Immunol Res(2010)46:72–78
DOI10.1007/s12026-009-8126-5
Generation of tolerogenic dendritic cells via
the E-cadherin/b-catenin-signaling pathway
Chunmei Fu?Aimin Jiang
Published online:23September2009
óSpringer Science+Business Media,LLC2009
Abstract Besides their well-characterized role as the initiator of adaptive immune responses,dendritic cells(DCs)play a critical role in the induction and maintenance of self-tolerance,the failure of which could lead to autoimmune/in?ammatory diseases.Although it is clear that tolerance is a property of DCs at the steady state,the molecular mechanisms governing their generation,function and regulation remain elusive.Our recent studies have uncovered the E-cadherin/b-catenin-signaling pathway as a novel maturation pathway that achieves DC maturation without in?ammatory cytokines.As a result,E-cadherin-stimulated DCs elicited an entirely different T cell response in vivo,generating T cells with a regu-latory as opposed to an effector phenotype.These DCs induced tolerance in vivo and more importantly,immunization with these DCs provided complete protection against autoim-mune diseases in experimental autoimmune encephalomyelitis(EAE).Interestingly,while DCs matured upon disruption of E-cadherin-mediated clusters were functional tolerogenic, upon further TLR ligation,they displayed a strong Th1cytokine pro?le and much enhanced antigen presentation capacity consistent with enhanced immunity.Thus,E-cadherin/ b-catenin-signaling might serve as a novel signal that contributes to the elusive steady-state ‘‘tolerogenic DCs’’.Targeting E-cadherin/b-catenin signaling to either enhance or reduce DC-mediated tolerance might represent an attractive new strategy to achieve antigen-spe-ci?c immunotherapy for cancers and autoimmune/in?ammatory diseases.
Keywords E-Cadherináb-CatenináDC maturationáToleranceá
In?ammatory cytokinesáIL-10áRegulatory T cells
Introduction
Dendritic cells(DCs)play a pivotal role in the immune response,being unique among antigen-presenting cells in their ability to present a vast array of antigens with great C.FuáA.Jiang(&)
Department of Immunology,Roswell Park Cancer Institute,Elm and Carlton Streets,
Buffalo,NY14263,USA
e-mail:aimin.jiang@https://www.doczj.com/doc/0316540991.html,
ef?ciency and to stimulate na?¨ve T lymphocytes[1].DCs are further distinguished by their ability to stimulate other effector cells such as B lymphocytes and NK cells.In addition to initiating immunity,there is increasing evidence that DCs are charged with maintaining tolerance to‘‘self’’or innocuous antigens,the failure of which could lead to autoimmune and/or in?ammatory diseases[2].How DCs accomplish these seemingly contradictory functions in immunity vs.tolerance is unclear.While TLR-mediated signaling has been extensively studied for their role in inducing DC-mediated immunity,little is known about what signals lead to tolerogenic DCs.
DC maturation and function
As the sentinels of the immune system,DCs commence a complex and heterogeneous transformation process termed‘‘maturation’’,which greatly enhances their capacity for antigen processing and presentation upon encountering pathogens or a variety of pro-in?ammatory mediators[1,3,4].Maturation may occur prior to,during,or after migration to secondary lymphoid organs where the DCs serve to prime na?¨ve T cells[1].The general features of DC maturation are well understood[3]and involve the translocation of MHC class II molecules(MHCII)from lysosomal compartments to the plasma membrane,the upregulation of costimulatory molecules such as CD80and CD86,the activation of lysosomal antigen processing,and the release of a host of immunostimulatory cytokines [4].There is also a marked increase in the expression of lymphoid chemokine receptors such as CCR7,required for directed migration of DCs to lymph nodes[5].Although the phenotypic correlates of DC maturation are clear,their relationship to DC function is complex.For example,depending on the type of microbial stimulus,DCs can prime qualitatively different types of effector T cell responses[6].DC maturation and migration to lymph nodes can be independently regulated[7,8],although the underlying mechanisms have not been elucidated.In DCs lacking the TLR adaptor MyD88,the phenotypic mat-uration of DCs can occur without in?ammatory cytokine production[9].Such DCs cannot activate na?¨ve CD4?T cells in vivo suggesting that this phenotype,should it occur physiologically,might play a role in tolerance[10].
DCs in tolerance and tolerogenic DCs
Another poorly understood but essential feature of DC function is tolerance.There is increasing evidence that in addition to initiating immunity,DCs are charged with main-taining tolerance to‘‘self’’or innocuous antigens,the failure of which could lead to autoimmune and/or in?ammatory diseases[2].How DCs accomplish these seemingly contradictory functions is unclear.It seems likely that‘‘tolerogenic’’DCs are those that present antigens captured in the absence of the microbial products or in?ammatory mediators that signal the presence of conditions requiring of an immune response[2,11]. The maturation state,origin,phenotype,and regulation of these‘‘tolerogenic DCs’’remain poorly understood,thus a confusing and often contradictory array of descriptions is available from the literature[12].Tolerogenic DCs have often been described or predicted to be immature,since early concepts held that antigen presentation in the absence of costimulation leads to T cell anergy or death.However,immature DCs neither present antigen ef?ciently[13,14]nor interact effectively with T cells[15,16].When immature DCs leave their site of epithelial or parenchymal residence and enter the lymphatics,one
thing is certain:they must alter their interactions with surrounding cells.Conceivably,this change may itself signal aspects of the maturation program,producing mature DCs capable of producing T cell tolerance:inducing either T cell deletion or the production of Tregs. Indeed,it has been elegantly demonstrated that targeting antigens to steady-state DCs using antibody to DEC-205in the absence of overt in?ammatory or immunostimulatory medi-ators led to tolerance[17–19].These steady-state‘‘tolerogenic’’DCs were phenotypically mature,suggesting tolerance is a property of DCs at the steady state instead of being immature.Thus,DCs matured by non-in?ammatory signals with enhanced antigen pro-cessing and presentation capacity are more likely to mediate and maintain peripheral tolerance to self-antigens.
The role of E-cadherin/b-catenin-signaling pathway in the generation
of mature tolerogenic DCs
In seeking non-in?ammatory signals that might activate DCs to mature,we came across E-cadherin,a component of epithelial cell junctions that was also expressed in langerhans cells(LCs),specialized DCs in the skin[20,21].LCs form networks anchored to neigh-boring keratinocytes through homotypic binding mediated by E-cadherin[20,22]. Although these networks are quite stable,LCs appear to traf?c to lymph nodes,with their rate of emigration being enhanced by UV exposure or mechanical trauma[23,24].How this occurs is unknown,but seems likely to require the disruption of E-cadherin interac-tions.In epithelial cells,E-cadherin forms a complex with members of the catenin family, which control interactions with the actin cytoskeleton and(after translocation to the nucleus)act as cofactors for T cell factor(TCF;and lymphoid enhancing factor,LEF) transcriptional activators[25].Given these functions,the amount of free cytosolic catenins, especially b-catenin,is carefully regulated.Under resting conditions,the bulk of b-catenin is sequestered to the E-cadherin cytoplasmic domain,with the cytosolic pool further attenuated by its phosphorylation by glycogen synthase kinase-3b(GSK-3b and sub-sequent proteasomal degradation[26,27].Activation of Wnt signaling activates TCF-dependent transcription by increasing free b-catenin due in part to an inhibition of GSK-3b (Fig.1).
While it is unclear that whether E-cadherin-mediated cell–cell adhesion is linked to activation of b-catenin signaling,early works have demonstrated that disruption of LC–LC interactions in vitro could trigger phenotypic maturation[21,28,29].We have found that BMDCs as well as some primary DC subsets,not just epidermal Langerhans cells,express the adhesion protein E-cadherin,and we demonstrated that cluster disruption(CD)of E-cadherin-mediated cell–cell adhesion is linked to the activation of b-catenin signaling [30],suggesting an intriguing possibility that E-cadherin/b-catenin might serve as a signal for the generation of steady-state tolerogenic DCs.Indeed,we showed that CD of E-cadherin-mediated adhesion ef?ciently stimulated DC maturation,triggering the dra-matic upregulation of MHC class II,costimulatory molecules,and chemokine receptors [30].Results thus far indicated that activating the b-catenin-TCF/LEF pathway induced maturation.However,in contrast to DCs conventionally matured by microbial products, E-cadherin-stimulated DCs displayed a dramatically different transcriptional pro?le,and most importantly,they failed to produce immunostimulatory cytokines,suggesting E-cadherin/b-catenin signaling is a novel mechanism for DC maturation[30].DCs emi-grating from tissues at the steady state in principle would contain antigens derived only from self-proteins and thus are expected to be responsible for maintaining peripheral
tolerance [2,11].Since exit from epithelial tissues might also alter E-cadherin-mediated adhesion,we further examined the functional implications of these observations.Indeed,these CD-matured DCs elicited an entirely different T cell response in vivo,generating T cells with a regulatory as opposed to an effector phenotype.Upon adoptive transfer,these DCs induced tolerance in vivo and could even provide complete protection against subsequent induction of autoimmune diseases in a murine model of experimental auto-immune encephalomyelitis (EAE)[30].Taken together,our results suggested an intriguing possibility that E-cadherin/b -catenin signaling might serve as a signal for the generation of steady-state tolerogenic DCs.
