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CRISPR-Cas9细胞-动物KOKI实验基本流程-2

CRISPR-Cas9细胞-动物KOKI实验基本流程-2
CRISPR-Cas9细胞-动物KOKI实验基本流程-2

一、CRISPR-Cas9 细胞基因敲除敲入实验基本操作流程

1)设计sgRNA :

1.1、确定待敲除基因的靶位点

根据提供的物种、基因名称或者基因ID在NCBI或ENSEMBLE中进行查找。找到该基因CDS 区,分析相应的基因组结构,明确CDS的外显子部分。按照基因本身的性质,选择候选的待敲除位点,确定待敲除位点。对于蛋白编码基因,如果该蛋白具重要结构功能域,可考虑将基因敲除位点设计在编码该结构域的外显子;如果不能确定基因产物性质,可选择将待敲除位点放在起始密码子A TG后的外显子上。如果是microRNA,可以将待敲除位点设计在编码成熟microRNA的外显子或在编码成熟microRNA的外显子的5’和3’侧翼序列。

1.2、设计识别靶位点的一对DNA Oligos

确定待敲除位点后,选择23-至250bp的外显子序列输入到在线免费设计sgRNA的软件Input 框中(https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/),然后进行设计运算,软件会自动输出sgRNA序列(网站设计一般很慢或数据输出不完整,可使用我的内部软件,2天内输出全部结果,无物种限制)。一般地,基因特异的sgRNA模板序列为位于PAM序列(Protospacer AdjacentMotif)前间区序列邻近基序,这是一种见于crRNA分子的短核苷酸基序,可以被Cas9蛋白特异性识别并切割)的20个nt。而PAM序列的特征为NGG(其中N为任意核苷酸)。因此,sgRNA模板序列选择非常方便,即使没有软件,研究者也可手工进行选择。不过,在线软件可以给出该序列在基因组中存在相似序列的情况,即可能的脱靶位点。因此,利用在线软件可以选择脱靶机会小的序列作为sgRNA模板序列。根据选择的sgRNA模板序列,合成一对序列互补的DNA Oligos (同时设计检测目的基因的引物一起合成)。

1、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/

2、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/mpg/crispr_design/

3、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/~slin/cas9.html

4、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/E-CRISP/

5、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/

6、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/crispr/,Drosophila

7、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/index.jsp

8、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/casot/index.php

9、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/ZiFiT/ChoiceMenu.aspx

10、https://www.doczj.com/doc/1f1848457.html,/

根据酶切方式,选择合适接头,例如,PX458等质粒sgRNA靶点oligo如下(Bbs1酶切)5‘-CACCGNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN-3’

3‘- CNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN-CAAA-5‘

(1)对于sgRNA的长度,一般应为20 nt左右;

(2)对于sgRNA序列的碱基组成,可选3'末端含GG的sgRNA,同时sgRNA种子序列尽量避免以4个以上的T结尾,GC%含量最佳为40%~60%;

(3)sgRNA的种子序列与脱靶位点的匹配数尽可能低

(4)如果构建U6或T7启动子驱动sgRNA的表达载体,需考虑sgRNA的5' 碱基为G或GG,以提高其转录效率;

(5)对于sgRNA靶向基因的结合位置,如需造成基因移码突变,需尽量靠近基因编码区的

A TG下游,最好位于第一或第二外显子;

(6)检查sgRNA靶向结合位点基因组序列是否存在SNPs;

(7)如采用Cas9单切口酶,设计paired-gRNA需考虑成对sgRNA的间距;

(8)全基因脱靶效应分析,需考虑脱靶位点最大允许几个错配碱基数,建议最少5个碱基。重点考察种子序列和非种子序列碱基错配数,以及脱靶位点是否位于基因编码区等,另外还可考察是否存在碱基插入或缺失的脱靶位点。特异性的sgRNA最好存在较少的脱靶位点,不存在种子序列完全匹配的脱靶位点,不存在含有1和2个碱基错配的脱靶位点。实验前,首先应选择合适的软件进行sgRNA设计和全基因组脱靶效应评估,筛选2~3个活性可能高且脱靶效率最低的sgRNA。再通过实验验证,依据实验结果选择最优的sgRNA。

2)构建sgRNA表达载体:

将两条引物按照如下体系,退火后连接进sgRNA表达载体中,转化DH5a、Stbl3细菌,挑取单克隆测序鉴定。

Annealing and cloning procedure:

1. Anneal each pair of oligos:

1 μl oligo 1 (100 μM)

1 μl oligo

2 (100 μM)

8 μl H2O

10 μl total

Anneal in a thermocycler at 95℃ 5 min and then leave on the bench at RT to cool down for 1hr. Dilute the annealed oligo 1:250 (250 - fold).

2. Set up digestion reaction: (pX330/pX335载体和内切酶Bbs I为演示案例)

X μl pX330/pX335 or other backbone vector (at least 2 μg)

2 μl 10X NEBuffer 2.1

1 μl Bbs I (NEB) Use more if cutting more DNA

H2O to final V olume of 20 μl

Incubate the digestion reaction at 37o C for at least 4hr. Run ~200ng on agarose gel to ensure COMPLETE digestion. When digest is complete, heat inactivate (65°C for 20 min) or column purify linearized plasmid.

3. Set up ligation reaction:

X μl pX330/pX335 BbsI digested vector (100ng)

2 μl annealed oligo duplex from step 1 (1:250 dilution)

2 μl 10x DNA ligase buffer (make sure fresh, else A TP or DTT may be shot)

1 μl T4 ligase

Y μl H2O to 20 μl final volume

- Incubate the ligation reaction according to manufacturer recommendations.

4. Transformation with 1 - 2 ul of the final product into competent cells.

5. Pick colony and sequence verify with U6 sequencing primer (U6seqF: ACTA TCA TA TGCTTACCGTAAC)

3)质粒制备:用去内毒素试剂盒抽提质粒,测定浓度,琼脂糖电泳检测质粒质量。

sgRNA表达质粒

Cas9表达质粒(或二合一质粒)

4)培养细胞和转染

a)准备培养皿,培养细胞,细胞汇合度70%左右时进行转染。

b)按照Lipofectamine? 2000(或Dfector TM原代细胞转染试剂)转染说明书转染细胞,如果是分开表达的质粒(质粒质量比1:1)

c)转染48h或72h后提取细胞基因组DNA,提前设计好检测on-target或预测的off-target引物,PCR扩增目的片段。(引物在切口两端不对称设计,100:200或者200:300bp)

5)T7E1酶切法检测突变体

T7 核酸内切酶I 是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃,会导致酶活性降低。

a) PCR扩增出带有突变位点(CRISPR/Cas9的target site)DNA片段,长度约500bp,突变位点最好不位于PCR片段中央,这样将切割出两条大小不同的带。

b)突变体DNA与野生型DNA的PCR产物按如下体系进行混合,进行加热变性、退火复性处理。(如果测混合克隆,直接将PCR产物变性,退火复性处理)表1. T7E1酶切体系和反应条件

c)上述反应体系分别加入0.5ul T7E1酶,37℃反应30 min后,跑2%的琼脂糖凝胶电泳检测分析酶切结果。

图2-1. T7E1酶切法检测图

图2-2. T7E1酶切法检测图

6)测序评估:将PCR产物连接进T载体中,转化进DH5a细菌,随机挑取15-20个单菌落进行测序,评估目标片段被切割后碱基变化和切割效率。

图3. 单克隆测序

7)PAGE胶检测突变体:制备非变性PAGE胶,检测PCR产物,检测on-target 或预测的off-target sites位点(可选方法)。

图4. PAGE胶检测突变体模式图(REF. SCIENTIFIC REPORTS,2014)

