上海交通大学网络教育学院医学院分院
生物化学技术课程习题册答案
专业：检验技术层次：专升本
绪论
一、名词解释
1.生物化学技术：是研究生物体的化学组成、结构、功能以及在生命活动中化学物质的代
谢、调节控制等的实验方法。
2.盐溶：蛋白质、酶及其它们与其它物质的复合体在离子强度低的盐溶液中，其溶解度随
着盐溶液浓度的升高而增加，此现象称为“盐溶”。
3.盐析：当溶液中盐浓度不断上升，达到一定程度，蛋白质等的溶解度反而逐渐减小，并
先后从溶液中析出，称为“盐析”。
4.透析：利用溶液组分能否通过半透膜并由引起膜两边溶液的化学势能不同，而达到去除
溶液中的小分子物质。
5.超滤（反向渗透）：利用压力或离心力，迫使水和其他小的溶质分子通过半透膜，而蛋
白质不能透过半透膜仍留在膜上。
6.凝胶层析法（Gel Chromatography)：利用各种物质分子大小不同，在固定相上受到阻
滞程度不同而达到分离的一种层析方法。
二、单选题
1.凝胶层析不可应用于：（ B ）
A. 脱盐
B. 一步分离纯化生物大分子物质
C. 高分子溶液的浓缩
D. 测定高分子物质的分子量 E．分离分子大小不同的物质
2.核酸在紫外区有强吸收，其最大吸收值是在波长：（ C ）
A．206nm B．240nm C．260nm D．280nm E．304nm
3.对260nm波长的紫外有强吸收主要是因为（ E ）
A．核糖的环式结构 B.脱氧核糖的环式结构
C．嘌呤的双环结构 D.嘧啶的单环结构 E. 嘌呤和嘧啶环中的共轭双键
4.蛋白质在紫外区有强吸收，其最大吸收值是在波长：（ D ）
A．206nm B．240nm C．260nm D．280nm E．304nm
5.用紫外分光光度法测定蛋白质，因为蛋白质在紫外区有个最大吸收峰，其峰值波长是：D A．220nm B．245nm C．260nm D．280nm E．340nm
6.用吸收光谱法测量双链DNA的含量为：（ A ）
A.C（ug/ml）=A260×50×稀释倍数
B.C（ug/ml）=A260×40×稀释倍数
C.C（ug/ml）=A260×30×稀释倍数
D.C（ug/ml）=A260×20×稀释倍数
E.C（ug/ml）=A260×10×稀释倍数
7.用吸收光谱法测量单链DNA的含量为：（ B ）
A.C（ug/ml）=A260×50×稀释倍数
B.C（ug/ml）=A260×40×稀释倍数
C.C（ug/ml）=A260×30×稀释倍数
D.C（ug/ml）=A260×20×稀释倍数
E.C（ug/ml）=A260×10×稀释倍数
8.用吸收光谱法测量RNA的含量为：（ B ）
A.C（ug/ml）=A260×50×稀释倍数
B.C（ug/ml）=A260×40×稀释倍数
C.C（ug/ml）=A260×30×稀释倍数
D.C（ug/ml）=A260×20×稀释倍数
E.C（ug/ml）=A260×10×稀释倍数
9.以下哪一个比值说明DNA纯度较高：（ C ）
A.A260/A280=1.4
B.A260/A280=1.6
C.A260/A280=1.8
D.A260/A280=2.0
E.A260/A280=2.2
10.以下哪一个比值说明RNA纯度较高：（ D ）
A.A260/A280=1.4
B.A260/A280=1.6
C.A260/A280=1.8
D.A260/A280=2.0
E.A260/A280=2.2
11.某人提取DNA后，将DNA溶液稀释20倍，然后经紫外分光光度计检测结果为A260nm=0.44，A280nm=0.25，比色皿光径1cm，该DNA样品的浓度为：（D ）
A. 250μg/ml
B.264μg/ml
C.352μg/ml
D.440μg/ml
E.220μg/ml
12.以下哪一种方法不属于物理破碎细胞法：（ C ）
A．组织匀浆法 B．组织捣碎法 C．有机溶剂法 D．超声波法 E．反复冻融法
13.以下哪一种方法适用于破碎细菌：（ D ）
A．组织匀浆法 B．组织捣碎法 C．有机溶剂法 D．超声波法 E．反复冻融法
14.盐析时最常用的盐是：（ C ）
A．硫酸钾 B．硫酸钠 C．硫酸铵 D．硫酸镁 E．氯化钠
15.测定蛋白质分子量的方法有：（ C ）
A.不连续PAGE、琼脂糖凝胶电泳、醋纤薄膜电泳
B.IEF、聚酰胺薄膜双向层析、凝胶过滤
C.超滤、SDS-PAGE、凝胶过滤
D.超速离心、透析、超滤
E.SDS-PAGE、PAGE、IEF
16.以下哪一种方法根据蛋白质的分子大小不同来分离：（ D ）
A.离子交换层析
B.聚酰胺薄膜双向层析
C.亲和层析
D.凝胶层析
E.薄层层析
17.以下哪一种方法根据蛋白质的带电性质差异来分离：（ A ）
A.离子交换层析
B.聚酰胺薄膜双向层析
C.亲和层析
D.凝胶层析
E.薄层层析
18.要分离血浆蛋白取得某一单独组分，下列方法不能使用：（C ）
A.色谱法
B.电泳法
C.染料结合法
D.盐析法
E.层析法
三、问答题
1.什么是生物化学技术？
答：生物化学技术是研究生物体的化学组成、结构、功能以及在生命活动中化学物质的代谢、调节控制等的实验方法。
2.生物大分子的一般制备需要哪些步骤？
答：选择材料和预处理；组织细胞的破碎及细胞器的分离；生物大分子的分离纯化；浓缩、干燥和保存。
3.组织细胞破碎的方法有哪些？
答：物理方法：匀浆器；研钵；高速组织捣碎器；超声波；渗透压法；反复冻融法等。化学方法：有机溶剂（破坏细胞膜的脂质双分子层）。酶法：自溶法（蛋白酶、酯酶）；酶解法（溶菌酶破坏微生物细胞壁的 -1，4-糖苷键）。
4.请归纳生物大分子分离纯化的方法，并简述方法原理。
答：根据蛋白质溶解度不同：盐溶、盐析；
根据蛋白质分子大小不同：透析和超滤、凝胶层析；
根据蛋白质带电性不同：电泳、离子交换层析；
根据蛋白质配体特异性：亲和层析；
根据蛋白质分子密度不同：离心技术。
5.生物化学技术的特点有哪些？
答：条件温和；实验条件与机体内环境尽量符合。
6.什么是盐溶和盐析？
答：蛋白质、酶及其它们与其它物质的复合体在离子强度低的盐溶液中，其溶解度随着盐溶液浓度的升高而增加，此现象称为“盐溶”。
当溶液中盐浓度不断上升，达到一定程度，蛋白质等的溶解度反而逐渐减小，并先后从溶液中析出，称为“盐析”。
7.什么是透析和超滤？
答：透析：利用溶液组分能否通过半透膜并由引起膜两边溶液的化学势能不同，而达到去除溶液中的小分子物质。超滤（反向渗透）：利用压力或离心力，迫使水和其他小的溶质分子通过半透膜，而蛋白质不能透过半透膜仍留在膜上。
分光光度法原理
一、名词解释
1.光谱技术：根据物质具有吸收、发射或辐射能（散射)的特征而建立起来的一类分析方法.具有灵敏度高、测定简便、快速、不破坏试样等优点。
2.发射光谱分析法：根据物质受到热能或电能等物质激发所发射的特征光谱线进行定性及定量分析的一种方法。
3.吸收光谱分析法：根据溶液能吸收由光源发出的某些波长光后所形成的光谱,利用这种光谱鉴定物质的性质和含量的一种方法。
4.散射光谱分析法：测定光线通过溶液混悬颗粒后光吸收或光散射程度的一类定量方法。
5.吸光系数：吸光系数是吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度。
二、单选题
1.现测得某物质的透光度为10%，则其吸光度A为：（D ）
A.0.01
B.0.1
C.0.1
D.1
E.2
2.现测得某物质的透光率为1%，则其吸光度A为：（ E ）
A. 0.001
B.0.01
C. 0.2
D.1
E.2
3.波长200~400nm的电磁波为：（C ）
A.红外光
B.可见光
C.紫外光
D.无线电波
E.远红外
4.波长400~760nm的电磁波为：（B ）
A.红外光
B.可见光
C.紫外光
D.无线电波
E.远红外
5.下面关于吸光度（A）与透光度（T）的关系的叙述哪条是正确的？（ D ）
A．吸光度是透光度的倒数 B。吸光度是透光度的对数 C．吸光度是透光度平方的对数D。吸光度是透光度倒数的对数 E．吸光度是（1-T）的负对数
6.用同一个有色溶液，在同一波长处，分别使用光程为2mm、4mm、6mm、8mm的比色皿在同一台分光光度计上测定其吸光度，问所测结果将会是：（ C ）
A．用各种比色皿测得的吸光度相同 B。它们的吸光度与光程呈对数关系
C．它们的吸光度依次分别为：x、2x、3x、4x
D．它们的吸光度依次分别为：x、x/2、x/3、x/4 E。它们的吸光度之间没有一定规律7.调节分光光度计上狭缝的大小对单色光纯度的影响是：（ C ）
A．狭缝愈大光纯度愈大 B。狭缝愈小光纯度愈小 C。狭缝愈小光纯度愈大
D．狭缝的大小不影响光的纯度E。狭缝大小与光纯度成正比
8.下列两种方法同属于吸收光谱的是（ D ）
A．原子发射光谱和紫外吸收光谱 B．原子发射光谱和红外光谱
C．红外光谱和荧光分析法D．原子吸收光谱和可见光分光光度法
E．原子吸收光谱和透射比浊法
9.辐射能作用于粒子（原子、分子或离子）后, 粒子选择性地吸收某些频率的辐射能, 并从低能态（基态）跃迁至高能态（激发态）, 这种现象称为（ C ）
A．折射 B．发射 C．吸收 D．散射 E．透射
10.在检查一病人血红蛋白溶液时，在630nm波长处，出现一吸收峰，这表明该病人血液中何种血红蛋白增高？（C ）
A．氧合血红蛋白B．脱氧血红蛋白C．高铁血红蛋白
D．羰氧血红蛋白E．氰化高铁血红蛋白
