Ｙ７３８５６９银杳叶提取物（ＥＧｂ７６１）对红细胞脂质
过氧化损伤及红细胞老化的影响
中文摘要
目的观察不同浓度银杏叶提取物（ＥＧｂ７６１）对脂质过氧化损伤的红细胞以及自然衰老红细胞的抗氧化酶类和膜骨架蛋白的保护作用，以探讨其抗氧化和抗衰老的作用机制。
方法①氧化损伤部分：采集健康成人静脉血制成红细胞悬液，分为难常组、单纯性氧化损伤组（对照组）和不同浓度（分别为０．００２９／Ｌ，０．０１０９／Ｌ，０．０５０９／Ｌ，Ｏ．２５０９／Ｌ）ＥＧｂ７６１保护组。正常组为同体积的红细胞生理盐水溶液，不加Ｈ２０２和ＥＧｂ７６１；对照组中加入浓度为１００ｍｒｎｏｌ／Ｌ的Ｈ２０２生理盐水溶液，使红细胞发生氧化损伤；ＥＧｂ７６１保护组分４个浓度梯度，即加入浓度分别为０．００２９／Ｌ，０．０１０９／Ｌ，０．０５０９／Ｌ，０．２５０９／Ｌ的ＥＧｂ７６１生理盐水溶液。３７。ｃ孵育１ｈ，测定红细胞溶血度、红细胞丙二醛（ＭＤＡ）浓度、红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、Ｎａ＋，Ｋ十一ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性，同时采用透射电镜和扫描电镜观察红细胞骨架蛋白结构和红细胞形态变化，并计算异常红细胞百分率。②自然衰老部分：采集健康成人静脉血，分为单纯衰老组（对照组）和不同浓度ＥＧｂ７６１保护组，３７℃孵育１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ后测定红细胞ＭＤＡ浓度、ＳＯＤ活性、Ｎａ＊，Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ“，Ｍｇｚ＋＿ＡＴＰａｓｅ活性。
结果①氧化损伤部分：ＥＧｂ７６１能明显降低红细胞溶血度，与正常组比较差异显著（ｔ＝４．１３—１９．４１，Ｐ＜Ｏ．０５，Ｏ．００１），且随着浓度增高其作用逐渐增强。在Ｈ２０２作用下，红细胞ＭＤＡ含量增加，ＳＯＤ活性、Ｎａ＋，Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性降低显著（ｔ＝２．０２～７０．０６，Ｐ＜０．０５，０．００１）。加入ＥＧｂ７６１后，红细胞ＭＤＡ明显降低，ＳＯＤ活性、Ｎａ＋，Ｋ＋．ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性明显升高，与对照相比差别有显著性（ｔ＝２．０２～１６．８８，Ｐ＜０．０５，Ｏ．００１）。ＥＧｂ７６１各浓度之间的指标差别亦有显著性（ｑ＝３．１４—８３．８９，Ｐ＜Ｏ．０５，０．０１）ｏ②自然衰老部分：随孵育时间的延长，与正常相比，红细胞ＭＤＡ含量增加，ＳＯＤ活性、Ｎａ＋，Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅ和ｃａ“，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性降低显著（ｔ＝２．０２—７４．９９，Ｐ＜０．０５，Ｏ．００１）。加入ＥＧｂ７６１生理盐水溶液后同样条件孵育，红细胞ＭＤＡ含量逐渐降低，ＳＯＤ活性、Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性和Ｃａ２＋，Ｍｇｚ＋＿ＡＴＰａｓｅ活性逐渐升高，与对照组比较差异显著（ｔ＝２．０２～７５．】】，Ｐ＜０．０５，ｏ．００１）。ＥＧｂ７６１各浓度组之间比较，差别有显著性（Ｆ＝２１４．３７～１５９１．５２，ｑ＝５．７２～１００．８５，Ｐ＜Ｏ．０５，０．０１）。透射电镜下，氧化损伤后红细胞骨架结构破坏严重。预先加入ＥＧｂ７６１的红细胞骨架结构部分完整。扫描电镜下，正常组偶见棘
红细胞，氧化损伤组棘红细胞百分率为（９２．０士４．２）％，ＥＧｂ７６１保护组棘红细胞百分率分别为（８３．７±５．４）％，（７３．５±４．６）％，（６２．８±５．０），（５２．０±５．７）％，与氧化损伤组比较差异有显著性（ｔ＝７．６７～３５．７３，Ｐ＜０．０１，００１），且随着ＥＧｂ７６１浓度的增高，棘红细胞百分率逐渐减低。
结论ＥＧｂ７６１能在膜水平上直接对抗氧自由基引发的红细胞脂质过氧化损伤，保护红细胞的抗氧化酶类和红细胞形态完整性及膜骨架结构的完整性。ＥＧｂ７６１能提高红细胞的抗氧化能力，保护红细胞膜蛋白，减缓红细胞的老化过程。
关键词：ＥＧｂ７６１；红细胞膜；骨架；超微结构；脂质过氧化；老化红细胞
ＥＦＦＥＣＴＯＦＧＩＮＫＧＯＢＩＬＯＢＡＥＸＴＲＡＣＴＳ（ＥＧｂ７６１）ＯＮＥＲＹＴＨＲＯＣＹＴＥＬＩＰＩＤＰＥＲＯＸＩＤＡＴＩＶＥＩＮＪＵＲＹＡＮＤＥＲＹＴＨＲＯＣＹＴＥＳＵＲＶＩＶＡＬ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ
ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｅｘｔｒａｃｔｓ（ＥＧｂ７６１）ｏｎｅｒｙｄｉｒｏｃｙｔｅｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｆｉｖｅｉｎｊｕｒｙａｎｄｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓｕｒｖｉｖａｌ，ａｎｄｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＥＧｂ７６１Ｏｎｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ０）Ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｖｅｉｎｊｕｒｙ：ＩｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｂｌｏｏｄｓａｍｐｌｅｓｔａｋｅｎｆｒｏｍｈｅａｌｔｈｙａｄｕｌｔｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｆｏｒｒｅｄｂｌｏｏｄｃｅｌＩ（ＲＢＣ）ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓａｎｄｄｉｖｉｄｅｄｅｑｕａｌｌｙｉｎｔｏ６ｇｒｏｕｐｓ：ｇｒｏｕｐＩｆ砬ｎｏｒｍａｌ，ｇｒｏｕｐｌｌｆｏｒｃｏｎｔｒｏｌ，ｗｉｔｈｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅ（Ｈ２０２，ｌＯＯｍｍｏｌ／Ｌ）ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｊｕｒｙ，ａｎｄｇｒｏｕｐⅢ，Ⅳ。