8)稀释法筛单克隆

先从A1孔(细胞原液约1000个细胞/孔,数量根据细胞状态调整)至H1孔方向对半稀释,然后第一列再横向对半稀释,显微镜观察含单细胞的孔。

9)设计ssODN寡核苷酸(KI)

Designing an ssODN template for HR-mediated repair

5’ — (~60 - nt 5’ homology) NNN NGG (~60 - nt 3' homology) —3’

如果用donor质粒,同源臂理论上越长越好,比如KI 1K左右的基因,同源臂设计在1K bp左右。

二、利用CRISPR系统建立基因敲除动物品系实验过程:

2.1 确定待敲除基因的靶位点

2.2 设计识别靶位点的识别的一对DNA Oligo(引物)

2.3 构建可表达sgRNA的Cas9质粒

2.4 体外转录sgRNA 和Cas9 RNA

2.5 将sgRNA和Cas9 RNA直接注射入受精卵检测sgRNA活性

2.6 将有活性的sgRNA和Cas9 RNA直接注射入受精卵建立Founder

2.7 将Founder自交得到F1

2.8 F1自交得到F2

2.1 确定待敲除基因的靶位点

同前

2.2 设计识别靶位点的一对DNA Oligo(引物)

同前

2.3 构建可表达sgRNA的Cas9质粒

同前,选择带有T7启动子的质粒

2.4 体外转录sgRNA 和Cas9 RNA

使用特定引物,以上述质粒为模板,以高保值酶分别对Cas9和sgRNA

进行PCR扩增,循环数设为30个,20 ul反应体系。然后将产物纯化用

作体外转录模板。体外转录时,Cas9 RNA需要戴帽和加尾,而sgRNA

无需戴帽和加尾。

2.5 将sgRNA和Cas9 RNA直接注射入受精卵检测sgRNA活性

将体外转录的sgRNA和Cas9 RNA直接注射入斑马鱼受精卵中进行活

性检测;对于非斑马鱼基因,将含待敲除靶位点序列的DNA片段进

行扩增,然后和上述两种RNA共同注射入斑马鱼受精卵。待斑马鱼胚

胎发育至24小时,随机选取5个胚胎,提取基因组DNA,然后以此为

模板进行PCR扩增。然后按前面同样的方法进行sgRNA的活性验证。

2.6 将有活性的sgRNA和Cas9 RNA直接注射入受精卵建立Founder

将体外转录的有活性的sgRNA和Cas9 RNA直接注射入动物受精卵,

获得基因敲除的初建者。待初建者发育至可进行基因型鉴定时(斑马

鱼为4个星期),剪取部分尾鳍,提取基因组DNA,作为PCR模板,然

后按前面同样的方法进行基因突变鉴定。选取有突变的斑马鱼用作传

代实验。

4.7 将Founder自交得到F1

以斑马鱼为例,将阳性Founder自交,得到F1。待F1生长至4星期时,

进行剪取部分尾鳍,提取基因组DNA,作为PCR模板,然后按前面同

样的方法进行基因突变鉴定。选取有移码突变的斑马鱼用作建系。

8)F1自交得到F2

对于特定的基因,建立基因鉴定的酶切或PCR方法,通过将携带相

同基因型突变等位基因的F1斑马鱼自交,获得纯合突变体、杂合突变

体。如果纯合突变不致死,则可将纯合突变F2传代,从而建立纯合突

变体系。如果纯合突变致死,则可将杂合突变F2传代,从而建立杂合

突变体系。

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动物实验的基本操作

第一节实验动物的捉拿、固定和编号方法 在基础医学实验中,正确捉拿与固定动物,是实验工作的基础,也是实验顺利进行的保证。掌握正确捉拿、固定动物的目的就是防止实验者被动物咬伤抓伤,同时也是为了维持动物的正常生理活动,从而不影响实验观察结果。 一、实验动物的捉拿与固定方法 在基础医学实验中,最常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、蟾蜍、蛙、家兔和犬,现分别就其捉拿与固定方法依次予以介绍。 1. 小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起,放在较粗糙的台面或鼠笼上,在其向前爬行时,右手向后拉尾(图5-1),用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤,将其置于左手心中,拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢(图5-2),右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时,可将小鼠固定在金属或木制的固定器上(图5-11)。 图5-1 图5-2 2. 大鼠 方法基本与捉拿小鼠相同,但实验者事先应戴帆布防护手套。用右手将鼠尾抓住提起,放在较粗糙的台面或鼠笼上,抓住鼠尾向后轻拉,左手拇指和食指抓紧两耳和头颈部皮肤,余下三指紧捏鼠背部皮肤,如果大鼠后肢挣扎厉害,可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住,将整个鼠固定在左手中,右手进行操作。若进行手术或解剖,则应事先麻醉或处死,然后用棉线活结缚四肢,用棉线固定门齿,背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时,可将其固定在大鼠固定盒里,将鼠尾留在外面供实验操作。 3. 豚鼠 豚鼠具有胆小易惊的特性,因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是:先用右手掌迅速、轻轻地扣住豚鼠背部,抓住其肩中上方,以拇指和食指环握颈部,对于体型较大或怀孕的豚鼠,可用另一只手托住其臀部(图5-3、图5-4)。

兽医学实验指导书

动物科学学院 《兽医学》 实验指导书 主性编写 适用专业:动物科学(含营养方向) 贵州大学 二OO 七年八月

前言 兽医学的基本内容涉及兽医病理学、兽医药理学、兽医临床诊断学、家畜传染病学、家畜寄生虫学病、兽医内科学及兽医外产科学等学科。通过学习,让学生熟练掌握临床检查的基本方法,并运用于临床一般检查和系统检查,最终达到初步的临诊分析能力,对动物常见疾病能够作出诊断和防治。 兽医学是一门实践性很强的课程。为了使学生不仅在理论上学好本门课的基本知识,而且能确实掌握有关的基本技能和操作技术,并能应用于临诊实际,以保证教学质量,必须在动物保定、投药、一般检查、系统检查等方面加实践动手操作能力。通过本门课程相关实验的开展,要求学生能够认识常见病理标本和临床常用药物;能够熟练掌握动物(牛为例)的各种保定方法和投药、注射方法;能够运用临床基本检查法进行一般检查和系统检查;初步掌握公母畜阉割技术;掌握常见中毒(如有机磷中毒)毒理及解救措施;最终能够独自开展一些常见动物疾病的诊疗工作。 实验项目—病理标本观察及临床常用药物认识,要求学生对常见病理变化及临床常用药物有感性认识,能够分析常见疾病病理过程,选用合适药物进行动物疾病的防治;实验项目—动物保定、一般检查和系统检查、投药注射法,要求学生熟练掌握动物通用保定方法,理解一般检查和系统检查的内容及其临床意义,熟练操作各种注射技术。实验项目—公畜睾丸摘除术,要求学生能够以公猪、公犬为例,举一反三,熟练掌握公畜睾丸摘除技术。实验项目—母畜卵巢子宫切除术,要求学生能够以母猪、母犬为例,举一反三,熟练掌握母畜卵巢子宫切除技术。实验项目—中毒实验,要求学生能够以犬有机磷中毒为例,掌握常见中毒的机理及施救办法。实验项目—现场病例诊疗分析,主要考查学生综合运用知识的能力和分析能力。现场病例诊疗分析为综合性实验项目。 本指导书适用于动物科学本科专业的学生。在实验项目的编排上,做到循序渐进、由浅入深,重点突出培养学生的操作动手能力和综合运用知识的能力。

