现代生物医学进展https://www.doczj.com/doc/0613119433.html, Progress in Modern Biomedicine 2009Vol.9No.14
·技术与方法·
应用基于适配器连接介导的等位基因特异性扩增法检测LRRK2基因
的单核苷酸多态性*
孙晓如1卜莹2丁新生3汪维鹏2丁海霞3丁一冰1邓黎丽2王
枫3
周国华2黄乐群1
（1南京大学医学院江苏南京210093；
2华东医学生物技术研究所江苏南京210002；3江苏省人民医院神经内科江苏南京210029）
摘要目的：应用基于适配器连接介导的等位基因特异性扩增法（Adapter Ligation-mediated Allele-specific Amplification ，简称ALM-ASA ）技术，检测与帕金森病（PD ）发病相关的LRRK2基因中的4个SNP 位点（6055G>A,7153G>A ，4321C>T 和2264C>T ），探讨该法用于筛查帕金森病相关SNP 位点的可行性，研究多个SNP 位点同时检测的准确性和可靠性。方法：运用
ALM-ASA 法原理，改进使用多重PCR 法代替单一预扩增法，使用4对引物在单管中预扩增含所待测SNP 位点的四段片段，通过酶切、
酶连和PCR 特异性扩增检测判断SNP 的类型。经PCR 体外定点突变实验制备的相应位点的突变阳性片段，检验方法的准确性和可靠性。结果：采用该法成功测定了20名PD 病人和20名健康中国人的LRRK2基因中最受关注的4个SNP 位点的多态性。
并随机对其中10分样本的检测结果以测序法检测进行验证，结果完全一致。结论：ALM-ASA 法极大提高了PCR 反应的特异性，是一种准确、可靠，且费用低廉的SNP 筛查方法，可推广应用于临床和实验室进行与PD 有关的单核苷酸多态性的筛查检测。
关键词：ALM-ASA 法，LRRK2，单核苷酸多态，多重PCR ，中图分类号：
R741文献标识码：B 文章编号：1673-6273（2009）
14-2716-05Adapter-ligation Mediated Allele-specific Amplification (ALM-ASA)
for Multiplex SNP Genotyping of LRRK2*
SUN Xiao-ru 1,BU Ying 2,DING Xin-sheng 3,WANG Wei-peng 2,DING Yi-bing 1,DING Hai-xia 3,DENG Li-li 2,
WANG Feng 3,ZHOU Guo-hua 1,2,HUANG Le-qun 1
（1College of medicine,Nanjing University,Nanjing,Jiangsu,210093,P.R.China;
2Huadong Research Institute for Medicine and Biotechnics,Nanjing,Jiangsu,210002,P.R.China;
3Jiangsu People's Hospital,Nanjing,Jiangsu,210029,P.R.China ）
ABSTRACT Objective:To apply a new method named as adapter-legation mediated allele-specific amplification (ALM-ASA in short)for multiplex single nucleotide polymorphism (SNP)genotyping of 1eucine rich repeat kinase 2(LRRK2)in Parkinson's disease (PD)patients.Four SNPs loci 6055G>A （G2019S ）,7153G>A （G2385R ），4321C>T （R1441C ）and 2264C>T （P755L ）
in LRRK2gene were selected as targets for investigation.Methods:The ALM-ASA method was applied to the genotyping with a slight modification,such as multiple DNA fragments containing SNPs of interest were preamplification instead of one fragment with all SNPs.By comparing with the positive samples artificially prepared from the PCR-based site-directed mutagenesis,the accuracy and reliability of the method was testified.Results:The four SNPs in the samples of 20patients and 20healthy were successfully typed.The results were in agreement with those by Sanger's DNA sequencing method.Conclusion:ALM-ASA is an accurate and efficient method for LRRK2SNP typing with the advantages of simple set-up,low sample consuming,and lower running cost.It will be very powerful for screening the SNPs in the LRRK2gene associated with PD in clinical research.
Key words:Adapter-ligation mediated allele-specific amplification;1eucine rich repeat kinase 2;single nucleotide polymorphism;multiplex PCR
Chinese Library Classification:R741Document code:B
Article ID:1673-6273（2009）
14-2716-05*基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.30270368）通讯作者：黄乐群，Email ：huanglq@https://www.doczj.com/doc/0613119433.html, （收稿日期：2009-05-05接受日期：2009-05-31）
帕金森病（Parkinson's disease,PD ）是当今发生最为广泛的神经退行性疾病,已成为严重影响人类健康的重要疾病之一。据最近的统计资料显示，我国55岁以上老年人帕金森病的发病率约为1%，给社会和病人家庭带来了极大的经济与精神负担。随着家族遗传性PD 的致病基因a-synuclein 、
Parkin 、DJ-1和PINK1的相继克隆，遗传因素在PD 发病机制中的作用越来越受到重视。而家族性帕金森病8型(PARK8)的致病基因，即亮氨酸富集区重复激酶2（1eucine rich repeat kinase 2，LRRK2）基因，由于其变异在散发性和家族性PD 人群中均有发现，逐渐引起了广泛的关注[1]，成为研究PD 发病机制的热点。
LRRK22716··
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表1用于LRRK2基因中4个SNP位点测定实验用引物及其相应的扩增产物长度Table1The primers used for typing four SNPs in LRRK2gene and the corresponding lengths of amplification products
SNPs
引物名
Primer name
引物序列（5'-3'）
Primer sequence(5'-3')
扩增长度
Product length(bp)
预扩增引物
Primers
For Pre-Amplification 7153G>A7273F CAATTCAGAATGGTTAGGGAAG635 7273R GACACTGTGACAGAACTATGTC
6055G>A6055F AGGGACAAAGTGAGCACAGA918 6055R TGGGAACTAAGAAAGGGAGG
4321C>T4321F TGCCACCTAAAAGGGTGAAG550 4321R AAGTGAGTTGCTCACTTCTC
2264C>T2384F ATGCTTGTCTTGAGGAGCTC883 2384R CTTAAGGTCCCTCAAACTGG
等位基因特异性引物
Allele-
Specific
primers 7153G>A7153G(A)AAAAGTGCACGCAGTCTATTAGaCC(T)b307 6055G>A6055G(A)TGCAAAGATTGCTGACTtCG(A)383 4321C>T4321C(T)ACAGGGGAAGAAGAAGCcCG(A)171 2264C>T2264C(T)TTCAGTAAGAGTTCCACCAATTaGG(A)576
体外定点突变引物
Primers
for
artificial
Allele
mutation 7153G>A2385p1AAGTAACCAAAAGTAAGTAAAG
2385p3GTCTATTAGTCTACAGAGTTTTTCAc
2385p2ACTCTGTAGACTAATAGACTGCGT
2385p4TAGAGCAGATAATCCTGGGGC 6055G>A2019p1CACTTATCAGATTTGACCCT
2019p3GAGCAATGCTGTAGTCAGCA
2019p2TGCTGACTACAGCATTGCTC
2019p4AGCACTGGCCCCATAACTGC 4321C>T1441p1GAAGATGGGAAAGGAAAACTAT
1441p3AGAAGCGCAAGCCTGGA
1441p2CCTCCAGGCTTGCGCTT
1441p4TCAGTATCCCAGAAACGGTC 2264C>T755p1CTAACCCACCCTGAACACAT
755p3TTCCACCAATTTGAGACTGC
755p2GTCTCAAATTGGTGGAACTC
755p4TTGCAATATCTTTGGCTTAA
基因位于染色体12q12，全长7584个碱基，共有51个外显子，编码一个含2527个氨基酸的大分子蛋白。研究表明在LRRK2基因上至少有9个位点的突变变异明确与迟发性PD发病有关联[2]。但在不同人种中与PD发病相关SNP位点却有所不同。因此明确中国人群中该基因突变发生SNP位点和频率与PD 发生的关联性，对认识PD的发病机理，在防病、治病中具有重要的意义。
