头角[2]?目前,对黄酮类化合物的研究逐步延伸到植物科学方面?据报道类黄酮化合物能显著提高植物的抗
银杏叶黄酮提取及含量测定 一、实验目的 1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法 2、了解银杏叶中黄酮的含量测定 二、实验原理 近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。 １．１有机溶剂浸提法 目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂，如甲醇－水（１＋１）溶液。由于甲醇的毒性、挥发性较大，因此一般采用乙醇作为提取剂。银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤，滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。徐桂花等［１］提取银杏叶中黄酮类化合物时，采用乙醇（７０＋３０）溶液为提取剂，提取温度为７０℃，料液质量浓度比为１ｇ比４０ｍＬ，提取时间为４ｈ。由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争，张林涛等［1］提出了以硼砂－ 氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮，其黄酮提取率与文献值相近，但提取工艺时间缩短为１ｈ。 １．２超声波提取法 超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间，并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。刘晶芝等［2］运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为：超声频率４０ｋＨｚ，超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比１００，提取温度３５℃，静置３ｈ，提取率为８１．９％。郭国瑞等［3］以水为介质，超声波提取银杏叶中黄酮苷，与常规水浸提法比较，超声波提取效率大大提高，确定超声波提取的最佳工艺为：超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比３０，提取温度５０℃，提取率为８２．３％。 １．３超临界流体萃取法 超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。可作为超临界流体的物质很多，其中二氧化碳临界温度（ＴＣ＝３１．３℃）接近室温，且具有无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉、易制成高纯气体等优点而被广泛应用，特别在中药材及其制剂中更显示出其独特、简便、快速、具有较高的选择性、提取杂质少、可直接进样分析的优点。邓启焕等［4］探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素，最佳条件为萃取压力２０ＭＰａ、时间９０ｍｉｎ、粒度３．９ｍｍ、温度４０℃，经测定银杏叶黄酮的质量分数为２８％，高于国际公认标准。 １．４微波提取法 微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。曾里等［5］的研究表明以乙醇溶液作溶剂比以水作溶剂的效果好，最佳条件为以乙醇 （６０＋４０）溶液为提取剂，解冻处理２０ｍｉｎ。张鹏等［6］对微波法提取银杏叶中黄酮类物质进行了研究，最佳提取条件为以乙醇（５０＋５０）溶液
Iridoid and ?avone glycosides from Asystasia gangetica subsp.micrantha and Asystasia salicifolia and their antioxidant activities Prateep Worawittayanon a ,Juriratana Ruadreo a ,Wannaporn Disadee a , Poolsak Sahakitpichan a ,Somkid Sitthimonchai a ,Nopporn Thasana a ,b ,Somsak Ruchirawat a ,b ,Tripetch Kanchanapoom a ,c ,* a Chulabhorn Research Institute and Chulabhorn Graduate Institute,Vipavadee-Rangsit Highway,Bangkok 10210,Thailand b The Center of Excellence on Environmental Health,Toxicology and Management of Chemicals,Vipavadee-Rangsit Highway,Bangkok 10210,Thailand c Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University,Khon Kaen 40002,Thailand a r t i c l e i n f o Article history: Received 31March 2011Accepted 28August 2011 Available online 