E-cadherin/b -catenin signaling in regulating DC function in vivo
While our ?ndings strongly suggested a role of E-cadherin/b -catenin signaling in regu-lating DC maturation and function in both cultured murine and human DCs,it remains an open question whether E-cadherin/b -catenin signaling functions similarly under physio-logical conditions.The embryo lethality of mice de?cient in E-cadherin and b -catenin,however,presents a major hurdle to directly address this question.Recognizing this challenge,we have generated a series of CD11c-speci?c conditional knockout mice that either inactivate b -catenin signaling by deletion (b -catenin -/-and E-cadherin -/-)or activate the pathway by making b -catenin constitutively active (b -catenin Exon3-/-)
[31–34],in collaboration with Bjoern Clausen in Amsterdam.These mice will allow us to directly address the role of E-cadherin/b -catenin signaling in a variety of settings.Our preliminary results showed a time-dependent increase in percentage of spontaneously mature DCs with constitutively active b -catenin than that of wild-type DCs (Fig.2a),consistent with the activation of b -catenin as a tolerizing signal for DCs.Not surprisingly,DCs with constitutively active b -catenin exhibited diminished IL-12p40response,
with Fig.1A simpli?ed model of E-cadherin/b -catenin-signaling pathway.In resting cells,E-cadherin helps to control the level of the cytosolic b -catenin.b -Catenin normally forms a complex with tumor suppressor proteins APC and Axin and undergoes phosphorylation by GSK-3and subsequent ubiquitination and degradation.Wnt signaling leads to nuclear accumulation of b -catenin,where it complexes with the TCF family transcription factors,resulting in transactivation of target genes includes myc and cyclin D.SB 216763is an inhibitor to GSK-3that also leads to DC maturation
only 12.8%became IL-12p40-producing cells compared to 27%for wild-type DCs (Fig.2b left panels).Further,consistent with our previous results,CD failed to induce IL-12p40production from wild-type and mutant DCs (Fig.2b right panels).Current efforts are made to con?rm the role of E-cadherin/b -catenin signaling in mediating DC tolerance,especially under autoimmune disease settings.
Summary and perspectives
While our work strongly suggested that E-cadherin/b -catenin pathway might serves as a novel signal to induce DC-mediated tolerance,the availability of a series of DC-speci?c conditional knockout mice with altered b -catenin signaling provide the right tools to further establish the molecular and cellular mechanisms and functional signi?cance of the E-cadherin/b -catenin-signaling pathway in immune responses and autoimmunity.
Due to their pivotal role in controlling both immune and tolerance responses,DCs have emerged as good candidates to modulate the immune system in an antigen-speci?c manner with immunotherapy for both cancers and autoimmune/in?ammatory diseases [35–38].However,the underlying mechanisms for the regulation of DC function,especially tol-erance,remained poorly understood,critically hindering successful application of these approaches.Our studies suggested E-cadherin/b -catenin-signaling pathway as a novel mechanism to generate tolerogenic DCs and showed that these tolerogenic DCs could be converted into highly immunogenic DCs upon certain treatments [30].Thus,a therapeutic strategy that enhances the tolerance or immunity function of DCs by targeting E-cadherin/b -catenin-signaling pathway may represent an attractive approach for treatment of auto-immune/allergic diseases and cancer,respectively.We are currently focusing on investi-gating therapeutic effects of activating the E-cadherin/b -catenin-signaling pathway in DCs with preclinical animal models for melanoma,multiple sclerosis,and asthma.As E-cadherin/b -catenin functions similarly in human CD34?-derived DCs widely used in immunotherapy trials [30,37],and great efforts have already been made to develop spe-ci?c GSK-3and b -catenin inhibitors for drug development [39,40],our research could have immediate clinical
impact.
Fig.2E-cadherin/b -catenin signaling regulated DC maturation and cytokine production.a BMDCs with active b -catenin showed increased maturation.BMDCs from either wild-type or active b -catenin (CD11c-Cre b -catenin-Exon3Fl/Fl )mice were monitored for their expression of CD86by FACS.b Activation of b -catenin in DCs diminished their capacity to produce IL-12p40upon TLR signaling.BMDCs from either wild-type or active b -catenin mice were matured either with CpG plus LPS or CD.IL-12p40production was assessed by intracellular staining
References
1.Banchereau J,Steinman RM.Dendritic cells and the control of immunity.Nature.1998;392:245–5
2.
2.Steinman RM,Hawiger D,Nussenzweig MC.Tolerogenic dendritic cells.Annu Rev Immunol.
2003;21:685–711.
3.Mellman I,Steinman RM.Dendritic cells:specialized and regulated antigen processing machines.Cell.
2001;106:255–8.
4.Trombetta ES,Mellman I.Cell biology of antigen processing in vitro and in vivo.Annu Rev Immunol.
2005;23:975–1028.
5.Randolph GJ,Sanchez-Schmitz G,Angeli V.Factors and signals that govern the migration of dendritic
cells via lymphatics:recent advances.Springer Semin Immunopathol.2005;26:273–87.
https://www.doczj.com/doc/0316540991.html,nzavecchia A,Sallusto F.Antigen decoding by T lymphocytes:from synapses to fate determination.
Nat Immunol.2001;2:487–92.
7.Geissmann F,Dieu-Nosjean MC,Dezutter C,Valladeau J,Kayal S,Leborgne M,et al.Accumulation of
immature Langerhans cells in human lymph nodes draining chronically in?amed skin.J Exp Med.
2002;196:417–30.
8.Verbovetski I,Bychkov H,Trahtemberg U,Shapira I,Hareuveni M,Ben-Tal O,et al.Opsonization of
apoptotic cells by autologous iC3b facilitates clearance by immature dendritic cells,down-regulates DR and CD86,and up-regulates CC chemokine receptor7.J Exp Med.2002;196:1553–61.
9.Kaisho T,Takeuchi O,Kawai T,Hoshino K,Akira S.Endotoxin-induced maturation of MyD88-
de?cient dendritic cells.J Immunol.2001;166:5688–94.
10.Pasare C,Medzhitov R.Toll-dependent control mechanisms of CD4T cell activation.Immunity.
2004;21:733–41.
11.Steinman RM,Turley S,Mellman I,Inaba K.The induction of tolerance by dendritic cells that have
captured apoptotic cells.J Exp Med.2000;191:411–6.
12.Reis e Sousa C.Dendritic cells in a mature age.Nat Rev Immunol.2006;6:476–83.
13.Turley SJ,Inaba K,Garrett WS,Ebersold M,Unternaehrer J,Steinman RM,et al.Transport of peptide-
MHC class II complexes in developing dendritic cells.Science.2000;288:522–7.
14.Inaba K,Turley S,Iyoda T,Yamaide F,Shimoyama S,Reis e Sousa C,et al.The formation of
immunogenic major histocompatibility complex class II-peptide ligands in lysosomal compartments of dendritic cells is regulated by in?ammatory stimuli.J Exp Med.2000;191:927–36.
15.Benvenuti F,Hugues S,Walmsley M,Ruf S,Fetler L,Popoff M,et al.Requirement of Rac1and Rac2
expression by mature dendritic cells for T cell priming.Science.2004;305:1150–3.
16.Benvenuti F,Lagaudriere-Gesbert C,Grandjean I,Jancic C,Hivroz C,Trautmann A,et al.Dendritic
cell maturation controls adhesion,synapse formation,and the duration of the interactions with naive T lymphocytes.J Immunol.2004;172:292–301.