目前报道的SNP检测方法很多，按原理分类主要有：等位基因杂交法（等位基因特异性杂交（Allele specific hybridization, ASH）、内切酶切技术（Endonuclease digestion）、引物延伸法（Primer extension）、寡核苷酸连接分析（Oligonucleotide ligation assay,OLA）和变性高效液相色谱（dHPLC）等[3]。这些分析方法均各有其优缺点，但其通常需要较为昂贵的费用进行检测，限制了普通实验室和临床筛查的广泛使用。为了建立一种具有中通量、高特异性、DNA模板消耗量少、检测费用低廉的SNP测定法，我们研究了一种基于适配器连接介导的等位基因特异性扩增（Adapter Ligation-mediated Allele-specific Amplification，简称ALM-ASA）的多重SNP测定方法[4,5]，虽然该法在SNP测定中表现出良好的特异性，但对不同SNP位点的测定来说，仍然需要评价方法的适用性。为评价该方法在临床和实验室对PD
相关的LRRK2中SNPs的筛查和分析的应用前景，我们采用了该方法的基本原理，以文献报道中最受关注的LRRK2基因中的4个等位基因位点，即6055G>A（G2019S）,7153G>A （G2385R），4321C>T（R1441C）和2264C>T（P755L）[6-9]为测定对象，进行了多个SNP位点同时测定的方法学研究。通过自制阳性样本和序列测定的验证，确立了可满足大规模疾病相关性筛查需要的快速和低成本SNP检测新方法。
1材料与方法
1.1对象
按照知情同意的原则,抽取20例临床检测患有PD病人和20例健康人无亲缘关系个体静脉血,EDTA抗凝,-20℃保存。
1.2方法
1.2.1模板DNA制备采用常规酚-氯法提取DNA。
1.2.2引物设计与SNP位点实验用引物采用Primer5引物设计程序初步设计，并用在线的Oligo Prarmeter Calculation(http: //https://www.doczj.com/doc/0613119433.html,/calculation/calculation.html)进一步优化引物参数而得。所有引物均由上海Invitrogen公司合成并经PAGE纯化。实验中所有使用的引物见表1。
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所有待测LRRK2SNP查自GenBank(http://www.ncbi. https://www.doczj.com/doc/0613119433.html,/),LRRK2登录号AY792511，7153G>A，6055G>A, 4321C>T和2264C>T的登录号分别是ss48398568，ss48398564，ss48398556和rs34410987。
1.2.3ALM-ASA方法及步骤ALM-ASA法见文献[4]。本研究中使用的具体方法如下：
第一步，采用多重PCR预扩增含有待测SNP位点的片段。15μL PCR反应体系中含有等量混合的引物（见表1），每种引物用量为0.3μmol/L，dNTP浓度为0.2mmol/L，MgCl2浓度为1.5mmol/L，1单位Taq DNA聚合酶及100~200ng模板DNA。扩增使用PTC-225型PCR仪（MJ Research,Inc.,Massachusetts, USA）。PCR热循环条件为：94℃预变性5min，然后以94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸1min，扩增35个循环，最后72℃延伸7min使反应完全。反应完成后，取反应产物3μL，在2%琼脂糖凝胶上进行电泳（1×TAE电泳缓冲液，琼脂糖、凝胶电泳加样液和溴乙锭（EB）均为Sangong生物公司产品），电泳条件为：电压100V，恒压电泳15min，于Power PAC1000型电泳仪（Bio-Rad Laboratories，Inc.，CA，USA）进行电泳，于GeneGe-nius凝胶成像系统（Syngene，Co.,Ltd.,Cambridge,UK）拍摄电泳图谱。以TiangenTM50bpDNA ladder MarkerII为DNA分子量标准标记。
第二步，酶切与酶连反应。取5μL第一步反应产物作为模板，加入Xsp1内切酶（TaKaRa Biotechnology大连Co.,Ltd.）10U，反应缓冲液（10倍）2μL，加水至20μL，在37℃水浴中保温反应2.5h。取反应液10μL在70℃孵育15min，使内切酶失活后，加入DNA适配器（见表1E区）各50pmol，5μL反应缓冲液（10倍）和50单位T4DNA连接酶（TaKaRa Biotechnology 大连Co.,Ltd.），加水至50μL，16℃水浴中反应2.5h。取出4℃保存。
第三步，多重PCR扩增。10μL反应体系中含有共用引物10pmol（见表1），特异性引物混合物（一管为7153A，6055G，4321C和2264C，另一管为7153G，6055A，4321T，2264T，序列见表1）共20pmol（根据电泳条带强度不同略微调整不同引物的用量），反应缓冲液1μL （10倍），dNTP浓度为0.2mmol/L，MgCl2浓度为1.5mmol/L，0.7单位Taq DNA聚合酶，以及1μL酶连产物。PCR反应热循环条件为：94℃预变性5min后，94℃变性20s，60℃退火30s，72℃延伸1min，扩增30个循环，最后72℃延伸7min使反应完全。反应完成后，取反应产物3μL，在2%琼脂糖凝胶上进行电泳（条件同前），于凝胶成像系统拍摄电泳图谱。
第四步，根据DNA条带大小及出现位置判断个等位基因的类型。
1.2.4PCR体外定点突变实验突变位点片段制备由于实际样本中有关SNP位点的变异为偶发，且在不同种族中发生率的比例不同。本研究为检验ALM-ASA法的准确性和灵敏性，自制定点突变样本，供试验检测。采用方法为PCR体外定点突变实验方法见文献[10]。本实验具体使用方法如下。
第一步，PCR扩增引入人工突变位点。分别以p1和p3，p2和p4（见表1）扩增出含有相应突变位点的上下游两个片段。50μL反应体系中含有上下游引物各0.6μmol/L，5μL反应缓冲液（10倍），dNTP浓度为0.2mmol/L，2.0单位Pfu DNA聚合酶（promega Corporation，USA），和80~100ng DNA模板。PCR反应热循环条件为：95℃预变性2min，然后以88℃变性30s，46℃退火30s，72℃延伸1min，扩增35个循环，最后72℃延伸5min 使反应完全。反应完成后，取反应产物3μL，在2%琼脂糖凝胶上进行电泳（条件同前），于凝胶成像系统拍摄电泳图谱。
第二步，PCR扩增产物纯化。使用赛百盛试剂盒（上海赛百盛基因技术有限公司，上海），按使用说明书进行割胶纯化。
第三步，PCR反应合成突变片段。将纯化后含有突变位点的等量上下游两个片段的混合，共计约100ng。以预扩增引物（见表1）连接突变片段。50μL反应体系中含有上下游引物各1.2μmol/L，5μL反应缓冲液（10倍），dNTP浓度为0.2mmol/L，MgCl2浓度为1.5mmol/L，1．25个单位Taq DNA聚合酶。PCR热循环条件为：94℃预变性5min，然后以94℃变性30s，48℃退火30s，72℃延伸1min，扩增10个循环后加入外引物，再进行上述循环30个，最后72℃延伸7min使反应完全。第四步，脱氧核糖核苷酸序列鉴定：DNA测序送上海英骏生物技术有限公司完成.以最终确证片段的序列和定点突变结果。
1.2.5人工阳性突变样本的制备和检测将PCR体外定点突变成功的PCR扩增DNA片段产物稀释105倍，与标准DNA模板等体积混合，得单一或全突变样本。
以ALM-ASA法检测所制备得含有定点突变的样本，确定方法的灵敏度和准确性。
2结果与分析
2.1PCR预扩增含有SNP位点的片段
由于与PD发病有关的基因位点分别位于LRRK2基因的不同区域，而LRRK2基因全长7584bp[11]，因此本文以四重PCR扩增出分别含有待测突变位点的四个片段。理论上，4个片段对应的多重扩增产物的长度分别为883（2264C>T），550（4321C>T），918（6055G>A）和635(7153G>A)bp。从DNA分子量标准标记可知，所有扩增产物的长度正确（见图1）。
2.2PCR体外定点突变
由于在病人中有关SNP位点的突变为散发和偶发，为评价本方法学检出的灵敏度、正确性和可靠性，我们通过PCR体外定点突变方法，人工制备含特定位点突变样本。分别通过
共用引物
Common primer
mp-1CCCCACTTCTTGTTCTCTCAT
适配器adaptor adp-5
CCCCACTTCTTGTTCTCTCATCAGGCG-
CATCACTCGC
adp-6CTAGCGAGTGATGCGCTAAG
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现代生物医学进展https://www.doczj.com/doc/0613119433.html, Progress in Modern Biomedicine 2009Vol.9No.14图1多重预扩增的PCR 扩增产物的凝胶电泳图
Figure 1The gel electrophoretogram of PCR products from multiplex
preamplification
通道1-5分别为5个待测样本凝聚电泳图，
M 为DNA 分子标记。A 和B 为条带883（2264C>T ）和918（6055G>A ），C 为635(7153G>A)D 为550（4321C>T ）。
Lanes 1-5:five samples;M:DNA marker.A:883-bp fragment (2264C>T);B:918-bp fragment (6055G>A);C:635-bp fragment (7153G>A);D:
550-bp fragment
(4321C>T).
PCR 扩增合成了含有特定位点定点突变的DNA 片断，经测序鉴定突变成功。
见图2A ，其中除含有6055G>A 突变的片段，其余均与相应位点的预扩增片段等长。含6055A 突变的片段虽然长度和预扩增产物不同，但因具有和预扩增产物相同的酶切位点，酶切后片段长度相等，将不会影响到下一步的检测反应。各含定点突变位点的片段凝胶电泳图见图2B 。
2.3人工制备标本的检测结果
在预扩增中，由于多对引物共同作用于同一基因组DNA 模板，同时扩增不同长度含有待测位点的片段，扩增的效率会有所差异。因此，不同的片段在扩增后的产物中所占有的量会有不同。
经过酶切、酶连反应后，再使用特异性引物进行等位基因扩增时，不同位点的模板片段浓度会有差异。通过调整特异性引物的组合和比例，可以得到强度相当的电泳条带。
图3A 为人工组合基因型分别为野生型纯合子、杂合子和突变型纯合子的基因组DNA 试验结果。结果表明每条等位基因特异性引物均具有良好的特异性，扩增条带与基因型相一致，无非特异性或错配杂带。理论上，与4个SNP 位点（2264C>T ）,383（6055G>A ）,307（7153G>A ）171（4321C>T ）对应的扩增产物长度分别为576，
383，307和171bp,从图中DNA marker 可知，所有扩增产物的长度正确
。
图2四个位点体外定点突变后的扩增产物电泳图和测序结果图Figure 2The electrophoretograms by Sanger's sequencing method and the gel electrophoretogram of PCR products amplified from the mutagenic
primers for site-directed mutagenesis at four SNP loci in vitro.