Ｖ，Ｖｌｗｉｔｈｔｈｅ￥ａｎｌｅｉｎｊｕｒｙａｓｇｒｏｕｐＩＩ，ｂｕｔｂｅｉｎｇｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＥＧｂ７６１（Ｏ．００２９／Ｌ，ｏ．ｏｌｏｇｎ一，０．０５０９／Ｌ，Ｏ．２５０９／Ｌ），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．②Ｓｅｎｅｓｃｅｎｔｅｒｙｔｂｒｏｃｙｔｅ：Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｂｌｏｏｄｓａｍｐｌｅｓｔａｋｅｎｆｒｏｍｈｅａｌｔｈｙａｄｕｌｔｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｅｑｕａｌｌｙｉｎｔｏ５ｇｒｏｕｐｓ：ｇｒｏｕｐＩｆｏｒｃｏｎｔｒｏｌ，ｇｒｏｕｐｌＩ，Ⅲ，ＩＶ，Ｖｗｅｒｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎ州ｏｎｓｏｆＥＧｂ７６１，ｉｎｃｕｂａｔｅｄｕｎｄｅｒ３７℃ｆｏｒ１２ｈ．２４ｈａｎｄ３６ｈａｓｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｎｏｒｍａｌａｇｉｎｇ．Ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｄｅｇｒｅｅ．ｔｈｅｃｏｒｌｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｍｅｍｂｒａｎｅｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｌｄａｔｉｏｎｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅｆＭＤＡ）ａｎｄｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）ａｎｄＡＴＰａｓｅｉｎＲＢＣｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓａｆｔｅｒｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ．Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ｍｅｍｂｒａｎｅｓｋｅｌｅｔｏｎｓ帆ｃｔｏｒｅａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｅｒｙｔｈｒｏｃｙＺｗＧＭ＇ｅｓｔｕｄｉｅｄｗｉｔｈｔｒａｎｓ｜１１ｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｌＩＩｉｃｍｓｃｏｐｅｃ疆Ｍ）ａｎｄｓｃａｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（ＳＥＭ）ｆｏｒｅｒｙｔｂｒｏｃｙｔｅｓｏｆｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｖｅｉｎｊｕｒｙ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
ＲｅｓｕｌｔｓＡｆｔｅｒｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｖｅｉｎｊｕｒｙ，ｔｈｅＭＤＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｗｈｉｌｅｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＳＯＤａｎｄＮａ＋，ＩＣ－ＡＴＰａｓｅａｎｄＣａ２＋，ＭｇＺ＋－ＡＴＰａｓｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌ（ｔ＝２．０２—７０．０６，Ｐ＜０．０５，０．００ｉ）．ＡｆｔｅｒｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆＥＧｂ７６１，ｔｈｅｈｅｍｏｌｙｔｉｃｄｅｇｒｅｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｆｌｙ（ｔ＝４．１３～１９．４１，Ｐ＜Ｏ．０５，０．００Ｄ，ｔｈｅＭＤＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｌｓｏｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｗｈｉｌｅｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＳＯＤａｎｄＮａ＋，Ｋ。＋－ＡＴＰａｓｅａｎｄＣａ２＋，Ｍ９２＋．ＡＴＰａｓｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（ｔ＝２．０２～１６．８８，Ｐ＜０，０５，Ｏ．００１）．ＳｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｃｏｕｌｄａｌｓｏｂｅｓｅｅｄｗｉｔｈｉｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔＥＧｂ７６１ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｓ（ｑ＝３．１４—８３．８９，Ｐ＜０．０５，Ｏ．０１）．Ａｆｔｅｒｎｏｒｍａｌａｇｉｎｇ，ｔｈｅＭＤＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｃｒｅａｓａｄｗｈｉｌｅｔｈｅａｃｔｉｆｉｔｙｏｆＳＯＤａｎｄＡＴＰａｓｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌ（ｔ＝２．０２～７４．９９，Ｐ＜０．０５，０．００１）．ＷｉｔｈｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆＥＧｂ７６１．ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＭＤＡｄｅｃｒｅａｓｅｄａｎｄｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＳＯＤａｎｄｍＴＰａｓｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌ（ｔ＝２．０２～７５．１１，Ｐ＜０．０５，０｝００１）．Ｓｉｇｎｉｆｃａｎｃｅｃｏｕｌｄａｌｓｏｂｅｓｅｅｎ