17.Hawiger D,Inaba K,Dorsett Y,Guo M,Mahnke K,Rivera M,et al.Dendritic cells induce peripheral T
cell unresponsiveness under steady state conditions in vivo.J Exp Med.2001;194:769–79.
18.Bonifaz L,Bonnyay D,Mahnke K,Rivera M,Nussenzweig MC,Steinman RM.Ef?cient targeting of
protein antigen to the dendritic cell receptor DEC-205in the steady state leads to antigen presentation on major histocompatibility complex class I products and peripheral CD8?T cell tolerance.J Exp Med.
2002;196:1627–38.
19.Hawiger D,Masilamani RF,Bettelli E,Kuchroo VK,Nussenzweig MC.Immunological unrespon-
siveness characterized by increased expression of CD5on peripheral T cells induced by dendritic cells in vivo.Immunity.2004;20:695–705.
20.Tang A,Amagai M,Granger LG,Stanley JR,Udey MC.Adhesion of epidermal Langerhans cells to
keratinocytes mediated by E-cadherin.Nature.1993;361:82–5.
21.Jakob T,Udey MC.Regulation of E-cadherin-mediated adhesion in Langerhans cell-like dendritic cells
by in?ammatory mediators that mobilize Langerhans cells in vivo.J Immunol.1998;160:4067–73. 22.Jakob T,Brown MJ,Udey MC.Characterization of E-cadherin-containing junctions involving skin-
derived dendritic cells.J Invest Dermatol.1999;112:102–8.
23.Jakob T,Ring J,Udey MC.Multistep navigation of Langerhans/dendritic cells in and out of the skin.
J Allergy Clin Immunol.2001;108:688–96.
24.Merad M,Manz MG,Karsunky H,Wagers A,Peters W,Charo I,et https://www.doczj.com/doc/0316540991.html,ngerhans cells renew in the
skin throughout life under steady-state conditions.Nat Immunol.2002;3:1135–41.
25.Vasioukhin V,Fuchs E.Actin dynamics and cell–cell adhesion in epithelia.Curr Opin Cell Biol.
2001;13:76–84.
26.Nelson WJ,Nusse R.Convergence of Wnt,beta-catenin,and cadherin pathways.Science.2004;303:
1483–7.
27.Staal FJ,Clevers HC.WNT signalling and haematopoiesis:a WNT-WNT situation.Nat Rev Immunol.
2005;5:21–30.
28.Riedl E,Stockl J,Majdic O,Scheinecker C,Rappersberger K,Knapp W,et al.Functional involvement
of E-cadherin in TGF-beta1-induced cell cluster formation of in vitro developing human Langerhans-type dendritic cells.J Immunol.2000;165:1381–6.
29.Riedl E,Stockl J,Majdic O,Scheinecker C,Knapp W,Strobl H.Ligation of E-cadherin on in vitro-
generated immature Langerhans-type dendritic cells inhibits their maturation.Blood.2000;96:4276–84.
30.Jiang A,Bloom O,Ono S,Cui W,Unternaehrer J,Jiang S,et al.Disruption of E-cadherin-mediated
adhesion induces a functionally distinct pathway of dendritic cell maturation.Immunity.2007;27:610–24.
31.Boussadia O,Kutsch S,Hierholzer A,Delmas V,Kemler R.E-cadherin is a survival factor for the
lactating mouse mammary gland.Mech Dev.2002;115:53–62.
32.Brault V,Moore R,Kutsch S,Ishibashi M,Rowitch DH,McMahon AP,et al.Inactivation of the beta-
catenin gene by Wnt1-Cre-mediated deletion results in dramatic brain malformation and failure of craniofacial development.Development.2001;128:1253–64.
33.Harada N,Tamai Y,Ishikawa T,Sauer B,Takaku K,Oshima M,et al.Intestinal polyposis in mice with
a dominant stable mutation of the beta-catenin gene.EMBO J.1999;18:5931–42.
34.Travis MA,Reizis B,Melton AC,Masteller E,Tang Q,Proctor JM,et al.Loss of integrin alpha(v)beta8
on dendritic cells causes autoimmunity and colitis in mice.Nature.2007;449:361–5.
35.Tarner IH,Slavin AJ,McBride J,Levicnik A,Smith R,Nolan GP,et al.Treatment of autoimmune
disease by adoptive cellular gene therapy.Ann N Y Acad Sci.2003;998:512–9.
36.van Duivenvoorde LM,van Mierlo GJ,Boonman ZF,Toes RE.Dendritic cells:vehicles for tolerance
induction and prevention of autoimmune diseases.Immunobiology.2006;211:627–32.
37.Palucka AK,Ueno H,Fay JW,Banchereau J.Taming cancer by inducing immunity via dendritic cells.
Immunol Rev.2007;220:129–50.
38.Steinman RM,Banchereau J.Taking dendritic cells into medicine.Nature.2007;449:419–26.
39.Meijer L,Flajolet M,Greengard P.Pharmacological inhibitors of glycogen synthase kinase3.Trends
Pharmacol Sci.2004;25:471–80.
40.Takemaru KI,Ohmitsu M,Li FQ.An oncogenic hub:beta-catenin as a molecular target for cancer
therapeutics.Handb Exp Pharmacol.2008;26:1–284.