图2A ．DNA 序列测定结果
Figure 2A.The electrophoretograms by Sanger's sequencing method.a ．2264C>T,b.4321C>T,c.6055G>A,d.71533G>A,箭头所指处为人造
突变位点。
a.2264C>T;
b.4321C>T;
c.6055G>A;
d.71533G>A.The arrow place is
artificial mutation
site.
图2B 定点突变PCR 产物凝胶电泳图
Figure 2B The gel electrophoretogram of PCR products with site-directed
mutagenesis.
通道1=2264T （883bp ）；2=4321T （550bp ）；3=6055A （630bp ）；
4=7153A ，（635bp ）。M 为DNA 分子标记。
Lane 1:2264T (883bp);lane 2:4321T (550bp);lane 3:6055A (630bp);
lane 4:7153A (635bp).M:DNA
marker.
图3A 基因型分别为野生型纯合子、突变型纯合子和杂合子的基因组
以特异性引物进行SNP 测定时的PCR 扩增产物凝胶电泳图Figure 3A The gel electrophoretogram of PCR products amplified from two homozygotes (wild-type and mutant)and a heterozygote with
allele-specific primers for SNP typing.
通道1和2，3和4，5和6，分别为野生型纯合子、杂合子和突变型纯合子的凝胶电泳图。通道1、
3和5中的A=2264C ，B=6055G,C=7153A,D=4321C ；通道2、
4和6中的A=2264T ，B=6055A,C=7153G,D=4321T Lanes 1and 2:wild-type;lanes 3and 4:mutant;lanes 5and 6:https://www.doczj.com/doc/0613119433.html,nes 1,3and 5:A=2264C,B=6055G,C=7153A,D=4321C;lanes 2,4and 6:A=2264T,B=6055A,C=7153G,D=4321T.
2719··
根据文献，
LRRK2基因中同时多个SNP 位点发生突变的情况及其罕见，通常仅一个SNP 位点发生突变，因此，我们人工制备了单一位点突变型基因组DNA 进行测试。结果见图3B 。结果表明ALM-ASA 法可以灵敏和准确检测出突变类型，对不同位点的DNA 突变检出具有特异性。
2.4四重PCR 同时测定LRRK2中的4个SNP 位点
本文使用ALM-ASA 法，直接将野生型和突变型特异性引物分别按一定组合和比例混合后加入含有底物和扩增试剂的两个PCR 管中进行扩增，
可同时测定LRRK2基因中与PD 有关的4个SNP 位点的变异状况。我们采用该法分别测定了20个健康成人和20名PD 病人（男女各半）的LRRK2基因的4个SNP 位点：
2264C>T ，4321C>T ，6055G>A 和7153G>A 的突变型，发现其中一例病人的LRRK2基因7153G>A 位点野生型和突变型对应处都出现条带，即7153G>A 位点为杂合子（见图4，样本4）。该位点的突变发生率和文献报道该位点在汉族人口中突变发生率相当。
为验证ALM-ASA 法的准确性，我们抽取部分样本同时测序验证。经过对比，
ALM-ASA 法和测序结果完全一致（图表略）。说明ALM-ASA 法结果可靠准确，与测序法相比，ALM-ASA 法具有简单快速、检测价廉的优点。
3讨论
本文采用的ALM-ASA 测定多重SNPs 的检测法，可以方便快捷的同时对LRRK2常见多发生率的4个SNPs 位点检测。该法通过对人工突变模板的检测和样本的测序验证，证明检测方法灵敏，结果准确、可靠。
与等位基因特异性多重PCR 技术相比，
ALM-ASA 法仅需要n+1个引物就可以进行n 重PCR 扩增，
因此PCR 测定中引物间的相互作用大大降低，保证了测定的特异性。另外，由于测
定每个SNP 位点有两条特异性引物，即分别与正义链和反义链互补，对n 重SNP 测定来说就需要2n 个引物组合，因此合适的引物筛选就很费事，我们研究了一种名为SNiP DESIGN-ER 的软件[12]来优化引物组合。
ALM-ASA 检测方法具有很高的特异性，本文中通过同时使用PCR 预扩增含待检测位点DNA 片段和在等位基因特异性引物的3'端倒数第三位人工引入错配碱基配合以特殊设计的adapter 等手段，使得本法可以特异性的检测LRRK2相应的SNP 位点，结果准确。
ALM-ASA 检测方法所需DNA 模板量少，可仅用少量的模板量同时检测出LRRK2基因中与PD 有关的4个SNPs 位点的类型。在其他方法进行SNP 位点检测时，通常每个位点即需要100~200ng 的DNA 模板量。
而在本法中，使用相同的模板量即可同时完成对4个SNPs 位点的检测。因此本方法在临床使用中可大大减轻临床检测病人的痛苦和损耗。
ALM-ASA 检测方法具有操作简单方便，不需要特殊仪器，测试成本低廉等优点。在具备基本PCR 扩增仪和凝胶成像分析系统的条件下即可开展相应的检测，对临床医院开展帕金森病相关基因LRRK2在中国汉族人群中进行突变和多态性的筛查具有实用性和易操作性等重要的意义。在PD 病的机理研究和防治方面将有广泛的应用价值。
参考文献（References ）
[1]Giasson BI,Van Deerlin VM.Mutations in LRRK2as a cause of Park-inson's disease.[J]Neurosignals,2008,16(1):99-105
[2]Giasson BI,Covy JP,Bonini NM,et al.Biochemical and pathological
characterization of Lrrk2[J].Ann Neurol,2006,59(2):315-322[3]汪维鹏，倪坤仪，周国华.单核苷酸多态性检测方法的研究进展[J].
遗传,2006,28(1):117-126
Wang Wei-peng,Ni Kun-yi,Zhou Guo-hua.Approaches for SNP
Genotyping[J].Hereditas,2006,28(1):117-126.
[4]汪维鹏，倪坤仪，周国华.一种基于适配器连接介导的等位基因特异
性扩增法测定多重SNP[J].遗传,2006,28(2):219-226
Wang Wei-peng,Ni Kun-yi,Zhou Guo-hua.Adapter ligation Mediated Allele specific Amplification (ALM-ASA)for Multiplex SNP Genotyping[J].Hereditas,2006,28(2):219-226
[5]Wei-peng Wang,Kun-yi Ni,Guo-hua Zhou.Multiplex single
nucleotide polymorphism genotyping by adapter ligation-mediated allele-specific amplification [J].Analytical Biochemistry,2006,355:240-248
（下转第2734页）
图3B ALM-ASA 法测定4种单一突变型杂合子的典型电泳检测图谱Figure 3B The typical profiles of four heterozygotes,each only with one
SNP mutant by ALM-ASA.
每对通道为一个SNP 突变型的凝胶电泳图象。突变型等位基因，1=7153G>A ，2=2264C>T ，3=4321C>T ，4=6055G>A ，5=野生型纯合子。Each pair of lanes contains the products from one SNP mutant.Mutant allele,1=7153G>A,2=2264C>T,3=4321C>T,4=6055G>A,
5=wild-type.
图4四个样本经凝胶电泳检测的图谱Figure 4The gel electrophoretogram of four samples.
每对通道的SNPs 特异性引物左边自上而下为2264C ，
6055G,7153A,4321C ；右边自上而下为2264T ，6055A,7153G,4321T ，样本4显示为
位点7153处为杂合子。
Each pair of lanes contains the products from the amplification of SNPs allele-specific primers 2264C,6055G,7153A and 4321C from up to down (left lane);2264T,6055A,7153G and 4321T from up to down (right lane).
The type of sample 4at the site of 7153is heterozygote.
（上接第2720页）
[6]Wu T,Zeng Y,Ding X,et al.A novel P755L mutation in LRRK2gene
associated with Parkinson's disease[J].Neuroreport,2006,17(18): 1859-1862
[7]Farrer MJ,Stone JT,Lin CH,et al.Lrrk2G2385R is an ancestral risk
factor for Parkinson's disease in Asia[J].Parkinsonism Relat.Disord, 2007,13(2):89-92
[8]Tomiyama H,Li Y,Funayama M,et al.Clinicogenetic study of muta-
tions in LRRK2exon41in Parkinson's disease patients from18coun-tries[J].Mov Disord,2006,21(8):1102-1108
[9]Mata IF,Kachergus JM,Taylor JP,et al.Lrrk2pathogenic substitu-
tions in Parkinson's disease[J].Neurogenetics,2005,6(4):171-717[10]梁国栋主编.最新分子生物学实验技术.[M]北京：科学出版社，
2002,169-170.