ｗｉｔｈｉｎｔｈｅｇｒｏｕｐｓｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＥＧｂ７６１（Ｆ＝２１４．３７～１５９１．５２．ｑ＝
５．７２～１００。８５，Ｐ＜０．０５，Ｏ．０１）．Ｔｈｅｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｍｅｍｂｒａｎｅｓｋｅｌｅｔｏｎｓ叽ｃｔｕｒｅｏｆ
ｇｒｏｕｐｓｉｎｊｕｒｅｄｗａｓ
ｌｏｏｓｅ，ｂｌｕｒｒｅｄａｎｄｐａｒｔｉａｌｌｙｄｅｆｉｃｉｅｎｔ．ＧｒｏｕｐｓｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＥＧｂ７６１
ｂｅｃａｍｅｂｅｔｔｅｒ．Ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ，
ｍｏｒｅｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓｗｉｔｈｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌａｂｎｏｒｍａｌｉｔｙｌｉｋｅａｃａｎｔｈｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅｓｅｅｎｉｎｉｎｊｕｒｙｇｒｏｕｐｓｔｈａｎｉｎｇｒｏｕｐｓｐｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＥＧｂ７６１（ｔ＝７６７～３５．７３，Ｐ＜Ｏ．０１，０．００１）ｃｏｍｐａｒｉｎｇｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐｕｎｄｅｒｓｃａｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｃｏｕｌｄｂｅｓｅｅｎａｂｏｕｔａｃａｎｔｈｏｃｙｔｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅａｍｏｎｇ５ｇｒｏｕｐｓ．
ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＥＧｂ７６１ｃｏｕｌｄｄｉｒｅｃｔｌｙｃｏｕｎｔｅｒａｃｔｔｈｅｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｍｅｍｂｒａｎｅｕｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔＩｖｅｉｎｊｕｒｙｃａｕｓｅｄｂｙｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓａｎｄａｇｉｎｇ．
ＫＥＹＷＯＲＤＳ：ＥＧｂ７６１；ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｍｅｍｂｒａｎｅ；ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ；ｓｅｎｅｓｃｅｎｔｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ；
ｍｅｍｂｒａｎｅｓｋａｌｅｔｏｎｓｔｒｕｔｌｌｌＲ
引言
１引言银杏叶提取物（ＥＧｂ７６１）对红细胞脂质过氧化损伤及红细胞老化的影响
高等生物生命活动的进行和维持是通过有氧代谢完成的，所以此过程中活性氧等多种自由基的产生，对许多细胞来说是非常重要的。一方面，它是需氧代谢所必需的；另一方面，它对机体又有毒性。它能损伤脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）、灭活酶的活性、氧化激素、破坏细胞膜的结构与功能，甚至杀死某些细胞等。许多证据已经表明，自由基反应是最终导致细胞裂解和老化、退化的主要原因。自由基所造成的氧化损伤被认为是多种疾病的起点，细胞膜是氧化损伤的主要目标之一。循环中的红细胞经常接触高分压的氧，且红细胞富含不饱和脂类及铁，其中铁离子是自由基反应强有力的催化剂；红细胞所处的环境使之经常与细胞内和细胞外的自由基接触，因此，红细胞是一种最易遭受自由基损伤的细胞。正常情况下，红细胞内存在一套完善的抗氧化体系，以维持氧化与抗氧化状态的平衡。如果红细胞的抗氧化系统不能保护自身而遭受自由基的侵袭时，红细胞就会受到长期的氧化损伤，损伤作用可加速正常红细胞的衰老和破坏。红细胞的脂质过氧化损伤是临床诸多疾病的病理生理变化的基础之一。
自１９５６年Ｈａｒｍａｎ提出衰老的自由基学说以来，许多学者就从机体盼衰老过程与细胞老化过程来研究机体衰老的机制，细胞老化是机体衰老的基础，机体衰老是细胞衰老的结果。由于红细胞所具有的特殊性，使之成为研究脂质过氧化损伤的最佳模型。因此，Ｊａｉｎ创导在人体红细胞水平研究人类衰：老现象，以探讨衰老的奥秘。
银杏叶为地球上存活最久的植物、素有“天然活化石”之称的银杏科植物银杏（ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．）的干燥叶，在我国古代就已人药。近年来，在世界特别是西方发达国家掀起的绿色浪潮的推动下，银杏作为近代植物药开发研究的热点之一，国内外对其活性成分和药理作用的开发应用研究也理所当然地受到青睐。银杏叶（标准提取物，ＥｘｔｒａｃｔｓｏｆＧｉｎｋｇｏＢｉｌｏｂａ，ＥＧｂ７６１）主要活性成分包括２４％的黄酮甙及６％的萜内酯类等【１】，其中内酯的血小板激活因子（ＰＡＦ）特异性受体拮抗作用、黄酮类化合物的抗氧化和自由基清除作用是心脑血管疾病和中枢神经系统疾病预防和治疗作用的基础。ＥＧｂ７６１具有普遍的抗氧化作用，其清除自由基的效率比维生素Ｅ还要高，能防止高脂肪的细胞膜被氧化【２１”。曾有研究报道，ＥＧｂ７６１能剂量依赖性地保护过氧化特丁烷（ＴＢＨＰ）造成的红细胞脂质过氧化损伤而防止红细胞溶血和变