三、问答题
1.什么是物质的吸光光谱？
答：溶液中的物质在光的照射下激发产生了对光吸收的效应.物质对光的吸收具有选择性(不同的物质具有不同的分子结构,不同物质对同一波长的单色光可有不同的吸光系数)，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。吸收光谱是物质的特征曲线。一种物质在一定条件下（pH、浓度、温度等）具有一定形状的吸收光谱曲线，可用于化合物的鉴定和结构分析
2.光吸收的基本原理和基本定律是什么？
答：光的吸收和发射时分子或原子是不连续的量子化能级,只有当照射光的能量与被照射物质粒子的基态和激发态能量差相当时才能发生吸收或发射.因此由于不同的物质具有不同的分子结构,不同物质电子跃迁时所需的能量差不同,其电子只能吸收与其相同的能量差并跃迁至一定能级,所以物质对光的吸收是选择性吸收。Lamber–Beer定律是说明吸光物质对单色光吸收的强弱与该物质的浓度和厚度间关系的定律,是光吸收的基本定律。
3.吸光度和吸光系数两者有何关系？
答：吸光系数是吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度。在给定条件（单色光波长、溶剂、温度）下，吸光系数是物质的特征性常数，只与该物质分子在基态和激发态之间的跃迁几率有关,是定性的依据，其值愈大测定灵敏度愈高。吸光系数常有两种表示方法:摩尔吸光系数ε即1摩尔浓度的溶液在厚度为1cm时吸光度.A = εcL。百分吸光系数 E1%即浓度为1%（w/v）的溶液在厚度为1cm时的吸光度.A = E1% cL。
电泳原理、醋酸纤维簿膜电泳（CAME）、琼脂糖凝胶电泳（AGE）
一、名词解释
1.电泳：带电粒子在直流电场中向着电性相反电极移动的现象。
2.电泳分析技术：利用电泳现象对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。
3.迁移率(Mobility)：带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。M=V/E=Q/6πrη。
4.等电点：蛋白质为两性电解质，兼有酸性基团(-COOH)及碱性基团(-NH2)。
当在特定的pH溶液中所带的正负电荷数恰好相等,即分子的净电荷为零,此时蛋白质在电场中不再移动,溶液的这一pH称为该蛋白质的等电点。
5.电渗：液体在电场中对于固体支持介质的相对移动，称电渗。
6.分子筛：在凝胶电泳中，支持介质的筛孔大小对待分离物质的电泳迁移速度有明显的影响，筛孔大泳动速度快；反之，则泳动速度慢。
7.凝胶电泳：是由琼脂、琼脂糖、淀粉胶或聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳。
二、单选题
1.在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中，下列哪种物质带负电荷量最多？（A ）
A.白蛋白
B.α1-球蛋白
C.α1-球蛋白
D.β-球蛋白
E.γ-球蛋白
2.在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中，下列哪种物质带负电荷量最少？（E ）
A.白蛋白
B.α1-球蛋白
C.α1-球蛋白
D.β-球蛋白
E.γ-球蛋白
3.在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中，下列哪种物质分子量最大？（E ）
A.白蛋白
B.α1-球蛋白
C.α1-球蛋白
D.β-球蛋白
E.γ-球蛋白
4.在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中，下列哪种物质分子量最小？（A ）
A.白蛋白
B.α1-球蛋白
C.α1-球蛋白
D.β-球蛋白
E.γ-球蛋白
5.在血清脂蛋白琼脂糖电泳中，下列哪种物质带负电荷量最多？（A ）
A.α-脂蛋白
B.前β-脂蛋白
C. β-脂蛋白
D. 乳糜微粒
6.在血清脂蛋白琼脂糖电泳中，下列哪种物质带负电荷量最少？（D ）
A.α-脂蛋白
B.前β-脂蛋白
C. β-脂蛋白
D. 乳糜微粒
7.在血清脂蛋白琼脂糖电泳中，下列哪种物质分子量最大？（D ）
A.α-脂蛋白
B.前β-脂蛋白
C. β-脂蛋白
D. 乳糜微粒
8.在血清脂蛋白琼脂糖电泳中，下列哪种物质分子量最小？（A ）
A.α-脂蛋白
B.前β-脂蛋白
C. β-脂蛋白
D. 乳糜微粒
9.有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3，电泳时欲使其中四种泳向正极，缓冲液的pH应该是（A ）
A. 7.0
B. 6.0
C. 8.6
D. 4.0
E.3.0
10.有一混合蛋白质溶液，其中蛋白质的pI分别为4.6、5.0，电泳时欲使它们泳向正极，缓冲液的pH应该是（A ）
A. 6.0
B. 5.0
C. 4.0
D.3.0
E.2.0
11.血清蛋白在pH8.6巴比妥缓冲液中电泳，如其他条件相同，不同的仅是电场强度不同，问在何种情况下蛋白质泳动最快？（B ）
A．5v/1cm B．20 v/1cm C．8 v/1cm D．15 v/1cm E．12 v/1cm
12.血红蛋白在不同离子强度的pH8.6巴比妥缓冲液中电泳，如其他条件相同，在何者中电泳速度最快？（A ）
A．0.02M巴比妥缓冲液B．0.03M巴比妥缓冲液C．0.04M巴比妥缓冲液
D．0.05M巴比妥缓冲液E．0.06M巴比妥缓冲液
13.现有一血清清蛋白和血红蛋白的混合液，欲用电泳法使其分离，问在何种pH值时分离最为有效（血清清蛋白等电点为4.9，血红蛋白的等电点为6.8）？（ E ）
A．pH8.6缓冲液B．pH6.5缓冲液C．pH4.9缓冲液
D．pH6.8缓冲液E．pH5.85缓冲液
三、问答题
1．什么是电泳？什么是电泳技术？
答：电泳即带电粒子在直流电场中向着电性相反电极移动的现象。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。
2．按照电泳原理不同可将电泳技术分哪几类？
答：自由界面电泳：在Ｕ形管中进行电泳，无支持介质,分离效果差,现已被淘汰。
区带电泳：各组分在支持介质中被分离成许多条明显的区带，如滤纸电泳、醋纤膜电泳。
稳态电泳：电泳迁移在一定时间后达到稳态,如等电聚焦和等速电泳。
3．电泳的基本原理是什么？什么是电泳的相对迁移率？
答：电泳的基本原理是：一个质点，如能解离或能吸附带电颗粒，在电场中便会向电性相反电极移动。不同的质点，由于带电性质、带电量、分子大小及形状的不同，在一定的电场强度下移动的方向和速度也不同，经一定时间电泳后彼此被分开。电泳的相对迁移率即带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。M=V/E=Q/6πrη。
4．影响电泳速度的因素有哪些？
答：影响电泳速度的因素有：电场强度；离子强度；缓冲液的pH；电渗；分子筛；待分离物质的性质。
5．醋酸纤维薄膜电泳的基本原理是什么？
答：CAME是以醋纤膜作支持物的一种区带电泳技术。在pH8.6的缓冲液中电泳时，血清蛋白质均带负电荷移向正极。由于血清中各蛋白组份的pI 不同而致带电荷量不等,加之分子大小和形状各异，因而电泳迁移率不同，彼此得以分离。电泳后,CAM经染色和漂洗,可清晰呈现5条区带。再经脱色、比色即可计算出血清各蛋白组份的相对百分数。
6．琼脂糖凝胶电泳的基本原理是什么？
答：血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以琼脂糖为载体,在pH8.6巴比妥缓冲液中电泳,由于各种脂蛋白所带的电荷及形状、大小不同而被分离。
聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、等电聚焦电泳（IEF）
一、名词解释
1.聚丙烯酰胺凝胶：是由单体丙烯酰胺和交联剂N，N’-亚甲基双丙烯酰胺通过自由基聚合而成的一种多孔三维网状结构。
2.凝胶总浓度：100ml凝胶溶液中，Acr和Bis的总浓度。凝胶总浓度越大，孔径越小，适合分离小分子物质。
3.交联度：交联剂的百分含量即Bis占Acr与Bis总和的百分比。
4.等电聚焦电泳：是一种利用具有pH梯度的支持介质来分离等点电不同的蛋白质的电泳技术。
二、单选题
1.本学期所学的电泳中，需进行预电泳的有：（C ）
A. PAGE
B. SDS-PAG
C. IEF
D. CAME
E.AGE
2.IEF电泳时（D ）
A.上极槽置酸液，下极槽置碱液
B.酸液置负极槽，碱液置正极槽
C.上极槽置碱液，下极槽置酸液
D.碱液置负极槽，酸液置正极槽
3.IEF电泳时（D ）
A.上槽置酸液，下槽置碱液
B.上槽置碱液，下槽置酸液
C.负极槽置酸液，正极槽置碱液
D.负极槽置碱液，正极槽置酸液
4.PAGE中，表示凝胶浓度的参数T值：（C ）
A. T越大，凝胶网孔越大，适用于分离大分子物质
B. T越小，凝胶网孔越小，适用于分离小分子物质
C. T越大，凝胶网孔越小，适用于分离小分子物质
D. T越小，凝胶网孔越小，适用于分离小分子物质
5.聚丙烯酰胺凝胶电泳比一般电泳的分辨率高，是因为具有一些特殊的效应，但除外：（B ）
A. 浓缩效应
B. 粘度效应
