实验八叶绿体中色素的提取和分离 教学目的 1．初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 2．探索叶绿体中有几种色素。 实验原理 1．叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。 2．色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。 实验程序 （1）称取5g绿色叶片并剪碎 提取色素 （2）加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口 （1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时 到达滤液细线）制滤纸条 （2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线 （1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线 滤液划线 （2）干燥后重复划2-3次 （1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准） 纸上层析（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中 （3）用培养皿盖盖上烧杯 观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图） 最宽：叶绿素a； 最窄：叶绿素b； 相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b； 相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。 实验关键 1．选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。2．画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行，重复2-3次。 3．层析时不要让滤液细线触及层析液。 注意事项 1．因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。 2．在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。 3．分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。
叶绿体色素的提取分离、理化性质实验报告 第一部分提取与分离 一实验目的 学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法 二实验原理 叶绿体是进行光合作用的细胞器。叶绿体中的叶绿体a(C55H72O5N4Mg)、叶绿素b(C55H72O6N4Mg)、胡萝卜素(C40H56)和叶黄素(C40H56O2)与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。这些色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。提取液可用薄层色谱法加以分离与鉴别。 薄层色谱分析法是将吸附剂均匀的涂在玻璃板上成一薄层，将此吸附剂薄层做固定相，把待分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用一定量的溶剂做流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂中。流动相通过毛细管作用由下而上的逐渐浸润薄层板，并带动样品在板上也向上移动，样品中各组分在吸附剂和展开剂之间发生连续不断的吸附、脱附、再吸附、再脱附……的过程。由于吸附剂的吸附能力大小不同，吸附力强的物质相对移动慢一些，而吸附力弱的则相对移动快一些，从而使各组分有不同的移动速度而彼此分开。 三实验材料与试剂 1 新鲜的菠菜叶片 2 体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂(石油醚:丙酮:苯=7:5:1，体积比) 3 天平，研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸 四实验步骤 (一)色素提取液的制备 1 取新鲜叶片4至5片(2g左右)，洗净，擦干叶表面，去中脉剪碎，放入研钵中。 2 研钵中加入少量碳酸钙粉末，加2至3ml体积分数为95%的乙醇，研磨至糊状，再加10至15ml体积分数为95%的乙醇，上清液用漏斗过滤，残渣再用10ml体积分数为95%的乙醇冲洗一次，一同过滤于三角瓶中，即制成叶绿体色素提取液。提取液应避光保存。 (二)叶绿体色素的分离 1 取硅胶预制板一个，用点样毛细管吸取上述提取液，平行于硅胶板的短边，距下边缘约1cm处用毛细管划线，风干后再划第二次，重复操作3至4次。 2 在干洁的层析缸中加入适量的展开剂，高度约0.5cm，将硅胶预制板带有色素的一端放下，使其浸入展开剂中(但不要使待测样品浸入展开剂中)。迅速盖好层析缸盖。此时，展开剂借毛细管作用沿硅胶预制板向上扩散，并把叶绿体色素向上推动，不久即可以看到各种色素的色带。 3 当各种色素的得到较好分离，展开剂前沿接近硅胶预制板上端近边缘处时，取出硅胶预制板，并迅速用铅笔标出展开剂前沿和各色素带的位置。