Liang Guo Dong.The modern experimental technology in molecular biology[M].Beijing:Science Press,2002,169-170
[11]张婷，曹立.LRRK2与帕金森病[J]国际神经病学神经外科学杂
志,2007,34(5):467-470
Zhang Ting,Cao Li.Relationship of LRRK2and Parkinson's dis-ease.[J]Journal of International Neruology and Nerosurgery,2007, 34(5):467-470
[12]Wang W,Sun W,Wu W,et al.Improved adapter-ligation mediated
allele-specific amplification for multiplex genotyping by using soft-ware[J].Electrophoresis,2008,29:1490-501
性眼跳前已存在注意的转移，内源性眼跳计划期制定的眼跳方向与注意转移方向是一致的。
根据神经心理学的研究表明外界光刺激作用于视网膜，形成的电信号经外侧膝状体、初级视皮层到达位于顶叶和颞叶的高级视皮层。在初级视皮层，由于单个神经元加工的信息较为简单，难以形成对物体的完整的知觉。在视皮层的较高区域，神经元接受的信息较为复杂，对物体具有特征的加工与整合起重要作用，但同时这类神经元的感受野比较大，使得当某神经元对呈现在其感受野内的刺激做出反应时，并不能确定该刺激在其感受野内的具体位置。Luck等人提出的模糊解决理论，认为空间选择注意一个重要作用在于提高高级视皮层神经元的空间分辨率[7]，结合本研究结果，可以推测对于提示刺激位于视野左侧还是右侧的觉察不需要精确的定位，所以在前注意阶段即可以完成，而对于完成提示刺激的觉察，并据此制订眼跳计划时（在实验中眼跳到提示刺激位置处或对侧处），只有在空间注意的参与下才能获取眼跳目标在感受野中的精确定位，当然这需要更进一步的研究才能证实。
总之，根据以上所述，内源性眼跳与注意的关系密切，它们之间的关系可以这样来理解，在发生眼跳前，为了形成眼跳程序，必须先要注意到内源性眼跳的区域，即注意的转移是在准备眼跳位置时就完成了；可以假设注意与眼跳程序通常是相关的，但需要一个启动信号激活眼跳程序。
参考文献（reference）
[1]邓铸.眼动心理学的理论、技术及其应用研究[J].南京师大学报（社
会科学版）.2005,1(1):91~95
Deng Tao.Saccades psychology theory,research technology and its applications[J].Journal of Nanjing Normal University(Social Science Edition).2005,1(1):91~95
[2]任延涛,韩玉昌,隋雪.视觉搜索过程中的眼跳及其机制[J].心理科学
进展,2006,14(3):340~345
Ren Yan-tao,Han Yu-chang,Sui Xue.Visual search process and mechanism of saccade[J].Advances in Psychological Science, 2006,14(3):340~345
[3]杨华海，赵晨，张侃．内源性和外源性视觉空间选择注意[J].心理
学报,1998,(21):150~151
Yang Jin-hai,Zhao Chen,Zhang Kan.Endogenous and exogenous vi-sual-spatial selective attention[J].Acta Psychologica Sinica,1998,
(21):150~151
[4]Godijn R,&Theeuwes J.The relationship between exogenous and en-
dogenous saccades and attention.In:Hyona J.Radach R.,&Deubel H.
(Eds.).The Mind'Eye:Cognitive and Applied Aspects of Eye Move-ment Research[M].Elseviser Science BV,2003,3~18
[5]刘伟，袁修干.人的视觉--眼动系统的研究[J].人类工效学,2000,
(4):41~44
Liu Wei,Yuan Wei-gan.Human visual-eye movement system[J].
Ergonomics,2000,(4):41~44
[6]Hikosaka O,Miyauchi S,Shimojo S.Focal visual attention produce il-
lusory temporal order and motion sensation[J].Vision Research, 1993,33:1219~1240
[7]Hikosaka O,Miyauchi S,Shimojo S.Voluntary and stimulus induced
attention detectes as motion sensation[J].Perception,1993,22:517~52
中国医科大学2016年6月考试《医学遗传学》考查课试题 一、单选题（共 20 道试题，共 20 分。） 1. 细胞周期中进行大量DNA合成的时期为 A. G1期 B. S期 C. G2期 D. M期 E. G0期 正确答案：B 2. Klinefelter综合征的核型为 A. 47,XXX B. 47,XYY C. 47,XXY D. 46,XX/47,XYY E. 46,XX/47,XXX 正确答案：C 3. 限制酶切割不同来源DNA时，能产生具有相同序列的突出末端的不同片段可能方式是 A. 用相同的限制酶切割 B. 用识别相同靶序列的不同限制酶切割
C. 用识别不同序列但可产生一致的粘性末端的限制酶切割 D. A和B E. A、B和C 正确答案：E 4. 减数分裂I 的前期中同源染色体间的两条非姊妹染色单体发生交换的时期为 A. 细线期 B. 偶线期 C. 粗线期 D. 双线期 E. 终变期 正确答案：C 5. 父亲并指（AD），母亲表现型正常，生出一个白化病（AR）但手指正常的孩子，他们再生孩子手指和肤色都正常的概率是 A. 1/2 B. 1/4 C. 3/4 D. 1/8 E. 3/8 正确答案：E 6. 下列哪一项不是XR特点 A. 交叉遗传 B. 系谱中男性患者远多于女性患者 C. 系谱中女性患者远多于男性患者 D. 致病基因位于X染色体上 E. 男性患者的致病基因是从母亲遗传而来
正确答案：C 7. 癌家族通常符合 A. 常染色体隐性遗传 B. 常染色体显性遗传 C. X连锁隐性遗传 D. X连锁显性遗传 E. Y连锁遗传 正确答案：B 8. 脆性X染色体的脆性部位位于 A. Xq24．3 B. Xq25．3 C. Xq26．1 D. Xq27．3 E. Xq29．3 正确答案：D 9. 癌基因erb产物是 A. 生长因子 B. 生长因子受体 C. 信号传递因子 D. 核内转录因子 E. 蛋白质酪氨酸激酶 正确答案：B 10. 在研究尿黑酸尿症的基础上，提出先天性代谢缺陷概念的是 A. Morgan
一．解释下列名词 1.单位性状与相对性状 2.积加作用与抑制作用 3.上位作用与下位作用 4.不完全连锁与符合系数 5. 臂内倒位与臂间倒位 6. 三体与双三体 7. 细胞质遗传与母性影响 8.植物的核不育型与核质不育型 9.广义遗传力与狭义遗传力 10.减数分裂。 11.测交 12.完全连锁 13.共显性 14.广义遗传力 15.隐性上位作用
16.单体 17.并发系数 18.母性遗传 20.染色体组 21.基因的加性效应 22.臂间倒位染色体 23.相斥组与相引组 24.染色体 25.染色单体 26.着丝点 27.细胞周期 28.同源染色体 29.异源染色体 30.无丝分裂 31.有丝分裂
32.单倍体 33.联会 34.联会复合体 35.显性性状与隐性性状 36.基因与等位基因 37.表现型与基因型 38.互补作用 39.积加作用 40.显性上位作用 41.隐性上位作用 42.重叠作用 43.抑制作用 44.多因一效 45.一因多效 46.完全连锁与不完全连锁
47．交换值 48.基因定位 49.连锁遗传图 50.伴性遗传 51.限性遗传 52.从性遗传 53.超亲遗传 54.加性效应 55.显性效应 56.上位性效应 57.遗传率 58.加性方差 59.显性方差 60.上位性方差 61.QTL作图
62.近交衰退 62.杂种优势 63.杂种劣势 64.基因突变 65.突变率 66. 复等位基因 67.母性影响 68.伴性遗传 69.杂种优势 二、简答题 1.显性现象的表现有那几种形式？显性现象的实质是什么？ 2.纯系学说的内容是什么？有何重要的理论意义？ 3．什么是微效基因、微效多基因和主效基因？它们的作用有何区别？