形Ⅲ。本研究设计了一系列试验，采用体外红细胞过氧化损伤模型和自然衰老模型，以药品金纳多针剂作为ＥＧｂ７６１来源，研究ＥＧｂ７６１对红细胞的保护作用及其机制，以便为其作为抗氧化剂应用于临床提供实验依据和理论依据。
２材料与方法
２．１材料
２．１．１药品与试剂
（１）ＭＤＡ测试盒、ＳＯＤ测试盒、ＡＴＰ酶测试盒：均购自南京建成生物工程研究所。
（２）银杏叶提取物（金纳多针剂，内含ＥＧｂ７６１）：德国威玛舒培博士药厂。
（３）红细胞骨架蛋白提取液：含２．５％（ｗ，ｙ）ＴｒｉｔｏｎＸ．１００的５ｍｍｏｌ／ＬＮａＰｉ（ｐＨ７．０）０
（４）过氧化氢（ｎ２０２）、磷酸盐、Ｎａ２ＥＤＴＡ等其他试剂均为国产分析纯试剂。２．１．２主要仪器
（１）紫外可见分光光度计ＵＶ－２６０：ＣＯ－ＰＡＲＭＥＫＵＳＡ产品。
（２）电热恒温水浴箱：北京医疗设备厂产品。
（３）８０－２离心沉淀器：上海手术器械厂产品。
（４）ＫＲ－１５００低温离心机：日本ＫＵＢＯＴＡ公司。
（５）ＪＳＭ一８４０扫描电镜：日本ＪＥＯＬ公司。
（６）ＪＥＭ一１２００ＥＸ透射电镜：日本ＪＥＯＬ公司。
２．１．３标本采集
实验所用红细胞均取自４０例健康体检者或无血液系统疾患的门诊体检者的肘静脉血（肝素抗凝２０ｕ／ｍ１）。男２０例，女２０侧，年龄２０～５９岁，平均（３６士１４）岁。
２．２实验方法
２．２．１Ｈ２０２诱导红细胞氧化溶血实验
取新鲜抗凝全血，２５００ｒ／ｒａｉｎ，离心５ｍｉｎ，去除血浆及白细胞层，用ＰＢＳ磷酸盐缓冲液（磷酸盐５ｍｍｏｌ／Ｌ，氯化钠１５０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７．４）洗涤３次（每次２５００ｒ／ｍｉｎ，５ｍｉｎ），得到压积红细胞，加ＰＢＳ磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．４）配制成体积分数为５％（红
细胞计数为５．５６×１０１３／Ｌ）的红细胞悬液，每管２ｍｌ，分装５支试管。第１管作为对照，２～５管分别加入等体积的ＥＧｂ７６１生理盐水（ｐＨ７．４）溶液，终浓度分别为Ｏ．００２９／Ｌ、Ｏ．ＯｌＯｇ／Ｌ、Ｏ．０５０９／Ｌ、０．２５０９／Ｌ，再向各管加入终浓度为１００ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２０２生理盐水（ｐＨ７．４）溶液，３７。Ｃ孵育ｌｈ，２５００ｒ／ｍｉｎ，离心５ｍｉｎ，７２１分光光度计，测定上清液在５４０ｎｍ波长下的吸光度，与相同浓度红细胞在蒸馏水中的溶血作对比，计算溶血度。
２．２．２ＥＧｂ７６１对氧化损伤红细胞的保护作用
取５支装有２ｍｌ的５％红细胞悬液的试管，第１管加入等体积的生理盐水溶液，作为对照，２—５管分别加入等体积的ＥＧｂ７６１生理盐水溶液，使其终浓度分别为ｏ．００２９，Ｌ、Ｏ．ＯｌＯｇ／Ｌ、ｏ．ｏｓｏｇｍ、０．２５０９／Ｌ，为ＥＧｂ７６１保护组，再向各管ＪＪＩＡ终浓度为１００ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２０２生理盐水溶液，以不加ＥＧｂ７６１和１－１２０２的另１支试管的红细胞悬液为正常对照组，３７。Ｃ孵育１ｈ。反应完毕后离心１０００ｒ／ｍｉｎ，５ｍｉｎ，ＰＢＳ磷酸盐缓冲液洗涤３次，测定红细胞丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）含量、超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）和三磷酸腺甘酶（ＡＴＰａｓｅ）活性。２．２．３ＥＧｂ７６１对自然衰老红细胞的保护作用
取新鲜抗凝全血，每管０．５ｍｌ，分装１５支试管，分成３组，其中每组第１管加入等体积的生理盐水溶液作为对照，第２—５管分别加入等体积不同浓度的ＥＧｂ７６１生理盐水溶液（ｏ．００２ｅｃＬ、Ｏ．０１０９／Ｌ、ｏ．ｏｓｏｇｍ、Ｏ．２５０９／Ｌ）保护，３７。Ｃ水浴保温。在１２ｈ，２４ｈ，３６ｈ分别取红细胞测定红细胞ＭＤＡ含量、ＳＯＤ和ＡＴＰａｓｅ活性。２．２．４红细胞ＳＯＤ和ＡＴＰａｓｅ活性及ＭＤＡ含量测定
氧化损伤及自然衰老的红细胞经ＰＢＳ磷酸盐缓冲液洗涤３次后，定磷法测定红细胞三磷酸腺苷酶（ＡＴＰａｓｅ）活性。进行红细胞抽提后，采用硫代巴比妥酸法测定红细胞丙二醛（ＭＤＡ）含量，黄嘌呤氧化酶法测定其超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。２．２．５红细胞膜骨架结构透射电镜观察
按文献［５，６】的方法制备红细胞膜的骨架，将自然衰老和氧化损伤的红细胞用ＰＢＳ磷酸盐缓冲液洗涤３次后，将得到的压积红细胞与５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＮａＰｉ（ｐＨ８．０）以１：４０混合，使红细胞溶解，１５０００ｒ／ｍｉｎ，离心ｌＯｍｉｎ，洗３次得红细胞膜影。将制备膜影与含２．５％（Ｗ／Ｖ）ＴｒｉｔｏｎＸ一１００的５ｍｍｏｌ／ＬＮａＰｉ（ｐＨ７．０）溶液以１：４混合，０。Ｃ放置３０ｍｉｎ，取混合液滴到带有Ｆｏｒｍｖａｒ膜的铜网上，ｌ％醋酸双氧铀负染１０ｒａｉｎ，蒸馏水洗涤３次，干燥后置于ＪＥＭ一１２００ＥＸ透射电镜下观察红细胞骨架结构。
２．２．６红细胞形态扫描电镜观察
将自然衰老和氧化损伤红细胞用ＰＢＳ磷酸盐缓冲液洗涤３次，得到的压积红细胞与固定液一１％的戊二醛（ｗｖ）以１：１００的比例混合，固定２～３ｈ，滴于盖玻片上，缓冲液冲洗，经脱水于燥后喷镀，置扫描电镜下观察红细胞形态变化，并计算异常红细胞占正常红细胞百分率。
２．３统计学处理
检测结果均以■±Ｊ表示，两组间均数比较采用ｔ检验，ｔ’检验，多组间均数比较采用方差分析和ｑ检验，所有数据统计处理均采用ＳＰＳＳｌ２．０统计软件进行，以Ｐ＜０．０５，Ｐ＜Ｏ．０１表示差别有统计学意义和高度统计学意义。
３实验结果
３．１ＥＧｂ７６１对Ｈ２０２诱导红细胞氧化溶血的影响
红细胞与Ｈ２０２共同孵育后，其溶血度为２９．８４％４－６．４２％，加入不同浓度的ＥＧｂ７６１生理盐水溶液后，其溶血度明显降低，与Ｈ２０２组比较差异有显著意义（ｔ＝４．１３—１９．４１，Ｐ＜０．０５，０．００１），且不同浓度ＥＧｂ７６１组溶血度相比较，差异亦具有显著意义（Ｆ＝１１７．４０，Ｐ＜０．００１；ｑ＝７．１２—２７．０１，Ｐ＜Ｏ．０１），见表１。
表１不同浓度ＥＧｂ７６１对Ｈ２０２诱导红细胞溶血的影响（％，ｆ±Ｆ）