第5章细胞的能量代谢 第四节光合作用和呼吸作用综合复习 【学习目标】： 1．理解光合作用和细胞呼吸的过程、影响因素、相关实验及在生产实践中的作用,学会分析实验数据、图表、曲线等形式的试题， 2.学习获取信息、理解信息，提高分析、推理、评价及实验探究能力。 【学习重点】1、绿叶中色素的种类和作用。 【学习过程】 一、知识预览 叶绿体中色素的提取和分离 1、实验原理： 叶绿体中色素提取的原理：叶绿体中的色素溶解于_____ 如酒精或丙酮（相似相溶），可以用其提取叶绿体中的色素。 分离的原理：不同色素在层析液中__________ 不同，溶解度高的随在滤纸上扩散的，其中胡萝卜素在丙酮中的溶解度最高，扩散速度最快，叶黄素和叶绿素ａ次之，叶绿素ｂ溶解度最低，扩散得最慢。根据此原理使各色素分离开来。 2、实验步骤分析： (1)提取色素时，加入研钵内的物质： A 少许，作用是使研磨充分； B 少许，作用是防止色素被破坏； C 或15ml，作用是。 (2)过滤时，要将用过滤，收集到小试管中，用胶塞塞紧试管口。 (3)制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角的作用是，画滤液细线的要求是。待滤液后，还要重复画几次。 (4)分离色素时，试管口加塞子的目的是防止；关键应注意一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为。 叶绿体中色素的性质和功能 （1）叶绿体中的叶绿素主要吸收太阳光中的光和光，对光的吸收量很少；类胡萝卜素主要吸收光，对光的吸收量很少。 （2）聚光色素：包括大多数的和全部的、、，这类色素的功能是。
编制：曾德洪审核：彭采勇 （3）反应中心色素：少数不仅能吸收光能，还能接受传递过来的光能，并将光能转变成。 二、合作探讨 问题1：在色素提取时，某实验小组得到的色素提取的颜色过浅，可能的原因是？ 问题2：秋季绿叶变黄，可能的原因是什么？ 【配餐作业】A基础巩固 1、叶绿体中的色素都分布在____________的膜上。 2、下列关于在高等植物细胞内的色素的叙述中正确的是（） A、植物细胞内的色素都可以吸收和传递光能 B、植物细胞内的色素均可参加光合作用C．植物细胞内的色素有四种D．植物细胞内的色素与植物体的颜色有关系3、某同学提取得到叶绿体色素溶液后，取一圆形滤纸，在滤纸中央滴一滴 色素提取液，再滴一滴层析液，色素随层析液扩散得到下图结果，则1、2、 3、4四条色带依次表示 A．胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B．叶黄素、胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b C．叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素 D．叶绿素b、叶绿素a、胡萝卜素、叶黄素 4、在做植物实验的暗室内，为了尽可能地降低植物光合作用的强度，最好安装（）A红橙光灯B绿光灯C白炽灯D蓝光灯 B能力提高 1、当绿色植物缺磷时，光合作用明显受到阻碍，这是因为（）A．磷对维持叶绿体膜的结构和功能起着重要作用 B．磷是叶绿素的重要组成成分C．磷是酶的重要组成成分D．糖类运输到块根、块茎和种子中都需要磷 2、黑暗条件下生长的水稻幼苗缺少的光合色素有（）A．叶绿素a与叶绿素b B．叶绿素a与叶黄素 C．叶绿素b与胡萝卜素 D．叶绿素a与胡萝卜素 3、1915年、l930年、l965年三个年度的诺贝尔奖都授予了有关叶绿素研究方面的科学家，下列有关叶绿素的说法正确的是（）A．叶绿素在高等植物体内有两种，叶绿素a呈黄绿色，叶绿素b呈蓝绿色 B．叶绿体的囊状结构薄膜和基质中均含有与光合作用有关的色素和酶 C．叶绿素主要吸收蓝紫光 D．叶绿体色素提取和分离实验中，在滤纸条上叶绿素a比叶绿素b扩散得快 4、当绿色植物缺磷时，光合作用明显受到阻碍，这是因为（）
光合色素的提取与分离改进实验 一、本实验在教材中所处的地位与作用 本实验是浙科版高中生物必修一《分子与细胞》中的一节内容，是高中生物教学中的一个重要实验。光和色素在光合作用中起着吸收、传递与转化光能的作用，通过光合色素的提取和分离实验，有助于学生理解光合色素的种类和作用、加强学生对光合作用的理解和掌握，培养学生提取、分离光合色素的技能。 二、对教材实验的教学思考 结合笔者多年的教学实践和学生操作反馈的实验结果 可以发现，即使完全按照课本所提供的材料和实验方案进行规范操作，光合色素提取和分离的效果也不是很理想。主要体现在以下三个方面：（1）教材中提取光合色素使用研磨法，步骤较为繁琐，药品种类较多。虽然浙科版已经改用烘干的菠菜叶干粉作材料，降低了研磨操作的难度，但是所用到的药品种类还是比较多（包括二氧化硅和碳酸钙等），且用量不好控制，用量过多影响色素的浓度，用量过少则得不到很好的研磨效果。另外，研磨时要求迅速、充分研磨成匀浆，学生难以把握好匀浆的程度，而且提取液中色素含量不高，导致色素分离不明显。（2）教材中画滤液细线时使用毛细吸
管吸取滤液直接画线，毛细吸管很细、易断，而且画滤液细线时，线画得较粗且不直，操作上很难符合要求。（3）分离光合色素，用到的工具是滤纸条，且放置于装有层析液的试管中层析，由于试管口径较小，所制备的滤纸条也相应较小，滤纸条上即使在画滤液细线时重复多次，滤纸上色素含量也不多，导致分离出来的色素带不是很明显；另外，操作上也很容易使滤液细线触及层析液，导致实验失败。 三、实验改进之处 1.光合色素提取的改进――酒精隔水加热提取色素 将原实验中的研磨法改为酒精隔水加热法。直接将菠菜叶片的绿叶剪碎加入无水乙醇，进行隔水加热，所得的溶液就是色素溶液，省去了添加二氧化硅和碳酸钙、过滤的步骤，操作简单，也能使学生明确色素不溶于水，极易溶于有机溶剂的知识点。 2.画滤液细线方法的改进 将教材实验中画滤液细线工具毛细吸管改为自制画线器，如，笔帽、大号移液枪头等空心圆柱材料，直接在装有色素溶液的培养皿中蘸取，印上滤纸圆心处即可，这样操作更为便利。 3.光合色素分离的改进――灯芯法分离色素 将教材中的滤纸条分离改为用圆形滤纸分离，以酒精灯灯芯作为介质，将层析液引导至圆形滤纸片上，得到的层析
