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EDTA导致的血小板聚集引起血小板数值明显改变的观察与分析

PSA(前列腺特异性抗原)存在于前列腺腺泡及导管上皮细胞浆中,作为最佳前列腺癌(P C)标志物,在临床得到广泛应用。为提高前列腺癌诊断的检出率和准确性,我们同时测定55例患者总PSA(t-PSA),游离PSA(f-PSA)和SIL-2R值,现将结果报告如下:

1 材料和方法

1.1 标本来源 本院门诊及住院病例,20例前列腺癌(P C),35例前列腺增生(BPH)患者,均经B超及病理证实,空腹采集血清,避免溶血;同时取20例同年龄段健康男性作为对照组,同时测定t-P SA,f-PSA和SIL-2R值,计算f-PSA百分率。

1.2 方法与试剂 t-PSA和f-PSA测定采用化学发光法。仪器为Beckman Coulter A CCESS全自动发光分析仪,试剂为原装美国进口;SI L-2R检测采用酶联免疫法,试剂为法国Immunotech产品,按说明书操作。

2 结果 t-PSA,f-PSA及SIL-2R测定结果见表1。

 表1 t-P SA、f-PSA及SI L-2R的测定结果组别t-PSA(ng/m l)f-PSA(ng/ml)f-PSA(%)SIL-2R(u/ml)

PC组BPH组对照组18.6±10.1

4.6±2.8

1.06±0.51

1.95±0.81

1.01±0.46

0.31±0.14

10.5±4.1

22.1±7.2

28.2±8.5

681±139

303±101

246±68

3 讨论 由表1可见,PC组t-PSA及SIL-2R值显著高于

BP H组及对照组,PC组的f-P SA百分率明显低于BPH

组,与文献[1]报道相符。PSA测定对PC的诊断及鉴别诊断

具有重要价值[2,3]。由于前列腺良性疾病时t-P SA也会升

高,P C和BP H之间,t-P SA结果有一临界重叠区域,特别

是t-P SA值在4.0~10.0ng/ml范围内,两者极难区别。同

时测定t-PSA及f-PSA值,并计算f-PSA百分率可以提高

PC诊断的敏感性和特异性。

SIL-2R作为一项免疫功能抑制性指标[4],临床通常用

作为肿瘤病人的辅助诊断及判断愈后的指标,笔者认为同

时测定患者t-PSA,f-P SA及SIL-2R具有一定的临床价

值。

参考文献:

[1] 谢克俭.t-P SA为4.0~10.0ng/ml时f-PSA百分率

对前列腺疾病的鉴别诊断价值[J].临床检验杂志,

2001,19(5):299.

[2] 林李京.前列腺特异性抗原在不同前列腺疾病中的表

现[J].临床泌尿科杂志,1997,12(6):368.

[3] 段 红.前列腺特异性抗原测定在前列腺诊断中的价

值[J].癌症,1997,16(4):265—266,269.

[4] 耿新杰.恶性肿瘤患者血清SIL-2R的检测[J].中国

免疫学杂志,1993,9(4):215—216.

收稿日期:2006-08-31 EDT A导致的血小板聚集引起血小板数值明显改变的观察与分析王 欣 (中国医学科学院北京协和医院检验科,北京 100032)

摘 要:目的 分析ED T A所致血小板聚集对血小板计数的影响及观察电阻抗法和光学法两种方法检测EDT A所致血小板聚集标本的不同结果。方法 采用电阻抗法和光学法检测ED T A抗凝血和枸橼酸钠抗凝血,同时手工计数血小板和涂片显微镜镜检。结果 电阻抗法检测EDT A抗凝血血小板数值明显低于手工法数值,光学法检测EDT A抗凝血血小板数值高于电阻抗法但仍低于手工法。上述两种方法检测枸橼酸钠抗凝血血小板数值无显著差别且与手工法数值无显著差别(P>0.05)。涂片镜检EDT A抗凝血可见成堆聚集的血小板而枸橼酸钠抗凝血则未见。结论 EDT A引起的血小板聚集可导致血小板数值明显的假性减低。对于仪器提示血小板聚集的标本应涂片镜检确认,并同时用枸橼酸钠抗凝血检测血小板。