高通量测序领域常用名词解释大全 什么是高通量测序？ 高通量测序技术（High-throughput sequencing，HTS）是对传统Sanger测序（称为一代测序技术）革命性的改变, 一次对几十万到几百万条核酸分子进行序列测定, 因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing，NGS )足见其划时代的改变, 同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能, 所以又被称为深度测序(Deep sequencing)。 什么是Sanger法测序（一代测序） Sanger法测序利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。
什么是基因组重测序（Genome Re-sequencing） 全基因组重测序是对基因组序列已知的个体进行基因组测序，并在个体或群体水平上进行差异性分析的方法。随着基因组测序成本的不断降低，人类疾病的致病突变研究由外显子区域扩大到全基因组范围。通过构建不同长度的插入片段文库和短序列、双末端测序相结合的策略进行高通量测序，实现在全基因组水平上检测疾病关联的常见、低频、甚至是罕见的突变位点，以及结构变异等，具有重大的科研和产业价值。 什么是de novo测序 de novo测序也称为从头测序：其不需要任何现有的序列资料就可以对某个物种进行测序，利用生物信息学分析手段对序列进行拼接，组装，从而获得该物种的基因组图谱。获得一个物种的全基因组序列是加快对此物种了解的重要捷径。随着新一代测序技术的飞速发展，基因组测序所需的成本和时间较传统技术都大大降低，大规模基因组测序渐入佳境，基因组学研究也迎来新的发展契机和革命性突破。利用新一代高通量、高效率测序技术以及强大的生物信息分析能力，可以高效、低成本地测定并分析所有生物的基因组序列。
专题34 2019年下半年高考专题复习从性遗传及血型问题 1．在某种牛中，在基因型为AA的个体的体色是红褐色，aa是红色，基因型为Aa的个体中雄牛是红褐色，而雌牛则为红色。一头红褐色的母牛生了一头红色的小牛，这头小牛的性别及基因型是[ ] A．雄性或雌性，aa B．雄性，Aa C．雌性，Aa D．雌性，aa或Aa 2．从性遗传是指由常染色体上基因控制的性状，在表现型上受个体性别影响的现象。如绵羊的有角和无角受常染色体上一对等位基因控制，有角基因H对无角基因h为显性。在公羊中，基因型为HH、Hh均表现为有角；而在母羊中基因型为HH表现为有角，基因型为Hh表现为无角。如果基因型为Hh的雌雄个体交配，则子代中出现无角母羊的概率为 A.1/8 B.1/4 C.3/8 D.3/4 3．已知绵羊角的性状遗传遵循基因分离定律，其表现型与基因型的关系如下，据表正确的判断是：A．若双亲无角，则子代全部无角 B．若双亲有角，则子代全部有角 C．若双亲基因型为Hh，则子代有角与无角的数量比为1：1 D．绵羊角的性状遗传一定是伴性遗传 4.【加试题】在雌果蝇中，胚胎发育所需要的部分养分、蛋白质和mRNA由卵母细胞旁边的营养细胞和滤泡 细胞提供。有一个位于常染色体上的基因所产生的mRNA被运送到卵母细胞，从而保证受精后形成的胚胎正常发育，如果此基因发生突变将会导致胚胎畸形而且无法存活。以下叙述正确的是 A.如果此突变是显性的，则突变杂合子雄果蝇和正常雌果蝇交配所生的雌性子代不可以存活 B.如果此突变是显性的，则可观察到存活的突变纯合子个体 C.如果此突变是隐性的，则对于突变杂合子母体所生的雌、雄性胚胎都有一半可正常发育 D.如果此突变是隐性的，两个突变杂合子的个体杂交，子二代中有1/6是突变纯合子 5. 从性遗传是指由常染色体上基因控制的性状在表现型上受个体性别影响的现象。试分析下列从性遗传 现象：Ⅰ．果蝇中一常染色体的隐性基因（a）纯合时，雌果蝇（XX）转化为不育的雄蝇；基因（a）在雄性（XY）中没有这种效应。另外，决定果蝇眼色的基因位于X染色体上，白眼（b）为隐性性状。 请回答下列问题： （1）白眼雌蝇的基因型为：；白眼雄蝇的基因型为：。 （2）一对白眼的雌蝇与雄蝇杂交，后代雌雄比为1∶3，则双亲基因型为：。 写出该杂交的遗传图解。(3分) （3）让（2）题中的子代自由交配，其后代的雌雄比为：。 6．雄性蝴蝶有黄色（Y）和白色（y），雌性只有白色。触角棒形（A）和正常形（a）正交和反交的结果都一样。 （4）在下列各组合中，不能从其子代表现型判断出性别的是。①yyaa♀×♂YYAA ②YyAA♀×♂yyaa ③YYAa♀×♂Yyaa ④YYAa♀×♂yyAa ⑤YyAA♀×♂Yyaa ⑥yyAa♀×♂yyaa （5）一对表现型为黄色棒形和白色棒形的亲本杂交，F1代表现型为雄性3/8黄色棒形、1/8黄色正常、3/8白色棒形、1/8白色正常；雌性3/4白色棒形、1/4白色正常。则两个亲本的基因型组合为、（标明亲本的雌雄）。②⑤⑥YyAa yyAa 7．（14分）右图为哺乳动物的性染色体简图。X和Y染色体有一部分是同源的（图中Ⅰ片段）， 该部分基因互为等位：另一部分是非同源的（图中的Ⅱ，Ⅲ片段），该部分基因不互为等位。 从性遗传又称性控遗传。从性遗传是指常染色体上基因控制的性状，在表现上受个体性 别的影响的现象。在杂合体中雄性表现为有角，雌性表现为无角。 绵羊有角和无角受一对等位基因（A,a）控制，雌雄都有有角个体出现。现有一只有角 公羊与一只无角母羊交配所生的多胎小羊中，性成熟以后，凡公羊都表现为有角，凡母羊都 表现为无角。试根据以上事实回答：（注：若性染色体上有角A基因为显性） （1）绵羊的有角基因A是否位于Ⅱ片段？_____________。理由是：_____________。 （2）根据以上事实。推测绵羊的有角性状的遗传有两种可能：一种是位于性染色体上的遗传，另一种从性遗传，则无角母羊的基因型是：_____________。 （3）为进一步验证绵羊的有角性状的遗传方式的方案，请补充完善。 步骤：选择_____________公羊与多只无角母羊交配，观察子代性成熟后表现出来的性状。
名词解释： 1、遗传与变异：生物通过繁殖的方式来繁衍种族，保持生命在世代间的连续，保持子代与亲代的相似与类同，这种现象叫遗传，遗传的本质就是遗传物质通过不断地复制和传递，保持亲代与子代间的相似与类同，与此同时，亲代与子代之间，子代个体之间总存在着不同程度的差异，包括环境差异与遗传物质差异，这种差异就是变异。 2、遗传变异：变异不一定都能遗传，只有由遗传物质改变导致的变异可以传递给后代，这种变异叫遗传变异。 3、遗传学： 经典定义：研究生物的遗传和变异现象及其规律的一门学科。 现代定义： （1）在生物的群体、个体、细胞和基因等层次上研究生命信息（基因）的结构、组成、功能、变异、传递（复制）和表达规律与调控机制的一门科学－－基因学。 （2）研究基因和基因组的结构与功能的学科。 名词解释： １、性状：在遗传学上，把生物表现出来的形态特征和生理特征统称为性状。 2、相对性状：同一性状的两种不同表现形式叫相对性状。 3、显性性状：孟德尔把F1表现出来的性状叫显性性状，F1不表现出来的性状叫隐性性状。 4、性状分离现象：孟德尔把F2中显现性状与隐性性状同时表现出来的现象叫做性状分离现象。 5、等位基因与非等位基因：等位基因是指位于同源染色体上，占有同一位点，但以不同的方式影响同一性状发育的两个基因。非等位基因指位于不同位点上，控制非相对性状的基因。 6、自交：F1代个体之间的相互交配叫自交。 7、回交：F1代与亲本之一的交配叫回交。 8、侧交：F1代与双隐性个体之间的交配叫侧交。 9、基因型和表型 基因型是生物体的遗传组成，是性状得以表现的内在物质基础，是肉眼看不到的，要通过杂交试验才能检定。如cc,CC,Cc。 表型是生物体所表现出来的性状，是基因型和内外环境相互作用的结果，是肉眼可以看到的。如花的颜色性状。 10、纯合体、杂合体 由两个同是显性或同是隐性的基因结合的个体，叫纯合体，如CC,cc。由一个显性基因与一个隐性基因结合而成的个体，叫杂合体，如Cc。 11、真实遗传 指纯合体的物种所产生的子代表型与亲本表型相同的现象。纯合体所产生的后代性状不发生分离，能真实遗传，杂合体自交产生的后代性状要发生分离，它不能真实遗传。 名词解释： 1、染色体与染色质：是指核内易于被碱性染料着色的无定形物质，是由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的复合体，以纤丝状存在于核膜内面。当细胞分裂时，核内的染色质便螺旋化形成一定数目和形状的染色体。两者是同一物质在细胞分裂过程中表现的不同形态。核内遗传物质就集中在这染色体上。 2、常染色质与异染色质：着色较浅，呈松散状，分布在靠近核的中心部分，是遗传的活性部位。着色较深，呈致密状，分布在靠近核内膜处，是遗传的惰性部位。又分结构异染色质或组成型异染色质和兼性异染色质。前者存在于染色体的着丝点区及核仁组织区，后者在间期时仍处于浓缩状态， 3、核小体：是染色质的基本结构单位，直径10nm，其核心是由四种组蛋白（H2A、H2B、H3、H4各2分子共8分子）构成的扁球体。 4、同源染色体：指形态、结构和功能相似的一对染色体，他们一条来自父本，一条来自母本。 5、联会：分别来自父母本的同源染色体逐渐成对靠拢配对，这种同源染色体的配对称为联会。
复等位基因遗传试题 及分析