C. 电荷效应
D. 分子筛效应
6..在PAGE中，TEMED所起的作用为（A ）
A. 加速剂
B. 催化剂
C. 两者都是
D. 两者都不是
7.聚丙烯酰胺凝胶电泳不具有以下哪个效应？（D ）
A.浓缩效应
B.分子筛效应
C.电荷效应
D.粘质效应
8.不连续与连续聚丙烯酰胺凝胶电泳相比，哪种效应是其特有？（A ）
A.浓缩效应
B.分子筛效应
C.电荷效应
D.粘质效应
9.在PAGE中，AP所起的作用为（B ）
A. 加速剂
B. 催化剂
C. 两者都是
D. 两者都不是
10.过硫酸铵-TEMED系统常用于在制备：（C ）
A．淀粉凝胶B．琼脂糖凝胶C．聚丙烯酰胺凝胶D．琼脂凝胶E．淀粉板
11.在制备聚丙烯酰胺凝胶时，其交联剂是：（B ）
A．TEMED B．亚甲双丙烯酰胺C．丙烯酰胺D．核黄素E．过硫酸铵
12.聚丙烯酰胺凝胶的机械性能取决于：（D ）
A．成胶后环境的温度B．缓冲溶液的pH值C．催化剂的浓度
D．丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺总的浓度和交联度E．亚甲双丙烯酰胺的浓度
13.Ampholine在等电聚焦中的作用是：（D ）
A．制备凝胶的催化剂B．蛋白质的染料C．蛋白质稳定剂
D．两性电解质载体，在电泳中构成pH梯度E．蛋白质的变性剂
三、问答题
1．聚丙烯酰胺凝胶是由哪些物质如何聚合而成的？
答：PAG是由单体丙烯酰胺（acrylamide，Acr）和交联剂N，N’-亚甲基双丙烯酰胺（N，N，-methylene bisacrylamide，Bis）通过自由基聚合而成的一种多孔三维网状结构。通常采用化学聚合，催化剂是AP，加速剂是TEMED。
2．什么是凝胶总浓度和交联度？
答：凝胶总浓度即100ml凝胶溶液中，Acr和Bis的总浓度。凝胶总浓度越大，孔径越小，适合分离小分子物质。交联度即交联剂的百分含量即Bis占Acr与Bis总和的百分比。
3．不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理是什么？
答：不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳是由四个不连续，即凝胶层的不连续、缓冲液离子成分的不连续、pH值的不连续、电位梯度不连续，当电荷和分子大小不一的血清蛋白通过凝胶时，不连续的电泳由于浓缩效应、电荷效应和分子筛效应，各组分被精细的分离开来。
4．等电聚焦电泳的基本原理是什么？
答：在电泳介质中加入载体两性电解质，当通入直流电时，两性电解质即形成一个由正极到负极、pH逐渐增加的梯度。蛋白质进入这个环境时，不同的蛋白质带上不同性质和数量的电荷，向着一定的方向移动，当迁移到与其相同的等电点位置时不再移动，即被聚焦于一个狭窄的区带中，得以分离。
5．等电聚焦电泳的关键步骤是什么？
答：等电聚焦电泳的关键步骤是是由正极到负极、pH逐渐增加的梯度的形成。
层析原理、凝胶层析、亲和层析
一、名词解释
1.吸附层析法:固定相是固体吸附剂.利用吸附剂对不同组分吸附能力的不同加以分离的方法。
2.分配层析法:固定相是液体.利用各组分在两液相中分配系数的差别而分离。
3.凝胶层析法:固定相是一种多孔凝胶.利用各组分之间分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度也不同而获得分离。
4.亲和层析法:利用各种待分离组分生物学性质不同的一种层析,固定相只能与一种待分离组分有高度专一性的亲和结合能力,藉此和没有亲和力的其它组分分离。
5.保留值：是表示样品中各组分在层析柱中停留时间的长短或组分流出时所需流动相体积的大小。
6.分配系数：通常被用来叙述一种化合物在互不相溶的两个相中分配的状况。对于层析来说，分配系数定为分配平衡时该化合物在移动相中的浓度除以固定相中的浓度。
7.配基：在亲和层析中能被某一生物分子识别和可逆结合的生物专一性物质称作配基。
8.载体：在亲和层析中，与配基共价结合，使配基固相化的物质。
9.分子筛效应：当被分离物质流经凝胶柱时,因各组分的分子大小不同在凝胶中受到的阻值作用有差异,从而造成各组分在凝胶柱中的迁移速度不同得到分离。
10.洗脱体积Ve:指被分离物质通过凝胶柱所需洗脱液的体积。
二、单选题
1.在凝胶层析中，下列哪种说法是错误的？（B ）
A. Ve = Vo 故Kd = 0
B. Ve = Vi故Kd = 1
C. Ve = Vo + Vi故Kd = 1
D. 0 2.在凝胶层析中，下列哪种说法是正确的？（D ） A. Kd =1故Ve = V o B. Kd = 0故Ve = Vi C. Kd =0故Ve = V o + Vi D. 0 3.Bio-Gel P-100允许进入凝胶内部的最大分子量为（D ） A. 100 B. 1000 C. 10000 D. 100000 4.在亲和层析中，Kd越大则（B ） A. K L越大 B. K L越小 C. K L不变 D. K L不定 5.根据蛋白质分子的配基专一性进行分离的是：（D ） A.离子交换层析法 B.凝胶层析法 C.超速离心法 D.亲和层析法 6.用凝胶层析法分离甲乙两蛋白，甲蛋白Kd=0.25，乙蛋白Kd=0.75，下列叙述正确的是：A A.甲蛋白分子量大，先被洗脱 B.乙蛋白分子量大，先被洗脱 C.甲蛋白的洗脱体积大 D.甲蛋白在凝胶中受到的阻滞作用大 7.葡聚糖Sephadex G50每克凝胶吸水量为：（C ） A.0.05ml B.0.5ml C.5ml D.50ml 8.Sephadex G75每克干凝胶的吸水量为：（B ） A. 0.75ml B. 7.5ml C. 7.5L D. 75ml 9.凝胶过滤时通过凝胶柱慢的是：（B ） A. 大的溶质分子 B. 小的溶质分子 C. 形态不规则的物质 D. 带电荷小的物质 10.凝胶过滤时通过凝胶柱快的是：（A ） A.大的溶质分子 B.小的溶质分子 C.形态不规则的物质 D.带电荷少的物质 11.用Sephadex G50分离血红蛋白和鱼精蛋白时，鱼精蛋白的Ve减血红蛋白的Ve得该层析柱的：（A ） A. 内水体积 B.外水体积 C.凝胶总体积 D.凝胶干体积 12.以下哪种方法可测定蛋白质分子量：（C ） A.不连续PAGE B.IEF C.凝胶层析 D.超速离心 13.下面是对亲和层析的一些说法，你认为何者是对的？（C ） A．是吸附层析的另一种说法B．只是一种仅适用于蛋白质分离的方法 C．是一种对酶制备极有用的方法D．它对大分子缺少专一性 E．它的本质仍是分配层析 14.今将含有X，Y，Z混合物的样品，上样在Sephadex G-25凝胶柱，已知其洗脱顺序是Y 在先而Z最后下来，是否可认为：（D ） A．Z是糖类，亲和力大B．Z的溶解度最小C．Z的分子量最大 D．Z的分子量比X小E．Z的分子量比Y大 三、问答题 1．什么是层析？其两个基本相分别是什么？ 答：层析是一种利用混合物中各理化性质的不同,而使各组分借以分离的方法。其两个基本相分别是固定相、流动相。 2．什么是层析的分配系数？层析的基本原理是什么？ 答：分配系数是在一定条件下,物质在固定相和流动相间达到平衡时, 它在固定相和流动相中平均浓度的比值。层析的基本原理：不同物质在不同的两相即固定相和流动相中具有不同的分配系数,当这些物质随着流动相移动时,它们在两相中反复多次分配从而使各物质得到完全的分离。 3．什么是凝胶层析的基本原理？ 答：凝胶层析的基本原理：当被分离物质流经凝胶柱时,因各组分的分子大小不同在凝胶中受到的阻值作用有差异,从而造成各组分在凝胶柱中的迁移速度不同得到分离。 4．凝胶层析的分配系数如何表示？ 答：Kd =(Ve- V0)/ Vi。 5．亲和层析的基本原理是什么？ 答：亲和层析是利用生物大分子之间有专一的亲和力而达到分离纯化的层析方法。 6．什么是配基？什么是载体？ 答：在亲和层析中把能被某一生物大分子识别和可逆结合的生物专一性物质称为配基。载体是在亲和层析中，与配基共价结合，使配基固相化的物质。 离子交换层析、双向层析 一、名词解释 1.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相,以特定的含离子的溶液为流动相,利用离子交换剂对需要分离的各种离子结合力的差异,而将混合物中不同离子进行分离的层析技术。 2.离子交换剂: 在惰性载体上引入(以共价结合的方式)带有电荷的活性基团。 3.阳离子交换剂:载体上带有负电荷的功能基团,能结合溶液中的正电荷。 4.阴离子交换剂:载体上带有正电荷的功能基团,能结合溶液中的负电荷。 5.目数：离子交换树脂的颗粒直径大小，目数越大，颗粒直径越小。 6.活度：吸附剂的吸附能力常称为活度，用罗马数字Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ表示。 从Ⅰ至Ⅴ，活度逐渐减少，含水量逐渐增大。 二、单选题 1.用离子交换层析法分离一蛋白质混合物，所用阳离子交换剂为Dowex50，洗脱缓冲液pH 为6.0，请问第一个被洗脱下来的氨基酸是：（B ） A.赖氨酸（pI 9.74） B.天冬氨酸（pI 2.77） C.精氨酸（pI 10.76） D.缬氨酸（pI5.96） 2.离子交换层析的主要原理是利用物质的（C ） A.在两相的吸附力不同 B.在两相的溶解度不同 C.离子交换不同 D.