动物实验的基本操作技术

动物实验的基本操作技术 实验动物 实验动物(experimental animals)是指经过人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,应用于科研、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。这些个体具有较好的遗传均一性、对外来刺激的敏感性和实验再现性。 一、常用实验动物的种类和特点 (一)狗(dog)属于哺乳纲、食肉目、犬科动物。其嗅觉、视和听觉均很灵敏,对外界环境的适应能力强。消化、循环和神经系统均发达,且与人类很相似。适用于各类实验外科手术学的教学和临床科研工作,是复制休克、DIC、动脉粥样硬化等动物模型首选的动物之一,由于其价格较昂贵,教学实验中不如某些中小动物常用。 (二)家兔(rabbit) 属于哺乳纲、啮齿目、兔科、草食类动物。品种有:青紫蓝兔(livor blue rabbit)、中国白兔(china white rabbit)、新西兰白兔和大耳白兔(maximus ear white rabbit)等。具有性情温顺,对温度适应敏锐和便于静脉注射等特点,是教学实验中最常用的动物之一。可用于血压、呼吸、泌尿等多种实验,还可用于体温实验和热原的研究与鉴定。 (三)大白鼠(rat) 属哺乳纲、啮齿目、鼠科类动物。其性情凶猛、喜欢啃咬、繁殖周期短、抗病能力较强、心血管反应敏锐。用于水肿、休克、炎症、心功能不全、肾功能不全和应激反应等实验。大鼠不能呕吐,故不能做催吐实验。 (四)小白鼠(mouse) 属哺乳纲、啮齿目、鼠科类动物。具有繁殖周期短、产仔多、生长快、体型小、温顺易捉、易于饲养等特点。广泛应用于各种药物的毒理实验、药物筛选实验、生物药效学实验,以及癌症研究、营养学、遗传学、免疫性疾病研究等项实验。 (五)豚鼠(cavy) 属哺乳纲、啮齿目、豚鼠科类动物。又名天丝鼠、荷兰猪。其性情温顺,嗅觉和听觉较发达。对某些病毒反应敏锐,易引起变态反应。适用于药理学、营养学、各种传染病的实验研究。细菌、病毒诊断学研究、过敏、变态反应性实验研究和内耳及听神经疾病研究。也常用于离体心脏实验研究。 (六)蛙和蟾蜍(frog and toad ) 均属两栖纲、无尾目类动物。常用于教学实验。其心脏在离体后仍可有节律地跳动。常用于心脏生理、药理和病生实验。蛙舌与肠系膜是观察炎症和微循环变化的良好标本。此外,蛙类还可用于水肿和肾功能不全的实验研究。 二、常用实验动物的品系

常用实验动物

常用实验动物 1、小鼠 喜欢群居,怕热,高温容易中暑 雌雄性小鼠交配后10~12小时,在雌性小鼠阴道口会形成白色的阴道栓 主要解剖学特性 消化系统:食管内壁有角质化鳞状上皮,利于灌胃;有胆囊;胰腺分散,色淡红,似脂肪组织。 生殖系统:雌性小鼠为双子宫型,呈“Y”形,卵巢不予腹腔相通,无宫外孕。 骨髓为红骨髓,无黄骨髓,终身造血。 皮肤无汗腺。 小鼠常用品种、品系 1. 近交系小鼠 C3H:1975年从美国引进,野生色毛; ? C57BL/6:1975年从日本引进,黑色毛; ? BALB/c:Bagg1913年获得小鼠白化株,经近亲繁殖20代以上育成,毛色为白色; ? DBA:分为DBA/1和DBA/2两个品系,1977年由美国实验动物中心引进,毛色均为浅灰色。 2、封闭群小鼠 ①KM小鼠:我国使用量最大的远交种小鼠,白色,抗病、适应力强,繁殖、成活率高。 ②ICR:1973年由日本国立肿瘤研究所引入我国,白色,其显著特点是繁殖

力强。 ③LACA :1973年由英国实验动物中心引入我国,白色。其实是小鼠改名而成。 ④NIH :由美国国立卫生研究院培育,白色,繁殖力强,幼仔成活率高,雄性好斗 3、突变系 1、裸鼠:第11对染色体上的裸基因(nu)导致无毛裸体、无胸腺 2、SCID小鼠:第16对染色体上的Scid隐性基因突变基因导致T、B淋巴细胞联合免疫缺陷.外观与普通小鼠差别不大,被毛白色,体重发育正常 3、快速老化模型小鼠:4~6月龄以前与普通小鼠的生长一样,4~6月龄以后迅速出现老化症状。如心、肺、脑、皮肤等器官老化,出现骨质疏松和老化淀粉样变。侏儒症:比正常小鼠体型小,缺少生长素和促甲状腺素,用于内分泌研究。小鼠在医学、生物学的应用 1、重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重组产生一系列的子系,是遗传分析的重要依据,用作基因定位及其连锁关系的研究 2、提供自然的动物模型 2、大鼠染色体数2n=42 喜独居,喜啃咬,性情较凶猛、抗病力强,对新环境适应力强,但对环境刺激、炎症反应敏感。强烈噪音可引起食仔或抽搐;湿度低于40%易发生环尾巴症。行为表现多样,情绪反应敏感,易接受通过正负强化进行的多种感觉指令的训练雌性2.5月龄达到性成熟,具有产后发情、产后妊娠的特点。寿命2.5~3年。解剖学特征

动物医学

动物药学动物药学农林类学制:五年授予学位:农学学士1、培养目标:动物药学专业是根据当前社会市场需求新办的专业。本专业主要培养具备药学基本理论和基本技能,能够在药品配方、生产开发、药残检验、药品营销及药政管理等方面从事相关工作的高级科技人才。2、主干课程:动物解剖学、动物组织胚胎学、动物生理学、兽医微生物学、兽医病理生理学、兽医卫生检验学、有机化学、生物化学、药理学、药剂学、中药制剂学、生物制品学、药物分析、药品毒理学、药政管理学、中医学基础、基础医学、预防医学、临床医学等。3、毕业就业方向:毕业生毕业后可以到药品生产、检验、销售、研究开发等制药企业、保健公司、药检局、防疫站、现代养殖场、科研院所、行政管理部门,从事与药学有关的药品配方与生产、推广与开发、经营与管理、教学与科研等工作。还可以自主研发动物药品,申请专利,独立建场,独立创业。本专业毕业生还可以继续攻读基础兽医学学科的药理学与毒理学方向硕士学位。开设院校:江西农业大学南京农业大学东北农业大学黑龙江八一农垦大学华南农业大学湖南农业大学江苏畜牧兽医职业学院河南科技大学(农林专业) 河北农业大学(四年制本科) 动物医学

百科名片 是研究家畜、宠物、野生动物等所有动物疾病的预防、治疗的理论和技术的一门学问。从研究动物的肌肉骨骼、内脏位置开始,通过大量有趣的实验和丰富的临床实习,你将逐步了解到动物疾病种类及症状,它们生病的原因,如何预防家畜传染病等知识,掌握许多有效的治疗动物疾病的方法。运用动物医学的研究成果,能有效控制由于疾病发生给动物生产单位造成的严重经济损失,还能保障家庭宠物健康。动物医学把重点放在处理具体复杂病症的能力培养上,而不只是在背诵方剂的水平上。 目录 概述 授课内容 就业前景 学科要求主干学科 主要课程 主要实践性教学环节 主要实验 业务培养目标 业务培养要求