复等位基因遗传试题及分析 华兴高中：刘春荣 1、喷瓜有雄株、雌株和两性植株。G基因决定雄株,g基因决定两性植株,基因决定雌株。G对g、显性,g对是显性。如:Gg是雄株,g 是两性植株, 是雌株。下列分析正确的是 ( ) A.Gg和G 能杂交并产生雄株 B.一株两性植株的喷瓜最多可产生三种配子 C.两性植株自交不可能产生雌株 D.两性植株群体内随机传粉,产生的后代中,纯合子比例高于杂合子 解析本题涉及复等位基因及基因的显性等级的问题,考查了基因的分离定律及考生对问题的分析能力。从题意可知,Gg、G均为雄性,不能杂交,A项错误;两性植株为gg或g,最多可产生两种配子,B项错误;两性植株gg-可自交可产生雌株,C项错误;在D选项中,两性植株群体(有gg和g两种基因型)内随机传粉,群体中的交配类型有:gg×gg、gg×g、g×g,gg个体自交后代全部为纯合子,gg和g杂交的后代也有1/2的为纯合子,g个体自交后代有1/2的为纯合子,则两性植株群体内随机传粉后产生的子代中纯合子比例肯定会比杂合子高,所以D选项正确。 2 、某种植物的花色受一组复等位基因控制,纯合子和杂合子的表现型如表。若W P W S与W S w杂交,子代表现型的种类及比例分别是( ) A. 3种,2∶1∶1 B. 4种,1∶1∶1∶1 C. 2种,1∶1 D. 2种,3∶1 解析分析表格可知,这一组复等位基因的显隐性关系表现为W>W P>W S>w,则W P W S与W S w杂交,其子代的基因型及表现型分别为:W P W S(红斑白
花),W P w(红斑白花),WSWS(红条白花),W S w(红条白花),所以其子代表现型的种类及比例应为:2种1∶1。 3 、紫色企鹅的羽毛颜色是由复等位基因决定的:Pd深紫色、Pm中紫色、Pl 浅紫色、Pvl很浅紫色(近于白色)。其显隐性关系是:Pd>Pm>Pl>Pvl(前者对后者为完全显性)。若有浅紫色企鹅(PlPvl)与深紫色企鹅交配,则后代小企鹅的羽毛颜色和比例可能是( ) A.1中紫色∶1浅紫色 B.2深紫色∶1中紫色∶1浅紫色 C.1深紫色∶1中紫色 D.1深紫色∶1中紫色∶1浅紫色∶1很浅紫色 解析本题涉及有关复等位基因的相关问题。深紫色个体的基因型为PdPd 时,子代全为深紫色;深紫色个体的基因型为PdPm时,子代的性状分离比为1深紫色∶1中紫色;深紫色个体的基因型为PdPl时,子代的性状分离比为1深紫色∶1浅紫色;深紫色个体的基因型为PdPvl时,子代的性状分离比为2深紫色∶1浅紫色∶1很浅紫色。综上分析,选项A、B、D均不可能出现,只有选项C有可能。 4 、人类的ABO血型系统由3三个等位基因I A、I B、i决定,通过调查一个由400个个体组成的样本,发现180人是A型血,144人是O型血,从理论上推测,该人群中血型为B的人应该有( ) A.24人 B.36人 C.52人 D.76人 解析在本题中,A型血的人(基因型为I A I A或I A i)占的比例为 180÷400=0.45,O型血的人(基因型为ii)占的比例为144÷400=0.36,假设i的基
《普通遗传学》复习题 一、名词解释 1. 同源染色体 2. 不完全显性 3. 干扰（干涉） 4. 伴性遗传 5. 狭义遗传率 6. 复等位基因 7. 转座因子 8. 部分二倍体 9. 母性影响 10. 隔裂基因 11. 联会 12.等位基因 13.位置效应 14.数量性状15.回交 16.同源染色体 17.转化 18.雄性不育 19.基因频率 20. 双三体 二、填空题 1. 以豌豆为材料进而提出分离与组合定律的是，利用果蝇研究提出提 出基因论是，比德尔利用为研究对象提出一个基因一个酶的假说。 2.基因型AABbDdEeFfGG的个体可产生种配子，自交可产生种基因 型类型，其中纯合基因类型种。 3. 人白化症由常染色体隐性单基因（a）控制遗传，某白化症患者的正常双亲 基因型为和。 4. 家蚕和蝗虫的性染色体组成分别为型和型，而蝴蝶的性染 色体为型。 5.遗传学中重组率也称为__ _。两对基因独立遗传时，重组率为___ _， 当两对基因为完全连锁时，重组率为__ __。 6. A与B连锁，则AABB和aabb杂交称为，aaBB和AAbb杂交称 为。 7. 在染色体结构变异中，、和杂合体性母细胞在减 数分裂的前期I都可以形成凸隆起来的瘤状物或环状形象。 8. 马铃薯单倍体减数分裂时可形成12个二价体，因此马铃薯属于倍 体。 9. PCR反应的基本步骤是、、。 10.死细菌与活细菌混合在一起后基因实现了重组，这叫。两种细菌以 噬菌体为媒介实现了基因重组是。 11.减数分裂过程中，同源染色体在__ __期配对，在___ ___期分开，染色单体在___ ___期分离。 12.大麦现有纯合密穗染病(AAbb)材料和稀穗抗病(aaBB)材料，两基因自由组合。想用这两个材料杂交以选育稳定的密穗抗病品种，所需类型第___ 代就会出
1、遗传学的发展时期 （1）经典遗传学时期(1900 ~ 1940 )——遗传学的诞生和细胞遗传学时期 标志：孟德尔定律的二次发现 成就：确立遗传的染色体学说，创立连锁定律（Morgan,1910），提出“基因”概念 （2）微生物遗传和生化遗传学时期(1941 ~ 1960) 标志：“一基因一酶”学说(Beadle&Totum) 成就：“一基因一酶”学说(1941,Beadle&Totum) ，遗传物质为DNA(1944， A very,Hershey&Chase)，双螺旋模型:(1953,Watson&Crick)，转座子:(1951，McClintock)， 顺反子:(1956, Benzer) （3）分子遗传学时期和基因工程时期(1961~1989) 标志：操纵子模型的建立 成就：操纵子模型的建立（1961,Monod&Jacob)，深入了解基因（破译遗传密码、重组技术、反转录酶、合成酶、内切酶、核糖酶、转座子、内含子、DNA测序、PCR等）（4）基因组-蛋白质组时期(1990 ~ 至今) 标志：人类基因组测序工作启动 成就：2003年4月14日美、英、日、德、法、中六国科学家完成人类基因组图谱（物理图），从基因组角度研究遗传学 2、遗传学形成多个分支学科：细胞遗传学，生化遗传学，分子遗传学，群体遗传学，数学 遗传学，生统遗传学发育遗传学，进化遗传学，微生物遗传学医学遗传学，辐射遗传学，行为遗传学遗传工程，生物信息学，基因组学。 3、染色体在细胞分裂中的行为 （1）细胞周期：由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，分四个阶段: ①G1期：指从有丝分裂完成到DNA复制之前的间隙时间； ②S期：DNA复制时期； ③G2期：DNA复制完成到有丝分裂开始前的一段时间； ④M期（D期）：细胞分裂开始到结束。 （2）有丝分裂中的染色体行为 ①前期：染色体开始逐渐缩短变粗，形成螺旋状。当染色体变得明显可见时，每条染色 体已含有两条染色单体，互称为姐妹染色单体，通过着丝粒把它们连接在一起。至前期末，核仁逐渐消失，核膜开始破裂，核质和细胞质融为一体。 ②中期：在此期纺缍体逐渐明显。着丝粒附着在染色体上，染色体向细胞的赤道板移动。 ③后期：着丝粒纵裂为二，姐妹染色单体彼此分离，各自移向一极。染色体的两臂由着
等位基因特异性-PCR联合限制性内切酶消化法检测JAK2V617F突变(一) 作者：申徐良陈方平魏武张梅香史文芝秦小琪徐洪亮 【摘要】目的：建立敏感特异的JAK2V617F点突变的临床检测方法。方法：基因组DNA从HEL细胞或正常志愿者外周血中提取。采用等位基因特异性-PCR（Allelespecific-PCR，AS-PCR）和限制性内切酶消化的方法检测基因组中JAK2V617F突变。结果：本AS-PCR法可对JAK2基因扩增出364bp的内参照条带，当存在JAK2V617F突变时，又可以扩增出203bp的突变条带。只有野生型内参照条带364bp可被BsaXⅠ消化切割。结论：AS－PCR法和限制性内切酶法是检测JAK2V617F突变的敏感特异的检测方法，可以成功应用于临床检测。 【关键词】等位基因特异性-PCR；JAK2V617F突变；限制性内切酶BsaXⅠAbstractObjective:ToestablishasensitiveandspecifictestforJAK2V617Fpointmutation.Methods:Gen omicDNAwasisolatedfromHELcellsorPeripheral-bloodcellsfromnormalvolunteer.Allele-specificpol ymerasechainreactions(AS-PCR)andrestrictionenzymedigestionwereperformedtodetectthemutati oningenomicDNA.Results:Acontrolband(364bp)canbeobtainedbyAS-PCR,andamutedband(203bp) canbeobtainedonlywhenJAK2V617Fwaspresented.Onlywildtypecontrolband(364bp)canbedigeste dbyrestrictionenzymeBsaXⅠ.Conclusion:AS-PCRandrestrictionenzymedigestionweresensitiveand specifictestsforJAK2V617Fpointmutation,andcanbesuccessfullyusedforclinicaltest. KeywordsAllelespecific-PCR;JAK2V617Fmutation;RestrictionenzymeBsaXⅠ JAK2基因属JAKs(Januskinases/Justanotherkinases)家族成员，是胞浆非受体性酪氨酸激酶,在多种造血生长因子受体信号转导中发挥关键作用〔１〕。2005年，Baxter〔２〕和Kralovucs 〔３〕先后发现大部分骨髓增殖性疾病患者携带有一个获得性的JAK2基因突变-JAK2V617F，该基因突变位于JAK2基因第1849位，原来的鸟嘌呤（G）被胸腺嘧啶（T）所取代，导致原位于617位的缬氨酸错义编码为苯丙氨酸(G→T,JAK2V617F)。