分子大小不同 3.在离子交换层析中，分配系数与溶质的关系是决定于：（A ） A．离解状态B．极性大小C．溶解度D．分子大小 E．分子结构 4.有一氨基酸混合液，已知含赖氨酸（pI=9.74）苯丙氨酸（pI= 5.48），精氨酸（pI=10.76）及谷氨酸（pI=3.22），在阳离子交换柱上层析，以pH5.38缓冲液洗脱，推测其洗脱顺序是：（C ） A．精-赖-苯丙-谷B．苯丙-谷-赖-精C．谷-苯丙-赖-精 D．赖-精-苯丙-谷E．谷-赖-苯丙-精 5.氨基酸与茚三酮反应的终产物是紫蓝色至紫红色，其最大吸收波长是：（D ） A．420nm B．480nm C．540nm D．570nm M E．650nm 6.DNS-Cl可与氨基酸的哪个基团结合成DNS-氨基酸？（A ） A.α-氨基 B.β-氨基 C.γ-氨基 D.δ-氨基 7.下列不同活度的吸附剂中吸附能力最强的是：（A ） A．Ⅰ级B．Ⅱ级C．Ⅲ级D．Ⅳ级 8.下列不同活度的吸附剂中吸附能力最弱的是：（D ） A．Ⅰ级B．Ⅱ级C．Ⅲ级D．Ⅳ级 三、问答题 1．什么是离子交换层析？离子交换层析分离氨基酸的基本原理是什么？ 答：离子交换层析是以离子交换剂为固定相,以特定的含离子的溶液为流动相,利用离子交换剂对需要分离的各种离子结合力的差异,而将混合物中不同离子进行分离的层析技术。离子交换层析分离氨基酸的基本原理是依据离子交换剂对需要分离的各种氨基酸结合力的差异。 2．什么是阳离子交换剂？ 答：离子交换剂即在惰性载体上引入(以共价结合的方式)带有电荷的活性基团。阳离子交换剂即载体上带有负电荷的功能基团,能结合溶液中的正电荷。 3．什么是吸附层析，其基本原理是什么？ 答：以固体吸附剂为固定相,利用各组分在吸附剂表面吸附能力的差异而分离的层析法。吸附层析是利用溶质在吸附剂和溶剂中的可逆平衡,以及吸附剂对不同物质吸附力的不同而达到分离的目的。 4．简述薄层层析概念及原理。 答：薄层层析法是在平滑的玻板或在聚酰胺薄膜上将吸附剂铺在上面成薄层作为固定相,以溶剂(展开剂)作为流动相,把样品中各组分分离。使用最多的是吸附层析的原理，层析时将样品点在薄膜上,流动相沿着薄膜一定方向移动,当流经样品点时,待分离组分在两相间进行分配,由于不同组分有不同的分配系数,在薄膜上移动的速度也不同,一定时间后不同组分移动距离远近不一,从而得到分离。 5．DNS-氨基酸的双向聚酰胺簿膜层析原理是什么？ 答：二甲氨基萘磺酰氯简称DNS-Cl，可与氨基酸的游离氨基结合成DNS-氨基酸，混合氨基酸随流动相通过聚酰胺薄膜时,待分离氨基酸与聚酰胺薄膜形成氢键.由于各种氨基酸形成氢键的能力强弱不同,因此决定了各待分离氨基酸吸附力的差异,吸附力强展层速度较慢,吸附力弱展层速度较快。同时展层溶剂与待分离氨基酸在聚酰胺粒子表面竞争形成氢键,选择适当的展层溶剂,就可使待分离氨基酸在溶剂与聚酰胺薄膜表面之间分配系数产生最大的差异。一般讲,易溶于展层溶剂的物质所受到的动力作用大,展层速度快,反之速度就慢。这样通过各物质的吸附力和分配系数不同,使得被分离的物质在聚酰胺薄膜层析中的到分离。 组织DNA提取、聚合酶链反应（PCR） 一、名词解释 聚合酶链反应：聚合酶链(PCR)技术是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法.又称无细胞克隆技术.不通过活细胞，操作简便，在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增107～108倍，大大提高了DNA的得率。 二、单选题 1.某人提取DNA后，将DNA溶液稀释10倍，然后经紫外分光光度计检测结果为A260nm=0.44，A280nm=0.25，比色皿光径1cm，该DNA样品的浓度为：（D ） A. 250μg/ml B.132μg/ml C.176μg/ml D.220μg/ml 2.下列几种DNA分子的碱基组成比例各不相同，哪一种DNA的Tm较低？（D ） A. DNA中A-T占15% B. DNA中G-C占25% C. DNA中G-C占40% D. DNA中A-T占80% 3.PCR反应中不需要哪种物质？（C ） A．Mg2+ B.引物 C.RNA酶 D.DNA聚合酶 4. PCR反应中需要哪酶？（D ） A.蛋白酶 B.限制性内切酶 C.溶菌酶 D.Taq DNA聚合酶 5.为制备完整的人体细胞DNA，处理样品时不可（A ） A. 剧烈震荡 B. 将蛋白质除净 C. 将多糖除净 D. 加核酸酶抑制剂 6.提取DNA的原则除外的是：（B ） A.保证核酸一级结构完整性 B.保留所有核酸分子 C.核酸样品中不应存在有机溶剂和过高浓度的金属离子 D.蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度 7.下列关于DNA变性的叙述哪一项是正确的？（D ） A. 升高温度是变性的唯一原因 B. DNA热变性是一种渐进过程，无明显分界线 C. 核酸变性是DNA的独有现象，RNA无此现象 D. 凡引起DNA两股互补链间氢键断裂的因素，都可使其变性 8.组织DNA提取中，苯酚-氯仿抽提离心分三层，DNA位于：（A ） A.上层 B.中间层 C.下层 D.上下层均有 9.组织DNA提取中，苯酚-氯仿抽提离心分三层，变性蛋白质位于：（B ） A.上层 B.中间层 C.下层 D.上下层均有 10.有关DNA变性（C ） A．DNA链的断裂引起 B. 核苷酸之间磷酸二酯键的断裂 C.维持双螺旋稳定的氢键的断裂 D.DNA变性后分子量降低 E. 变性后使DNA一级结构改变 11.有关Tm值描述不正确的是（A ） A．加热使DNA变性时，在260nm吸收最高的值是Tm值 B. Tm时，核酸分子内50%的双螺旋结构破坏 C. 核酸分子的Tm值与其G+C与总碱基的百分比成正相关 D.典型的DNA变性曲线为S型 E. DNA变性是在一个很窄的范围内发生的 12.有关退火的描述正确的是（B ） A．热变性DNA经速冷即可复性 B. 热变性DNA经缓冷即可复性 C. DNA复性仅受温度影响 D. DNA复性受时间的影响 E. DNA复性仅受其浓度影响 13.DNA分子变性时（A ） A.G+C比例越高，Tm值也越高 B. A+T比例越高，Tm值也越高 C. Tm=（A+T）+（G+C） D. DNA分子越长，Tm值也越高 E. 双链DNA解链并断裂 14.组织DNA提取中，异戊醇的作用是：（C ） A.抑制DNase B.沉淀DNA C.减少液体表面张力 D.抑制RNase 三、问答题 1．组织DNA提取的基本原理是什么？ 答：DNA在生物组织中往往以核蛋白的形式存在于细胞核中，分子量颇大，故在提取DNA 时最根本的要求是保持DNA大分子的完整性及纯度，所以提取过程中要避免机械剪切引起DNA分子降解，另需注意对杂质及蛋白质的去除以及防止细胞内存在的DNA酶对DNA的酶解。组织DNA提取的基本原理是SDS存在的条件下，裂解细胞，使核蛋白解聚并使细胞内存在的DNA 酶失活，并通过用酚-氯仿多次抽提后，用乙醇沉淀得到纯化的DNA。 2．组织DNA提取用到哪些试剂，其主要作用是什么？ 答：裂解液：裂解细胞，抑制DNA酶活性；苯酚-氯仿：蛋白变性剂；氯仿-异戊醇：降低分子表面张力,减少抽提过程中泡沫的产生;同时异戊醇有助于分相；5mol/L NaCl：使DNA 沉淀；冰无水乙醇使DNA从DNA水溶液中沉淀出来；70%乙醇：洗涤DNA,去除残余的盐离子；TE缓冲液：溶解并保存DNA。 3．什么是PCR，其基本原理是什么？ 答：即聚合酶链反应（Polymerase chain reaction，PCR），是一种体外快速扩增特异性DNA 片段的技术。PCR反应体系中含有模板DNA、引物、Mg2+、4种脱氧核糖核苷酸（dNTP）和Taq DNA聚合酶，在高温94℃下变性，使双链模板解链为两条单链，再在退火温度下使引物与模板DNA形成部分双链DNA，然后在72℃下，通过Taq DNA 聚合酶使引物从5＇端向3＇端延伸，随着4种dNTP的掺入合成新的DNA互补链，完成第一轮变性、退火和延伸反应循环，由于每一轮循环扩增的产物可作为下一轮扩增反应的模板，因此，理论上每一轮循环可使DNA数量增加一倍。反复25~30次，特异DNA序列片段以指数方式可扩增106倍以上。 4．如何计算提取得到的DNA浓度？ 答：DNA浓度(μg/ml)= A260nm×50×稀释倍数×1/光径 DNA得量(μg) = DNA浓度×最终DNA原液毫升数。 5．组织DNA提取有哪些操作注意事项？ 答：尽量简化操作步骤,缩短提取过程,以减少各种有害因素对核酸的破坏；减少化学因素对核酸的降解,操作多在pH4～10条件下进行；减少物理因素对核酸的降解,主要是机械剪切力、高温对核酸的破坏；防止核酸的生物降解,主要是细胞内和外来的各种核酸酶对核酸的破坏。 《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参 与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是: 第一章蛋白质化学 一、选择题 1、下列氨基酸哪个含有吲哚环？ a、Met b、Phe c、Trp d、Val e、His 2、含有咪唑环的氨基酸是： a、Trp b、Tyr c、His d、Phe e、Arg 3、氨基酸在等电点时，应具有的特点是： a、不具正电荷ｂ、不具负电荷ｃ、溶解度最大ｄ、在电场中不泳动 4、氨基酸与蛋白质共有的性质是： ａ、胶体性质ｂ、沉淀反应ｃ、变性性质ｄ、两性性质ｅ、双缩脲反应 5、维持蛋白质三级结构主要靠： ａ、疏水相互作用ｂ、氢键ｃ、盐键ｄ、二硫键ｅ、范德华力 6、蛋白质变性是由于： ａ、氢键被破坏ｂ、肽键断裂ｃ、蛋白质降解 ｄ、水化层被破坏及电荷被中和ｅ、亚基的解聚 7、高级结构中包含的唯一共价键是： ａ、疏水键ｂ氢键ｃ、离子键ｄ、二硫键 8、八肽Gly-Tyr-Pro-Lys-Arg-Met-Ala-Phe用下述那种方式处理不产生任何更小的肽？ a、溴化氰 b、胰蛋白酶 c、胰凝乳蛋白酶 d、盐酸 9、在蛋白质的二级结构α-螺旋中，多少个氨基酸旋转一周？ a、0.15 b、5.4 c、10 d、3.6 二、填空题 １、天然氨基酸的结构通式是。 ２、具有紫外吸收能力的氨基酸有、、，其中以的吸收最强。 ３、盐溶作用是 。 盐析作用是 。 ４、维持蛋白质三级结构的作用力是，，和盐键。 ５、蛋白质的三种典型的二级结构是，，。 ６、Ｓａｎｇｅｒ反应的主要试剂是。 7、胰蛋白酶是一种酶，专一的水解肽链中 和的 形成的肽键。 8、溴化氢（HBr）是一种水解肽链肽键的化学试剂。 三、判断题 1、天然存在的氨基酸就是天然氨基酸。 2、氨基酸在中性水溶液中或在晶体状态时都以两性离子形式存在。 3、维系蛋白质二级结构的最重要的作用力是氢键。 4、所有蛋白质分子中氮元素的含量都是１６%。 5、利用盐浓度的不同可以提高或降低蛋白质的溶解度。 6、能使氨基酸净电荷为０时的ｐH值即ｐＩ值就一定是真正的中性ｐH值即ｐH＝７。 7、由于各种天然氨基酸都有２８０ｎｍ的光吸收特性，据此可以作为紫外吸收法定性 检测蛋白质的依据。 8、氨基酸的等电点可以由其分子上解离基团的解离常数来确定。 9、一般变性的蛋白质都产生沉淀现象，而沉淀的蛋白质一定是变性蛋白质。 10、某氨基酸的等电点为６.５，当它在ｐＨ＝４.８的缓冲液中 121.胆固醇在体内的主要代谢去路是（C） A.转变成胆固醇酯 B.转变为维生素D3 C.合成胆汁酸 D.合成类固醇激素 E.转变为二氢胆固醇 125.肝细胞内脂肪合成后的主要去向是（C） A. C. E. A.胆A.激酶 136.高密度脂蛋白的主要功能是（D） A.转运外源性脂肪 B.转运内源性脂肪 C.转运胆固醇 D.逆转胆固醇 E.转运游离脂肪酸 138.家族性高胆固醇血症纯合子的原发性代谢障碍是（C） A.缺乏载脂蛋白B B.由VLDL生成LDL增加 C.细胞膜LDL受体功能缺陷 D.肝脏HMG-CoA还原酶活性增加 E.脂酰胆固醇脂酰转移酶（ACAT）活性降低 139.下列哪种磷脂含有胆碱（B） A.脑磷脂 B.卵磷脂 C.心磷脂 D.磷脂酸 E.脑苷脂 ）A. D. A. E. A. 谢 A. 216.直接参与胆固醇合成的物质是（ACE） A.乙酰CoA B.丙二酰CoA C.ATP D.NADH E.NADPH 217.胆固醇在体内可以转变为（BDE） A.维生素D2 B.睾酮 C.胆红素 D.醛固酮 E.鹅胆酸220.合成甘油磷脂共同需要的原料（ABE） A.甘油 B.脂肪酸 C.胆碱 D.乙醇胺 E.磷酸盐 222.脂蛋白的结构是（ABCDE） A.脂蛋白呈球状颗粒 B.脂蛋白具有亲水表面和疏水核心 C.载脂蛋白位于表面 D.CM、VLDL主要以甘油三酯为核心 E.LDL、HDL主要的胆固醇酯为核心 过淋巴系统进入血液循环。 230、写出胆固醇合成的基本原料及关键酶？胆固醇在体内可的转变成哪些物质？ 答：胆固醇合成的基本原料是乙酰CoA、NADPH和ATP等，限速酶是HMG-CoA还原酶，胆固醇在体内可以转变为胆汁酸、类固醇激素和维生素D3。231、简述血脂的来源和去路？ 答：来源：食物脂类的消化吸收；体内自身合成的 2、 （β-[及 胰岛素抑制HSL活性及肉碱脂酰转移酶工的活性，增加乙酰CoA羧化酶的活性，故能促进脂肪合成，抑制脂肪分解及脂肪酸的氧化。 29、乙酰CoA可进入以下代谢途径： 答：①进入三羧酸循环氧化分解为和O，产生大量 一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键就是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物就是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1,3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中,首先合成的就是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式就是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环,下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH与FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶就是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶就是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶 10、DNA二级结构模型就是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的就是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物就是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号就是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质就是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式就是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质就是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制,下列哪项就是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都就是连续进行的 生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸 生物化学试题库及其答案——糖类化学 一、填空题 1.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和 ________________试剂。 3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是 ________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________。 4.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 5.鉴别糖的普通方法为________________试验。 6.蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物。 7.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。 8.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。 9.多糖的构象大致可分为________________、________________、 ________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是 ________________。 二、是非题 1.[ ]果糖是左旋的，因此它属于L-构型。 2.[ ]从热力学上讲,葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳 定。 3.[ ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性。 4.[ ]同一种单糖的α-型和β-型是对映体。 5.[ ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。 6.[ ]D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖,后者存在于自然界。 7.[ ]D-葡萄糖,D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。 8.[ ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 9.[ ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。 10.[ ]肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸,而且还有D-型氨基酸。 