与①组比较，ｔ’＝４．１３，１２．８０，Ｐ＜０，００１，ｔ“＝８．９４，１９．４１，Ｐ＜０．０５；５组之间比较，Ｆ１１７．４０，Ｐ＜０．０１；两两比较，ｑ＝７．１２—２７．叭，Ｐ＜０．０１。
实验结果
３．２ＥＧｂ７６１对氧化损伤红细胞ＭＤＡ、ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ的影响
在Ｈ２０２作用下，红细胞ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ十一ＡＴＰａｓｅ和ｃａ２十，Ｍ９２＋－ＡＴＰａｓｅ活性明
显降低，ＭＤＡ含量明显增高，与正常组相比差异显著（ｔ＝２．０２～７０．０６，Ｐ＜０．０５，０．００１）ｏ在ＥＧｂ７６１作用下，红细胞ＭＤＡ含量明显降低，ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋．ＡＴＰａｓｅ和ｃａ２＋，Ｍ９２＋－ＡＴＰａｓｅ活性显著升高（ｔ＝２．０２～１６．８８，Ｐ＜０．０５，０．００１），但红细胞ＭＤＡ仍高于正常（ｔ＝２．０５，Ｐ＜０．０５），ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和ｃａ２＋，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性仍低于正常，差别有统计意义（ｔ＝２．０２，４．０６，９。８８，Ｐ＜０．０５，０．００１）。且不同的ＥＧｂ７６１浓度组各指标差别亦有统计意义（ｑ＝３．１４～８３．８９，Ｐ＜０．０５，０．０１）。见表２。
表２不同浓度ＥＧｂ７６１对氧自由基作用下的红细胞ＭＤＡ、ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和ｃａ“，
Ｍ矿－ＡａＶ．的影响（Ｘ岛）
ｎＭＤＡＳＯＤＮａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅＣａ２＋．
组别（ｎｍｏｌ／ｍ１）（Ｖ／ｇ．Ｈｂ）（Ｕ／ｇ?ｌｉｂ）Ｍ９２＋－ＡＴＰａｓｅ
（Ｕ／ｇ?Ｈｂ）
—————————————～————————～ｍ—————一…～＋～—一①正常组４０
０．６１－＋０．２８２１９８７．９１±３１５９．２３２１９．６９±７．２２１６３．３７±５．７４②对照组（１ｔ２０２组）４０２．５０－＇ｘ０．１９”１０３１３．３４＋＿５００３．３４”
１０８．６１±６．９６’（§）ＥＧｂ７６１组４０
２．０５±０．２４１２７１４．３８．±．３８３８．２６１３４．１９±６．５９（０．００２９／Ｌ）
＠ＥＧｂ７６１组４０１．５８±０．２３１４５４２．２５±３３８２．０８１５９．２７±６．２９（０．ＯｌＯ：。）
⑤ＥＧｂ７６１组
４０１．０９±０，３２１６６４６．６２－＋３３７９．３５１８４－３２±６．２９（０．０５０９／Ｌ）⑥ＥＧｂ７６１组４０
０。７６－＋０．３６”１８５９０．５５±４２４９。２８’２０７．７４±１０．４１¨（０．２５０９／Ｌ）５８．５０±１０４１４＋７９，３２±５．６６１０６，５６±１９．９８１２７．５６－＋４．９５
１４９，８８±６．４５０
“……”‘。。。‘。。。。。１——。‘。’‘。。。。。。’。’‘＿＿Ｈ。”＿＿。‘。。－＿＿＿－●●－。＿－＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＾＿＿＿＿＿●＿－—。。Ｉ＿＿＿＿＿＿＿Ⅷ＿”－ｗ＿＿＿＿＿●＿＿＿‘●－＿—————＿－＿＿Ⅷ＿＿＿＿＿＿一＊。＿＿一“
与①组相比，ｔ＋＝７０。０６，ｐ＜０．００１；，＝２．０２．２．０５，ｐ＜０，０５；一＝４．０６，９．８８，ｐ（０，００１。６组之间比较，Ｆ＝４６．５９—１３４１．１７，ｐ＜０．００１。两两比较，ｑ＝３，７０—９４．５４，Ｐ＜０．０１。
３．３ＥＧｂ７６１对自然衰老红细胞ＭＤＡ、ＳＯＤ、Ｎａ＋。Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ“，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ的影晌
随红细胞放置时间的延长，红细胞ＭＤＡ浓度逐渐增高，ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性逐渐下降，与正常相比较差异显著（ｔ＝２．０２～７４．９９，Ｐ＜０．０５．０．００１ｏ加入ＥＧｂ７６１生理盐水溶液后在同样条件下孵育，红细胞ＭＤＡ浓度下降，ＳＯＤ、Ｎａ＊，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性升高，与对照组相比差异显著（ｔ＝２．０２～５．５５，Ｐ＜０．０５，Ｏ．０１）。其中，各衰老时间段（同一衰老时间段）不同ＥＧｂ７６１浓度之间，随ＥＧｂ７６１浓度升高红细胞ＭＤＡ浓度逐渐下降，差别有显著意义（Ｆ＝１９３．９５—３６１．４１，ｑ＝６．０８～４９．８０，Ｐ＜０．０１）；同一ＥＧｂ７６１浓度内，随着放置时间的延长，ＭＤＡ浓度逐渐增高，差别有显著意义（Ｆ＝９７．２５—５４０．６８，ｑ：３．９５。５２．０８，Ｐ＜０．０１），见表３。各衰老时间段不同ＥＧｂ７６１浓度之间，细胞ＳＯＤ活性随ＥＧｂ７６１浓度升高，差别有显著意义（Ｆ＝２１８．０５～１３０８．９８，ｑ＝５．７２—９１．２９，Ｐ＜０．０１）；随放置时间的延长差别有显著意义（Ｆ＝１１６８．４５～１０１６２．３７，ｑ＝１８．８６—２３５．６６．Ｐ＜Ｏ．０１），见表４。红细胞Ｎａ＊，Ｋ＋一ＡＴＰａｓｅ和ｃａ２＋，Ｍ９２＋－ＡＴＰａｓ活性随ＥＧｂ７６１浓度升高差别有显著意义（Ｆ＝２７８．５３～１６３４．０４，ｑ＝８．３５—１０２．１９，Ｐ＜０．Ｏｌ；Ｆ＝３２６．８５。１６３４．０４．ｑ＝１０．５０～１０２．１９，Ｐ＜０．０１）；随着放置时间的延长差别有显著意义（Ｆ＝６４４．９０～５４３１．３９，ｑ＝３．１０—１６１．３２，Ｐ＜０．０１；Ｆ＝２８５．５２～５２０４．９８，ｑ＝６．７３—１６０．３９，Ｐ＜０．０１），见表５和表６。
表３不同浓度ＥＧｂ７６１抗自然衰老红细胞ＭＤＡ浓度的变化佃＂删见，ｆ±ｓ）