动物医学

动物医学—我的专业 引言;动物医学专业是以生物学为基础研究动物疾病的发生发展规律,并在此基础上对疾病进行诊断和防治的综合性学科,它的基本任务是有效地防治畜禽伴侣动物、医学实验动物及其他观赏动物疾病的发生。它是生物医学及社会预防医学的重要组成部分。随着社会经济和科学技术的发展,我国的动物医学研究已经从过去的以畜牧业发展服务为中心内容扩展到了公共卫生事业、社会预防医学、人类疾病动物模型、伴侣动物及观赏动物医疗保健及食品卫生、医药工业、环境保护等诸多领域,在生命科学的各个领域中发挥着越来越重要的作用。 摘要;我国动物医学在社会的不断发展下取得了突飞猛进的成就,现代兽医学的任务不仅在于保障畜牧业的发展,而且在于减少人畜共患疾病的兽医学危害,提高动物性食品(肉、蛋、乳和水产品等)的卫生质量和改善环境卫生等,直接为人类的健康服务。他的地位也在逐渐的增高,动物医学的研究范围已不再囿于畜牧业,而是像藤蔓植物一样伸张到了公共卫生事业、社会预防医学、伴侣动物及观赏动物医疗保健及食品卫生、环境保护、医药工业等诸多领域。而在此领域的就业前景也越来越好,就业方向也趋于多样性,毕业生在就业上有了更多的选择,动物医学正在一条高速通道上快速向前迈进。 关键词;动物医学专业概念就业方向前景 动物医学其基本任务是有效地防治畜禽、伴侣动物、医学实验动物及其他观赏动物疾病的发生。与其他医学类专业类似,动物医学首先要学习基础生物学和医学理论,然后通过大量解剖实验强化学生对理论的理解。 动物医学主干学科:基础兽医学、预防兽医学和临床兽医学。动物医学的主要课程为动物解剖与组织胚胎学、动物生理学、动物生物化学、兽医病理学、兽医药理学、兽医微生物学与免疫学、兽医内科学、兽医外科学、动物传染病学、动物寄生虫学与寄生虫病学、兽医产科学、兽医公共卫生学、中兽医学。主要实验为动物解剖学、动物组织学、动物生理学、动物生物化学、兽医药理学、兽医微生物学与免疫学、兽医病理学等实验。实践教学包括教学实习、生产实习、课程设计、毕业论文(毕业设计)、科研训练、生产劳动、社会实践等。 兽医临床诊治工作多半以价值昂贵的个体家畜或种畜,以及一些伴随动物、观赏动物等为主要对象,一般家畜均着重于全群防治。工厂式集约化养禽、养猪业的迅猛发展,加重了兽医对饲养场址选择、畜舍设计、饲料添加剂的配制、环境卫生管理免疫程序的制定和执行、疾病诊断和免疫水平监测等所负的责任,以

2015-动物实验基本操作

动物实验基本操作一(固定、性别判定、标识) 【实验目的】在做动物试验时,为确保给药、实验顺利进行,防止被动物咬伤、准确辨别动物性别、准确标识动物,要学会用正确方法捉拿实验动物、掌握辨别动物性别的方法以及掌握标识动物的方法。 【实验对象】SD大鼠,KM小鼠,雌雄各半,体重180-250g。 【实验器材和药品】 器材:鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套 药品:苦味酸80%~90%酒精饱和溶液、20%乌拉坦 【实验步骤】 一、小鼠的捉拿 1、徒手固定:用右手提起尾巴中部,放在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉,此时,小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面。左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤,再置小鼠于左手心,并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤,无名指压住小鼠尾根部,将其固定于手中。右手可行注射或其它操作。 2、固定器固定:尾静脉注射或给药时,将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当的容器(如烧杯),只露出尾巴,该类容器能够压住尾部,避免其活动。勿固定过紧造成窒息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时,先准备一个15-20cm的方木板,边缘钉入五颗钉子。将小鼠四肢分别用20-30cm的线绳捆绑,线的另一头分别绑在方木板的钉子上,并且在头部上颚切齿牵引一根线绳,也固定在钉子上,达到完全固定。 二、大鼠的捉拿

4-5周内的大鼠,方法同小鼠。周龄较大的,则:1、首先戴好防护手套。2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起,放在大鼠饲养盒的面罩上。3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部,稍加压力向头颈部滑行。4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤,其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤,完成抓取保定。三、性别判定 小鼠、大鼠性别判定 (1)幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是♀,外生殖器与肛门间隔长的是♂。 (2)成年动物可直接肉眼辨认,雄性有膨起的阴囊和阴茎,雌性动物有阴道口。四、动物的标记 小鼠的短期标记法:苦味酸80%~90%酒精饱和溶液(黄色),标出属于自己的编号【注意事项】 1、实验人员要有精神准备:掌握方法,胆大心细,做好防护。 2、动物兴奋的时候不要抓取,待其安静下来。 3、根据受试动物的给药部位或采血方法的不同,事先选择徒手固定还是固定器固定。 4、固定时把握好力度,过分用力会使小鼠颈椎脱臼或窒息死亡,若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者的手。 【思考题】 1.在固定实验动物时如何才能快、准、稳?

实验动物手术基本操作技术

实验动物手术基本操作技术 1. 动物实验手术常用的器械或设备 手术刀:准备不同型号的手术刀和手术刀柄。用于切开皮肤和脏器。 外科剪:准备直剪和弯剪。用于软组织剪断和组织分离。 手术镊:准备有齿镊和无齿镊。用于挟持皮肤、筋膜、肌腱等较坚硬组织或血管、神经、黏膜等脆弱组织。 止血钳:准备直、弯、蚊三种。用于夹住浅层血管止血或分离组织、牵引缝线等,或者夹住深部组织或内脏的血管出血点或者用于精细的止血和组织分离。 注射器:准备不同容量的注射器。用于补充麻醉或药物注射。 持针钳:用于缝合致密组织或深部组织。 缝合针:准备不同长短、粗细、弯度、针尖圆形或菱形的缝合针。 用于缝合不同的组织。 缝合线:准备丝线、肠线、金属线等不同种类缝合线。用于不同组织的缝合。 医用监护仪:准备呼吸、心跳、脉搏、血压及温度等医用监护仪。用于手术的操作监护。 医用气体:准备氧气、压缩空气、二氧化碳等医用气体。用于动物实验手术的应急需要。 2.动物实验手术器械的消毒方法 消毒对于防止手术伤口感染和保证伤口愈合极为重要,可以减少手术并发症和提高手术愈合效果,主要包括手术环境和手术器械的消毒。其中手术器械的消毒方法如下。 煮沸法:该法适合于金属、玻璃器械、缝合材料或橡皮手套等的灭菌,一般煮沸时间为20~30min。注意金属器械应在沸水时放入以防生锈,玻璃器械应在冷水时放入以防爆炸。 高压蒸汽灭菌法:该法适合于布类、敷料、手术衣帽及器械的灭菌, 灭菌条件为121OC、15min 。注意敷料包装应松紧适宜,待冷却后取出。 化学药品消毒法:主要的化学消毒液灭菌流程有三合液(甲醛2Oml+碳酸钠15g+石碳酸3g+蒸馏水100Oml)浸泡30min;新洁尔灭溶液(0.1%新洁尔灭100Oml+亚硝酸钠5g)浸泡1h;酒精溶液(70%酒精)浸泡1h;来苏水溶液(3~5%)浸泡1h;石炭酸(3%)浸泡1h;福尔马林(2%主要用于缝合线的消毒)浸泡30min;酒精溶液(75%主要用于缝合线的消毒)浸泡30min。 3.动物手术部位的消毒 实验动物手术部位处理一般包括除毛、皮肤消毒、手术部位隔离三个步骤。消毒顺序为:除毛→2%来苏水洗刷手术部位皮肤及周围皮肤→灭菌纱布擦干→70%酒精脱脂→5%碘酊擦抹→75%酒精脱碘→手术部位隔离→手术。 4. 手术人员手臂的消毒