《叶绿体色素的提取和分离》实验报告 实验目的 1. 学习叶绿体色素的提取、分离方法。 2. 通过叶绿体色素提取、分离方法的学习了解叶绿体色素的相关理化性质。 3. 为进一步研究各叶绿体色素性质、功能等奠定基础。 实验原理 叶绿体色素包括绿色的叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色的类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类,它们均以色素蛋白复合体形式存在于类囊体膜上。两类色素均不溶于水而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。由于提取液中不同色素在固定相和流动相中的分配系数不同,所以可借助分配层析方法将其分离。 实验仪器与药品 1. 绿色植物如菠菜等的叶片。 2. 研钵、漏斗、三角瓶、剪刀、滴管、康维皿、圆形滤纸(直径11cm)。 3. 95%乙醇、石英砂、碳酸钙、展层剂。展层剂按石油醚:丙酮:苯10:2:1的比例配制(V/V)。 实验步骤 1. 叶绿体色素的提取
(1)取菠菜或其它新鲜植物叶片4~5片(4g左右),将其洗净、擦干并去掉中脉,剪碎后置入研钵中。 (2)研钵中加入95%乙醇2~3 ml及少许石英砂、碳酸钙研磨至匀浆,再加95% 乙醇5ml,然后以漏斗过滤之,即为色素提取液。 2. 叶绿体色素的分离 (1)取圆形定性滤纸一张(直径应小于康维皿直径)于其中心扎一圆形小孔(直 径约3mm),另取长方形滤纸条一张(5cm×1.5cm),用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取 液沿滤纸条的长度方向涂抹,注意涂抹色素扩散宽度应限制在0.5cm以内,风干后再重复操作数次。然后沿长度方向将滤纸条卷成纸捻,使涂抹过叶绿体色素溶液的一侧恰在纸捻的一端。 (2)将纸捻带有色素的一端插入圆形滤纸的小孔中,使与滤纸刚刚平齐(勿突出)。 (3)在康维皿中央小室中加入适量的展层剂,把带有纸捻的圆形滤纸平放在康 维皿中央小室上,使纸捻下端浸入展层剂中,迅速盖好培养皿。展层剂将借助毛细管作用顺纸捻扩散至圆形滤纸上,使叶绿体色素在固定相(滤纸中吸附有水分的纤维素)和流动相(展层剂)间反复分配,从而使不同色素得到分离,分离结果为滤纸上可见到各种色素的同心圆环。无康维皿时亦可用底、盖直径相同的培养皿进行实验,实验时可在培养皿底中放入一平底短玻管或塑料药瓶盖以替代康维皿中央小室盛装展层剂,其余相同。 (4)当展层剂前沿接近滤纸边缘时便可结束实验,此时可看到不同色素的同心 圆环,各色素由内往外的顺序为:叶绿素b(黄绿色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶黄素(鲜黄色)、胡萝卜素(橙黄色),再用铅 笔标出各种色素的位置和名称。
生物一轮复习导学提纲(14) 必修一：光合作用的认识过程、提取和分离叶绿体中的色素 班级______ 学号______ 姓名___________ 1.(06广东) 材料1：1642年，比利时科学家海尔蒙特进行了一项著名的柳树实验。他在一个花盆里栽种了一棵2.3 kg的柳树。栽种前，花盆里的泥土经过高温烘烤干燥后称重为90.8 kg。以后 的5年中，海尔蒙特除了只给柳树浇水外，没有在花盆里添加任何物质，每年秋天柳 树的落叶也没有称重和计算：5年后，他将柳树和泥土分开称重，发现柳树的重量变 成了76.7 kg，泥土烘干后的重量为90.7 kg，比原来只减少0.1 kg。于是他得出结论： 柳树获得的74.4kg物质只是来源于水。 材料2：科学家将一盆绿色植物放在不同波长的光下照射，然后测量该植物对不同光质的吸光率，结果列于下表： ⑴根据你所掌握的生物学知识，判断海尔蒙特的结论是否确切?为什么? ⑵花盆内的泥土减少了0.1 kg，其原因是__________________ _________________________。 ⑶请用上表数据在指定方格纸内绘出植物叶片光吸收变化曲线， 并分析得出结论。___________________________________ ___________________________________________________。 ⑷CO2浓度对植物光合作用强度影响的规律如右图。当外界CO2浓度处于A时，植物叶片光合作用所固定的CO2量与________________________相等；为提高封闭大棚内作物产量，棚内人工释放CO 2应控制在________ (填图中字母)浓度为宜。 2.水绵是丝状的多细胞藻类植物，其结构如右图所示： ⑴图中的1、2、3分别为_________、__________、__________。 ⑵1880年美国科学家恩格尔曼把载有水绵和好氧细菌的临时装片放在没有空气的黑暗环境中， 然后用极细的光束照射水绵。他发现细菌只向叶绿体被光束照射到的部位集中；如果临时装片暴露在光下，细菌则分布在叶绿体所有受光的部位。 ①为什么选用水绵做为实验材料？_________________________________________________。 好氧细菌的作用是什么？_______________________________________________________。 ②为什么选黑暗且没有氧气的环境？_______________________________________________。 ③为什么先用极细光束照射水绵，而后又让水绵完全曝露在光下？______________________ ____________________________________________________________________________。 ④实验结论是什么？_____________________________________________________。