26October 2011Keywords: Asystasia gangetica Asystasia salicifolia Acanthaceae Iridoid glycoside Flavone glycoside Antioxidant activities 1.Subject and sources Asystasia ,member of Acanthaceae family,is a genus comprising of about 70species distributed in tropical and subtropical old world regions (Mabberley,1987).In Thailand,three species-two subspecies have been found,one of which,Asystasia salicifolia Craib,is a native species.The introduced species are Asystasia nemorum Nees.(syn.Asystasia intrusa Blume),Asystasia gangetica (L.)T.Anderson subsp.gangetica (L.).T.Anderson and subsp.micrantha (Nees)Ensermu,which are occasionally widespread and cultivated as ornamental plants. Asystasia ganetica (L.)T.Anderson subsp.micrantha (Nees)Ensermu was collected in March 2010from Khon Kaen University,Khon Kaen Province,Thailand.The latter species,A.salicifolia Craib was collected in November 2006from Nam-Nao National Park,Phetchabun Province,Thailand.The plants were identi ?ed by Mr.Nopporn Nontapa,Department of Pharmaceutical Botany and Pharmacognosy,Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University.Two voucher speci-mens (TK-PSKKU-0066and TK-PSKKU-0056)were deposited at the Herbarium of the Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University. *Corresponding author.Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University,Khon Kaen 40002,Thailand.Tel.:t6643202378;fax:t6643202379.E-mail address:trikan@kku.ac.th (T. Kanchanapoom).Contents lists available at SciVerse ScienceDirect Biochemical Systematics and Ecology journal homepage: https://www.doczj.com/doc/1d7678680.html,/locate/biochemsyseco 0305-1978/$–see front matter ó2011Elsevier Ltd.All rights reserved.doi:10.1016/j.bse.2011.08.016 Biochemical Systematics and Ecology 40(2012)38–42
溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告 小组成员：周璟、胡静、左兵华、刘云飞 2014年5月一、实验目的 ⅰ）掌握传统的溶剂提取法并对银杏中的黄酮进行提取 ⅱ）掌握紫外分光光度计的应用，以及origin软件绘图的基本操作ⅲ）学会自主设计实验，培养团队合作精神 二、实验原理 ⑴关于黄酮：银杏中最具药用价值的成分，有提高人体免疫力的作用；并且抗衰老、调节内分泌，还具有抗炎、抗真菌的作用； ⑵实验需设置空白参比液，由文献资料可知芦丁标准液的最大波长大概为510nm; ⑶本实验采用硝酸铝（氯化铝）法测定银杏叶总黄酮的质量浓度，因 为黄酮类化合物可以与铝盐发生络合显色反应。 其主要原理为：在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在的条件下，黄酮类化合物与铝盐发生螯合反应，加入氢氧化钠溶液后，溶液显橙红色，在510nm（左右）处有吸收峰，且符合定量分析的朗伯—比尔定律（即A=kbc）一般与芦丁标准溶液比较定量。先用亚硝酸钠还原黄酮类化合物，再加铝盐络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2-羟基查尔酮而显色。显色原理发生在黄酮醇类邻位无取代的邻二
