血液凝集
血液分析仪产生测定误差的原因及对策
上海朗约士生物科技有限公司
随着检验技术的发展，自动化仪器的不断普及，在很多医院中采用了自动的分析仪器进行临床检验。为进一步提高检测结果的准确性和重复性，现将白细胞三分类的血液分析仪产生有关误差的原因进行讨论，并提出一些建议供有关人员参考。
应该指出，真正意义上的白细胞分类是指将白细胞分类成淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等。而白细胞三分类只是白细胞体积的分群，并不是白细胞分类。
一、WBC 假性增高
产生白细胞假性高值的原因包括：凝血及血小板凝集、由EDTA 造成的假性血小板减少、寒冷蛋白的凝集、红细胞溶血不良、幼红细胞的出现、大型血小板的出现等。
1．凝血及血小板凝集
标本产生凝血或发生血小板凝集的主要原因包括：
采血时混入组织液；
采血后混合不均匀；
抗凝剂的量偏少(或采血量太大)等
对于产生凝血或血小板凝集的标本，应重新采集血液进行
测定。
下图是一个在采血时混入组织液的检测实例，其中右面的直方图和测量值是重新采血后获得的正常结果。
WBC 直方图
PLT 直方图 2．由EDTA 造成的假性血小板减少 由EDTA 造成的假性血小板减少的原因较为复杂，在健康人群中也有一定的数量出现。其类型包括寒冷型和非寒冷型(IgG 型、IgM 型)。 对于这类情况建议在采血时采用其他抗凝剂：①10倍浓度的EDTA(10mg/mL 以上)；②EDTA+枸
橼酸(10:1)；③枸橼酸钠(3.13%、3.8%)；④MgSO 4(14%)。
3．寒冷蛋白的沉淀
造成冷凝集的蛋白有：Cryo-Protein 、Cryo-Globulin 、Cryo-Fibrinogen 等。
对于冷凝集的标本可以采取以下两种对策，以获得较准确的结果：①37℃加热测定；②离心后血浆部分用生理盐水置换后再行测定。
4．红细胞溶血不良
标本溶血不良的情况多发生在：①肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、胆道堵塞)；②异常血红蛋白症(Hgb-S 症、Hgb-C 症)；③高脂血症；④高胆固醇制剂输液治疗过程中。
以下是正常人和肝硬化病人红细胞在溶血前后的形态比较，可以清晰地看出肝硬化病人由于脂肪代 采血时混入组织液
测量值 WBC WL* 6.3×109/L WBC 5.4×109/L L YM% WL* 0.231 L YM% 0.190 MXD% WL* 0.118 MXD% 0.115 NEUT%WL* 0.651 NEUT% 0.695 PLT AG 271×109/L PLT 228×109/L PDW 12.0fL PDW 11.2fL P-LCR 0.232 P-LCR 0.213
谢异常，造成红细胞膜上有脂肪堆积，在加入溶血素后，红细胞较难被破坏。
正常人RBC 肝硬化病人RBC
加入溶血素后正常RBC 加入溶血素后肝硬化病人RBC
对于溶血不良的标本建议采取以下的对策：
标本稀释两倍后进行测定；
离心后血浆部分用生理盐水置换后再行测定。
5．幼稚红细胞
在脐带血、新生儿、溶血性贫血的标本中经常出现
幼稚红细胞。对于这类标本建议通过显微镜检查加以
确认。
6．大型血小板
由于出现大型血小板，造成白血病计数值假性增
高。对于此类标本可以采取以下的对策：
通过显微镜检查加以确认；
可以在Sysmex R 系列网织红细胞分析仪或
XE-2100血液分析仪等高档的检测仪器上对
白细胞进行精确的测定。
大型血小板
二、WBC 假性降低
出现白细胞假性降低的原因有：白细胞凝集。
这类标本的WBC 直方图中的右面有一个较低的峰
值。对于这类标本有以下建议可以参考：
对于寒冷凝集可加热到37℃后再测定；
对于与抗凝剂相关的凝集：可在不添加抗
凝剂的情况下马上稀释后测定；
离心后血浆部分用生理盐水置换，充分搅拌后测定。
三、RBC 假性增高
检验过程中并不存在真正造成RBC 假性增高的因素。在实
际操作中，存在有标本长期放置未充分搅拌而从底部吸取进样
的情况，造成红细胞计数值的假性增高。对此，应混合均匀后
再进行测定。
剧烈运动或中暑等极度脱水状态时，RBC 计数值也会出现