绿叶中色素的提取和分离练习题 1．实验原理 （1）提取：绿叶中的色素能够溶于有机溶剂而不溶于水，可用无水乙醇等有机溶剂提取色素。 （2）分离：各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相互分离。 2．实验步骤 观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同的色素带 考向一叶绿体中色素提取与分离的实验分析 1．下列与“绿叶中色素的提取和分离”实验有关的叙述，正确的是（）A．提取绿叶中的色素时只能用无水乙醇溶解色素 B．研磨叶片后立即加入碳酸钙可防止色素被破坏 C．叶绿素b在层析液中的溶解度小于类胡萝卜素 D．不同绿叶中的色素在滤纸条上的色带顺序不同 ▼
【参考答案】C 【试题解析】提取绿叶中的色素时，可以用无水乙醇、丙酮等有机溶剂， A错误；叶绿体色素的提取实验中，加入碳酸钙的目的是保护叶绿体色素，防止色素被破坏，应该在研磨前加入，B错误；类胡萝卜素的溶解度大，扩散速度快，位于滤纸条的上面，而叶绿素b的溶解度小，扩散速度慢，位于滤纸条的下面，C 正确；不同绿叶中的色素在滤纸条上的色带顺序相同，从上到下都是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，D错误。 【解题必备】 绿叶中色素提取和分离实验的异常现象分析 （1）收集到的滤液绿色过浅的原因分析 ①未加石英砂(二氧化硅)，研磨不充分。 ②使用放置数天的叶片，滤液色素(叶绿素)太少。 ③一次加入大量的无水乙醇(正确做法：分次加入少量无水乙醇提取色素)。 ④未加碳酸钙或加入过少，色素分子被破坏。 （2）滤纸条色素带重叠：滤纸条上的滤液细线接触到层析液。 （3）滤纸条看不见色素带 ①忘记画滤液细线或没有提取出色素。 ②滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。 2．下列对提取光合色素，进行纸层析分离的实验中各种现象的解释，正确的是（） A．未见色素带，原因可能为材料是黄化叶片 B．色素始终在滤纸上，是因为色素不溶于层析液 C．提取液呈绿色是由于其含有叶绿素a和叶绿素b D．胡萝卜素处于滤纸条最前方，是因为其在提取液中的溶解度最高
绿叶中色素的提取和分离》实验教学设计 学院附中陈建志 一、教材分析 生物学是以实验为基础的科学，实验教学对提高学生的生物科学素养起着无可替代的重要作用，他是素质教育和创新教育的重要场所和前沿阵地，也是基础教育改革的基础、前提和保证。 《绿叶中色素的提取和分离》是一个探究性实验，通过本实验，可以让学生知道绿叶中色素的种类和颜色对植物叶片颜色的影响，是学习光合作用的基础。本实验要求层次较高、操作难度较大、考查频率高的一个实验，但是按照教材的实验步骤和方法，多数学生把握不够，操作不当。分离后的色带或不全或色浅，辨认困难，实验效果皆不理想。笔者在实验教学中将有关操作作了调整。 1、教材中值得推敲的地方 实验选材和研磨教材推荐用菠菜为实验材料。菠菜生长受季节的限制，有的季节很难采集。另外菠菜叶片含水量较高，较多的水分子与丙酮分子接触，降低了丙酮对色素分子的萃取率，导致提取液中含色素分子少，进而影响实验结果。 教材中选用5克叶片．相对于仅需的几滴滤液来说，显然太多，也增加了研磨的时间和难度。相对于5克叶片，5毫升丙酮又显太少。丙酮极易挥发，实验中常出现叶片未研碎。丙酮已挥发干的情况。因为研磨不彻底，提取液中色素含量少。 研磨剂的配制学生只是按课本要求按顺序添加无水、乙醇、CaCO、3 SiO2,并不能很深刻的理解添加这些物质的原理和作用。 过滤装置课本要求用放置单层尼龙布的漏斗过滤滤液，但实际操作中这个方法耗时且费力。 画线方法由于学生平时的实验操作中很少用到毛细吸管，所以采用课本要求的方法划线，很难做到滤液细线细、直、均匀的要求。色素分离装置分离色素是将滤纸条插入到
加入层析液的烧杯中，为了防止层析液挥发，还可以给烧杯加盖。而实际操作很难做到滤纸条在烧杯中保持竖直，也不能有效减少层析液的挥发。 分离色素的方法课本是让色素在长形滤纸条上扩散分离，方法单一，不能很好地激发学生的创新思维。 2 实验改进 只要是新鲜、浓绿的叶片皆可选，但要对叶片作些处理。将叶片用沸水处理，即将2克叶片置于沸水中煮20—40 秒（时间不宜过长。否则会破坏色素分子的结构）后。立即捞出置于冷水中降温，再用吸水纸吸千水分．剪碎后放人研钵。 研磨剂的配制 试验设计： 1）分别在A 、B、C 三个研钵中加入 5 克剪碎的叶片 2） A 中加少量的二氧化硅和无水乙醇， B 中加少量的二氧化硅、碳酸钙和水 C 中加少量的二氧化硅、碳酸钙和无水乙醇； 3）经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液（A黄绿色、B几乎无色、 C 深绿色）； 4）分析实验结果得出结论：碳酸钙可以防止色素被破坏，色素可以溶于酒精但不溶于水。 通过分组对照，让学生通过具体的实验探究，更直观更容易理解提取色素过程中所添加的各种物质的作用。 过滤装置的改进将过滤用的尼龙布改为用棉花塞住漏斗口过滤，一个人就能独立完成，而且过滤速度快，操作更为简单。 画线方法的研究这一步是本实验的一个操作难点，学生很难用毛细吸管画出细、直、均匀的滤液细线。如果用钢笔沾色素、硬币边缘压线、盖玻片或者棉线画线等，则操作起来更容易。色素分离装置的制作，用厚纸板作个烧杯盖，上面剪开 1.5 —2 厘米的缝隙，滤纸条只需要从层析缸上盖子的缝隙插入到层析液中，根据实验需要可以选择缝隙数量不同的盖子做出调整。分离色素的方法的创新1）用圆形滤纸片分离。用圆形滤纸片分离，取平面培养皿 1 只，将一干燥的圆形定性滤纸盖在培养皿中，在圆形滤纸（直径为l0 cm ）中央滴上2 ~ 3滴色素提取液，静置约1 min,在滤纸的中央点成圆形的色素