该突变的阳 性率在PV中高达65%～97%、ET为23%～57%和IMF为35%～57%，在AML/CML中有少量表达〔２～6〕。JAK2V617F基因突变的发现是近年来骨髓增殖性疾病发病机制的突破性进展，因此有学者将其称为骨髓增殖性疾病的“JAK2时代”。JAK2V617F的发现对于临床上骨髓增殖性疾病的诊断和鉴别诊断有非常重要的意义。为此，我们在临床上建立了两种敏感特异的JAK2V671F点突变的检测方法－等位基因特异性－PCR法（Allelespecific-PCR，AS-PCR）和限制性内切酶消化法。这两种方法的应用，有利于提高骨髓增殖性疾病的临床诊断水平。 1材料与方法 1.1细胞培养 HEL细胞株购自中国科学院上海科学研究院，培养于含10%胎牛血清(Hyclone)、100U/mL青霉素，100U/mL链霉素的RPMI1640(Gibco)培养基中，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养，每3d换液一次。待细胞生长至>80%汇合时以1∶3的比例传代，取对数生长期的细胞用作实验。 1.2基因组DNA制备 HEL细胞基因组和正常人血液基因组DNA用血液基因组提取试剂盒（上海生物工程公司产品）提取。 1.3AS-PCR及产物分析 PCR引物合成工作由北京奥科生物公司完成。各引物序列如下：公用反向引物(R1)5＇-CTGAATAGTCCTACAGTGTTTTCAGTTTCA-3＇、野生型正向引物(F1)5＇-ATCTATAGTCATGCTGAAAGTAGGAGAAAG-3＇（364bp）、突变特异性正向引物(F2)5＇-AGCATTTGGTTTTAAATTATGGAGTATATT-3＇（203bp）。PCR反应体系为50μL,每管中加入80ngDNA 模板，公用反向引物(10μM)1μL，突变特异性正向引物(10μM)1μL或野生型正向引物(10μM)1μL，10XPCR缓冲液5μL，25mMMgCl23μL，10mMdNTPs1μL，5U/μL的Taq聚合酶1μL，
一、名词解释 1、遗传：生物在以有性或无性生殖方式进行的种族繁衍过程中，子代与亲代的特征相似的现象。 2、核酸：是一种以核苷酸为基本结构单元组成的高分子化合物，是所有原核生物和真核生物的遗传物质，含有可以传递的遗传物质。 3、基因：是有功能的DNA片段，含有合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核苷酸序列，是遗传的结构和功能单位。 4、基因组：一个物种单倍体染色体所携带的一整套基因称为该物种的基因组。 5、近交：亲缘关系相近个体间杂交，亦称近亲交配。 6、开放阅读框：结构基因中从气势密码子开始到终止密码子的这一段核苷酸区域，期间不存在任何终止密码，可编码完整的多肽链，这一区域被称为开放阅读框。 7、复制：以亲代DNA分子为模板合成新的与亲代模板结构相同的子代DNA分子的过程。 8、转录：是以DNA中的一条单链为模板，4种核糖核苷酸为原料，在依赖于DNA 的RNA聚合酶催化下合成ＲＮＡ链的过程。 9、翻译：由核苷酸序列转换为蛋白质的氨基酸序列的过程。 10、染色体：在细胞分裂中期，由染色质聚缩而成的棒状结构，是DNA的载体。 11、染色质：细胞分裂间期，核内对碱性染料着色均匀的网状、丝状的物质。核小体是染色质的基本单位。 12、真核细胞：细胞核具有明显的核被膜所包围的细胞。细胞质中存在膜相细胞器。 13、原核细胞：细胞内遗传物质没有膜包围的一大类细胞。不含膜相细胞器。 14、染色单体：二价体中的每条染色体含有两条染色单体，他们互称姐妹染色单体。 15、基因工程:又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。 16、联会：同源染色体彼此靠拢并精确配对的过程。 17、二价体：一对同源染色体通过联会形成的复合结构。 18、核型分析:指把受检个体的核型与同种生物的正常核型或核型模式图进行比较,鉴别染色体数目和形态特征变异的一种方法。 19、有丝分裂：DNA复制一次，分裂一次，没有联会，姐妹染色单体没有交换，子细胞中有成套遗传物质。 20、减数分裂：DNA复制一次，分裂两次，有联会，并且姐妹染色单体发生交换，子细胞中只有体细胞的一半遗传物质。
遗传学复习提纲 绪论 1、遗传变异遗传学 2、遗传学发展简史 3、列举模式动植物，说明它们在遗传学研究中的作用？ 第一章遗传的细胞学基础 1、分离律和自由组合定律的细胞学基础是什么（染色体学说）？ 2、简述有丝分裂和减数分裂的遗传学意义。 第二章遗传的分子基础 1、中心法则发展历史 2、基因的概念 第三章孟德尔式遗传分析 重点： 三大定律的内容和验证方法 棋盘法和分枝法计算基因型和表现型的概率 显隐性的相对性：不完全显性、共显性、镶嵌显性 两对基因相互作用的方式和分离比，根据后代分离比确定控制性状基因的对数和作用的方式。什么是重叠作用／重叠基因、上位作用／上位基因、互补作用／互补基因？（非等位基因的相互作用） 概率论、条件概率、加法定理、乘法定律、二项式在计算后代特定基因型和表现型概率中的应用 应用两点测交和三点测交进行基因作图，并发率和干涉的计算 X2检验在遗传分布适合度中的应用 名词解释： 性状、相对性状、基因、复等位基因、基因型、表现型、等位基因、显性基因、隐性基因、外显率、表现度、连锁群、并发率、重组率、两点测交、三点测交、基因作图、共显性、镶嵌显性、纯合体、杂合体，自交、杂交、正交、反交、回交、测交，显性、隐性、纯系、真实遗传、表型模写
思考题 在1900年之后，孟德尔定律取得了哪些发展？ 简述三大定律的细胞基础。 基因的概念是如何发展起来的？ 第四章连锁遗传分析 重点： 1、性染色体决定性别的方式 XY XO ZW ZO 2、区别限性遗传、伴性遗传和从性遗传 3、性连锁遗传 4、利用试验数据进行重组率、符合系数的计算。 名词解释： 性染色体常染色体限性遗传、伴性遗传，连锁与交换、重组率、遗传距离、两点测交、三点测交、双交换、干扰、符合系数、基因座位、连锁群 思考题： 1．了解生物性别决定的机制。分别举例说明性染色体决定性别（各种类型）、环境决定性别和基因决定性别的情况。 2．常染色体在性别作用中有无作用？性激素对性别分化的作用如何？ 3．什么是伴性遗传、X-连锁、Y-连锁、从性遗传和限性遗传？掌握人类红绿色盲、血友病的遗传方式（要求懂得进行遗传分析）。 4．理解连锁与交换的细胞学基础。理解连锁与交换及重组率和遗传距离的关系。 第五章真核生物的遗传分析 1.名词：基因组、C值、C值悖理、N值悖理、卫星DNA、基因家族，卫星DNA，假 基因，灯刷染色体，卫星DNA、Alu家族、四分子、顺序四分子、非顺序四分子 2.什么是染色体的单线性？有哪些证据可以说明这个问题？ 3.重点与难点 a)如何确定基因与着丝粒是否重组？如何计算基因与着丝位之间的重组率？ b)如何利用四分子分析确定两个基因间的距离？ 第六章细菌的遗传分析 1.名词：原养型、营养缺陷型、转化、接合、转导、中断杂交试验，致育因子、性
1.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是 A.酵母表达体系 B.E.coil表达体系 C.昆虫表达体系 D.哺乳类细胞表达体系 E.大肠杆菌表达体系 2.下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板：A．RNA B．单链DNA C．cDNA D．肽链 E．双链DNA 3.关于探针叙述错误的是： A．带有特殊标记 B．具有特定序列 C．必须是双链的核酸片段 D．可以是基因组 DNA 片段 E．可以是抗体 4.有关肿瘤病毒叙述错误的是： A．有 RNA 肿瘤病毒 B．有 DNA 肿瘤病毒 C．能直接引起肿瘤 D．可使敏感宿主产生肿瘤 E． RSV 是一禽肉瘤病毒 5.关于 p53 基因的叙述错误的是： A．基因定位于 17p13 B．是一种抑癌基因 C．编码产物有转录因子作用 D．其突变仅见于少数肿瘤 E．突变后可致癌 6.原癌基因发生单个碱基的突变可导致: A．原癌基因表达产物增加 B．表达的蛋白质结构变异 C．无活性的原癌基因移至增强子附近 D．原癌基因扩增 E．以上都不对 7.关于细胞癌基因叙述正确的是 A．在体外能使培养细胞转化 B．感染宿主细胞能引起恶性转化
C．又称为病毒癌基因 D．主要存在于 RNA 病毒基因中 E．感染宿主细胞能随机整合于宿主细胞基因 8.原癌基因广泛存在于生物界，在进化过程中高度保守，这类基因属于 A.细胞癌基因 B.病毒癌基因 C.管家基因 D.抑癌基因 E.抗性基因 9.关于生长因子概念的叙述不正确的是 A.与特异性受体结合产生功能 B.主要以旁分泌和自分泌方式起作用 C.生长因子受体存在细胞核内 D.其化学本质属于多肽 E.与癌基因有密切关系 10.Sanger双脱氧末端终止测序法的链终止剂是 A.2’，3’—二脱氧核糖核苷酸 B.2’，4’—二脱氧核糖核苷酸 C.3’，5’—二脱氧核糖核苷酸 D.3’，4’—二脱氧核糖核苷酸 E.2’，5’—二脱氧核糖核苷酸 11.目前普遍采用Southern印迹杂交进行DNA指纹分析，用于法医案检工作中的个体识别和亲子鉴定，其分子基础是 A.肽链的多态性 B.RNA的多态性 C.氨基酸残基多态性 D.DNA的多态性 E.表型的多态性 12.人类基因组包括 A.核基因组和线粒体基因组 B.核基因组和微粒体基因组 C.溶原态病毒基因组和核基因组 D.质粒基因组和核基因组 E.只含核基因组 13.下述哪项决定基因表达的时间性和空间性 A.特异基因的启动子（序列）和增强子与调节蛋白的相互作用 B.DNA聚合酶 C.管家基因