与正常（０ｈ）相比较，ｔ＋＝２．０２，Ｐ＜０．０５；ｔ７＝２．０２，Ｐ＜０．０５。不加ＥＧｂ７６１的对照组中，与１２ｈ相比，吐，３６＝２．０２，Ｐ＜ｏ．０５；与２４ｂ相比，ｔ３６＝１６．８１，Ｐ＜Ｏ．００１。各时间段不同ＥＧｂ７６１浓度与对照组相比，ｔ＝２．０２—５．５５，Ｐ＜０．０５，０．Ｏｌ；不同ＥＧｂ７６１浓度之间，Ｆ＝１９３．９５～３６１．４１，ｑ＝６．０８—４９．８０，Ｐ＜ｏ．ｏｌ；各ＥＧｂ７６１浓度不同衰老时间之间，Ｆ＝９７．２５—５４０．６８，ｑ＝３．９５～５２．０８，Ｐ＜０．０１。
表４不同浓度ＥＧｂ７６１抗自然衰老红细胞ＳＯＤ活性的变化（Ｕ／ｇ?ｌｉｂ，ｘ±ｓ）
与正常（０ｈ）相比较，ｔ＝２．０２，Ｐ＜０．０５。不加ＥＧｂ７６１的对照组中，与１２ｈ相比，ｔ３６＝７９．７５，Ｐ＜Ｏ．００１；ｔ２４＝３７．５４，Ｐ＜Ｏ．００１；与２４ｈ相比，ｔ３６＝４２．９０，Ｐ＜Ｏ．００ｌ。各时间段不同ＥＧｂ７６１浓度与对照组相比，ｔ＝２．０２～６８．２４，Ｐ＜Ｏ．０５，０．０１；不同ＥＧｂ７６１浓度之间，Ｆ＝２１８．０５—１３０８．９８，ｑ＝５．７２～９１．２９，Ｐ＜０．０１；各ＥＧｂ７６１浓度不同衰老时间之间，Ｆ＝１１６８．４５—１０１６２．３７，ｑ＝１８．８６—２３５．６６，Ｐ＜０．０１。
表５不同浓度ＥＧｂ７６１抗自然衰老红细胞Ｎａ＋，Ｋ＋－Ａ．ＩＰａ∞活性的变化（Ｕ／ｇ?珊，ｘ±ｊ）组别ｎＯｈ１２ｈ２４ｈ３６ｈ
①对照组４０２１９．６９±７．２２１１８．３８±７．３５７１．７５±５．１７６１．４５±４．５９
②ＥＧｂ７６１组（ｏ．００２９ｍ）４０２１９．６９±７．２２１４０．８９±５．４６９１．１５±４．７８８０．２６±４．９８
③ＥＧｂ７６１组（０．０１０９ｉｎ）４０２１９．６９±７．２２１５８．０７±２０．０５１１０．５２±４．９７１０３．６７４－７．０８＠ＥＣ，ｂ７６１组（０．０５０９ｉｎ）４０２１９．６９±７．２２１８２．３５４－６．６０１３１．０３±４．６２１２７．９４±６．４９⑤ＥＧｂ７６１组（ｏ．２５０９ｍ）４０２１９．６９±７．２２１９８．３１４－ｔ４．１７１５１．２４±５．０４１４８．０９±５．６７
与正常（０ｈ）相比较，１２ｈ时，ｔ。＝６２．１７，幻＝５５．０５，ｔ回＝２４．１４，Ｐ＜ｏ．００１；如．ｏ＝２．０２，Ｐ＜Ｏ．０５。３６ｈ时，沁，＠＝２．０２，Ｐ＜０．０５；ｂ＝７２．５６，沁＝５９．７６，幻＝４９．３２，Ｐ＜０．００１。不加ＥＧｂ７６１的对照组ｏｏ，与１２ｈ相比，ｔ２４．３６＝２．０２，Ｐ＜０．０５；与２４ｈ相比，ｔ３６＝９．４１，Ｐ＜Ｏ．００１。各时间段不同ＥＧｂ７６１浓度与对照组相比，ｔ＝２．０２～７５．１１，Ｐ＜０．０５，０，叭；不同ＥＧｂ７６１浓度之间，Ｆ：２７８．５３。１６３４．０４，ｑ＝８．３５。１０２．１９，Ｐ＜０．０１；各ＥＧｂ７６１浓度不同衰老时间之间，Ｆ＝６４４．９０—５４３１．３９，ｑ＝３．１０—１６１．３２，Ｐ＜０．０ｌ。
实验结果
常的红细胞少见。图８为１００ｍｍｏｌ／ＬＨ２０２氧化损伤后的红细胞扫描电镜图，氧化损伤后，红细胞形态发生改变，大部分表面伸出很多大而粗，ｆ垂短及间距大致相等的棘状突起，形成棘红细胞（ａｃａｎｔｈｏｃｙｔｅｓ），占红细胞的（９２．０４－４．２）％；有的红细胞表面形成许多空洞，是由于红细胞受氧化损伤后，所含蛋白缺陷或缺失的结果；还可见到棘红细胞周围脱落的呈球形的囊泡。部分红细胞呈椭圆形，细胞表面光滑，较正常红细胞薄，硬度和脆性都增加，细胞中心凹陷或呈平板状，部分红细胞互相粘连呈簇状，正常红细胞少见。图９到１２为损伤前用不同浓度的ＥＧｂ７６１生理盐水溶液预先处理的红细胞，加入ＥＧｂ７６１生理盐水溶液后，棘红细胞逐渐减少，百分率降低为（８３．７４－５．４）％，且随ＥＧｂ７６１浓度的增高，百分率降低逐渐明显，分别为（７３。５土４．６）％，（６２．８－４－５．０）％，（５２．０４－５．７）％，与单纯损伤组比较差别有显著意义（ｔ＝７．６７—３５．７３，Ｐ＜０．０１，０．００１），各组差别亦有显著意义（Ｆ＝４０６．７７，ｑ＝１０．４８—５０．５１，Ｐ＜０．０１）。棘红细胞表面的棘突逐渐变细、变小、变少、消失，红细胞形状逐渐变规则。正常红细胞逐渐增多，红细胞之间粘连减轻。
图１正常红细胞膜骨架结构×４００００
青岛大学硕士学位论文
图２单纯１００ｍｍｏｌ／ＬＨ２０２氧化损伤１ｈ后的红细胞膜骨架ｘ枷０００
图３损伤前０．００２９／ＬＥＧｂ７６１预处理的红细胞膜骨架×帅ｏｏｏ
图４损伤前０．０１０９／ＬＥＧｂ７６１预处理的红细胞膜骨架×４００００
．１０．
实验结果
图５损伤前０．０５０９／ＬＥＧｂ７６１预处理的红细胞膜骨架×４００００
图６损伤前０．２５０９／ＬＥＧｂ７６１预处理的红细胞膜骨架ｘ４００００
图７正常红细胞扫描图×３０００
青岛大学硕士学位论文
图８单纯１００ｍｍｏｌ／ＬＨ２０２氧化损伤１ｈ后的红细胞×３０００
图９损伤前０．００２９／ＬＥＧｂ７６１预处理的红细胞×３０００
图１０损伤前０．０１０９／ＬＥＧｂ７６１预处理的红细胞×３０００
４讨论图１ｌ损伤前０．０Ｓ０９／ＬＥＧｂ７６１预处理的红细胞×３０００图１２损伤前０．２唧Ｇｂ７６１预处理的红细胞×３０００
４．１红细胞脂质过氧化损伤
自由基是具有不配对电子的原子或原子团，分子或离子，具有较高的反应活性。它是机体正常代谢的产物，参与机体许多重要的病理或生理过程。自由基生成增加或消除减少将会导致机体的损伤或疾病的发生。自由基对组织的损伤９０％是由脂质过氧化作用引起的。脂质过氧化反应是指自由基与细胞膜上的多不饱和脂肪酸（ＰＵＩ认）发生氧化反应，羟自由基与单线态氧与多价不饱和脂肪酸相互作用，自由
基从脂肪酸侧链甲烯碳中夺取氢原子启动脂质过氧化反应，生成烷自由基、烷过氧
青岛大学硕士学位论文
细胞内，维持细胞内外离子浓度和细胞内黏度的相对稳定。氧化损伤时，红细胞Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ受自由基攻击，使酶蛋白巯基偶联，从而弓ｆ起酶活性下降ｐＪ，钠泵功能减弱，造成Ｎａ＋一Ｋ＋协同转运障碍，引起细胞内处于高Ｎａ＋低Ｋ＋状态。过多的Ｎａ＋经Ｎａ＋一时交换使细胞内ｐＨ值升高，也可经Ｌ型钙通道进行Ｎａ＋一Ｃａ＞３适换使红细胞内Ｃａ２＋增加，这些都损害红细胞，使红细胞膜硬度增加，变形能力下降“０１。低温储存较久的血液，血浆内Ｋ＋浓度升高，其原因就是由于低温下细胞代谢活动几乎停止，Ｎａ＋泵不能发挥作用的缘故。氧化损伤后，红细胞膜上的Ｃａ２＋，Ｍ９２＋一ＡＴＰａｓｅ话性下降，说明钙泵对ｃａ２＋的亲和力降低，造成膜结合钙减少，同时泵出多余Ｃａ２＋的能力下降，同样导致红细胞内“钙超载”（ｃａｌｃｉｕｍｏｖｅｒｌｏａｄ），影响细胞膜复极化，使红细胞功能受损【１“Ⅲ。同时，红细胞内Ｃａ２＋浓度增加，增强了膜钙依赖中性蛋白酶（ｃａｌｐａｉｎ）的活性，又加速了Ｃａ２．，Ｍｇ“－ＡＴＰａｓｅ和红细胞膜骨架蛋白的溶解和破坏，导致红细胞功能进一步受损，红细胞变形性和稳定性降低，红细胞破坏加重［１３’１４］。红细胞膜内外离子转运异常，红细胞中Ｃａ２＋、Ｎａ＋离子增加、血管反应异常是高血压和心脑血管疾病最可能的发病原因【ｌ“。