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目录 1. CLK Test (3) 1.1 Differential Signal Test (3) 1.2 Single Signal Test (5) 2. LPC Test (7) 2.1 EC Side Test (7) 2.2 Control Sidse Test (8) 3. USB Test (11) 3.1 High Speed Test (11) 3.2 Low Speed Test (12) 3.3 Full Speed Test (12) 3.4 Drop/Droop Test (12) 4. VGA Test (14) 4.1 R、G、B Signal Test (14) 4.2 RGB Channel to Channel Skew Test (14) 4.3 VSYNC and HSYNC Test (15) 4.4 DDC_DA TA and DDC_CKL Test (15) 5. LVDS Test (17) 5.1 Differential data signals swing Test (17) 5.2 Checking Skew at receiver Test (18) 5.3 Checking the offset voltage Test (19) 5.4 Differential Input Voltage Test (20) 5.5 Common Mode Voltage Test (20) 5.6 Slew Rate Test (21) 5.7 Data to Clock Timing Test (23) 6. FSB Test (26) 7. Serial Data（SA TA/ESA TA, PCIE, DMI,FDI）Test (29) 8. HD Audio Test (30) 8.1 Measurement at The Controller (30) 8.2Measurement at The Codec (31) 9. DDR2 Test (34) 9.1 Clock (34) 9.2 Write (35) 9.3 Read (37) 10.Ethernet Test (39) 11.SMbus Signal Test (40) 12. HDMI Test (42) 13. DisplayPort Test (43)
WORD 格式 专业资料整理 试述巨噬细胞及树突状细胞在处理和提呈抗原方面的特点 巨噬细胞是一种位于组织内的白血 球， 源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前 体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞， 在脊椎动物体内参与非特异性防 卫 （先天性免 疫）和特异性防卫（细胞免疫） 。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细 胞残 片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化） ，并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原 体作出反应。巨噬细胞是一种具多用途多功能的细胞。作为体内 的 “清道夫”，它们会去除体 内那些坏掉死去的细胞以及其他废料。它们是众多个细胞中首个 “呈递”抗原的，所以它其 中 一个重要的功能启动一个免疫反 应。 另外，作为一个分泌细胞， 单核细胞及巨噬细胞对于免 疫反应的调整和炎症的发展尤为必 需。 这是因为它们会大量地产生出一系列强劲的化学物质 （单核因子），其中包括酶、补体蛋白和调节因子如白细胞介素 1。 树突状细胞（ DC ）是机体功能最强的专职抗原递呈细胞 (Antigenpresenting cells , APC)，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC 具有较强的迁移能力，成熟 DC 能有效激活初始型 T 细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。人体内大部 分 DC 处于非成熟状态，表达低水平的共刺激因子和粘附因子，体外激发同种混合淋巴细胞 增 殖反应的能力较低，但未成熟 DC 具有极强的抗原吞噬能力，在摄取抗 原 (包括体外加工)或 受到某些因素刺激时即分化为成熟 DC ，而成熟的DC 表达高水平的共刺激因子和粘附因子。 DC 在成熟的过程中，由接触抗原的外周组织迁移进入次级淋巴器官， 与T 细胞接触并激发 免疫应答。 巨噬细胞摄取抗原的方式有吞噬作用、 胞饮作用和受体介导的胞吞作用三种方 式， 可摄 入较大的固体物质、极小的颗粒状物质、 液态物质等。巨噬细胞表面带有大量不同的受体 如 fcR 、CR 等，也可通过受体介导将抗原摄取。这些抗原被摄取后，首先在细胞内溶酶体的 作用下被降解成小分子的多肽片段，然后与细胞内合成 的 MHC-II 类分子结合形成抗原肽 -MHC-II 类分子的复合物，提呈给 T 细胞。 树突状细胞摄取抗原的方式有巨吞饮作用、 受 体介导的内吞作用和吞噬作用三种方式。 可吞入非常大量的液体，也可摄入较大颗粒的抗原 性物质。但是树突状细胞与巨噬细胞不同的 是， 其仅在发育的某些特定的阶段才具有一定的 吞噬功能。外来抗原性物质被树突状细胞摄入后处理成 13~25 个氨基酸的肽段，与 MHC-II 类分子结合后表达在细胞表面，再提呈给 CD4+T 细胞。
现在的高速电路设计已经达到GHz的水平，高速PCB设计要求从三维设计理论出发对过孔、封装和布线进行综合设计来解决信号完整性问题。高速PCB设计要求中国工程师必须具备电磁场的理论基础，必须懂得利用麦克斯韦尔方程来分析PCB设计过程中遇到的电磁场问题。目前，Ansoft公司的仿真工具能够从三维场求解的角度出发，对PCB设计的信号完整性问题进行动态仿真。 (一)Ansoft公司的仿真工具 现在的高速电路设计已经达到GHz的水平，高速PCB设计要求从三维设计理论出发对过孔、封装和布线进行综合设计来解决信号完整性问题。高速PCB设计要求中国工程师必须具备电磁场的理论基础，必须懂得利用麦克斯韦尔方程来分析PCB设计过程中遇到的电磁场问题。目前，Ansoft公司的仿真工具能够从三维场求解的角度出发，对PCB设计的信号完整性问题进行动态仿真。 Ansoft的信号完整性工具采用一个仿真可解决全部设计问题： SIwave是一种创新的工具，它尤其适于解决现在高速PCB和复杂IC封装中普遍存在的电源输送和信号完整性问题。 该工具采用基于混合、全波及有限元技术的新颖方法，它允许工程师们特性化同步开关噪声、电源散射和地散射、谐振、反射以及引线条和电源/地平面之间的耦合。该工具采用一个仿真方案解决整个设计问题，缩短了设计时间。 它可分析复杂的线路设计，该设计由多重、任意形状的电源和接地层，以及任何数量的过孔和信号引线条构成。仿真结果采用先进的3D图形方式显示，它还可产生等效电路模型，使商业用户能够长期采用全波技术，而不必一定使用专有仿真器。 (二)SPECCTRAQuest Cadence的工具采用Sun的电源层分析模块： Cadence Design Systems的SpecctraQuest PCB信号完整性套件中的电源完整性模块据称能让工程师在高速PCB设计中更好地控制电源层分析和共模EMI。 该产品是由一份与Sun Microsystems公司签署的开发协议而来的，Sun最初研制该项技术是为了解决母板上的电源问题。 有了这种新模块，用户就可根据系统要求来算出电源层的目标阻抗；然后基于板上的器件考虑去耦合要求，Shah表示，向导程序能帮助用户确定其设计所要求的去耦合电容的数目和类型；选择一组去耦合电容并放置在板上之后，用户就可运行一个仿真程序，通过分析结果来发现问题所在。 SPECCTRAQuest是CADENCE公司提供的高速系统板级设计工具，通过它可以控制与PCB layout相应的限制条件。在SPECCTRAQuest菜单下集成了一下工具： （1）SigXplorer可以进行走线拓扑结构的编辑。可在工具中定义和控制延时、特性阻抗、驱动和负载的类型和数量、拓扑结构以及终端负载的类型等等。可在PCB详细设计前使用此工具，对互连线的不同情况进行仿真，把仿真结果存为拓扑结构模板，在后期详细设计中应用这些模板进行设计。 （2）DF/Signoise工具是信号仿真分析工具，可提供复杂的信号延时和信号畸变分析、IBIS 模型库的设置开发功能。SigNoise是SPECCTRAQUEST SI Expert和SQ Signal Explorer Expert进行分析仿真的仿真引擎，利用SigNoise可以进行反射、串扰、SSN、EMI、源同步及系统级的仿真。 （3）DF/EMC工具——EMC分析控制工具。 （4）DF/Thermax——热分析控制工具。 SPECCTRAQuest中的理想高速PCB设计流程： 由上所示，通过模型的验证、预布局布线的space分析、通过floorplan制定拓朴规则、由规
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什么是信号完整性? 如果你发现，以前低速时代积累的设计经验现在似乎都不灵了，同样的设计，以前没问题，可是现在却无法工作，那么恭喜你，你碰到了硬件设计中最核心的问题：信号完整性。早一天遇到，对你来说是好事。 在过去的低速时代，电平跳变时信号上升时间较长，通常几个ns。器件间的互连线不至于影响电路的功能，没必要关心信号完整性问题。但在今天的高速时代，随着IC输出开关速度的提高，很多都在皮秒级，不管信号周期如何，几乎所有设计都遇到了信号完整性问题。另外，对低功耗追求使得内核电压越来越低，1.2v内核电压已经很常见了。因此系统能容忍的噪声余量越来越小，这也使得信号完整性问题更加突出。 广义上讲，信号完整性是指在电路设计中互连线引起的所有问题，它主要研究互连线的电气特性参数与数字信号的电压电流波形相互作用后，如何影响到产品性能的问题。主要表现在对时序的影响、信号振铃、信号反射、近端串扰、远端串扰、开关噪声、非单调性、地弹、电源反弹、衰减、容性负载、电磁辐射、电磁干扰等。 信号完整性问题的根源在于信号上升时间的减小。即使布线拓扑结构没有变化，如果采用了信号上升时间很小的IC芯片，现有设计也将处于临界状态或者停止工作。 下面谈谈几种常见的信号完整性问题。 反射： 图1显示了信号反射引起的波形畸变。看起来就像振铃，拿出你制作的电路板，测一测各种信号，比如时钟输出或是高速数据线输出，看看是不是存在这种波形。如果有，那么你该对信号完整性问题有个感性的认识了，对，这就是一种信号完整性问题。 很多硬件工程师都会在时钟输出信号上串接一个小电阻，至于为什么，他们中很多人都说不清楚，他们会说，很多成熟设计上都有，照着做的。或许你知道，可是确实很多人说不清这个小小电阻的作用，包括很多有了三四年经验的硬件工程师，很惊讶么?可这确实是事实，我碰到过很多。其实这个小电阻的作用就是为了解决信号反射问题。而且随着电阻的加大，振铃会消失，但你会发现信号上升沿不再那么陡峭了。这个解决方法叫阻抗匹配，奥，对了，一定要注意阻抗匹配，阻抗在信号完整性问题中占据着极其重要的