酚羟基部位，不具有邻位无取代的邻二酚羟基的黄酮类成分加入上述试剂时是不显色的。（如二氢黄酮类化合物就不发生该显色反应） 三、实验药品及仪器 ⑴药品：银杏叶（阴干碾碎储藏备用），芦丁，无水乙醇，亚硝酸钠，氯化铝和氢氧化钠； ⑵仪器：电子天平，旋转蒸发仪，索氏提取器，uv-1800型紫外分光光度计，研钵，比色皿，容量瓶（10ml*6,50ml*1,100ml*2），移液管，量筒，烧杯，玻璃棒。 四．实验步骤 Ⅰ）配制60%的乙醇溶液（黄酮同时具有水溶和油溶性）。 Ⅱ）准确称取10g银杏叶粉末置于索氏提取器中，加入60%的乙醇溶液10ml，回流提取3h，然后用旋转蒸发仪浓缩并回收乙醇溶液，抽滤得到银杏叶黄酮粗提物。再用60%的乙醇定容到100ml。 Ⅲ）芦丁标准液的配置：准确称取芦丁标准品0.005g，用60%的乙醇溶液加热溶解，并转移到50ml容量瓶内用乙醇溶液定容，摇匀，得质量浓度为0.1mg/ml的芦丁标准液。 Ⅳ）分别吸取上部配制的母液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml于6只10ml容量瓶中摇匀，先加入5%的亚硝酸钠0.5ml摇匀，静置6min，再加入10%的氯化铝溶液0.31ml，摇匀，静置6min，再加入4%的氢氧化钠溶液4ml，用60%的乙醇溶液定容到10ml，放置20min。其中，加入
食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 提取物与应用· 198 ·2013年 第38卷 第2期 黄酮类化合物广泛存在于水果、蔬菜、谷物、植物来源的饮料(如红酒、绿茶等)等植物性食品中，具有保护心血管、降血压、降胆固醇、抗收稿日期：2012-08-25 基金项目：宁波职业技术学院2011年院级课题(NZ11022)；宁波工程学院“北仑科技创新基金”项目。 作者简介：汤晓(1981—)，女，浙江宁波人，硕士研究生，讲师，研究方向为植物有效成分提取与应用。 癌、杀菌、消炎等多种生理活性[1]。黄酮类化合物的基本结构为2个苯环通过中央三碳链连接而成，目前已确认结构的黄酮有5000多种，可划分为10汤 晓1，焦泽武1，龚淑珍1，梁 春1，方振飞1，关亚璠1，仇 丹2 (1.宁波职业技术学院应用化工系，宁波 315800 ； 2.宁波工程学院化学工程学院， 宁波 315016)摘要：测定槲皮素、异槲皮素、杨梅素、山萘酚、儿茶素、表儿茶素、芹菜素、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷等9种黄酮类化合物及其两两混合物的体外抗氧化活性，以研究黄酮混合物的协同、拮抗与加合作用。以DPPH 清除能力、羟基自由基清除能力、总抗氧化性、还原能力为评价指标。结果表明，含有较多B 环羟基的黄酮类化合物更易发生拮抗作用，可通过调节黄酮单品的比例减小混合物的拮抗作用或是增强其协同作用，不同反应机理的评价指标所得结果不同。 关键词：黄酮；抗氧化活性；协同；拮抗；加合 中图分类号：R 285 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2013)02-0198-09 Interaction of flavonoids mixtures on antioxidant activities in vitro TANG Xiao 1, JIAO Ze-wu 1, GONG Shu-zhen 1, LIANG Chun 1, FANG Zhen-fei 1, GUAN Ya-fan 1, QIU Dan 2 (1.Department of Chemical Engineering, Ningbo Polytechnic College, Ningbo 315800;2.College of Chemical Engineering, Ningbo University of Technology, Ningbo 315016)Abstract: This study investigated in vitro antioxidant activities of quercetin, isoquercetrin, myricetin, kaempferol, catechin, epicatechin, apigenin, delphinidin-3-O-glucoside, cyanidin-3-O-glucoside and their pairwise mixtures to evaluate synergistic, antagonistic, and additive effects of flavonoids mixtures. DPPH radical scavenging activity, hydroxyl radical scavenging activity, total antioxidant activity and reducing power were used as evaluation indicators. The results indicate that flavonoids with more B ring hydroxyls are more influenced by antagonistic effect. Antagonistic effect could be reduced and synergistic effect could be enhanced by changing the ratio of single flavonoid in the mixture. Different reaction mechanisms could induce different experimental results.Key words: flavonoids; antioxidant activity; synergistic; antagonistic; additive 黄酮混合物体外抗氧化活性的相互作用