第4节能量之源——光与光合作用 一捕获光能的色素和结构 一 课前预习学案 1阅读p98填写绿叶中的色素和种类 2如何提取和分离色素？阅读p97—98实验 1.色素的提取 (1)实验原理： (2)实验流程 取材：称取5 g绿叶，，放入研钵中 ↓ 研磨： 加二氧化硅,为了 无水乙醇为了 ↓ 过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布，将滤液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤↓ 收集：用小试管收集色素滤液，及时将试管口用棉塞塞严 2．色素的分离 (1)实验原理：绿叶中色素在层析液中的不同，它们随层析液在滤纸条上的也不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得；反之则慢。这样，色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。 (2)实验流程
1．形态：扁平的 或 。 2．结构 3．功能：绿色植物进行 的场所。 4．色素的分布： 。
课堂探究一实验部分 1．实验成功的关键 (1)色素的提取 ①选取新鲜叶片： ②加入少许SiO2 CaCO3：。 ③加入无水乙醇：。 ④收集完滤液后，试管口加棉塞，。 (2)色素的分离 ①滤纸条剪去两角，。 ②画滤液细线时，画得要，使分离的色素带平整、不重叠； 而且要重复一两次，。 ③层析液不能没及滤液细线，。 2．注意事项 (1)裁取定性滤纸时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 (2)根据试管的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出试管1 cm，高出的部分做直角弯折。 (3)画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中。 (4)研磨要迅速、充分。①因为无水乙醇容易挥发；②为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素。叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。 (5)过滤时，不能用滤纸，要用单层尼龙布(或脱脂棉)，因为滤纸可以吸附色素，降低滤液中色素的含量，使实验效果不明显。 2画出实验得到的色素带以及位置 3该实验中收集到的滤液绿色过浅，可能的原因有哪些？
光合色素的提取、分离与作用 1、叶绿体中色素的提取和分离实验主要证明了( ) A.四种色素在层析液中的溶解度和扩散速度不同 B.叶绿体中色素的种类和色素的颜色 C.叶绿素的含量是类胡萝卜素的四倍 D.色素分布在叶绿体类囊体膜上 2、在进行绿叶中色素的提取和分离的实验时,不让层析液没及滤液细线的原因是() A.滤纸上的几种色素会扩散不均匀而影响实验结果 B.滤纸上的滤液细线会变粗而使色素太分散 C.色素会溶解在层析液中而使实验失败 D.滤纸上的几种色素会混合起来不分散 3、对“绿叶中色素的提取和分离”实验,下列描述正确的是( ) A.将5 g新鲜完整的菠菜叶,放入研钵中,加人无水乙醇、石英砂、CaCO3以后,迅速研磨 B.用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线处小心均匀地画出一条滤液细线,并连续迅速地重复画2~3次 C.把画好细线的滤纸条插入层析液中,并不断摇晃, 以求加快色素在滤纸条上的扩散 D.色素分子是有机物,不溶于水,所以研磨过程中加人无水乙醇是为了溶解色素 4、下列有关“叶绿体色素的提取和分离”的实验叙述正确的是( ) A.加入碳酸钙防止滤液挥发 B.用NaCl溶液提取叶片中的色素 C.用无水乙醇或丙酮分离滤液中的色素 D.加入二氧化硅(石英砂)有利于充分研磨 5、提取和分离叶绿体色素的实验中,正确的操作顺序应该是( ) A.进行纸层析→制取滤液→在滤纸条上画线→将实验材料研磨 B.制取滤液→进行纸层析→在滤纸条上画线→取滤液→再画线 C.将实验材料剪碎、研磨→在滤纸条上画线→制取滤液→进行纸层析 D.将实验材料剪碎、研磨→制取滤液→在滤纸条上画线→进行纸层析 6、下列关于绿叶中色素的提取和分离的相关说法正确的是( ) A.提取色素时需使用95%的乙醇 B.含量最多的叶绿素a呈现黄绿色 C.叶绿素比类胡萝卜素在层析液中溶解度大 D.研磨时若不加入碳酸钙得到的色素带可能只有两条 7、从叶绿体中提取色素,选取下列哪一种叶片效果最好 ( ) A.厚硬似革质的绿色叶片 B.衰老、黄绿的叶片 C.新鲜、细嫩、颜色浓绿的叶片 D.多浆汁或有特殊气味的绿色叶片 8、绿色植物的叶片大多数是绿色的,对此现象解释正确的是 () A.绿叶主要吸收太阳光中的绿光进行光合作用 B.绿叶较少吸收绿光,较多反射绿光 C.绿叶的色素中叶绿素的含量是类胡萝卜素的5倍 D.绿叶吸收各种颜色的太阳光,然后再放出绿光
实验：绿叶中色素的提取和分离 杨琪 一．实验原理 实验中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇(丙酮，汽油，苯等)中，所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 绿叶中的色素不止一种，他们都能溶解在层析液中。然而，它们在层析液中的溶解度不同；溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快；反之则慢。这样，几分钟之后绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。且溶解度最高的是胡萝卜素，它随层析液在滤纸上扩散的最快；叶黄素和叶绿素a的溶解度次之，叶绿素b的溶解度最低，扩散的最慢。 二．实验目的 1. 掌握提取和分离叶绿体色素的方法 2. 探究绿叶中含有几种色素 三．实验材料用具 材料：新鲜的绿色叶片（如菠菜的绿叶）。无水乙醇，层析液，SiO2、CaCO3 用具:干燥的定性滤纸，烧杯（100ml）,小试管，试管架，培养皿盖，棉塞，研钵，玻璃漏斗，尼绒布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml）,天 平，铅笔 四．实验步骤 1.提取绿叶中的色素 取材：用天平称取5g的新鲜绿叶，剪碎，放入研钵中。