信号完整性分析基础系列之一 ——关于眼图测量（上） 汪进进美国力科公司深圳代表处 内容提要：本文将从作者习惯的无厘头漫话风格起篇，从四个方面介绍了眼图测量的相关知识：一、串行数据的背景知识; 二、眼图的基本概念; 三、眼图测量方法; 四、力科示波器在眼图测量方面的特点和优势。全分为上、下两篇。上篇包括一、二部分。下篇包括三、四部分。 您知道吗？眼图的历史可以追溯到大约47年前。在力科于2002年发明基 于连续比特位的方法来测量眼图之前，1962年-2002的40年间，眼图的测量是基 于采样示波器的传统方法。 您相信吗？在长期的培训和技术支持工作中，我们发现很少有工程师能完整地准确地理解眼图的测量原理。很多工程师们往往满足于各种标准权威机构提供的测量向导，Step by Step，满足于用“万能”的Sigtest软件测量出来的眼图给出的Pass or Fail结论。这种对于Sigtest的迷恋甚至使有些工程师忘记了眼图是 可以作为一项重要的调试工具的。 在我2004年来力科面试前，我也从来没有听说过眼图。那天面试时，老板反复强调力科在眼图测量方面的优势，但我不知所云。之后我Google“眼图”， 看到网络上有限的几篇文章，但仍不知所云。刚刚我再次Google“眼图”，仍然 没有找到哪怕一篇文章讲透了眼图测量。 网络上搜到的关于眼图的文字，出现频率最多的如下，表达得似乎非常地专业，但却在拒绝我们的阅读兴趣。 “在实际数字互连系统中，完全消除码间串扰是十分困难的，而码间串扰 对误码率的影响目前尚无法找到数学上便于处理的统计规律，还不能进行准确计算。为了衡量基带传输系统的性能优劣，在实验室中，通常用示波器观察接收信号波形的方法来分析码间串扰和噪声对系统性能的影响，这就是眼图分析法。 如果将输入波形输入示波器的Y轴，并且当示波器的水平扫描周期和码元 定时同步时，适当调整相位，使波形的中心对准取样时刻，在示波器上显示的图形很象人的眼睛，因此被称为眼图（Eye Map）。 二进制信号传输时的眼图只有一只“眼睛”，当传输三元码时，会显示两 只“眼睛”。眼图是由各段码元波形叠加而成的，眼图中央的垂直线表示最佳抽样时刻，位于两峰值中间的水平线是判决门限电平。 在无码间串扰和噪声的理想情况下，波形无失真，每个码元将重叠在一起，最终在示波器上看到的是迹线又细又清晰的“眼睛”，“眼”开启得最大。当有码
浅谈巨噬细胞及树突状细胞在处理和提呈抗原方面的特点巨噬细胞是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫（先天性免疫）和特异性防卫（细胞免疫）。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。巨噬细胞是一种具多用途多功能的细胞。为体内的“清道夫”，它们会去除体内那些坏掉死去的细胞以及其他废料。它们是众多个细胞中首个“呈递”抗原的，所以它其中一个重要的功能启动一个免疫反应。另外，作为一个分泌细胞，单核细胞及巨噬细胞对于免疫反应的调整和炎症的发展尤为必需。这是因为它们会大量地产生出一系列强劲的化学物质（单核因子），其中包括酶、补体蛋白和调节因子如白细胞介素1。 树突状细胞（DC）是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells, APC)，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。人体内大部分DC处于非成熟状态，表达低水平的共刺激因子和粘附因子，体外激发同种混合淋巴细胞增殖反应的能力较低，但未成熟DC具有极强的抗原吞噬能力，在摄取抗原(包括体外加工)或受到某些因素刺激时即分化为成熟DC，而成熟的DC表达高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的过程中，由接触抗原的外周组织迁移进入次级淋巴器官，与T
细胞接触并激发免疫应答。巨噬细胞摄取抗原的方式有吞噬作用、胞饮作用和受体介导的胞吞作用三种方式，可摄入较大的固体物质、极小的颗粒状物质、液态物质等。巨噬细胞表面带有大量不同的受体如fcR、CR 等，也可通过受体介导将抗原摄取。这些抗原被摄取后，首先在细胞内溶酶体的作用下被降解成小分子的多肽片段，然后与细胞内合成的MHC-II 类分子结合形成抗原肽-MHC-II 类分子的复合物，提呈给T 细胞。树突状细胞摄取抗原的方式有巨吞饮作用、受体介导的内吞作用和吞噬作用三种方式。可吞入非常大量的液体，也可摄入较大颗粒的抗原性物质。但是树突状细胞与巨噬细胞不同的是，其仅在发育的某些特定的阶段才具有一定的吞噬功能。外来抗原性物质被树突状细胞摄入后处理成13~25 个氨基酸的肽段，与MHC-II类分子结合后表达在细胞表面，再提呈给CD4+ T 细胞。
信号完整性测试规范和工作流程(Ver0.9x) 历史记录： 1．2003-4-22：初稿、起草。 2．2003-5-23： 一．主要目的： 信号完整性测试的思想是信号源输出，经过传输线到达信号末端（负载），信号本身的相对变化情况。主要目的是验证PCB设计是否保证了信号在传输过程中能否保证其完整性，以信号的相对测试为主旨，信号本身8的绝对测试为辅。信号比较的内容主要是信号的本征特性参数。同时也部分验证电路原理设计的合理性。也检验产品的性能符合国家有关标准的要求，比如3C、EMC、ESD等。从定性参数的角度保证PCB设计达到了电路设计的要求，同时也保证产品的可靠性、一致性。 信号完整性测试一般是在线测试，因此很多测试参数在不同的工作模式下会有较大的差别。一般情况下需要测试静态工作模式，但一些参数需要测试满负荷工作模式。另外测试点的选择，特别是接地点的位置会对测试结果有很大的影响。 二．基本要求： 要求测试准确、可靠、完善。并要求有完整的测试报告。这里的要求是一般通用性的要求，针对具体的产品、产品的不同阶段，可以提出不同的参数要求和具体的测试内容。由于测试是在PCB板上（或称“在线”）的测试，因此一些测试条件和测试参数的定义条件可能会出现不一致的情况，因此规定：测试的基本状态在没有任何说明的情况下，认为是静态工作模式或额定正常工作模式。如果在测试方法中有规定或说明的，以测试说明的条件为准。在类型和参数中列出了比较详细全面的参数，但在测试中可能没有要求，因此，具体产品如果需要测试请加以特别说明。一般规定：主要参数是必须测试的项目参数。 + 三．类型和参数： 3.1电源部分： 3.1.1电源类型分为LDO电源、DC/DC电源。 3.1.2主要参数有：幅度、纹波、噪声。 3.1.3状态分为：额定负载、空载、轻载、重载、超载。 3.1.4保护能力：输出电流保护、输出电压保护、输入电压保护、热保护。 3.1.5其它参数：输入电压适应性、静态电流、关机电流（漏电流）。 3.2时钟信号： 3.2.1时钟源分类：晶体时钟（正弦波时钟）、晶振时钟（方波时钟、钟振时钟）。 3.2.2时钟类型：系统时钟（源时钟）、（数据）同步时钟。 3.2.3主要参数：频率、占空比、过冲、上升沿、下降沿。 3.2.4其它参数：相位抖动、频率漂移、波形畸变。 3.3总线类信号： 3.3.1分类：数据类总线、地址类总线、混合类总线。 3.3.2主要参数：幅度、过冲。 3.3.3其它参数：抖动、上升沿、下降沿。 3.4端口信号： 3.4.1分类：数据信号、基带（调制）信号、二次调制信号、 3.4.2主要参数：幅度、过冲、上升沿、下降沿。 3.4.3其它参数：抖动、频谱、功率（谱）密度。 3.4.4使用到的几种埠：串口、网口、USB口、IF、RF。 3.5其它信号、器件、电路： 3.5.1主要的几个：复位信号、JTAG、无线、功耗、温度、音频振荡器。 3.5.2参数：
本人技术屌丝一枚，从事PCB相关工作已达8年有余，现供职于世界闻名的首屈一指的芯片设计公司，从苦逼的板厂制板实习，到初入Pcblayout，再到各种仿真的实战，再到今天的销售工作，一步一步一路兢兢业业诚诚恳恳，有一些相关领悟和大家分享。买卖不成也可交流。 1.谈起硬件工作，是原理图，pcb，码农的结合体，如果你开始了苦逼的pcblayout工作，那么将是漫长的迷茫之路，日复一日年复一年，永远搞不完的布局，拉线。眼冒金星不是梦。最多你可以懂得各种模块的不同处理方式，各种高速信号的设计，但永远只能按照别人的意见进行，毫无乐趣。 2.谈起EDA相关软件，形象的说，就普通的PROTEL/AD来说你可能只有3-6K，对于pads 可能你有5-8K，对于ALLEGRO你可能6-10K,你会哀叹做的东西一样，却同工不同酬，没办法这就是市场，我们来不得无意义的抱怨。 3.众所周知，一个PCB从业者最好的后路就是仿真工作，为什么呢？一；你可以懂得各种模块的设计原则，可以优化不准确的部分，可以改善SI/PI可以做很多，这往往是至关重要的，你可以最大化节约成本，减少器件却功效相同；二；从一个pcblayout到仿真算是水到渠成，让路走的更远； 三：现实的说薪资可以到达11-15K or more，却更轻松，更有价值，发言权，你不愿意吗？ 现在由于本人已技术转销售，现在就是生意人了哈哈，我也查询过各种仿真资料我发现很少，最多不过是Mentor Graphics 的HyperLynx ，candense的si工具，