常用实验动物的实验基本操作技术

常用实验动物的实验基本操作技术 第一节常用实验动物的生物学特征 1.蛙(或蟾蜍)的生物学特点是什么?主要用于哪些实验? 属于两栖变温动物,皮肤光滑湿润,有腺体无外鳞。蛙的心脏有两个心房,一个心室,心房与心室区分不明显,动静脉血液混合,有冬眠习性。生存环境比哺乳动物简单,在机能学实验中有多种实验选择该动物。如:①离体蛙心实验,常用来研究心脏的生理功能及药物对心脏活动的影响。②蛙的腓肠肌和坐骨神经可用于观察外周神经及其肌肉的功能,以及药物对周围神经、骨骼肌或神经肌肉接头的影响。③缝匠肌可用于记录终板电位。脊休克、脊髓反射、反射弧分析、肠系膜微循环等。在临床检验中,可用雄蛙作妊娠反应实验。 2.小白鼠的生物学特征是什么?主要用于哪些实验? 小白鼠性情温顺,易于捕捉,胆小怕惊,对外来刺激敏感。它胃容量小,不耐饥渴,随时采食。在机能学实验中常选用该动物。故适用于大量的实验动物,如:某些药物的筛选实验、半数致死量(LD50)测定、药效比较、毒性实验、妊娠期20天左右,常用于避孕药实验及抗癌药实验。 3.大白鼠的生物学特征是什么?主要用于哪些实验? 大白鼠性情温顺,行动迟缓,易于捕捉,但受惊吓或粗暴操作时,会紧张不安甚至攻击人。大鼠嗅觉发达,对外界刺激敏感,抵抗力较强。大鼠无胆囊,肾单位表浅,肝再生能力强。大鼠的血压反应比兔稳定,可用它作血压实验,也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。 4.豚鼠生物学特征是什么?主要用于哪些实验? 豚鼠性情温和,胆小,饲养管理方便,可群养。豚鼠耳蜗管发达,听觉灵敏,存在可见的普赖厄反射(听觉耳动反射),乳突部骨质薄弱。豚鼠对组织胺、人型结核杆菌很敏感。能耐受腹腔手术,使用于肾上腺机能的研究。其自身不能制造维生素C,是研究实验性坏血症的唯一动物。 5.家兔生物学特征是什么?主要用于哪些实验? 家兔属于草食性动物,性情温顺但群居性差,听觉、嗅觉十分灵敏,胆小易惊,具夜行

药理学实验动物的基本操作实验心得

药理学实验动物的基本操 作实验心得 Revised by Jack on December 14,2020

这次是第一次药理学实验,我们学习了很多实验动物的基本操作方法。在做药理学实验之前我们就有做过人体解剖生理学实验,解剖过蟾蜍,小白鼠和家兔,这次的药理学实验更是一次对所学知识的巩固和深化,教给了我们很多在生理学实验中并没有学过的知识点。在刚做实验时,黄老师就向我们介绍了3R原则,即减少,优化,替代。动物是我们人类的朋友,首先我们应该尊重动物。它们用生命来换取人类的健康,推动着医学的进步,人类医学的发展离不开动物实验,动物为我们人类的健康做出了牺牲,我们应遵循“3R”原则。黄老师还通过视频给我们重点介绍了常用麻醉药及用法,实验动物的捉拿、麻醉、固定、给药、取血和处死方法。让我学到了很多实用性很强的东西。 之后便是分组自己做实验了,首先陈老师向我们讲解了小白鼠的标记方法,用中性品红表示十位数,苦味酸表示个位数,加上空白对照,一共可以标记一百支小白鼠。标记顺序为先左后右,从上至下。用苦味酸作为标记物的一个原因是它不容易被分解和弄掉,不会因为小鼠的活动而消失。其次是因为其有苦味,避免了被其他老鼠舔掉。之后讲解了小鼠的性别鉴定方法,除了书上说的方法外还可通过观察小鼠的乳房辨别。关于大鼠和家兔的捉持方法,大鼠在捉持前最好对其进行安抚,避免其急躁而咬人,而家兔则不可用手扯其双耳将其拉起。在给药方法方面,灌胃法要注意从口角插入口腔,用灌胃针抵住舌头,插入不可过深,一般入喉即可。腹腔注射时最好将其倒转,头部朝下,这样不容易刺入内脏。是否插入腹腔的判断方法:推注完后,轻微回抽,若有负压将注射器的推杆拉回,则已入腹腔。皮下注射时是否的入皮下的判断方法上同,皮下无负压,回抽不拉回。尾静脉注射时注意静脉在尾的两侧,不在上下,注射时用手捏住尾巴前段有利于暴露血管。 家兔的灌胃用木质开口器,使用时要想办法将其舌头压在开口器下,因为舌头会阻碍导尿管插入口腔,可以另外使用棉签配合,一边用棉签压住舌头,一边将开口器插入口腔。耳缘静脉注射时要注意选择小号针头,因家兔耳静脉较小,插入时应仔细谨慎。

20080623144735 动物医学专业教学计划

畜牧兽医学院College of Animal Science and Veterinary Medicine 吉林大学畜牧兽医学院的历史最早可追溯到清政府创办的北洋马医学堂,始建于1904年。新中国成立后,于1953年,由朱德总司令题写校名,组建成为中国人民解放军兽医大学,1992年由原中央军委主席江泽民同志题写校名,更名为中国人民解放军农牧大学,1999年更名为中国人民解放军军需大学。2004年原军需大学转隶并入吉林大学后,改建为吉林大学畜牧兽医学院。作为中国现代兽医教育的摇篮,她开创了我国兽医本科和研究生教育的先河,培养了一大批高层次的专业技术人才,为我国畜牧兽医事业的发展做出了历史性贡献。2004年8月,我们隆重举办了中国现代兽医教育百年庆典,教育部原常务副部长张宝庆同志参加了庆典,并亲自为“中国现代兽医教育百年”纪念石揭幕。学院现设有6个教学单位(基础兽医学系、临床兽医学系、预防兽医学系、动物生物技术系、动物遗传育种与繁殖系、动物营养与饲料科学系)、6个科研单位(动物机能与形态学研究

室、动物营养代谢病与中毒病研究室,动物重要病原与疫病研究室、动物生物技术研究室、动物遗传繁育工程研究室和人兽共患病研究所)和3个实习、实验基地(动物疾病诊断与防治中心、动物繁育与饲料研发中心、动物科技实验教学中心)。学院现有在编及回聘教师共计57人,其中在编教师50人(教授9人,副教授10人,讲师11人,助教20人),回聘教师7人(教授4人,副教授3人);博士生导师11人(回聘2人),硕士生导师21人(回聘2人);12人在国家级学会及专业委员会任副理事长以上学术职务;先后培养2名中国工程院院士。学院现有动物医学、动物科学、生物技术3个本科专业;动物药学、宠物医学、实验动物学、兽医公共卫生学、动物生物技术、植物生物技术等 6个专业方向。动物医学专业是学院的品牌专业,兽医学科处于国内领先水平。学院拥有1个国家重点学科(预防兽医学);2个博士后科研工作流动站(兽医学、生物化学与分子生物学);7个博士学位授权学科(生物化学与分子生物学、基础兽医学、预防兽医