向研钵中加入少许SiO2、CaCO3 ，再加入10ml无水乙醇，进行快速，充分的研磨。 过滤：将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一块单层尼绒布）中进行过滤。将滤液收集到小试管中，及时用棉塞将试管口塞严。 2.制备滤纸条 将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。 3.画滤液细线 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀的画出一条细线。待滤液干后，再画一两次 4.分离绿叶中的色素 将适量的层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微倾斜靠着烧杯的内壁，轻轻插入层析液中，随后用培养皿盖盖住烧杯口。注意，不能让滤液细线触及层析液 5.观察与记录 几分钟以后，打开培养皿盖，取出滤纸条，干燥后观察滤纸条上的色素带，以及每条色素带的颜色和宽度，将观测结果记录下来。 6．观察结果分析结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）
叶绿体中色素的提取和分离实验创新 汉寿二中吴蔚 一、在教材中的地位和作用 该实验是人教版必修一分子与细胞第五章的内容，叶绿体是光合作用的场所,做好叶绿体中色素的提取和分离实验,有助于学生了解光合作用色素的种类和作用,加强学生对光合作用的理解和掌握。 二、实验原型及不足之处 实验原型： 1.称取5g的绿叶，剪碎，放入研钵中.向研钵中加入10ml有机溶剂，进行迅速、充分的研磨。 2.将研磨液进行过滤，将滤液收集倒试管中，及时塞住试管口。 3.将干燥的滤纸条剪去两角，在距一端1cm处画滤液细线，再将滤纸条插入层析液中进行层析。 不足之处： 1.实验材料菠菜叶并不是一年四季都有。 2.提取色素时加入10ml有机溶剂溶解色素，造成了一定程度的浪费。 2.层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，教材中采用的是石油醚、丙酮、苯的混合液，吸入以后对人体有一定的副作用。 4.操作不便，效果不明显。在分离色素时，要在条形滤纸上画滤液细线，且滤液细线不容易画细画直。还有的学生对“不让滤液细线触及到层析液”这一点做的不是很好，因而实验现象不明显。 三、实验创新与改进之处 1.实验材料的改进 选用校园中常见的枸树叶，优点：容易获得，几乎没有成本，叶片粗糙含水量低提取的色素量大。 2.有机溶剂的改进 在操作中加入约5ml同样能达到实验效果，这样既能节约实验材料也能减少有害气体的挥发。 3. 层析液的改进 本实验改为用97号汽油代替作为层析液，材料易得也省去了配制的时间，更重要的是减少有害气体的摄入。
4.分离装置的改进 取一圆形滤纸并在中心打一小孔，用毛细吸管吸取少量滤液，延小孔边缘均匀涂抹，待滤液干后，再涂抹一两次。将另一滤纸卷成纸筒，插入小孔内，使尖端与滤纸平齐。在培养皿中加入适量97汽油，把插有纸筒的圆形滤纸平放在培养皿上，使纸筒的一端浸入其中，盖好培养皿。 四、实验器材 培养皿、滤纸、烧杯、漏斗、研钵、毛细吸管、量筒、剪刀、丙酮、碳酸钙、二氧化硅、试管、试管架、纱布、新鲜的绿色植物叶片等。 五、实验原理及装置说明 叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡萝卜素），它们都溶于有机溶剂，因此可选用乙醇或丙酮进行提取。叶绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之越慢。因此可使用纸层析法将叶绿体中的色素分离开来。 六、实验过程 1．色素的提取 称取约5g左右的鲜叶，剪碎，放入研钵中。加少许的二氧化硅（充分研磨）碳酸钙(防止研磨中色素被破坏)与约5ml丙酮，快速研磨。将研磨液收集到试管中。 2．色素的分离 取一圆形滤纸（直径应略大于培养皿直径），中心打一小圆形孔，用毛细吸管吸取少量滤液，延小孔边缘均匀涂抹，待滤液干后，再涂抹一两次。另取一方型滤纸（长5cm，宽1cm）卷成纸筒，将纸条插入小孔内，使尖端与滤纸平齐（勿突出）。在培养皿中加入适量层析液，把插有纸筒的圆形滤纸平放在培养皿上，使纸筒的一端浸入层析液中，盖好培养皿进行层析，待层析液将要到达滤纸边缘时取出滤纸，风干。 3.观察和记录 观察滤纸上出现了几个同心圆，以及每条色素带的颜色。将观察结果记录下来。 七、实验效果 可清楚的看见被分离的各种色素的同心圆。由内到外依次是叶绿素b（黄绿色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶黄素（鲜黄色）、胡萝卜素（橙黄色）。 八、自我评价 1.本实验的材料选自生活中常见的构树叶，不但取材方便而且能培养学生勤于思考、
实验九叶绿体色素的提取分离与理化性质鉴定 一、实验目的 1、学会叶绿体色素提取和分离的方法。 2、了解叶绿体色素的荧光现象、皂化反应等理化性质。 二、实验原理 叶绿体中含有绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b）和黄色素（包括胡萝卜素和叶黄素）两大类，这两类色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇或丙酮等有机溶剂提取。 提取液可用色层分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各成分在两相（流动相和固定相）间具有不同的分配系数，所以它们的移动速度不同，经过一定时间层析后，便将混合色素分离。 叶绿素是一种二羧酸——叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯，故可与碱起皂化反应而生成醇（甲醇和叶绿醇）和叶绿酸的盐，产生的盐能溶于水中，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开；叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，叶绿素吸收光量子而转变成激发态，激发态的叶绿素分子很不稳定，当它变回到基态时可发射出红光量子，因而产生荧光。