1、本课题国内外研究动态，选题的依据和意义。 1.1 竹叶黄酮的提取工艺 黄酮类化合物的糖苷是多酚化合物，具有酚性化合物的特征，呈弱酸性，可溶于碱性溶液，但很多黄酮类化合物在溶于碱性溶液的同时有氧存在，其黄酮苷会发生降解反应。根据相似相溶原理，按黄酮类化合物的极性来选择所用溶剂，竹叶所含的有效活性物质主要为黄酮苷类，具有较大的极性和亲水性，故可选择热水、甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇等溶剂进行提取。竹叶黄酮的提取方法传统上多用浸提和蒸馏，目前已采用一些高新技术提取和精制竹叶提取物，如CO，超临界提取、超声波提取等。提取原料选新鲜竹叶，最好是现用现取。 1.1.1溶剂提取法 水提法此法适用于黄酮苷类物质提取。具有成本低，对环境及人类无毒害，设备简单，适合工业化大生产，但提取率低，提取中杂质较多(如无机盐，蛋白质，糖类等)，后续分离麻烦，现在很少单一使用此法。 有机溶剂提取法根据黄酮类化合物与杂质极性不同来选择适合的有机溶剂，常用有乙酸乙酯，丙酮，乙醇，甲醇，水或某些极性较大的混合溶剂。如甲醇一水(1：1)进行提取。竹叶中黄酮苷类易溶于水，甲醇，乙醇等强极性的溶剂中，故一般用浓度为60％左右的乙醇提取黄酮苷类。 陈彦等以水和乙醇水溶液为提取剂，对影响提取率的因素进行了优化，得出乙醇最佳提取浓度为75％。 1.1.2微波提取法 微波法原理是利用磁控管所产生的每秒亿次超高频率的快速震动，使材料内分子互碰撞、挤压，使得位于细胞内的有效成分从细胞壁周围自由流出，传递转移至萃取介质周围，在较低的温度下背萃取介质获取并溶解其中。此法具有提取率高，准确，快速，操作成本低，减少原料预处理费并于环境无害。微波射线穿透性好，在接近环境温度下抽提竹叶中所需的有效成分，对于热敏性成分的萃取非常有效。微波萃取作为一种新的顺应潮流的高新技术必将得到迅
学院：化学化工学院 专业：生物工程 学生姓名：张文实 目录 摘要 (2)
1 绪论 (3) 2 实验原理 (3) 3 实验仪器和药品 (4) 3.1 实验仪器 (4) 3.2 实验药品 (4) 4 实验过程 (4) 4.1 侧柏叶中黄酮的提取及定性分析 (4) 4.2 侧柏黄酮洗发香波的配制及性能定 (6) 4.3 侧柏黄酮雪花膏的配制及性能测定 (7) 5 结果与讨论 (7) 5.1 侧柏叶中黄酮的含量 (7) 5.2 侧柏叶黄酮提取物的紫外—可见分析 (8) 5.3 洗发香波和雪花膏的性能测定 (9) 6 结论 (10) 参考文献 摘要
采用超声波法和索氏提取法从侧柏叶中提取黄酮类化合物。芦丁中也含有黄酮类化合物，根据不同溶度的黄铜提取液对应不同的吸光度，作出标准曲线，得出吸光度关于浓度的方程，然后再测得侧柏提取液的吸光度，根据方程计算黄酮类化合物的含量。黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用。去屑止痒的机理在于抑制头发表皮细胞蜕化的速度，延迟脱落，减少脂溢性皮肤病的产生。因此，广泛应用于洗发香波的制备中。同时它还有很好的美白效果，可添加到雪花膏中。 关键词：侧柏；黄酮类化合物；洗发香波；雪花膏 1 绪论
侧柏(Platycladus orientalis)系柏科侧柏属常绿乔木，别名扁柏、香柏、片柏、片松。喜生于湿润肥沃的山坡[1]，分布于全国大部分地区。现代医学研究证明，侧柏叶对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、宋内氏痢疾杆菌有明显的抑制作用，能缩短出血和凝血时间，对肺炎、痢疾、高血压等多种疾病有一定的疗效。侧柏叶的疗效作用主要是通过存在其中的黄酮类物质起作用的。 黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。最初，这类物质的粗制品仅作为染料应用，20世纪20年代，国外把槲皮素、芦丁用于临床后，才引起人们的关注。60年代末，人们发现黄酮类化合物有抗炎、抗病毒、利胆、强心、镇静和镇痛等作用。到70年代，又发现它们有抗氧化、抗衰老、免疫调节和抗肿瘤等作用。 此外，黄酮还有明显的美白功效，其美白功效的药理作用主要在于抑制酪氨酸酶的活性，从而抑制黑色素的合成。侧柏叶总黄酮作为美容护肤化妆品的添加剂，具有药性稳定，药力持久，对皮肤作用温和、刺激性小、安全性高、疗效显著等特点。将其制成水包油型的乳化产品，安全性好，使肌肤自然、美白亮泽[2]。且成本低廉，原料易得，又不会产生副作用，顺应了国际化妆品天然化、营养化、疗效化的发展趋势，具有广阔的市场前景。在雪花膏中加入侧柏叶提取液组分，与表面活性剂等配制成美白雪花膏，是一种兼具美白、保湿功效和调理性能的天然植物功能性雪花膏。同时，黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环，使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用[3]。广泛用于洗发香波的生产中。 2 实验原理