三、选择题 第一章蛋白质结构与功能 一、单项选择题 1．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸?（） A．半胱氨酸B．蛋氨酸C．胱氨酸D．丝氨酸E．组氨酸 2．下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的? （） A.胶体性质 B.两性性质 C.沉淀反应 D.变性性质 E.双缩脲反应 3．下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的? （） A.蛋白质分子的净电荷为零时的pH值是它的等电点 B.大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出 C.由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点 D.蛋白质不具有两性解离性质 E.以上各项均不正确 4．在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链? （） A.凯氏定氮法 B.双缩尿反应 C.紫外吸收法 D.茚三酮法 E.以上都不是 5．尿素不可用于破坏（） A.肽键 B. 二硫键C、盐键 D.离子键 E.氢键 6．蛋白质变性会出现下列哪种现象（） A．分子量改变B．溶解度降低C．粘度下降D．不对称程度降低E．无双缩脲反应7．关于肽键与肽，正确的是（） A．肽键具有部分双键性质B．是核酸分子中的基本结构键C．含三个肽键的肽称为三肽 D．多肽经水解下来的氨基酸称氨基酸残基E．蛋白质的肽键也称为寡肽链 8．蛋白质分子中维持一级结构的主要化学键是（） A．肽键B．二硫键C．酯键D．氢键E．疏水键 9．下列不含极性链的氨基酸是（） A．酪氨酸B．苏氨酸C．亮氨酸D．半胱氨酸E．丝氨酸 10．能够参与合成蛋白质的氨基酸的构型为（） A．除甘氨酸外均为L系B．除丝氨酸外均为L系C．均只含a—氨基D．旋光性均为左旋E．以上说法均不对 11．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：（） A．天然蛋白质分子均有的这种结构B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 12．蛋白质的电泳行为是因为：（） A．碱性B．酸性C．中性D．电荷E．亲水性 13．蛋白质分子结构的特征元素是：（） 生物膜 五、问答题 1．正常生物膜中，脂质分子以什么的结构和状态存在？ 答：.脂质分子以脂双层结构存在，其状态为液晶态。 2．流动镶嵌模型的要点是什么？ 答：.蛋白质和脂质分子都有流动性，膜具有二侧不对称性，蛋白质附在膜表面或嵌入膜内部 3．外周蛋白和嵌入蛋白在提取性质上有那些不同？现代生物膜的结构要点是什么？ 4．什么是生物膜的相变？生物膜可以几种状态存在？ 5．什么是液晶相？它有何特点？ 6．影响生物膜相变的因素有那些？他们是如何对生物膜的相变影响的？ 7．物质的跨膜运输有那些主要类型？各种类型的要点是什么？ 1.脂质分子以脂双层结构存在，其状态为液晶态。 2.蛋白质和脂质分子都有流动性，膜具有二侧不对称性，蛋白质附在膜表面或嵌入膜内部 3.由于外周蛋白与膜以极性键结合，所以可以有普通的方法予以提取；由于嵌入蛋白与膜通过非极性键结合，所以只能用特殊的方法予以提取。 现代生物膜结构要点：脂双层是生物膜的骨架；蛋白质以外周蛋白和嵌入蛋白两种方式与膜结合；膜脂和膜蛋白在结构和功能上都具有二侧不对称性；膜具有一定的流动性；膜组分之间有相互作用。 4.生物膜从一种状态变为另一种状态的变化过程为生物膜的相变，一般指液晶相与晶胶相之间的变化。生物膜可以三种状态存在，即：晶胶相、液晶相和液相。 5.生物膜既有液态的流动性，又有晶体的有序性的状态称为液晶相。其特点为：头部有序，尾部无序，短程有序，长程无序，有序的流动，流动的有序。 6.影响生物膜相变的因素及其作用为：A、脂肪酸链的长度，其长度越长，膜的相变温度越高；B、脂肪酸链的不饱和度，其不饱和度越高，膜的相变温度越低；C、固醇类，他们可使液晶相存在温度范围变宽；D、蛋白质，其影响与固醇类相似。 7.有两种运输类型，即主动运输和被动运输，被动运输又分为简单扩散和帮助扩散两种。简单扩散运输方 向为从高浓度向低浓度，不需载体和能量；帮助扩散运输方向同上，需要载体，但不需能量；主动运输运 输方向为从低浓度向高浓度，需要载体和能量。 生物氧化与氧化磷酸化 一、选择题 1．生物氧化的底物是： A、无机离子 B、蛋白质 C、核酸 D、小分子有机物 2．除了哪一种化合物外，下列化合物都含有高能键？ A、磷酸烯醇式丙酮酸 B、磷酸肌酸 C、ADP D、G-6-P E、1,3-二磷酸甘油酸 3．下列哪一种氧化还原体系的氧化还原电位最大？ A、延胡羧酸→丙酮酸 B、CoQ(氧化型) →CoQ(还原型) C、Cyta Fe2+→Cyta Fe3+ D、Cytb Fe3+→Cytb Fe2+ E、NAD+→NADH 4．呼吸链的电子传递体中，有一组分不是蛋白质而是脂质，这就是： 生物化学试题及答案（6） 第六章生物氧化 【测试题】 一、名词解释 1.生物氧化 2.呼吸链 3.氧化磷酸化 4. P/O 比值 5.解偶联剂 6.高能化合物 7.细胞色素 8.混合功能氧化酶 二、填空题 9．琥珀酸呼吸链的组成成分有____、____、____、____、____。 10．在NADH 氧化呼吸链中，氧化磷酸化偶联部位分别是____、____、____，此三处释放的能量均超过____KJ。11．胞液中的NADH+H+通过____和____两种穿梭机制进入线粒体，并可进入____氧化呼吸链或____氧化呼 吸链，可分别产生____分子ATP 或____分子ATP。 12．ATP 生成的主要方式有____和____。 13．体内可消除过氧化氢的酶有____、____和____。 14．胞液中α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是____，线粒体中α-磷酸甘油脱氢酶的辅基是____。 15．铁硫簇主要有____和____两种组成形式，通过其中的铁原子与铁硫蛋白中的____相连接。 16．呼吸链中未参与形成复合体的两种游离成分是____和____。 17．FMN 或FAD 作为递氢体，其发挥功能的结构是____。 18．参与呼吸链构成的细胞色素有____、____、____、____、____、____。 19．呼吸链中含有铜原子的细胞色素是____。 20．构成呼吸链的四种复合体中，具有质子泵作用的是____、____、____。 21．ATP 合酶由____和____两部分组成，具有质子通道功能的是____，____具有催化生成ATP 的作用。 22．呼吸链抑制剂中，____、____、____可与复合体Ⅰ结合，____、____可抑制复合体Ⅲ，可抑制细胞色素c 氧化酶的物质有____、____、____。 23．因辅基不同，存在于胞液中SOD 为____，存在于线粒体中的SOD 为____，两者均可消除体内产生的 ____。 24．微粒体中的氧化酶类主要有____和____。 蛋白质 一、填空R （1）氨基酸的结构通式为H2N-C-COOH 。 （2）组成蛋白质分子的碱性氨基酸有赖氨酸、组氨酸、精氨酸，酸性氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸。 （3）氨基酸的等电点pI是指氨基酸所带净电荷为零时溶液的pH值。 （4）蛋白质的常见结构有α-螺旋β-折叠β-转角和无规卷曲。 （5）SDS-PAGE纯化分离蛋白质是根据各种蛋白质分子量大小不同。 （6）氨基酸在等电点时主要以两性离子形式存在，在pH>pI时的溶液中，大部分以__阴_离子形式存在，在pH 生物化学试题（1） 第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释：1．氨基酸 2．肽 3．肽键 4．肽键平面 5．蛋白质一级结构 6．α-螺旋 7．模序 8．次级键 9．结构域 10．亚基 11．协同效应 12．蛋白质等电点 13．蛋白质的变性 14．蛋白质的沉淀 15．电泳 16．透析 17．层析 18．沉降系数 19．双缩脲反应 20．谷胱甘肽 二、填空题 21．在各种蛋白质分子中，含量比较相近的元素是____，测得某蛋白质样品含氮量为15.2克，该样品白质含量应为____克。 22．组成蛋白质的基本单位是____，它们的结构均为____，它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23．由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基，可以在酸性溶液中带____电荷，在碱性溶液中带____电荷，因此，氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时，氨基酸成为____离子，此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24．