４．２红细胞的老化
衰老的自由基学说是人类衰老机制现代理论具有代表性的学说之一，该学说特点之一在于它与其他学说具有直接或间接联系，受到众多研究的支持。细胞是生物体的基本组成单位，机体衰老是细胞衰老的结果。有人认为细胞衰老来自细胞膜，细胞老化过程中，膜的基本成分蛋白质、脂类和糖类的组成及功能发生变化，离渗透性、细胞大小和稳定性也发生变化：膜脂饱和度增高，蛋白发生聚集、降解、共价修饰，膜糖类增多或减少，细胞膜变厚，渗透脆性增大，体积和表面积逐渐缩小，流动性和稳定性降低，物质转运及信息传递障碍，对环境的应激能力迟钝。细胞死亡不是一个突然事件，常见的细胞死亡过程是细胞生理功能减退，最后因代谢活动停止而死亡【“】。
哺乳动物的红细胞是研究细胞老化的一个很好的模型ｕ”，这是因为：①红细胞十分容易得到、分离和纯化；②红细胞无蛋白合成功能，不可能对损伤进行修复，也没有新合成蛋白质嵌入的影响；③红细胞膜是它唯一的质膜，分离时不易造成污染，同时它又是红细胞唯一的细胞器，因此用它研究与年龄相关的变化十分有利；
④红细胞直接暴露在高氧分压下，又有铁离子催化，特别易受脂质过氧化的损伤。
本研究设计了红细胞衰老模型，发现随着红细胞放置时间的延长，红细胞ＭＤＡ增高．ＳＯＤ、Ｎａ＋，Ｋ＋．ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＊，Ｍ９２＋＿ＡＴＰａｓｅ活性降低，说明随红细胞日龄的增长，红细胞内脂质过氧化作用逐渐加强，红细胞的抗氧化能力减低。这些变化
讨论
的机制可能为：成熟红细胞为了适应其运行至全身微血管的需要，除ｒ依靠较强的变形能力外，还要依靠多种酶完成其能量代谢。随着循环中的红细胞逐渐衰老，抗氧化剂摄入不足，抗氧化酶类合成减少，活性减低，各种酶（包括醛缩酶、丙酮酸脱氢酶、ＡＴＰａｓｅ等）无法再生，且其活性逐渐下降，使自由基清除率降低。而同时自由基生成并不减少甚至还增多，这样，自由基产生与清除失去平衡，脂质过氧化作用加剧，红细胞受损、老化加重，引起血管壁硬化及纤维性病变。红细胞衰老的一个重要表现是能量代谢异常，自由基生成增多及损害加重。随着红细胞日龄增加，高铁血红蛋白浓度逐渐增加，Ｎａ十浓度升高，Ｋ＋浓度降低，ＡＴＰ生成不足，不能维持细胞内ｃａ２＋稳定性而使细胞形态异常，机械脆性增加，红细胞膜流动性和变形性降低，使红细胞膜损伤，这又加快红细胞的老化，导致红细胞被吞噬细胞识别，最终导致红细胞破坏、溶疯ｕ７，”】。
研究红细胞的老化，对于阐明红细胞生命进程的机制以及相关疾病的诊断与治疗，提高输血效率，延长血液保存期具有十分重要的临床意义。根据细胞在体内平衡的原理，红细胞老化的机制也普遍地用于其他类型的细胞。因此，红细胞在老年医学和机体细胞体内平衡研究中是一种颇有价值和实用的便利模型，对认识细胞在正常状态下的发生发展及死亡过程以及病理状态下的变异、细胞老化与器官间的相互作用的规律具有重要意义。
４．３银杏叶（ＥＧｂ７６１）的抗氧化、抗老化和清除自由基作用
银杏是我国的特产植物，其广泛的药理作用史有记载。目前临床上所用的银杏叶提取物多为其标准制剂ＥＧｂ７６１，其主要活性成分有２４％的黄酮类和６％的萜类内酯两大类，另外还有少量的酚类、生物碱、长链醇、酮类、氨基酸以及Ｃａ２＋、Ｍｇ“、Ｐ、ｓｅ、Ｆｅ微量元素等主要化学成分［１９】。其中黄酮类化合物是银杏果实和叶子中所含的主要的药理活性成分。黄酮苷分子母核中含有还原性羟基（一ＯＨ）功能集团，可直接清除０２一、?ＯＨ、Ｈ２０２，捕捉脂质自由基、脂过氧自由基、脂氧自由基、烷过氧自由基和细胞膜花生四烯酸代谢过程中产生的自由基口川等，通过对这些自由基起一种氢离子供体的作用而终止自由基连锁反应链，从而阻止和抑制氧自由基反应和脂质过氧化反应的病理性加剧，抑制过氧化脂质ｕ，ｏ及其代谢产物丙二醛ＭＤＡ、共轭二烯等毒副物质的生成。Ｋｏｓｅ掣２”就曾将不同浓度的银杏叶提取物加入健康人红细胞悬液中，然后加入过氧化氢造成损伤，发现可减少膜脂质过氧化物丙二醛的生成，并呈时间和剂量依赖性，结果还显示ＥＧｂ的抗氧化作用强于水溶性抗氧化剂（维生素ｃ、谷胱甘肽等），与脂溶性抗氧化剂生育酚（维生素Ｅ，ＶｉｔＥ）等作用相似。这些都体现了ＥＧｂ７６１清除和拮抗自由基，保护细胞膜结构和功能的完整性的
银杏叶提取物的作用 【关键词】银杏叶提取物;药理作用;临床应用 银杏叶性甘，味苦、涩、平，归心、肺经，有敛肺、平喘、活血化淤、止痛之功效。银杏叶提取物(Ginkgo Biloba Extract，GBE)主要含有黄酮苷和萜烯酯，黄酮苷主要是山奈酚及槲皮素的葡萄糖苷，萜烯酯主要是银杏内酯和白果内酯[1]，均具有多种药理作用。本文即对GBE在临床中的应用作一综述。 1 中枢神经系统疾病 GBE中的黄酮苷具有扩张脑血管、降低脑血管阻力，降低毛细血管通透性，增加脑血管流量，清除自由基等作用;银杏内酯则是血小板活化因子拮抗剂，能降低血黏度，改善血液流动特性[2]。GBE 在抗脑缺血的作用中，能改善能量代谢障碍和对抗酸中毒，拮抗兴奋性氨基酸(EAA)毒性和自由基损伤，阻止缺血后炎症反应发生，减少神经细胞凋亡，还能明显抑制神经细胞内钙超载，从而减轻缺血缺氧对脑组织的损伤[3]。 1.1 眩晕症戴春富等[4]采用随机对照的方法，选用甲磺酸倍他司汀为对照药，疗程12周，结果研究组患者治疗第12周末眩晕发作频率、持续时间以及眩晕症状总体评分经Wilcoxon秩和检验均明显优于对照组，P值均小于0.05。经12周的治疗，两组患者间治疗总有效率无统计学差异;显效率差异有统计学意义，研究组为44.8%，对照组为1 2.9%。 1.2 帕金森病帕金森病(PD)是一种黑质致密层多巴胺能神经元病变所致的慢性进行性老年变性疾病，临床以震颤、强直、运动迟缓为主要表现。在对银杏叶的基础研究中发现，GBE除了具有扩血管作用、对中枢神经系统缺血缺氧的保护作用、抗自由基作用、抗焦虑及镇静作用外，还有抗帕金森病的作用。刘学文等[5]将帕金森病患者68例分为GBE组36例和对照组32例，治疗组给予 GBE20ml/d静滴，连续2周;2组均给予美多巴125～250mg，2～3次/d，每5～7d调整剂量。