第一章 1、遗传：生物按照亲代所经历的同一发育途径和方式，摄取环境中的物质建造自身，产生与亲代相似的复本，这种世代相似性的传递过程叫遗传。遗传是稳定和保守的，从而使一个物种物种得到保持。 2、变异：同种生物个体间的差异称变异。变异是适应和进化的基础与源泉。 第二章 1、基因型：指生物体从他的亲本获得的全部基因的总和，即生物体的遗传组成，又名遗传型。基因型肉眼看不到，只有通过杂交试验才能检定。 2、表型：指生物体所有性状的总和，即个体表现出来的性状，肉眼可见或可用理化方法测定。表型是基因型和内外环境条件相互作用的结果。 3、测交：基因型未知的显形个体与隐性个体纯合体间的交配方式称测交。它是回交方式中的一种，即同隐性亲本类型回交的交配方式，在遗传学上常用来测定显性个体基因型。 7、性状：是生物体形态、结构和生理、生化等特性的统称。 8、显性性状：在F1中表现出来的亲本性状叫显性性状。 9、隐性性状：在F1中没有表现出来的亲本性状叫隐性性状。 10、等位基因：同一基因的不同形式，如红花基因C和白花基因c，互为等位基因。 11、纯合体：由两个同是显性或同是隐性的基因结合而成的个体称纯合体。 12、杂合体：由一个显性基因和一个隐性基因结合而成的个体称杂合体。 13、回交：子一代（F1）杂合型基因型个体与亲本（P）或亲本类型基因型个体间的一种交配方式称回交。 14、显性遗传病：致病基因是显性，如人类小脑性运动失调症。 15、隐性遗传病：致病基因是隐性，只有在纯合基因型中才表现出来，携带有隐性基因的杂合体则不表现性状，如白化病。 16、亲组合：亲本P原有的性状组合。 17、重组合：亲本品种原来所没有的性状组合。 第三章 3、双重受精现象：通过授粉，成熟花粉发芽，在雌蕊柱头上萌发出花粉管，花粉管沿着花柱长到胚囊，在那里，一个雄核和卵结合发育成二倍体，另一个雄核和两个极核结合成一个三倍体核，此此即典型的被子植物特有的双重受精现象。 第四章 1、表型模写：在个体发育过程中，由于环境条件的改变所引起的表型改变，有时与由某基因引起的表型变化相似，这种想象称为表型模写，即环境条件引起的表型变化模仿了某基因决定的性状。 3、复等位基因：具有多个不同的等位形式，影响同一器官形状和性质的基因在遗传学上称复等位基因 4、完全显性：F1代的所有个体都充分表现出显性亲本的性状，这种表现称为完全显性 5、不完全显性：F1代个体所表现的性状不一定都是完全显性，有的表现为双亲性状的中间类型，这种表现称为不完全显性。 6、反应规范：通常把遗传型对环境反应的幅度称为反应规范。基因决定着个体的反应规范。 表现度：个体间基因的表达的变化程度称为表现度。 8、外显率：是种群的特征，指种群内某一基因型个体显示预期表型的比率 9、嵌镶显性：双亲性状可以各自在子代的不同部位分别表现出显性。 10、亚致死基因：致死效应仅出现在一部分个体上的基因。亚致死基因的效应称为亚致死现象。 11、互补基因：不同对的两个基因互相作用以致出现了新的性状，那么这两个互作的非等位基因称为互补基因 12、上位基因：某对等位基因的表现受到另外一对非等位基因的影响，随着后者的不同而不同，这种现象称为上位效应。 13、积加效应：两对非等位基因中的显性基因单独存在时能分别表现出某一性状；两个显性基因同时存在时表现出相对于这一性状的显性性状；两个显性基因同时不存在时表现出相对这一性状的隐性性状，从而分离比由9:3:3:1变为9:6:1，此为积加效应。 14、重叠效应：两对非等位基因中存在一个、两个、三个或四个显性基因的表型效应均相同的现
高通量测序相关名词 高通量测序时，在芯片上的每个反应，会读出一条序列，是比较短的，叫read，它们是原始数据； 有很多reads通过片段重叠，能够组装成一个更大的片段，称为contig； 多个contigs通过片段重叠，组成一个更长的scaffold； 一个contig被组成出来之后，鉴定发现它是编码蛋白质的基因，就叫singleton； 多个contigs组装成scaffold之后，鉴定发现它编码蛋白质的基因，叫unigene。 测序深度（Sequencing Depth）：测序得到的碱基总量（bp）与基因组大小（Genome）的比值，它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系，测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。重测序的个体，如果采用的是双末端或Mate-Pair方案，当测序深度在10~15X以上时，基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证。 什么是高通量测序？ 高通量测序技术（High-throughput sequencing，HTS）是对传统Sanger测序（称为一代测序技术）革命性的改变, 一次对几十万到几百万条核酸分子进行序列测定, 因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing，NGS )足见其划时代的改变, 同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能, 所以又被称为深度测序(Deep sequencing)。 什么是Sanger法测序（一代测序）
Sanger法测序利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。 什么是基因组重测序（Genome Re-sequencing） 全基因组重测序是对基因组序列已知的个体进行基因组测序，并在个体或群体水平上进行差异性分析的方法。随着基因组测序成本的不断降低，人类疾病的致病突变研究由外显子区域扩大到全基因组范围。通过构建不同长度的插入片段文库和短序列、双末端测序相结合的策略进行高通量测序，实现在全基因组水平上检测疾病关联的常见、低频、甚至是罕见的突变位点，以及结构变异等，具有重大的科研和产业价值。 什么是de novo测序 de novo测序也称为从头测序：其不需要任何现有的序列资料就可以对某个物种进行测序，利用生物信息学分析手段对序列进行拼接，组装，从而获得该物种的基因组图谱。获得一个物种的全基因组序列是加快对此物种了解的重要捷径。随着新一代测序技术的飞速发展，基因组测序所需的成本和时间较传统技术都大大降低，大规模基因组测序渐入佳境，基因组学研究也迎来新的发展契机和革命性突破。利用新一代高通量、高效率测序技术以及强大的生物信息分
（红色底色的为多次考到的） 外显子：把基因内部的转译部分即在成熟的mRNA中出现的序列称为外显子。复等位基因：在种群中，同源染色体的相同座位上，可以存在两个以上的等位基因，构成一个等位基因序列，称为复等位基因。 F因子：又称性因子或致育因子，是一种能自我复制的、微小的染色体外的环状DNA分子，大约为大肠杆菌全长的2%，F因子在大肠杆菌中又称F质粒。 F`因子：把带有部分细菌染基因的F因子称为F`因子。 母性影响：把子一代的表型受母本基因型控制的现象称为母性印象。 伴性遗传：在性染色体上的基因所控制的性状与性别相连锁，这种遗传方式称为伴性遗传。 杂种优势：指两个遗传组成不同的亲本杂交产生的杂种一代在生长势、生活力、繁殖力、抗逆性以及产量和品质等性状上比双亲优越的现象。 隔裂基因：真核类基因的编码顺序由若干个非编码区域隔开，使阅读框不连续，这种基因称为隔裂基因。 细胞质遗传：在核外遗传中，其中由细胞质成分如质体、线粒体引起的遗传现象称为细胞质遗传。 同源染色体：指形态、结构和功能相似的一对染色体，它们一条来自父本，另一条来自母本。 转座因子（跳跃基因）：指细胞中能改变自身位置的一段DNA序列。 基因工程：又称基因拼接技术和DNA重组技术。所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。 转导：以噬菌体为媒介，将细菌的小片段染色体或基因从一个细菌转移到另一细菌的过程叫转导。 假显性：一个显性基因的缺失导致原来不应该显现出来的一个隐形等位基因的效应显现了出来，这种现象叫做假显性。 核外遗传：由核外的一些遗传物质决定的遗传物质决定的遗传方式称核外遗传或染色体遗传。 常染色体：常染色质是指间期核内染色质纤维折叠压缩程度低，处于伸展状态，用碱性染料染色时着色浅的那些染色质。 异染色质：在细胞周期中，间期、早期或中、晚期，某些染色体或染色体的某些部分的固缩常较其他的染色质早些或晚些，其染色较深或较浅，具有这种固缩特性的染色体称为异染色质 等显性（并显性、共显性）：在F1杂种中，两个亲本的性状都表现出来的现象。 限性遗传：)：是指常染色体上的基因只在一种性别中表达，而在另一种性别完全不表达。从性遗传：是指由常染色体上基因控制的性状，在表现型上受个体性别影响的现象。 连锁群：在染色体中具有不同的连锁程度并按线性顺序排列的一组基因座位。 性导：细菌细胞在接合时，携带的外源DNA整合到细菌染色体上的过程。通常利用F'因子（带有部分细菌染色体的性因子）来形成部分二倍体。 核型与核型分析：一个体细胞中的全部染色体，按其大小、形态特征顺序排列所构成的图像就称为核型（Karyotype）。在完全正常的情况下，一个体细胞的核型一般可代表该个体的核型。将待测细胞的核型进行染色体数目、形态特性的分析，确定其是否与正常核型完全一致，称为核型分析（Karyotype analysis）。