实验三 实验动物基本操作技术

实验三实验动物基本操作技术 学习目标 ●熟悉大鼠、小鼠及家兔的捉拿与固定;熟悉小鼠腹腔注射、家兔耳 缘静脉注射的方法与技术;熟悉动物的编号方法。 ●了解其他动物实验技术。 大多数药理实验是以动物为实验对象的,常用实验动物有青蛙与蟾蜍,小白鼠,大白鼠,豚鼠,家兔,猫,狗等,实验前了解其特点,掌握常用的动物实验基本操作技术,有利于学生动手能力的培养。本节重点介绍青蛙与蟾蜍,小白鼠,大白鼠,豚鼠,家兔的实验基本操作技术。 一、实验动物的编号 为了分组和辨别的方便,实验时常需对实验动物进行编号。常用的编号方法如下: 1.染料标记法 (1)常用染料:红色染料:5%中性红或品红液;黄色染料:3%~5%苦味酸溶液;咖啡色染料:2%硝酸银溶液;黑色染料:煤焦油的酒精溶液。 (2)标记规则:根据实验动物被毛颜色的不同选择不同化学药品涂染动物。 A.家兔等动物的标记方法:一般用毛笔蘸取不同颜色的染料溶液直接在动物背部涂写。若用硝酸银溶液涂写,则需在日光下暴露1min。 B.大鼠、小鼠的标记方法:通常在动物不同部位涂上有色斑点来表示不同的。如需要对数只实验动物编号,将小白鼠背部划分为前肢、腰部、后肢的左、中、

右部九个区域,从右到左标记。 2.穿耳打孔法用专门的打孔器在动物耳朵的不同部位打孔表示。 3.挂牌编号法此法常用于狗、猴、猫等大动物的编号。将牌固定于动物的颈圈或耳上。 4.人工针刺法先将动物被毛去除,用针在动物皮肤上刺出,再用酒精墨汁涂染即可。 二、实验动物的捉拿与固定方法 1.蛙和蟾蜍用左手握住动物,以食指按压其头部前端,拇指按压背部。 2.小白鼠捉拿法有二种,一种是用右手提起尾部,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后上方轻拉,此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙面,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并用小指和手掌尺侧夹持其尾根部固定手中;另一种抓法是只用左手,先用拇指和食指抓住小鼠尾部,再用手掌尺侧及小指夹住尾根,然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤。 3.大白鼠捉拿时,右手抓住鼠尾基部(因抓尾尖动物会扭动易使其尾部的皮肤脱落,影响实验的进行)将大鼠放在粗糙面上,左手戴上防护手套或用厚布盖住大鼠,抓住其整个身体并固定其头部以防咬伤。捉拿时勿用力过猛,勿捏其颈部,以免引起窒息。 4.豚鼠捉拿时以拇指和中指从豚鼠背部绕到腋下抓住豚鼠,另一只手托住其臀部。体重小者可用一只手捉拿,体重大者捉拿时宜用双手。

2015-动物实验基本操作

2015-动物实验基本操作动物实验 基本操作一(固定、性别判定、标 识)【实验目的】在做动物试验 时,为确保给药、实验顺利进 行,防止被动物咬伤、准确辨别动 物性别、准确标识动物,要学会 用正确方法捉拿实验动物、掌握 辨别动物性别的方法以及掌握标识 动物的方法。 【实验对象】SD大鼠,KM小鼠,雌雄各半,体 重180-250g。 【实验器材和药品】 器材:鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套 药品:苦味酸80%?90酒精饱和溶液、20%乌拉坦【实验步骤】 一、小鼠的捉拿 1、徒手固定:用右手提起尾巴中部,放在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉,此时,小鼠前肢

紧紧抓住粗糙表面。左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤,再置小鼠于左手心,并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤,无名指压住小鼠尾根部,将其固定于手中。右手可行注射或其它操作。 2、固定器固定:尾静脉注射或给药时,将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当的容器(如烧杯),只露出尾巴,该类容器能够压住尾部,避免其活动。勿固定过紧造成窒息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时,先准备一个15-20cm的方木板,边缘钉入五颗钉子。将小鼠四肢分别用20-30cm的线绳捆绑,线的另一头分别绑在方木板的钉子上,并且在头部上颚切齿牵引一根线绳,也固定在钉子上,达到完全固定。 二、大鼠的捉拿 4-5 周内的大鼠,方法同小鼠。周龄较大的,^V: 1、首先戴好防护手套。2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起,放在大鼠饲养盒的面罩上。3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部,稍加压力向头颈部滑行。4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤,其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤,完成抓取保定。 三、性别判定小鼠、大鼠性别判定 (1)幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是早,夕卜生殖器与肛门间隔长的是£。 (2)成年动物可直接肉眼辨认,雄性有膨起的阴囊和阴茎,雌性动物有阴道口。

动物医学培养方案

动物医学专业本科培养方案 一、培养目标 培养适应社会主义现代化建设和未来社会与科技发展需要,德智体美全面和谐与健康个性相统一,富有创新精神、实践能力和国际视野的动物医学高素质专门人才。 学生毕业后可在兽医行政部门、商检、海关、科研院所及企、事业单位从事兽医、防疫检疫、教学、科学研究、兽药生产经营、产品开发营销及兽医行政管理等方面工作;也可报考动物医学、动物科学、医学实验动物学、生物技术及其他相关专业的研究生。 二、业务培养要求 本专业学生主要学习动物疾病诊断和治疗的基本知识和基础理论,培养较强的动手能力、创新精神和现代法律意识,接受科学研究的思维和实验训练。 毕业生应具备以下几方面的知识和能力: 1、掌握一门外国语,能顺利查阅外文书刊和专业资料,具有一定的学术交流能力和语言综合应用能力。具有计算机软硬件基础知识,掌握一门以上的计算机编程语言,具有较强的计算机应用能力; 2、掌握动物机体解剖学构造及生理机能,掌握病理情况下动物机能形态变化的特征,致病因素、疾病发生、发展和转归的规律及预防、诊断、治疗的基本知识; 3、掌握动物疾病致病因素分析检验、药物使用、常规器械使用、治疗、动物检疫以及兽医公共卫生检验等基本技术;具备从事科学研究和实际工作的基本技能; 4、熟悉国家动物生产、兽医事业发展规划、动物防疫检疫、环境保护、动物进出口检疫及动物性食品卫生等有关方针、政策和法规; 5、了解生物科学、动物医学和自然科学中相关领域的发展动态。 三、主干学科和主要课程 主干学科:基础兽医学、临床兽医学、预防兽医学。 主要课程:动物解剖学、动物组织学与胚胎学、动物生物化学、动物生理学、兽医药理学、兽医微生物学、兽医免疫学、动物病理生理学、动物病理解剖学、兽医临床诊断学、兽医手术学、兽医传染病学、兽医寄生虫病学、兽医内科学、兽医外科学、兽医产科学、中兽医学、兽医公共卫生检验学等。 主要实践性教学环节:兽医微生物学、兽医药学、病理诊断、兽医药学、寄生虫病学、传染病学、公共卫生学、兽医诊疗等教学实习。 主要专业实验:动物机体解剖、组织病理变化、疾病诊断和治疗、公共卫生防疫、分子克隆与细胞技术等实验。 四、专业特色 重点研究动物疾病发生、发展,动物疾病的诊断和防控;环境与动物的保护,动物产品的进出口贸易以及动物药物和生物制品生产等。 五、修学年限 一般为五年 六、学位授予 农学学士 七、毕业合格标准 1、具有良好的思想和身体素质,符合学校规定的德育和体育标准。 2、通过培养方案规定的全部教学环节,总学分至少达到212学分,其中理论教学至少达到174学分,实践教学30学分,课外培养8学分。