决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构，该结构是指多肽链中____的排列顺序。25．蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象，多肽链的折叠盘绕是以____为基础的，常见的二级结构形式包括____，____，____和____。 26．维持蛋白质二级结构的化学键是____，它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27．稳定蛋白质三级结构的次级键包括____，____，____和____等。 28．构成蛋白质的氨基酸有____种，除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____，____，____。酸性氨基酸有____，____。 29．电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下，蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的，还和蛋白质的____及____有一定关系。 30．蛋白质在pI时以____离子的形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以____离子形式存在，在pH 121.胆固醇在体内的主要代谢去路是（ C ） A.转变成胆固醇酯 B.转变为维生素D3 C.合成胆汁酸 D.合成类固醇激素 E.转变为二氢胆固醇 125.肝细胞内脂肪合成后的主要去向是（ C ） A.被肝细胞氧化分解而使肝细胞获得能量 B.在肝细胞内水解 C.在肝细胞内合成VLDL并分泌入血 D.在肝内储存 E.转变为其它物质127.乳糜微粒中含量最多的组分是（ C ） A.脂肪酸 B.甘油三酯 C.磷脂酰胆碱 D.蛋白质 E.胆固醇129.载脂蛋白不具备的下列哪种功能（ C ） A.稳定脂蛋白结构 B.激活肝外脂蛋白脂肪酶 C.激活激素敏感性脂肪酶 D.激活卵磷脂胆固醇脂酰转移酶 E.激活肝脂肪酶 131.血浆脂蛋白中转运外源性脂肪的是（ A ） （内源） 136.高密度脂蛋白的主要功能是（ D ） A.转运外源性脂肪 B.转运内源性脂肪 C.转运胆固醇 D.逆转胆固醇 E.转运游离脂肪酸 138.家族性高胆固醇血症纯合子的原发性代谢障碍是（ C ） A.缺乏载脂蛋白B B.由VLDL生成LDL增加 C.细胞膜LDL受体功能缺陷 D.肝脏HMG-CoA还原酶活性增加 E.脂酰胆固醇脂酰转移酶（ACAT）活性降低 139.下列哪种磷脂含有胆碱（ B ） A.脑磷脂 B.卵磷脂 C.心磷脂 D.磷脂酸 E.脑苷脂 二、多项选择题 203.下列物质中与脂肪消化吸收有关的是（ A D E ） A.胰脂酶 B.脂蛋白脂肪酶 C.激素敏感性脂肪酶 D.辅脂酶 E.胆酸 204.脂解激素是（ A B D E ） A.肾上腺素 B.胰高血糖素 C.胰岛素 D.促甲状腺素 E.甲状腺素 206.必需脂肪酸包括（ C D E ） A.油酸 B.软油酸 C.亚油酸 D.亚麻酸 E.花生四烯酸208.脂肪酸氧化产生乙酰CoA，不参与下列哪些代谢（ A E ） A.合成葡萄糖 B.再合成脂肪酸 C.合成酮体 D.合成胆固醇 E.参与鸟氨酸循环 216.直接参与胆固醇合成的物质是（ A C E ） A.乙酰CoA B.丙二酰CoA 217.胆固醇在体内可以转变为（ B D E ） A.维生素D2 B.睾酮 C.胆红素 D.醛固酮 E.鹅胆酸220.合成甘油磷脂共同需要的原料（ A B E ） A.甘油 B.脂肪酸 C.胆碱 D.乙醇胺 E.磷酸盐222.脂蛋白的结构是（ A B C D E ） A.脂蛋白呈球状颗粒 B.脂蛋白具有亲水表面和疏水核心 C.载脂蛋白位于表面、VLDL主要以甘油三酯为核心、HDL主要的胆固醇酯为核心 生物化学试题及答案（4） 第四章糖代谢 【测试题】 一、名词解释 1．糖酵解（glycolysis）11．糖原累积症 2．糖的有氧氧化12．糖酵解途径 3．磷酸戊糖途径13．血糖(blood sugar) 4．糖异生（glyconoegenesis)14．高血糖(hyperglycemin) 5．糖原的合成与分解15．低血糖(hypoglycemin) 6．三羧酸循环（krebs循环）16．肾糖阈 7．巴斯德效应(Pastuer效应) 17．糖尿病 8．丙酮酸羧化支路18．低血糖休克 9．乳酸循环（coris循环）19．活性葡萄糖 10．三碳途径20．底物循环 二、填空题 21．葡萄糖在体内主要分解代谢途径有、和。 22．糖酵解反应的进行亚细胞定位是在，最终产物为。 23．糖酵解途径中仅有的脱氢反应是在酶催化下完成的，受氢体是。两个 底物水平磷酸化反应分别由酶和酶催化。 24．肝糖原酵解的关键酶分别是、和丙酮酸激酶。 25．6—磷酸果糖激酶—1最强的变构激活剂是，是由6—磷酸果糖激酶—2催化生成，该酶是一双功能酶同时具有和两种活性。 26．1分子葡萄糖经糖酵解生成分子ATP，净生成分子A TP，其主要生理意义在于。 27．由于成熟红细胞没有，完全依赖供给能量。 28．丙酮酸脱氢酶复合体含有维生素、、、和。 29．三羧酸循环是由与缩合成柠檬酸开始，每循环一次有次脱氢、 - 次脱羧和次底物水平磷酸化，共生成分子A TP。 30．在三羧酸循环中催化氧化脱羧的酶分别是和。 31．糖有氧氧化反应的进行亚细胞定位是和。1分子葡萄糖氧化成CO2和H2O净生成或分子ATP。 32．6—磷酸果糖激酶—1有两个A TP结合位点，一是ATP作为底物结合，另一是与ATP亲和能力较低，需较高浓度A TP才能与之结合。 33．人体主要通过途径，为核酸的生物合成提供。 34．糖原合成与分解的关键酶分别是和。在糖原分解代谢时肝主要受的调控，而肌肉主要受的调控。 35．因肝脏含有酶，故能使糖原分解成葡萄糖，而肌肉中缺乏此酶，故肌糖原分解增强时，生成增多。 36．糖异生主要器官是，其次是。 37．糖异生的主要原料为、和。 38．糖异生过程中的关键酶分别是、、和。 39．调节血糖最主要的激素分别是和。 40．在饥饿状态下，维持血糖浓度恒定的主要代谢途径是。 三、选择题 生物化学试题及答案 绪论 一．名词解释 1.生物化学 2.生物大分子 蛋白质 一、名词解释 1、等电点 2、等离子点 3、肽平面 4、蛋白质一级结构 5、蛋白质二级结构 6、超二级结构 7、结构域 8、蛋白质三级结构 9、蛋白质四级结构 10、亚基 11、寡聚蛋白 12、蛋白质变性 13、蛋白质沉淀 14、蛋白质盐析 15、蛋白质盐溶 16、简单蛋白质 17、结合蛋白质 18、必需氨基酸 19、同源蛋白质 二、填空题 1、某蛋白质样品中的氮含量为0.40g，那么此样品中约含蛋白 g。 2、蛋白质水解会导致产物发生消旋。 3、蛋白质的基本化学单位是，其构象的基本单位是。 4、芳香族氨基酸包括、和。 5、常见的蛋白质氨基酸按极性可分为、、和。 6、氨基酸处在pH大于其pI的溶液时，分子带净电，在电场中向极游动。 7、蛋白质的最大吸收峰波长为。 8、构成蛋白质的氨基酸除外，均含有手性α-碳原子。 9、天然蛋白质氨基酸的构型绝大多数为。 10、在近紫外区只有、、和具有吸收光的能力。 11、常用于测定蛋白质N末端的反应有、和。 12、α-氨基酸与茚三酮反应生成色化合物。 13、脯氨酸与羟脯氨酸与茚三酮反应生成色化合物。 14、坂口反应可用于检测，指示现象为出现。 15、肽键中羰基氧和酰胺氢呈式排列。 16、还原型谷胱甘肽的缩写是。 17、蛋白质的一级结构主要靠和维系；空间结构则主要依靠维系。 18、维持蛋白质的空间结构的次级键包括、、和等。 19、常见的蛋白质二级结构包括、、、和等。 20、β-折叠可分和。 21、常见的超二级结构形式有、、和等。 22、蛋白质具有其特异性的功能主要取决于自身的排列顺序。 23、蛋白质按分子轴比可分为和。 24、已知谷氨酸的pK1(α-COOH)为2.19，pK2(γ-COOH)为4.25，其pK3(α-NH3+)为9.67，其pI为。 25、溶液pH等于等电点时，蛋白质的溶解度最。 三、简答题 生物化学第一章蛋白质化学测试题 一、单项选择题 1．测得某一蛋白质样品的氮含量为0．40g，此样品约含蛋白质多少？B(每克样品*6.25) A．2．00g B．2．50g C．6．40g D．3．00g E．6．25g 2．下列含有两个羧基的氨基酸是：E A．精氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸 D．色氨酸 E．谷氨酸 3．维持蛋白质二级结构的主要化学键是：D A．盐键 B．疏水键 C．肽键D．氢键 E．二硫键(三级结构) 4．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：B A．天然蛋白质分子均有的这种结构 B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系 D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5．具有四级结构的蛋白质特征是：E A．分子中必定含有辅基 B．