但是他们真的太low了，精确度和完整性根本不能保证，最多是定性的能力，无法定量。真正的仿真是完整的die到die的仿真，是完整的系统的，是需要更高级的仿真软件，被收购的xxsigrity，xx ansys，hspicexx，adxx等等，这些软件才是真正的仿真。 本人提供各种软件及实战代码，例子，从基本入门到高级仿真，从电源仿真，到ddr仿真到高速串行仿真，应有尽有，，完全可以使用，想想以后的高薪，这点投入算什么呢？舍不得孩子套不住狼哦。 所有软件全兼容32位和64位系统。 切记本人还提供学习手册，你懂的，完全快速进入仿真领域。你懂的！ 希望各位好好斟酌，自己的路是哪个方向，是否想更好的发展，舍得是哲学范畴，投资看得是利润的最大化，学会投资吧，因为他值得拥有，骚年！ 注：本人也可提供培训服务，面面俱到，形象具体，包会！ 有购买和学习培训兴趣的请联系 QQ:2941392162
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什么是信号完整性? 如果你发现，以前低速时代积累的设计经验现在似乎都不灵了，同样的设计，以前没问题，可是现在却无法工作，那么恭喜你，你碰到了硬件设计中最核心的问题：信号完整性。早一天遇到，对你来说是好事。 在过去的低速时代，电平跳变时信号上升时间较长，通常几个ns。器件间的互连线不至于影响电路的功能，没必要关心信号完整性问题。但在今天的高速时代，随着IC输出开关速度的提高，很多都在皮秒级，不管信号周期如何，几乎所有设计都遇到了信号完整性问题。另外，对低功耗追求使得内核电压越来越低，1.2v内核电压已经很常见了。因此系统能容忍的噪声余量越来越小，这也使得信号完整性问题更加突出。 广义上讲，信号完整性是指在电路设计中互连线引起的所有问题，它主要研究互连线的电气特性参数与数字信号的电压电流波形相互作用后，如何影响到产品性能的问题。主要表现在对时序的影响、信号振铃、信号反射、近端串扰、远端串扰、开关噪声、非单调性、地弹、电源反弹、衰减、容性负载、电磁辐射、电磁干扰等。 信号完整性问题的根源在于信号上升时间的减小。即使布线拓扑结构没有变化，如果采用了信号上升时间很小的IC芯片，现有设计也将处于临界状态或者停止工作。 下面谈谈几种常见的信号完整性问题。 反射： 图1显示了信号反射引起的波形畸变。看起来就像振铃，拿出你制作的电路板，测一测各种信号，比如时钟输出或是高速数据线输出，看看是不是存在这种波形。如果有，那么你该对信号完整性问题有个感性的认识了，对，这就是一种信号完整性问题。 很多硬件工程师都会在时钟输出信号上串接一个小电阻，至于为什么，他们中很多人都说不清楚，他们会说，很多成熟设计上都有，照着做的。或许你知道，可是确实很多人说不清这个小小电阻的作用，包括很多有了三四年经验的硬件工程师，很惊讶么?可这确实是事实，我碰到过很多。其实这个小电阻的作用就是为了解决信号反射问题。而且随着电阻的加大，振铃会消失，但你会发现信号上升沿不再那么陡峭了。这个解决方法叫阻抗匹配，奥，对了，一定要注意阻抗匹配，阻抗在信号完整性问题中占据着极其重要的
树突状细胞的培养与鉴定 【摘要】目的研究利用磁珠分离方法获取单核细胞，用细胞因子GM-CSF 和IL-4联合诱导使之分化为树突状细胞2.2 细胞表型流式细胞仪对新鲜分离的单核细胞以及培养至第7天的树突状细胞表面抗原进行分析，检测细胞表面CD14、CD80、CD86、HLA-DR等分子的表达情况。结果显示新鲜分离的单核细胞高表达细胞抗原CD14，而培养至第7天的树突状细胞表面出现特异性抗原CD1a、CD80、CD86、HLA-DR, 而不再表达单核细胞抗原CD14，结果如图二所示。 2.3 淋巴细胞增殖反应新生儿脐带血中含有大量的初始型T淋巴细胞，仅树突状细胞可以刺激初始型T淋巴细胞增殖(Sallusto，1994)。细胞在树突状细胞作用4天后，数量明显增加（如图三所示）. 3 讨论 抗原递呈细胞始动和调节免疫反应的发生，尤其是DCs在针对外来抗原的初始免疫反应中发挥关键作用（Banchereau，1998；Sumida，2004）。越来越多的研究显示DCs由于表皮LC细胞的分离培养过程复杂，细胞数量有限，而血液中的DCs含量也极少，直接分离存在很大困难。因此，我们采用分离DCs前体细胞即单核细胞的方法，在细胞因子诱导下培养DCs，这一方法操作相对简便，技术较成熟，且细胞保持体内未成熟DCs摄取加工抗原的特性，具有典型的突起，高表达MHCⅠ和MHCⅡ分子。 研究表明，从单核细胞诱导分化而来的DCs主要具备以下特点（Salluato F，1994）：1）典型的细胞形态和细胞的活动性；2）细胞的表型，高表达CD1、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、Ii、FcμRⅡ、B7、CD40、ICAM-1、LFA-3、CD11c；3) 刺激初始型T细胞增殖能力强，DCs是唯一可以激活脐带血T细胞增殖的抗原递呈细胞。因此，对树突状细胞的鉴定主要从这三个方面来进行。 经GM-CSF、IL-4共同培养的DCs是高度同质性的一群细胞，细胞的大小，形态，表型高度一致，方便实验研究，但是体外培养的DCs与体内的DCs 还是具有这明显的差别。研究发现，体外培养的DC具有MPO蛋白，并表达LZ 和M-CSFR。但这些标志并不经常在体内的DCs如朗格汉斯细胞及淋巴系DC 检测到（Pickl，1996），并且有实验证实皮肤DCs即LCs从体内分离后，短时间体外培养，表型会发生明显改变（Victor，2001）。另外，细胞因子的质量在DCs 培养过程中作用尤其重要，RD公司的细胞因子质量最好，有研究表明RD公司的IL-4浓度为5ng/ml就可诱导单核细胞分化。本研究经过多次实验发现GM-CSF 终浓度50ng/ml，IL-4终浓度25ng/ml可起到较好的效果。 参考文献 ［1］Banchereau Jacques, Steinman RM. Dendritic cell and the control of
信号完整性分析基础系列之二十四——关于抖动（上） 美国力科公司深圳代表处汪进进 写在前面的话 抖动话题是示波器测量的最高境界，也是最风云变换的一个话题，这是因为抖动是示波器测量的诸多功能中最和“数学”相关的。玩数学似乎是需要一定境界的。 “力科示波器是怎么测量抖动的?”，“这台示波器抖动测量准不准?”，“时钟抖动和数据抖动测量方法为什么不一样？”，“总体抖动和峰峰值抖动有什么区别? ”，“余辉方法测量抖动不是最方便吗？”，“抖动和眼图，浴盆曲线之间是什么?”，…… 关于抖动的问题层出不穷。这么多年来，在完成了“关于触发（上）、（下）”和“关于眼图（上）、（下）”，“关于S参数（上）（下）”等三篇拙作后，我一直希望有一篇“关于抖动”的文章问世，但每每下笔又忐忑而止，怕有谬误遗毒。今天，当我鼓起勇气来写关于抖动的时候，我需要特别说明，这是未定稿，恳请斧正。 抖动和波形余辉的关系 有一种比较传统的测量抖动的方法，就是利用余辉来查看信号边沿的变化，然后再用光标测量变化的大小（如图1所示），后来更进了一步，可以利用示波器的“余辉直方图”和相关参数自动测量出余辉的变化范围，这样测量的结果就被称为“抖动”。这个方法是在示波器还没有“测量统计”功能之前的方法，但在90年代初力科发明了测量统计功能之后，这个方法就逐渐被淘汰了。 图1 传统的抖动测量方法 这种传统的方法有下面这些缺点：（1）总会引入触发抖动，因此测量的结果很不准确。（2）只能测量某种参数的抖动，譬如触发上升沿，测量下降沿的余辉变化，反应了宽度的抖动，触发上升沿，测量相邻的上升沿的余辉变化，反应了周期的抖动。显然还有很多类型的抖动特别是最重要的TIE抖动无法测量出来。（3）抖动产生的因果关系的信息也无从得知。 定义抖动的四个维度 和抖动相关的名词非常多：时钟抖动，数据抖动; 周期抖动，TIE抖动，相位抖动，cycle-cycle抖动; 峰峰值抖动(pk-pk jitter)，有效值抖动(rms jitter);总体抖动(Tj)，随机抖动(Rj)，固有抖动(Dj);周期性抖动，DCD抖动，ISI抖动，数据相关性抖动; 定时抖动，基于误码率的抖动; 水平线以上的抖动和水平线以下的抖动…… 这些名词反应了定义抖动的不同维度。 回到“什么是抖动”的定义吧。其实抖动的定义一直没有统一，这可能也是因为需要表达清楚这个概念的维度比较多的原因。目前引用得比较多的定义是: Jitter is defined as the short-term variations of a digital signal’s significant instants from their ideal positions in time. 就是说抖动是信号在电平转换时，其边沿与理想位置之间的偏移量。如图2所示，红色的是表示理想信号，实际信号的边沿和红色信号边沿之间的偏差就是抖动。什么是“理想位置”，“理想位置”是怎么得到的？这是被问到后最不好回答的问题。
巨噬细胞及树突状细胞 在处理和提呈抗原方面的特点 巨噬细胞是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫（先天性免疫）和特异性防卫（细胞免疫）。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。巨噬细胞是一种具多用途多功能的细胞。作为体内的“清道夫”，它们会去除体内那些坏掉死去的细胞以及其他废料。它们是众多个细胞中首个“呈递”抗原的，所以它其中一个重要的功能启动一个免疫反应。另外，作为一个分泌细胞，单核细胞及巨噬细胞对于免疫反应的调整和炎症的发展尤为必需。这是因为它们会大量地产生出一系列强劲的化学物质（单核因子），其中包括酶、补体蛋白和调节因子如白细胞介素1。 树突状细胞（DC）是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells, APC)，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。人体内大部分DC处于非成熟状态，表达低水平的共刺激因子和粘附因子，体外激发同种混合淋巴细胞增殖反应的能力较低，但未成熟DC具有极强的抗原吞噬能力，在摄取抗原(包括体外加工)或受到某些因素刺激时即分化为成熟DC，而成熟的DC表达高水平的共刺激因子和粘附因子。DC在成熟的过程中，由接触抗原的外周组织迁