常见动物实验中实验动物的选择

常见动物实验中实验动物的选择 一、药理学研究中的选择 1、临床药物代谢动物学研究:首选动物及性别,应尽量与药效量或毒理学研究所用动物一致。 药物动力学参数测定:最好使用犬、猴子等大动物,可在同一动物上多次采样。药物分布实验:大、小鼠较方便。药物排泄试验:一般首选大鼠,胆汁采集可在乙醚麻醉,胆管插管引流。 2、一般药理研究 主要药效作用以外广泛药理作用的研究。动物:小鼠、大鼠、猫、犬等性别不限。 3、作用于神经系统的药物研究: 促智药:成年大小鼠一般应用幼年、老年鼠。 镇静催眠药:成年小鼠便于分组。 抗痛药:成年大小鼠,以雄性为宜。 镇痛药:需在整体动物上进行,常用成年小鼠、兔,也可用豚鼠、犬等,雌雄兼用。 中枢性肌松药:小鼠、猫。 解热药:首选兔。兔:品种、年龄、室温、动物活动情况等不同,对发热反应速度和程度有明显影响,应按药典规定进行。 神经节传导阻滞影响药物:首选猫,最常用的是颈神经节,因其前后部易于区分。 4、心血管系统的药物研究: 抗心肌缺血药:狗、猫、兔、大小鼠。 抗心率失常药:豚鼠。小鼠不便操作。 降压药:狗、猫、大鼠。不宜用兔:外周循环对外界环境刺激极敏感,血压变化大。 治疗心功能不全药:狗、猫、豚鼠、兔。一般不用大鼠。 降血压药:大鼠、兔。模型动物:遗传性高脂血症WHHL兔。 抗动脉粥样硬化药:一般用兔、鹌鹑。 抗血小板聚集药、抗凝血药:大鼠、兔,个别也可用小鼠。 5、呼吸系统药物: 镇咳药筛选:首选豚鼠,对化学刺激或机械刺激都很敏感。猫:生理条件下很少咳嗽,可用于刺激喉上神经诱发咳嗽,在初筛基础上进一步肯定药物的镇咳作用。犬:适用于观察药物的镇咳作用持续时间。 兔:对化学、电刺激不敏感。大小鼠:实验可靠性差。 支气管扩张药:常用豚鼠:气道平滑肌对致痉剂药物反应敏感。大鼠:某些免疫和药理学特点与人类较近。 祛痰药:一般用雄性小鼠,兔、猫。 6、消化系统药物: 胃肠解痉药:大鼠、豚鼠、家兔、犬等,雌雄均可。 催吐、止吐:犬、猫、鸽等。兔、豚鼠、大鼠,无呕吐反射,故不选用。 7、泌尿系统药物: 利尿、抗利尿药:雄性大鼠或犬为好。 8、内分泌系统药物:

动物医学(宠物医学方向)专业人才培养方案

动物医学(宠物医学方向)专业 一、培养目标与具体要求 培养目标:培养21世纪社会政治、经济、文化、科技发展所需要的具备动物医学和宠物医学方面的基本理论、基本知识和基本技能的德、智、体、美、劳全面发展的高素质应用型人才。毕业后能在宠物行业、宠物医疗与保健领域从事犬、猫、观赏鱼、玩赏鸟等宠物的驯养繁育、医疗与保健、美容与护理、宠物营销、宠物用品等生产、研究开发和服务以及兽医业务部门和动物生产单位及有关部门从事兽医、动物防疫检疫、动物产品安全、环境与动物保护、教学和科学研究等方面工作。 具体要求:热爱社会主义祖国,拥护中国共产党的领导,具有优良的学风、求实创新精神、敬业精神;主要学习动物医学和宠物医学的基础理论、基本知识和基本技能,受到动物医学和宠物医学专业的各项基本技能训练,具备对宠物的饲养管理、驯养、保健护理、疾病诊疗及其他动物疫病检疫、预防、控制和消灭,常见病的诊疗以及从事畜牧业生产、管理、兽医公共卫生等工作的基本能力,能应用现代医疗技术、生物技术预防和控制伴侣动物及畜禽的群发性疾病和常见病,保护人类免受人畜共患病的危害,并能从事兽医学的科学研究和教学工作。 本专业毕业生应获得以下几方面的知识和能力: 1.具备扎实的数理化和生命科学等学科的基本理论和基础知识。掌握计算机与现代信息处理技术,具有一定的外国语应用能力。 2.掌握基础兽医学、预防兽医学、临床兽医学和宠物医学的基本理论、基本知识。 3.掌握现代先进的动物疾病诊疗技术,能科学分析疾病的病因、发病机制、预后及转归,能正确使用药物及常规医疗器械进行畜禽疾病诊治的技能。 4.掌握人畜共患病及畜禽常见传染病的防治知识和技能,熟悉国家兽医防疫检疫、兽医学发展规划、兽药生产、动物生产、环境保护、动物进出口检疫等有关方针政策、法律法规。 5.掌握宠物繁殖、美容及护理、营养与饲料、驯养、疾病常规及特殊诊治技术。 6.了解生物科学、兽医学的学科前沿和发展趋势,以及自然科学中相关技术的应用前景。 7.掌握科学文献检索、资料查询和数据处理的基本方法,具备一定的科学研究和实际工作能力。 8.有较强的调查研究与决策、组织与管理、语言与文字表达能力,具有独立获得知识、信息处理和创新的基本能力。 二、学期与学制 学期:每学年分为秋季、春季和夏季三个学期,夏季学期为选择性学期。 学制:标准学制四年,学习期限为3-6年。 三、毕业学分与授予学位: 毕业学分:180学分。 授予学位:农学学士。 四、专业核心课程与宠物医学专业方向的形成及课程设置 核心课程:动物解剖学、动物生理学、动物生物化学、兽医药理学、兽医病理学、兽医微生物学、动物传染病学、动物寄生虫学、兽医临床诊断学、家畜内科学、兽医外科学与手术学、家畜产科学等。 形成:动物医学本科专业学生在第三学期采取自愿选择原则,分流出部分学生组成宠物医学专业方向班级。

动物医学实验

姓名:张贺金学号:12100365 山羊的流产造模与诊治 一、实验目的 1、通过该实验了解并掌握疾病造模的方法以及理解疾病模型在医学教学与研究中的 意义。 2、了解并掌握地塞米松,氯前列醇,己烯雌酚对生殖系统的药理机制。 3、掌握先兆流产的诊断与治疗原则。 二、实验器材 1、器械:B-型超声诊断仪、酶标仪、体温计、听诊器、计时器、注射器、离心机 2、材料:怀孕母山羊三只、地塞米松磷酸注射液、氯前列醇注射液、己烯雌酚注射液、 催产素、耦合剂、石蜡油、抗生素、止血药、1%高锰酸钾溶液等 三、实验原理 1、氯前列醇致流产机理是溶解黄体,增强子宫平滑肌张力与收缩力。 2、己烯雌酚致流产机理是增强子宫平滑肌收缩力,还可使子宫颈口松弛。 3、地塞米松致流产机理是通过血胎屏障,导致胎盘功能不全,抑制胎盘功能正常发育, 造成胎儿畸形甚至死亡,并能够兴奋子宫平滑肌引起流产。 四、实验内容及方法 (一)病例模型的复制 1、致病前的检查 ○1检查受孕母羊的呼吸,心跳,体温,观察母羊的胎动情况,以及检查受孕母 羊血清中的孕酮雌二醇水平,以作为对照。 ○2利用B超检测胎儿的状况。 2、病例模型的复制 ○1地塞米松的诱导发病:于实验前2-5天给受孕母羊肌肉注射0.3~0.5mg/kg地 塞米松磷酸 ○2氯前列醇的诱导发病:于实验前的1-2天给受孕母羊注射0.2mg/kg的氯前列 醇注射液。 ○3雌激素诱导发病:于实验前2天给受孕母羊注射己烯雌酚2.5~5mg。 (二)诊断 1、常规检查:测定体温,呼吸,心跳以及观察怀孕母羊的精神状态,是否腹痛,阴 道是否流出粘液和血液。 2、超声检查:使用B超仪器检查胎儿状况。 3、内分泌学检查:检查测定山羊血清中的孕酮和雌二醇水平。 (三)治疗方案 1、保胎。通过B超仪可监测胎儿心跳和胎动,如果确定胎儿活着,立即进行保胎,常用方法为给母羊肌肉注射黄体酮15-25毫克,每天1次,连用2一3天。同时肌内