关键词:EDTA;血小板聚集;血小板计数

中图分类号:R446.11+3 文献标识码:A 文章编号:1671-7414(2006)06-078-02

随着血细胞分析仪推广和使用,EDT A-K3作为血细胞分析的较理想的抗凝剂已被广泛使用,但ED T A可以导致个别人血液中的血小板发生聚集,从而引起假性血小板减少,检验人员如未能及时发现,则给临床的诊断和治疗带来不必要的麻烦。本试验对18例EDT A所致血小板聚集的病例进行分析,报告如下。

1 材料和方法

1.1 血液标本 18例ED T A导致血小板聚集者均为我院住院患者,其中男性11例,女性7例;每个病人抽两管血: EDT A-K3抗凝静脉血与枸橼酸钠抗凝静脉血。

1.2 仪器与试剂 Sysmex X E-2100血液分析仪(希森美康公司)与配套试剂。 O lmpus显微镜。按照操作规程配置的草酸铵血小板稀释液。!ED T A-K3真空抗凝管与枸橼酸钠真空抗凝管(该管通常用作凝血检查)。

1.3 方法

1.3.1 仪器分析:Sy smex-2100血液分析仪用e-check质控品(lev el1,2,3)监控稳定性,按操作规程操作。首先用常规方法检测EDT A-K3抗凝静脉血(该法使用电阻抗法计数血小板),其次是用半导体激光流式细胞法检测EDT A-K3抗凝血,然后以同样方法检测枸橼酸钠抗凝静脉血。因后者为液体抗凝剂其抗凝剂与血液之比为1 9,故细胞计数结果应再乘以1.1方为准确的结果,本文中所有枸橼酸钠抗凝管结果均为校正后的数值。

1.3.2 每个病人的两管血均涂片经瑞氏染色后显微镜镜

检。

1.3.3 手工计数血小板按文献[1]方法操作。

2 结果 18例患者ED T A抗凝血与枸橼酸钠抗凝血均分别采用光学法和电阻法计数血小板(x-±s,×109/L):光学法结果分别为62±35,266±56,P<0.05;电阻法结果分别为36±22,278±59,P<0.05;而18例患者末梢血标本手工法计数血小板为(272±62)×109/L与枸橼酸钠抗凝血采用光学法和电阻法结果无显著差异(P>0.05)。

两种抗凝血涂片瑞氏染色后镜检;EDT A抗凝血涂片均可见聚集成堆的血小板。而枸橼酸钠抗凝血涂片则未见聚集的血小板。

3 讨论

3.1 EDT A-K3的抗凝原理是与血液中凝血因子Ⅳ(钙离子)结合成螯合物,而使其失去凝血作用,从而阻止血液凝固。因EDT A-K3对血细胞形态影响很小,特别适用于全血细胞分析,已被ICSH认定并在临床广泛使用。但它偶尔可导致血小板聚集,发生血小板假性减少,至今未发现该现象的发生有何病理、生理意义,也与特殊药物的使用无关[2]。EDT A导致血小板聚集的原因与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关[3]。EDT A可导致血小板活化,血小板形态由正常的圆盘形变为圆球形,改变了血小板膜表面某种隐匿性抗原表位构象,与存在血浆中的自身抗体相结合[4],激活细胞膜中的磷脂酶A2和磷脂酶C,水解血小板膜磷脂并释放花生四烯酸、5-T H、胶原、凝血因子Ⅱ等活性物质。这些活性物质能活化血小板凝血因子Ⅰ受体,促使血小板与凝血因子Ⅰ聚集成团。