叶绿素中的镁可以被H+所取代而成褐色的去镁叶绿素，后者遇铜则成为绿色的铜代叶绿素，铜代叶绿素很稳定，在光下不易破坏，故常用此法制作绿色多汁植物的浸渍标本。 三、实验器材 新鲜的植物叶片。 研钵；漏斗；100ml三角瓶；玻璃棒；剪刀；滴管；培养皿；定性滤纸条（5cm×1.5cm）。 毛细管；试管；试管架；石棉网；烧杯（100ml）；酒精灯；铁三角架；刻度吸量管2ml、5ml各1支。 四、实验试剂 1、95%乙醇；石英砂；碳酸钙粉 2、推动剂：按石油醚：丙酮：苯（10：2：1）比例配制（体积比） 3、醋酸铜粉末；5%的稀盐酸 4、甲醇、KOH 五、实验步骤 1、叶绿体色素的提取 （1）取菠菜或其他植物新鲜叶片4~5片（2g左右），洗净，擦干，去掉中脉，剪碎，放入研钵中。 （2）研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉，加2~3ml 95%乙醇，研磨至糊状，再加10ml 95%
绿叶中色素的提取和分离实验改进、探索 武威二中何秀芳 一、实验在教材中所处的地位与作用 本实验是高中生物必修一《分子与细胞》中光合作用一节的内容，是高中生物教学中的一个重要实验，做好绿叶中色素的提取和分离实验，有助于学生理解光合色素的种类和作用、加强学生对光合作用的理解和掌握，培养学生提取、分离、观察叶绿体中色素的技能。 二、实验目的： 1、提取和分离绿叶中的色素。 2、探究绿叶中色素的种类。 三、实验原理： 1、提取色素：绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，则可用无水乙醇提取色素。 2、分离色素：绿叶中的色素不只一种，它们都能溶解在层析液中，而且在层析液中的溶解度不同：溶解度高→随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低→随层析液在滤纸上扩散得慢。则根据不同的扩散速度，把色素分离开。 四、原实验步骤
五、实验创新与改进之处 1、提取绿叶中的色素 不足之处：提取色素使用研磨法，加10ml无水乙醇，得到提取液色素含量不高，并且点样时容易印染（如图1），导致色素分离不明显；且实验中研磨之后还要过滤，步骤繁琐，所需器材较多。 改进：提取色素时加5ml无水乙醇即可，得到的提取液可不用过滤直接点样，这样步骤简单，节省时间并且不影响实验效果，只不过这一操作放到第二步较好。 2、制备滤纸条 改进之处：滤纸条剪去两角之后，剩下的长度在0.5CM左右为宜，底边左右两侧剪去两角时最好夹角一致这样色素在滤纸上扩散的才会更均匀。（如图2） 图1 图2 3、画滤液细线 不足之处：滤液细线要求“细、直、齐”，用毛细吸管加大了难度，毛细吸管很细易断，而且画滤液细线时，线画得较粗且不直，很难符合要求。 改进：直接用盖玻片蘸取提取液在铅笔线处拓印，这样干了再在原处拓印2~3次，降低难度，且色素含量较高。 4、层析液 成分：（1）石油醚、丙酮、苯（2）石油醚、二甲苯、苯、（如图3）（挥发性强，有刺激性气味，而且有毒） （3）汽油（如图4）
5.5生物分项小练习 光合作用的探索历程和色素的提取和分离 1. 下列关于生长在同一植株上绿色叶片和黄绿色叶片的叙述，错误．． 的是 A.两种叶片都能吸收蓝紫光 B.两种叶片中均含有类胡萝卜素 C.两种叶片的叶绿体中都含有叶绿素a D.黄绿色叶片在光反应中不会产生ATP 2. 阳光通过密林，林下不仅光弱，而且经上层叶片对光的吸收，使透到林下光的光波组成 也不同。以下四图（虚线表示林中空地的光谱，实线表示林下的光谱）中，能反映林下光的光波组成的是 3. 取生长状态相同两组番茄幼苗，分别置于表中（+表示有，－表示无）所列甲、乙两种 培养液中，在相同的适宜条件下培养，有关叙述不正确的是 A ．若干天后发现，两组番茄苗叶片颜色不同，甲组呈绿色，乙组呈黄色 B ．提取光合色素时未加碳酸钙，所得滤液颜色可能是黄色 C ．实验中，要不断向培养液中通入空气 D ．分离光合色素，乙组色素颜色都比甲组的浅 4. 下列有关生物学实验的叙述，不正确的是 A ．探索淀粉酶对淀粉和蔗糖作用的专一性时，不可用碘液替代斐林试剂进行鉴定；探索温度对酶活的影响实验中，一般不用过氧化氢与过氧化氢酶 B ．在色素的提取和分离实验中，用无水乙醇进行提取，叶绿素b 在层析液中的溶解度最低，扩散速度最慢 C ．用某一浓度的硝酸钾溶液处理洋葱鳞片叶表皮细胞，不一定观察到质壁分离及复原现象；探究酵母菌的呼吸方式可以用是否产生二氧化碳来予以确定 D ．在“观察洋葱根尖有丝分裂”和“观察细胞中RNA 和DNA 分布”的实验中加入盐酸的质量分数和目的都不相同 5. 为研究高光强对移栽幼苗光合色素的影响，某同学用乙醇提取叶绿体色素，用石油醚进 行纸层析，右图为滤纸层析的结果（I 、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、为色素条带）。下列叙述错误的是 A ．强光照导致了该植物叶绿素含量降低 B ．类胡萝卜素含量增加有利于该植物抵御强光照 C ．色素Ⅲ、Ⅳ吸收光谱的吸收峰波长不同 D ．画滤液线时，滤液在点样线上只能画一次