移进入次级淋巴器官，与T细胞接触并激发免疫应答。
巨噬细胞摄取抗原的方式有吞噬作用、胞饮作用和受体介导的胞吞作用三种方式，可摄入较大的固体物质、极小的颗粒状物质、液态物质等。巨噬细胞表面带有大量不同的受体如fcR、CR 等，也可通过受体介导将抗原摄取。这些抗原被摄取后，首先在细胞内溶酶体的作用下被降解成小分子的多肽片段，然后与细胞内合成的MHC-II 类分子结合形成抗原肽-MHC-II 类分子的复合物，提呈给T 细胞。树突状细胞摄取抗原的方式有巨吞饮作用、受体介导的内吞作用和吞噬作用三种方式。可吞入非常大量的液体，也可摄入较大颗粒的抗原性物质。但是树突状细胞与巨噬细胞不同的是，其仅在发育的某些特定的阶段才具有一定的吞噬功能。外来抗原性物质被树突状细胞摄入后处理成13~25 个氨基酸的肽段，与MHC-II类分子结合后表达在细胞表面，再提呈给CD4+ T 细胞。 （注：专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分来自网络，供参考。可复制、编制，期待你的好评与关注）
信号完整性背景 信号完整性问题引起人们的注意，最早起源于一次奇怪的设计失败现象。当时，美国硅谷一家著名的影像探测系统制造商早在7 年前就已经成功设计、制造并上市的产品，却在最近从生产线下线的产品中出现了问题，新产品无法正常运行，这是个20MHz 的系统设计，似乎无须考虑高速设计方面的问题，更为让产品设计工程师们困惑的是新产品没有任何设计上的修改，甚至采用的元器件型号也与原始设计的要求一致，唯一的区别是 IC 制造技术的进步，新采购的电子元器件实现了小型化、快速化。新的器件工艺技术使得新生产的每一个芯片都成为高速器件，也正是这些高速器件应用中的信号完整性问题导致了系统的失败。随着集成电路(IC)开关速度的提高，信号的上升和下降时间迅速缩减，不管信号频率如何，系统都将成为高速系统并且会出现各种各样的信号完整性问题。在高速PCB 系统设计方面信号完整性问题主要体现为：工作频率的提高和信号上升/下降时间的缩短，会使系统的时序余量减小甚至出现时序方面的问题；传输线效应导致信号在传输过程中的噪声容限、单调性甚至逻辑错误；信号间的串扰随着信号沿的时间减少而加剧；以及当信号沿的时间接近0.5ns 及以下时，电源系统的稳定性下降和出现电磁干扰问题。
信号完整性含义 信号完整性(Signal Integrity)简称SI，指信号从驱动端沿传输线到达接收端后波形的完整程度。即信号在电路中以正确的时序和电压作出响应的能力。如果电路中信号能够以要求的时序、持续时间和电压幅度到达IC，则该电路具有较好的信号完整性。反之，当信号不能正常响应时，就出现了信号完整性问题。从广义上讲，信号完整性问题指的是在高速产品中由互连线引起的所有问题，主要表现为五个方面:
在上两篇文章中，我们分别介绍了直方图（统计域分析）和抖动追踪（时域分析）在抖动分析中的应用。从抖动的直方图和抖动追踪波形上我们可以得到抖动的主要构成成分以及抖动参数的变化趋势。如需对抖动的构成做进一步的分析，还需要从频域角度去进一步分析抖动的跟踪波形。 抖动的频谱即是对抖动追踪（jitter track）波形做FFT运算。如下图1所示 为一个时钟周期测量参数的追踪、频谱分析步骤及效果，在抖动频谱图上可以清楚的看出某两个频率值点抖动比较大： 图1 抖动频谱 黄色为实际采集到的时钟波形（C1通道） P1测量C1通道时钟信号的时钟周期 F7函数对P1测量参数进行跟踪 F6对F7进行FFT分析 下图2所示为一典型的串行信号抖动追踪频谱图，从图中可看出各种抖动成分；DDj和Pj为窄带频谱（三角形谱或者谱线）但是DDj和Pj的区别是由于DDj是和码型相关的，其频率fDDJ一般会是数据位率的整数倍，如果Pj的频率fPJ正好等于fDDJ，那么从抖动的频谱图里面是很难将DDj和Pj精确的分开的，所以通常在抖动分解的过程中一般通过时域平均的方法来分解DDj；BUj主要由于串扰等因素引起的，一般分为两种，一种是窄带，但幅度较高，很显然这类BUJ也是很难和PJ区分开的，除非我们知道引起BUJ的源头，知道其频率，所以说我们在抖动测试时得到的PJ一般会包含这类BUJ(所以通常情况下对这类BUJ不加区分，直接算做PJ，而将BUJ分类为PJ和OBUJ，在之前的抖动分类文章中有提及)；另外一类是宽带的BUJ（很多时候也叫OBUJ，other bounded uncorrelated jitter），幅度很小，基本会埋没到RJ中去，这类抖动很容易被误算作RJ，目前使用在示波器上的抖动分解软件只有Lecroy最近推出的SDAII（基于NQ-SCALE抖动分解理论）能够较好的将这类抖动从Rj中剥离出来；RJ是 宽带频谱，幅度很小。
树突状细胞与免疫调节的研究进展 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【关键词】树突状细胞;自身免疫性疾病;免疫耐受 1973年 Steiman和Cohn［1］首次从脾脏中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功能都不同的白细胞,因其细胞膜向外伸出,形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起,故而命名为树突状细胞 (dendritic cells,DCs)。此后的研究发现DCs在免疫应答的首要环节-抗原提呈中起着重要的作用，是目前公认的体内功能最强大的专职性抗原提呈细胞( antigen - presenting cell,APC)。它能激活静息型T细胞，主要参与细胞免疫和T细胞依赖的体液免疫反应，在维持机体自身免疫耐受和活化外周T、B淋巴细胞中发挥重要作用,与炎症反应、自身免疫性疾病、移植免疫及肿瘤治疗关系密切。 1 DCs的生物学特性 DCs是具有典型的树突状形态、膜表面高表达MHC-I类和MHC-Ⅱ类分子、能移行至淋巴器官,刺激静息型T细胞增殖活化，并且具有一些相对特异性表面标志的一类细胞。 1.1 DCs的来源与分布 DCs起源于骨髓CD34+细胞,数量极少, 仅占人外周血的1%以下,
占小鼠脾细胞的0.2%～ 0.5%［2］。DCs前体细胞由骨髓进入外周血,再分布到全身各组织,根椐其移行部位不同而命名不同: (1)滤泡树突状细胞（Follicular dendritic cell,FDC）：其树突能有效地捕捉复合形式的抗原,并将抗原长期保留在其表面,以维持二级滤泡的记忆功能,也与B记忆细胞的产生有关; (2)并指状树突细胞(interdigitating dendritic cells，IDC)：定位于淋巴组织胸腺依赖区,是淋巴组织胸腺依赖区的重要APC,其表面缺乏Ig受体和C3受体,但富含MHCI类和Ⅱ类抗原;(3)朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)：位于皮肤和胃肠上皮层,是这些部位的重要 APC,其表面有丰富的MHC I类和Ⅱ类抗原,胞浆内有birbeck颗粒,为LC的重要特征; (4)隐蔽细胞(veiled cells)：分布于输入淋巴管。 1.2 DCs的分化发育 一般认为成熟DCs是已知最强的专职APC，在机体内可诱导强烈的免疫反应。但随着对DCs发育、分化和功能认识的不断深入，发现DCs的来源、表型及其功能都具有明显的多样性和异质性。根据DCs 的来源、功能和分布可将DCs分为髓系DCs 和淋巴系DCs［3］，前者与单核细胞、粒细胞有共同的祖细胞,而后者与T细胞、B细胞有共同的前体细胞。近年在人胎肝、脐血、骨髓、脾脏、人外周血以及小鼠的骨髓和外周血中分离出髓系前体,在体外合适的培养条件及刺激因素下获得了具有典型形态、表型及功能的DCs。目前淋巴系 DCs的分化发育过程尚不十分清楚,有研究表明IL-3能刺激淋巴系前体获得淋巴系 DCs［4］。髓系DCs的分化发育分为 4个阶段:前体阶段、
千兆位设备PCB的信号完整性设计 本文主要讨论在千兆位数据传输中需考虑的信号完整性设计问题，同时介绍应用PCB设计工具解决这些问题的方法，如趋肤效应和介质损耗、过孔和连接器的影响、差分信号及布线考虑、电源分配及EMI控制等。 通讯与计算机技术的高速发展使得高速PCB设计进入了千兆位领域，新的高速器件应用使得如此高的速率在背板和单板上的长距离传输成为可能，但与此同时，PCB设计中的信号完整性问题(SI)、电源完整性以及电磁兼容方面的问题也更加突出。 信号完整性是指信号在信号线上传输的质量，主要问题包括反射、振荡、时序、地弹和串扰等。信号完整性差不是由某个单一因素导致，而是板级设计中多种因素共同引起。在千兆位设备的PCB板设计中，一个好的信号完整性设计要求工程师全面考虑器件、传输线互联方案、电源分配以及EMC方面的问题。 高速PCB设计EDA工具已经从单纯的仿真验证发展到设计和验证相结合，帮助设计者在设计早期设定规则以避免错误而不是在设计后期发现问题。随着数据速率越来越高设计越来越复杂，高速PCB系统分析工具变得更加必要，这些工具包括时序分析、信号完整性分析、设计空间参数扫描分析、EMC设计、电源系统稳定性分析等。这里我们将着重讨论在千兆位设备PCB设计中信号完整性分析应考虑的一些问题。 高速器件与器件模型 尽管千兆位发送与接收元器件供应商会提供有关芯片的设计资料，但是器件供应商对于新器件信号完整性的了解也存在一个过程，这样器件供应商给出的设计指南可能并不成熟，还有就是器件供应商给出的设计约束条件通常都是非常苛刻的，对设计工程师来说要满足所有的设计规则会非常困难。