3.2 血小板在体内主要生理功能是参与止血与血栓形成。此外在动脉粥样硬化和炎症反应中起着重要的作用[5]。血小板数量的检测是临床上最常用的检验项目之一。EDT A 所致的血小板假性减少如未及时发现,会给病人的诊断和治疗带来许多麻烦,甚至会引起医疗纠纷,因此及时发现尤为重要。我们所观察的18例标本仪器均提示血小板聚集,血小板直方图也发生相应的变化,如无拟合曲线,跷尾现象。所以必须强调,一旦仪器有血小板聚集警告提示时,必须涂片染色后显微镜检查,看是否有血小板聚集成堆的现象。3.3 Sy smex XE-2100血细胞分析仪有两种方法测定血小板:电阻抗法和光学法。该仪器进行常规检测时使用电阻抗法计数血小板,当对其计数结果有疑问时则仪器做出提示;建议使用光学法重新计数血小板。电阻抗法计数血小板的原理是以体积的大小来区分血小板和其它细胞,该法具有经济、快速、重复性好等优点,但具有一定的局限性,聚集的血小板因体积增大而不被归类为血小板,因而出现血小板数量假性减少。此种情况下电阻法常常不能提供准确的结果[3]。光学法测定血小板原理为半导体激光流式细胞检测。在进行荧光染色后,用前向散射光提供体积信息,侧向荧光对血小板内部RN A和D NA成分进行鉴别计数。该法对血小板的鉴别优于电阻抗法。但由于血小板聚集成团影响计数,虽然其计数结果高于电阻抗法,仍低于其真实数值。3.4 抗凝剂枸橼酸钠无导致血小板聚集的作用,对EDT A 所致的血小板聚集的病例,可用枸橼酸钠抗凝管采血,因该管为液体抗凝剂,其抗凝剂与血液之比为1 9,故血小板及白细胞计数结果应另外再乘以1.1方为准确的结果。而其余结果则以EDT A管为准。实验结果表明枸橼酸钠抗凝管校正后的结果与手工计数结果无显著差异。另外电阻抗法及激光法所测枸橼酸钠抗凝管标本血小板数值无显著差别。

3.5 实验中我们还发现,所有EDT A导致血小板聚集的病例血小板数值明显减低与其真实数值相差甚远,绝大部分血小板聚集的标本血小板数≤30×109/L,真实数据均在正常范围。仅有一例标本血小板为290×109/L,而其真实血小板数为512×109/L。18例标本中有两例住院期间反复检查血常规时偶尔出现用EDT A抗凝管血小板不聚集的现象,其中一例为上述血小板聚集时数值仍正常者。该现象的原因有待于进一步研究。

参考文献:

[1] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[K].第2版.

南京:东南大学出版社,1997:22—197.

[2] Bizzaro N.EDT A-dependent pseudothro mbocyt o-

penia;a clinical and epidemiological study of11cases,

with10-year fo llow up[J].A m J H ematol,1995,50

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[3] Br agnani G,Bianconcini G,Brog na R,et al.Pseudo-

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M iner va M ED.2001,92(1):13.

[4] Bizzayo N,Brandalise M.EDT A-dependent pseudo-

thrombocytopenia;association wit h antiplatet and

antiphospholipid antibo dies[J].A m J Clin Pathol,

1995,103(1):103—107.

[5] 朱立华.实验诊断学[M].北京:北京医科大学出版

社,2002:265.收稿日期:2006-04-28

仪器维修经验四则

何 平 (安徽舒城县医院检验科,安徽舒城 231300)中图分类号:R446.9 文献标识码:B 文章编号:1671-7414(2006)06-079-02

1 上海安亭科学仪器厂80-2B型低速台式离心机,该机的启动是通过关闭盖门,盖门按压在启动键上使仪器开始启动运转,如果盖门关闭后严密性不佳、加在启动键上的压力不够,仪器就不能启动,此时,用百得胶将壹分钱硬币粘附于盖门内壁(启动键的对应处),待干,关闭盖门,硬币正好压在启动键上,压力增加,仪器即可启动运转。

2 桂林优利特尿液分析仪,长期使用会使光源灯老化、亮度变暗,测定时显示故障-4,此时,除采取更换灯泡还可通过调节可变电阻的方法来增加灯泡的亮度。打开仪器外壳,仪器左侧可见R35,逆时针方向旋转R35,灯泡亮度增加,

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