叶绿体中色素的提取和分离 一、实验目标 1、知识方面 （1）探究叶绿体中含有几种种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系 （2）了解纸层析法的原理。 2、能力方面 掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 3、情感态度与价值观方面 认识生物科学的价值，乐于学习生物科学，养成质疑、求实、创新及勇于实践的科学精神和科学态度 二、实验原理 1、色素提取的原理：叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中，故可用丙酮和无水乙醇提取色素。 2、色素分离的原理：叶绿体中的各种色素在层析液中的溶解度不同。溶解度大的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度快；溶解度小的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度慢。三、实验准备 实验材料：新鲜的绿叶（如新鲜菠菜叶片）。 实验仪器及用具：定性滤纸，研钵，玻璃滤斗，脱脂棉，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10mL），天平，试管，试管架，滴管，培养皿，三角瓶，烧杯 试验试剂：无水乙醇（或丙酮），层析液（CCl4），石英砂（SiO2）和碳酸钙（CaCO3） 四、实验步骤 1、叶绿体色素的提取 （1）取菠菜新鲜叶片5g，洗净，擦干，去掉中脉，剪碎，放入研钵中。 （2）向研钵中加入少许碳酸钙和二氧化硅，再加10mL无水乙醇，进行迅速、充分研磨（二氧化硅有助于研磨得充分，碳酸钙可防止研磨中色素被破坏）。 （3）将研磨液迅速倒入漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行过滤。将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。 2、制备滤纸条 用预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长10 cm、宽1cm的滤纸条，在滤纸条的一端剪去两角（防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快），并在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。 3、画滤液细线 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待滤液干后，再画二三次。 4、分离叶绿体中的色素
绿叶中色素的提取与分离实验 一、?实验原理 1、提取的原理：利用色素溶于有机溶剂无水乙醇而不溶于水的性质。 2、分离的原理：利用各种色素在层析液中的溶解度不同，随着层析液在滤纸上扩散的速度不同。（纸层析法） 二、目的要求 1、进行绿叶中色素的提取和分离； 2、探究绿叶中含有几种色素 三、材料用具 1、材料：新鲜的绿叶（如菠菜、韭菜的绿叶）。 2、用具：剪刀、药匙、研钵、量筒、漏斗、试管、棉塞、尼龙纱布、盖玻片、试管架、干燥的定性滤纸、铅笔、直尺、烧杯、穿针的细线、滴管。 3、试剂：无水乙醇、层析液、二氧化硅（石英沙）和碳酸钙。 四、方法步骤 1、提取绿叶中的色素 （1）取深绿色的植物叶片，洗净，抹干水分，并称取5g，剪成小块置于研钵中。 （2）在研钵中加入少许二氧化硅（SiO 2）、碳酸钙（CaCO 3 ），再加入6ml无水乙醇。 （3）迅速、充分地研磨成糊状。 （4）在漏斗基部放一小块单层尼龙纱布，将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤。将 滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。 剪 碎 绿 叶 加 二 氧 化 硅、碳酸钙，（迅速）研磨成糊状 再加入10ml无水乙醇 过滤收集滤液，棉塞封口 2、制备滤纸条（如下图） 3、画滤液细线（如下图） 滤纸条：长6cm，宽1cm，用盖玻片一端蘸取滤液，沿铅笔线画线， 距一端1cm处用铅笔和直尺等滤液细线风干后，再画下一道细线，重复 画一条细的横线。2—3次。画线要求：细、直、齐。 4、分离色素 将3ml层析液倒入小烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用培养皿盖盖住小烧杯。注意：不能让滤液细线接触到层析液。 5、观察与记录 观察烧杯中滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色和宽度。 将观察结果记录下来，并将橙黄色黄色蓝绿色黄绿色
叶绿体中色素的提取和分离实验专题 1.“绿叶中色素的提取与分离”实验 （1）色素提取液：①。 （2）色素分离方法：②法。 （3）色素分离原理：四种色素在层析液中③不同，溶解度高的扩散速度④。（4）分离结果：滤纸条上自上而下呈现四条色素带。 （5）该实验中化学物质的作用：二氧化硅的作用是使⑤；碳酸钙的作用是⑥。 2.叶绿体中色素的种类、含量及作用 含量最多的色素为⑨，含量最少的为⑩；在滤纸条上两者之间相距最远的为 ；光合作用中最有效的光为，最无效的光为。 习题 1、下列关于叶绿体中色素的提取和分离实验原理的叙述中，正确的是 A.加入少许二氧化硅可防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏 B.用无水乙醇将叶绿体中的色素进行分离 C.溶解度越高的色素随层析液在滤纸上扩散得越快 D.滤纸条上最上面的色素带呈黄绿色 2、色素提取和分离实验中，用于分离色素的正确装置是 3、下列关于叶绿体中色素的提取和分离实验的叙述，正确的是（） A．叶绿体色素提取液置于光源和三棱镜之间，连续光谱中只有红光区域变暗 B．用无水乙醇将叶绿体中的色素进行分离 C．在划出一条滤液细线后紧接着重复划线2～3 次 D．滤液细线不能触及层析液 4、下列有关“绿叶中色素的提取和分离”实验的叙述，错误的是（） A．研磨时加入CaCO3可防止叶绿素在酸性条件下分解 B．滤纸条的一段剪去两角的目的是使色素带比较整齐 C．画滤液细线时需迅速重复多画几次以增加色素的含量 D．滤纸条上相邻且距离最远的两条色素带呈橙黄色和黄色 5、提取和分离叶绿体中色素的正确顺序应该是（） A．进行纸层析→制取滤液→在滤纸条上画线→将实验材料研磨 B．制取滤液→进行纸层析→在滤纸条上画线→制取滤液→再画线