动物医学培养方案定稿版

动物医学培养方案 HUA system office room 【HUA16H-TTMS2A-HUAS8Q8-HUAH1688】

动物医学专业本科培养方案 一、培养目标 培养适应社会主义现代化建设和未来社会与科技发展需要,德智体美全面和谐与健康个性相统一,富有创新精神、实践能力和国际视野的动物医学高素质专门人才。 学生毕业后可在兽医行政部门、商检、海关、科研院所及企、事业单位从事兽医、防疫检疫、教学、科学研究、兽药生产经营、产品开发营销及兽医行政管理等方面工作;也可报考动物医学、动物科学、医学实验动物学、生物技术及其他相关专业的研究生。 二、业务培养要求 本专业学生主要学习动物疾病诊断和治疗的基本知识和基础理论,培养较强的动手能力、创新精神和现代法律意识,接受科学研究的思维和实验训练。 毕业生应具备以下几方面的知识和能力: 1、掌握一门外国语,能顺利查阅外文书刊和专业资料,具有一定的学术交流能力和语言综合应用能力。具有计算机软硬件基础知识,掌握一门以上的计算机编程语言,具有较强的计算机应用能力; 2、掌握动物机体解剖学构造及生理机能,掌握病理情况下动物机能形态变化的特征,致病因素、疾病发生、发展和转归的规律及预防、诊断、治疗的基本知识; 3、掌握动物疾病致病因素分析检验、药物使用、常规器械使用、治疗、动物检疫以及兽医公共卫生检验等基本技术;具备从事科学研究和实际工作的基本技能; 4、熟悉国家动物生产、兽医事业发展规划、动物防疫检疫、环境保护、动物进出口检疫及动物性食品卫生等有关方针、政策和法规; 5、了解生物科学、动物医学和自然科学中相关领域的发展动态。 三、主干学科和主要课程 主干学科:基础兽医学、临床兽医学、预防兽医学。 主要课程:动物解剖学、动物组织学与胚胎学、动物生物化学、动物生理学、兽医药理学、兽医微生物学、兽医免疫学、动物病理生理学、动物病理解剖学、兽医临床诊断学、兽医手术学、兽医传染病学、兽医寄生虫病学、兽医内科学、兽医外科学、兽医产科学、中兽医学、兽医公共卫生检验学等。 主要实践性教学环节:兽医微生物学、兽医药学、病理诊断、兽医药学、寄生虫病学、传染病学、公共卫生学、兽医诊疗等教学实习。 主要专业实验:动物机体解剖、组织病理变化、疾病诊断和治疗、公共卫生防疫、分子克隆与细胞技术等实验。 四、专业特色 重点研究动物疾病发生、发展,动物疾病的诊断和防控;环境与动物的保护,动物产品的进出口贸易以及动物药物和生物制品生产等。 五、修学年限 一般为五年

常用实验动物的种类与应用

常用实验动物的种类与应用 了解常用的实验动物的种类与应用范围,对组织实施实验研究有着不可低估的作用。当确立了实验研究题目及目标后,选择合适的实验动物对进行必要的研究是一项重要的工作。现将机能学实验教学中常用的动物用途简介如下: 一、家兔 家兔品种很多,目前我国实验用的家兔主要有以下三种。 1.中国本兔又称白家兔,毛色多为纯白,红眼睛,是我国长育的一种品种,成年兔体重1.5~3.5 kg。 2.青紫兰兔(山羊青兔或金基拉兔)毛色银灰色,成年兔体重2.5~3.5 kg. 3.大耳白兔(日本大耳白兔)毛色纯白,红眼睛,两耳长大,血管清晰,便于静脉注射和采血,成年兔体重4~5 kg. 家兔常用于机能学实验教学的各项实验中,如直接记录呼吸、血压、泌尿调节、减压神经放电、膈神经放电、观察药物对心脏的影响、了解心电图的变化、中枢神经兴奋药实验、药物对肠平滑肌的影响、药物中毒及解毒,复制许多病理过程和疾病,如水肿、炎症、电解质紊乱、酸碱平衡紊乱、失血、出血性休克、DIC、肺癌、动脉粥样硬化、高脂血症、心律失常、慢性肺心病、慢性肺动脉高血压、肺水肿、肝炎、胆管炎、阻塞性黄疸、肾性肾小球肾炎、急性肾功能衰竭。由于家兔体温变化比较敏感,也常用于研究发热、解热药和检查致热源等。 二、小白鼠: 小白鼠能用于药物的筛选,半数致死量的测定,复制许多病理过程和疾病,如水肿、炎症、缺氧、多种癌、肉瘤、白血病、多种传染病、慢性气管炎、心室纤颤等。 小白鼠做实验动物有以下特点: 1.小白鼠是实验室最常用的一种动物,价格低廉,便于大量繁殖,对动物实验同种、纯种、性别和年龄的要求,比较容易满足,生活条件也容易控制。因而只要符合实验要求,应尽量采用。它特别适用于需要大量动物的实验,容易满足统计学的要求。如药物的筛选,半数致死量的测定和安全实验,用于药物的效价比较及抗癌药的研究等。小白鼠也适用于避孕药的实验。 2.小白鼠对许多疾病有易感性,因而适用于研究下列疾病。如血吸虫病、疟疾、流感、脑炎等病。小白鼠的纯种品系很多,每系有其独特性,对某些疾病易感。如C1HA系,对癌瘤敏感,C5a系则抗癌;因此,纯系小白鼠广泛应用于各种肿瘤的研究。 3.当研究指标主要是观察组织学,特别是观察电镜下的结构时,应用小白鼠的器官较小,可节省人力、物力。如用于研究慢性气管炎时肺的变化。 4.小白鼠具有发达的神经系统,能应用于复制神经官能症模型。 5.小白鼠对外界环境适应性较差,不耐冷热,经不起饥饱,比较娇嫩;因此,做实验时要耐心细致,动作要轻,不然会干扰实验结果。 三、大白鼠: 大白鼠常用于复制许多病理过程和疾病,如水肿、炎症、缺氧、休克、DIC、胆固醇、肉芽肿、心肌梗塞、肝炎、肾性高血压、各种肿瘤等。 大白鼠做实验动物有以下特点: 1.大白鼠与小白鼠相似,便于大量繁殖,对动物实验同种、纯种、性别和年龄的要求,比较容易满足,生活条件也容易控制,适合于需要大量动物,而当小白鼠不能满足实验要求时。如:不对称亚硝酸胺口服和胃肠道外给药,能诱发大白鼠食道癌,而在小白鼠则很少引起食道癌;因而,在这种情况下,采用大白鼠较为适合。

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