所以就需要信号完整性工程师运用仿真分析工具对供应商的约束规则和实际设计进行分析，考察和优化元器件选择、拓扑结构、匹配方案、匹配元器件的值，并最终开发出确保信号完整性的PCB布局布线规则。因此，千兆位信号的精确仿真分析变得十分重要，而器件模型在信号完整性分析工作中的作用也越来越得到重视。 元器件模型通常包括IBIS模型和Spice模型。由于板级仿真只关心输出管脚经过互联系统到输入管脚的信号响应，同时IC厂家不希望泄漏器件内部详细的电路信息，且晶体管级Spice模型仿真时间通常难以忍受，所以IBIS模型在高速PCB设计领域逐渐被越来越多的器件厂家和信号完整性工程师所接受。 对于千兆位设备PCB系统的仿真，工程师经常会对IBIS模型的精确性提出质疑。当器件工作在晶体管的饱和与截止区时，IBIS模型缺乏足够详细的信息来描述，在瞬态响应的非线性区域，用IBIS模型仿真的结果不能像晶体管级模型那样产生精确的响应信息。然而，对于ECL类型器件，可以得到和晶体管级模型仿真结果很吻合的IBIS模型，原因很简单，ECL驱动器工作在晶体管的线性区域，输出波形更接近于理想的波形，按IBIS标准可以得到较为精确的IBIS模型。 随着数据传输速率提高，在ECL技术基础上发展起来的差分器件得到很大发展。LVDS标准和CML等使得千兆位信号传输成为可能。从上面的讨论可知，由于电路结构和相应的差分技术应用，IBIS标准仍然适用于千兆位系统的设计。已发表的一些IBIS模型在2.5Gbps LVDS 和CML设计中的应用文章也证明了这一点。 由于IBIS模型不适用于描述有源电路，对于许多有预加重电路进行损耗补偿的Gbps器件，IBIS模型并不合适。因此，在千兆位系统设计中，IBIS模型只有在下列情况下才可以有效工作： 1．差分器件工作在放大区(线性V-I曲线) 2．器件没有有源预加重电路
信号完整性分析与测试 信号完整性问题涉及的知识面比较广，我通过这个短期的学习，对信号完整性有了一个初步的认识，本文只是简单介绍和总结了几种常见现象，并对一些常用的测试手段做了相应总结。本文还有很多不足，欢迎各位帮助补充，谢谢！ 梁全贵 2011年9月16日
目录 第1章什么是信号完整性------------------------------------------------------------------------------ 3第2章轨道塌陷 ----------------------------------------------------------------------------------------- 5第3章信号上升时间与带宽 --------------------------------------------------------------------------- 6第4章地弹----------------------------------------------------------------------------------------------- 8第5章阻抗与特性阻抗--------------------------------------------------------------------------------- 9 5.1 阻抗 ------------------------------------------------------------------------------------------ 9 5.2 特性阻抗------------------------------------------------------------------------------------- 9第6章反射----------------------------------------------------------------------------------------------11 6.1 反射的定义 ---------------------------------------------------------------------------------11 6.2 反射的测试方法--------------------------------------------------------------------------- 12 6.3 TDR曲线映射着传输线的各点 --------------------------------------------------------- 12 6.4 TDR探头选择 ----------------------------------------------------------------------------- 13 第7章振铃--------------------------------------------------------------------------------------------- 14 第8章串扰--------------------------------------------------------------------------------------------- 16 8.1 串扰的定义 -------------------------------------------------------------------------------- 16 8.2 观测串扰 ----------------------------------------------------------------------------------- 16 第9章信号质量 --------------------------------------------------------------------------------------- 18 9.1 常见的信号质量问题 --------------------------------------------------------------------- 18 第10章信号完整性测试 ----------------------------------------------------------------------------- 21 10.1 波形测试---------------------------------------------------------------------------------- 21 10.2 眼图测试---------------------------------------------------------------------------------- 21 10.3 抖动测试---------------------------------------------------------------------------------- 23 10.3.1 抖动的定义 ------------------------------------------------------------------------ 23 10.3.2 抖动的成因 ------------------------------------------------------------------------ 23 10.3.3 抖动测试 --------------------------------------------------------------------------- 23 10.3.4 典型的抖动测试工具： ---------------------------------------------------------- 24 10.4 TDR测试 --------------------------------------------------------------------------------- 24 10.5 频谱测试---------------------------------------------------------------------------------- 25 10.6 频域阻抗测试 ---------------------------------------------------------------------------- 25 10.7 误码测试---------------------------------------------------------------------------------- 25 10.8 示波器选择与使用要求： -------------------------------------------------------------- 26 10.9 探头选择与使用要求-------------------------------------------------------------------- 26 10.10 测试点的选择--------------------------------------------------------------------------- 27 10.11 数据、地址信号质量测试 ------------------------------------------------------------- 27 10.11.1 简述 ------------------------------------------------------------------------------- 27 10.11.2 测试方法-------------------------------------------------------------------------- 27