假性增高。对于这一点，应与真性多血症加以区别。
四、RBC 假性低值
幼稚红细胞
白细胞凝集
出现RBC假性低值的原因包括：
由冷凝集素引起的RBC假性低值；
由红细胞凝集引起的RBC假性低值；
由自身抗体引起的RBC假性低值；
未混合均匀从标本上部吸取样品。
1．红细胞的凝集
在此类标本的检测结果中，MCV、MCH、MCHC出现高值。对于这类标本，可以采取加热措施，使红细胞解离。由此测得的结果中，MCV、MCH、MCHC恢复正常。
以下示例是红细胞凝集标本在解离前后的测定值和直方图。
RBC RU* 2.23×10
12/L RBC 4.35×1012/L
HGB 144g/L HGB 145g/L
HCT RU* 0.249 HCT 0.435
MCV RU* 111.7fL MCV 100.0fL
MCH RU* 64.6pg MCH 33.3pg
MCHC RU* 578g/L MCHC 333g/L
RDW * 0.254 RDW 0.147
2．冷凝集素造成的红细胞凝集
对于这类标本，建议采取的对策是：加温到37℃后进行测定。
3．EDTA造成的红细胞凝集
建议采用其他抗凝剂进行采血。
4．自身免疫造成的红细胞凝
自身免疫造成的红细胞凝集集
采用离心后将血浆部分用生理盐水置换，充分搅拌后进行测定的方法。
五、HGB假性高值
1．乳糜标本(高脂血症)
由于乳糜标本所产生的吸光度增高，造成HGB浓度假性偏高。建议离心后血浆部分用稀释液置换后进行测定。
2．WBC异常高值标本
对于白血病病人的标本，由于超大量白细胞的影响，同样会造成吸光度的增高。在Sysmex全自动血液分析仪中，采用SLS-HGB方法测定血红蛋白，这种方法可以在白细胞20万/uL时仍不受干扰。
六、MCV假性高值
当出现下列情况时，会出现MCV假性增高的情况：
1．高血糖
血糖、、高尿素
高尿素、、高氮标本
糖尿病患者、尿毒症患者、使用高卡路里输液治疗的标本中经常会出现这种情况。由于红细胞中含有浓度较高的葡萄糖(或尿素)，加入稀释液后，由于渗透压的原因，稀释液中的水分渗入细胞中，细胞体积增大从而造成MCV值的上升。
可以采用以下两种方法：①用离心比容法进行测定；②标本稀释两倍，5分钟后再进行测定。
红细胞凝集
红细胞凝集的解离
2．小型淋巴细胞
在ALL 和CLL 病人的标本中出现大量小型淋巴细胞，将导致MCV 值的假性上升。
3．红细胞凝集 由于RBC 计数假性低值，出现MCV 升高的现象。
4．标本长时间放置
出现了红细胞球状化，使得MCV 值上升。
七、PLT 假性高值
PLT 假性高值一般由以下原因所引起：①破碎红细胞；②溶血性贫血；③寒冷蛋白沉淀。
1．对于破碎红细胞、破碎白细胞的标本，应采用显微镜检查加以确认，或使用Sysmex R 系列网织红
细胞分析仪或XE-2100血液分析仪等高档的检测仪器进行精确的测定。
2．对于寒冷蛋白引起PLT 假性增高，可加温到37℃后在再进行测定。
八、PLT 假性低值
1．血小板凝集
为获得准确结果，应重新采血测定。
2．血小板卫星现象
由EDTA 盐所引起，特别易附着于中性粒细胞的周围。
3．巨大血小板
在红细胞计数值上升的同时，也使血小板计数
值下降。对此，应采用显微镜检查加以确认，或使用Sysmex R 系列网织红细胞分析仪或XE-2100血液分析仪等高档的检测仪器进
行精确的测定。
4．对于由冷凝集素造成的血小板凝集对于由冷凝集素造成的血小板凝集，，可加温到37℃后再测定后再测定。。
九、结语
本文关于血液分析仪产生误差的原因及对策，并未涉及到有关试剂、质控文件、仪器校准、实验室管理制度等因素。为使检验的质量达到规定的水准，并使检验质量不断提高，建议个医疗机构应按照国家的有关规范、规定进行实验室建设。
对于自动化血液分析仪，任何品牌的仪器在细胞形态分析方面均无法替代显微镜检查。因此，当仪器出现警告信号时，应对标本进行显微镜检查。
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RBC 3.74x1012/l HGB 11.8g/dl HCT 38.5% MCV 102.9fl MCHC 30.6g/dl WBC 800x109
/l 血小板卫星现象
小型淋巴细胞