在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠，盘曲形成 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．依赖肽键维系四级结构的稳定性 E．由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6．蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定：C A．溶液pH值大于pI B．溶液pH值小于pI C．溶液pH值等于pI D．溶液pH值等于7．4 E．在水溶液中 7．蛋白质变性是由于：D A．氨基酸排列顺序的改变B．氨基酸组成的改变C．肽键的断裂D．蛋白质空间构象的破坏E．蛋白质的水解 8．变性蛋白质的主要特点是：D A．粘度下降B．溶解度增加C．不易被蛋白酶水解 D．生物学活性丧失 E．容易被盐析出现沉淀 9．若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时，该溶液的pH值应为：B A．8 B．＞8 C．＜8 D．≤8 E．≥8 10．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？E A．半胱氨酸 B．蛋氨酸 C．胱氨酸 D．丝氨酸 E．瓜氨酸二、多项选择题 1．含硫氨基酸包括：AD A．蛋氨酸 B．苏氨酸 C．组氨酸D．半胖氨酸2．下列哪些是碱性氨基酸：ACD A．组氨酸B．蛋氨酸C．精氨酸D．赖氨酸 3．芳香族氨基酸是：ABD A．苯丙氨酸 B．酪氨酸 C．色氨酸 D．脯氨酸 4．关于α-螺旋正确的是：ABD A．螺旋中每3．6个氨基酸残基为一周 B．为右手螺旋结构 C．两螺旋之间借二硫键维持其稳定（氢键） D．氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5．蛋白质的二级结构包括：ABCD A．α-螺旋 B．β-片层C．β-转角 D．无规卷曲 6．下列关于β-片层结构的论述哪些是正确的：ABC A．是一种伸展的肽链结构 B．肽键平面折叠成锯齿状 C．也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成 D．两链间形成离子键以使结构稳定(氢键) 7．维持蛋白质三级结构的主要键是：BCD A．肽键B．疏水键C．离子键D．范德华引力 8．下列哪种蛋白质在pH5的溶液中带正电荷？BCD(>5) A．pI为4．5的蛋白质B．pI为7．4的蛋白质 C．pI为7的蛋白质D．pI为6．5的蛋白质 9．使蛋白质沉淀但不变性的方法有：AC A．中性盐沉淀蛋白 B．鞣酸沉淀蛋白 C．低温乙醇沉淀蛋白D．重金属盐沉淀蛋白 10．变性蛋白质的特性有：ABC 《基础生物化学》试题一 一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分） 1、DNA是遗传物质，而RNA则不是。 2、天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。 3、蛋白质降解的泛肽途径是一个耗能的过程，而蛋白酶对蛋白质的水解不需要ATP。 4、酶的最适温度是酶的一个特征性常数。 5、糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转。 6、哺乳动物无氧下不能存活，因为葡萄糖酵解不能合成ATP。 7、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。 8、变性后的蛋白质其分子量也发生改变。 9、tRNA的二级结构是倒L型。 10、端粒酶是一种反转录酶。 11、原核细胞新生肽链N端第一个残基为fMet，真核细胞新生肽链N端为Met。 12、DNA复制与转录的共同点在于都是以双链DNA为模板，以半保留方式进行，最后形成链状产物。 13、对于可逆反应而言，酶既可以改变正反应速度，也可以改变逆反应速度。 14、对于任一双链DNA分子来说，分子中的G和C的含量愈高，其熔点（Tm）值愈大。 15、DNA损伤重组修复可将损伤部位彻底修复。 16、蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中将向阴极移动。 17、酮体是在肝内合成，肝外利用。 18、镰刀型红细胞贫血病是一种先天性遗传病，其病因是由于血红蛋白的代谢发生障碍。 19、基因表达的最终产物都是蛋白质。 20、脂肪酸的从头合成需要NADPH+H+作为还原反应的供氢体。 二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共30分） 1、NAD+在酶促反应中转移（） A、氨基 B、氧原子 C、羧基 D、氢原子 2、参与转录的酶是（）。 A、依赖DNA的RNA聚合酶 B、依赖DNA的DNA聚合酶 C、依赖RNA的DNA聚合酶 D、依赖RNA的RNA聚合酶 3、米氏常数Km是一个可以用来度量（）。 A、酶和底物亲和力大小的常数 B、酶促反应速度大小的常数 C、酶被底物饱和程度的常数 D、酶的稳定性的常数 4、某双链DNA纯样品含15%的A，该样品中G的含量为（）。 A、35% B、15% C、30% D、20% 5、具有生物催化剂特征的核酶（ribozyme）其化学本质是（）。 A、蛋白质 B、RNA C、DNA D、酶 6、下列与能量代谢有关的途径不在线粒体内进行的是（）。 A、三羧酸循环 B、氧化磷酸化 C、脂肪酸β氧化 D、糖酵解作用 7、大肠杆菌有三种DNA聚合酶，其中主要参予DNA损伤修复的是（）。 A、DNA聚合酶Ⅰ B、DNA聚合酶Ⅱ C、DNA聚合酶Ⅲ D、都不可以 8、分离鉴定氨基酸的纸层析是（）。 A、离子交换层析 B、亲和层析 C、分配层析 D、薄层层析 9、糖酵解中，下列（）催化的反应不是限速反应。 A、丙酮酸激酶 B、磷酸果糖激酶 C、己糖激酶 D、磷酸丙糖异构酶 10、DNA复制需要：(1)DNA聚合酶Ⅲ；(2)解链蛋白；(3)DNA聚合酶Ⅰ；(4)DNA指导的RNA聚合酶；(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是（）。 代谢部分 第一部分填空 1、代谢调节酶一般(主要)分为两大类：_____________和____________ 第二部分单选题 1、磷酸化酶通过接受或脱去磷酸基而调节活性，因此它属于：（） A、别（变）构调节酶 B、共价调节酶 C、诱导酶 D、同工酶 2、操纵子调节系统属于哪一种水平的调节？（） A、复制水平的调节 B、转录水平的调节 C、转录后加工的调节 D、翻译水平的调节 第三部分判断（对的打“√”，错的打“×”） 1、在许多生物合成途径中，最先一步都是由一种调节酶催化的，此酶可被自身的产物，即该途径的最终产物所抑制。（） 2、细胞内区域化在代谢调节上的作用，除把不同的酶系统和代谢物分隔在特定区间外，还通过膜上的运载系统调节代谢物、辅助因子和金属离子的浓度。（） 3、分解代谢和合成代谢是同一反应的逆转，所以它们的代谢反应是可逆的。( ) 4、在许多生物合成途径中，最先一步都是由一种调节酶催化的，此酶可被自身的产物，即该途径的最终产物所抑制。（） 第四部分名词解释 1、操纵子 第五部分问答题 第六部分论述题 1、论述物质代谢特点和物质代谢在细胞水平的调节方式。 2、哪些化合物是联系糖，脂类，蛋白质和核酸代谢的重要物质？为什么？ 蛋白质氨基酸分解 第一部分填空 1、体内氨基酸脱氨基作用的主要方式是。 2、蛋白质脱氨基的主要方式有_________、_________和_________。 3、动植物中尿素生成是通循环进行的，此循环每进行一周可产生一分子尿素，其尿素分子中的两个氨基分别来自于 和。每合成一分子尿素需消耗分子ATP。 4、氨基酸的共同代谢包括_________作用和_________作用两个方面 第二部分单选题 1、草酰乙酸经转氨酶催化可转变成为（） A、苯丙氨酸 B、天冬氨酸 C、谷氨酸 D、丙氨酸 2、生物体内大多数氨基酸脱去氨基生成α-酮酸是通过下面那种作用完成的？（） A、氧化脱氨基 B、还原脱氨基 C、联合脱氨基 D、转氨基 3、下列氨基酸中哪一种可以通过转氨作用生成α－酮戊二酸？（） A、Glu B、Ala C、Asp D、Ser 4、三羧酸循环中,某一中间产物经转氨基作用后可直接生成下列的一种氨基酸是:( ) A、Ala B、Ser C、Glu D、Lys 5、三大物质（糖、脂肪、蛋白质）氧化的共同途径是 ( ) A、糖酵解 B、三羧酸循环 C、磷酸戎糖途径 6、氨基酸脱下的氨在人体内最终是通过哪条途径代谢？（） A、蛋氨酸循环 B、乳酸循环 C、尿素循环 D、嘌呤核苷酸循环 7、在鸟氨酸循环中，尿素由下列哪种物质水解而得（） A、鸟氨酸 B、胍氨酸 C、精氨酸 D、精氨琥珀酸 8、下列哪一种氨基酸与尿素循环无关？（） A 赖氨酸 B 精氨酸 C 天冬氨酸 D 鸟氨酸 9、肝细胞内合成尿素的部位是（） A 胞浆 B 线粒体 C 内质网 D 胞浆和线粒体 10、转氨酶的辅酶是（） A、NAD+ B、NADP+ C、FAD D、磷酸吡哆醛 11、参与尿素循环的氨基酸是。（）生物化学题库及答案大全
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