2周后2组疗效差异有统计学意义(P<0.05)，GBE组治疗前后Webster评分差异有统计学意义(P<0.05)，这表明GBE 治疗帕金森病有良好疗效，能有效缓解症状，改善患者生活质量。 1.3 脑梗死丁国祥等[6]将132例脑梗死患者随机分为2组。治疗组给舒血宁20ml，脑蛋白注射液60mg,l次/d,静滴，连用14d;对照组单用丹参注射液20ml加人生理盐水250ml中静滴，1次/d,14d 为1疗程。比较治疗前后疗效及血流变指标,治疗组均有明显改善，治疗组总有效率为9 2.64%，对照组总有效率为84.37%，差异有统计学意义(P<0.05)。 1.4 老年痴呆症盛树力[7]使用GBE(120mg/d)和麦角生物碱类(5.9mg/d)及安慰剂对60例轻、中度老年性痴呆进行治疗，每组20例。结果显示GBE和麦角生物碱类都有一定疗效，两组间无统计学差异，安慰剂组无变化。采用随机双盲方法观察GBE(80mg/d，共3个月)对另一组40例老年性痴呆的疗效，经SKT等量表评定发现，治疗组服药1个月后记忆力、注意力比空白对照组有明显改善，其他多项测验也有改善。 2 心血管系统疾病 银杏叶提取物中的总黄酮苷通过抑制缩血管物质内皮素(ET) 发挥体内扩血管作用[8]，银杏苦内酯则具有改善心肌缺血的作用，从而缓解心绞痛，机制可能是通过控制心律不齐和缩减梗死范围来提供对心肌的保护[9]。 武宇洲等[10]将60例老年冠心病患者随机分为GBE治疗组和对照组(给予生理盐水250ml)各30例。治疗组心电图有效率优于对照组(P<0.05)，显示GBE能明显增加老年冠心病患者冠状动脉左前降支舒张期峰值流速、收缩期峰值流速和舒张期时间速度积分(P<0.01);而对照组冠状动脉左前降支血
银杏叶中的主要成分、分离方法及药理作用 的研究 摘要 银杏叶提取物中的主要成分为萜类内酯化合物，具有强大的抗氧化与自由基能力，因此在临床上具有很好的应用。随着对银杏叶成分、药理作用、制剂、临床应用范围的研究领域进一步扩大、加深,银杏叶在传统治疗的作用越来越重要。其对心血管疾病、神经系统疾病、高脂血症以及感染、损伤等都有很好的疗效。本文主要研究了银杏叶提取物的主要成分和分离方法，并通过实验得出其药理作用。 关键词：银杏叶提取物分离药理作用 前言 银杏叶中的类黄酮物质对动物的循环系统、脑功能有改善作用，从此展开了对银杏叶药理及应用的广泛研究。现研究表明，银杏叶提取物具有广泛的药理作用，如肝脏保护作用、抗毒作用、抗肿瘤作用、抗辐射作用、肾脏保护等作用以及抗氧化、促智作用、抗焦虑及镇静作用、调节血脂和减轻缺血再灌注损伤作用等，其中心血管系统和血液系统的保护作用尤为当前的研究热点。银杏叶提取物能降低心血管系统疾病发生率，药理机制有:①增加人血浆抗氧化能力;②减少血检的形成;③降低血清TG;④扩张血管，增加血流量，改善缺血组织代谢;⑤在心肌缺血再灌注中清除氧自由基。 正文 1银杏叶的主要成分简述 银杏叶中的成分比较复杂，化学成分主要有黄酮苷类（flavonoidglycosides）、萜内酯类（terpenes）、聚异戊烯醇类（polyprenols）、6-羟基犬尿喹啉酸（6-hydroxykynurenic acid ,6HKA）、有机酸、银杏酚酸类（phenolic acids）及烷基酚、烷基酚酸、又称银杏酸（ginkgolic acids）、4’-甲氧基吡哆醇（4’-O-methypyridoxine）等。
银杏叶 文章目录*一、银杏叶的概述*二、银杏叶的功效与作用*三、银杏叶的药方选录*四、银杏叶的服用方法 银杏叶的概述 1、银杏叶的概述银杏叶,为银杏科植物银杏的干燥叶。秋季叶尚绿时采收,及时干燥。一般为人工栽培。栽培地区北至辽宁,南达广东,东起浙江,西达陕西、甘肃、西南到四川、贵州、云南等地。具有活血化瘀,通络止痛,敛肺平喘,化浊降脂的功效。用于瘀血阻络,胸痹心痛,中风偏瘫,肺虚咳喘,高脂血症。 2、银杏叶的别名飞蛾叶、鸭脚子。 3、银杏叶的性状形态本品多皱折或破碎,完整者呈扇形,长3～12cm,宽5～15cm。黄绿色或浅棕黄色,上缘呈不规则的波状弯曲,有的中间凹入,深者可达叶长的4/5。具二叉状平行叶脉,细而密,光滑无毛,易纵向撕裂。叶基楔形,叶柄长2～8cm。体轻。气微,味微苦。 4、银杏叶的性味归经甘、苦、涩,平。 归心、肺经。
5、银杏叶的来源银杏科植物银杏的叶。 6、银杏叶的产地分布全国各地均有栽培。分布于广西、四川、河南、山东、湖北、辽宁等地。 银杏叶的功效与作用 1、银杏叶的化学成分、营养成分含异鼠李素、山柰酚、槲皮素、芸香苷、槲皮苷、白果双黄酮、白果苫内酯A、白果苫内酯β-白果苫内酯儿茶精等。另含异白果双黄酮、穗花杉双黄醐、杨梅树皮素、丁香黄素-3-芸香糖苷、6-羟基犬尿酸、反式芳樟醇氧化物、白果酸、白果酚、白果醇等成分。 2、银杏叶的功效作用敛肺,平喘,活血化瘀,止痛。用于肺虚咳喘;冠心病,心绞痛,高血脂。 3、银杏叶的毒副作用有实邪者忌用。 银杏叶的药方选录治血清胆固醇过高症:银杏叶提取主要成分黄酮,制成糖衣片,每片含黄酮1.14毫克,每次4片,每日3次。(《全国中草药汇编》)
银杏叶提取物用于治疗慢性脑供血不足的临床效果观察 发表时间：2019-01-21T16:53:14.593Z 来源：《心理医生》2019年第1期作者：宋丹 [导读] 观察银杏叶提取物用于预防慢性脑供血不足继续进展的临床疗效 （重庆市大渡口区人民医院急诊科重庆 400084） 【摘要】目的：观察银杏叶提取物用于预防慢性脑供血不足继续进展的临床疗效，为慢性脑供血不足寻求不良反应小、疗效确切的治疗药物提供临床依据。方法：选取2017年1月—2018年6月在我院治疗的160例慢性脑供血不足患者，将其随机分为观察组（80例）和对照组（80例），对照组患者给予常规抗血小板治疗及营养神经药物，并针对患者存在的高危因素用药；观察组在此基础上给予银杏叶提取物（金纳多）治疗。观察两组血脂、血液流速等指标，比较其临床疗效。结果：观察组治疗总有效率为83.75%，明显高于对照组的 66.25％，差异有统计学意义（P＜0.05）；同时观察组治疗后血脂各项指标、高敏C 反应蛋白（hs-CRP）、血液流速均较治疗前明显改善（P＜0.05），横向比较优于对照组（P＜0.05）。结论：银杏叶提取物可防止慢性脑供血不足的继续进展，各项治疗指标疗效优于常规用药，值得临床推广。 【关键词】银杏叶提取物；慢性脑供血不足；临床效果 【中图分类号】R277.7 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2019）01-0142-02 慢性脑供血不足（chronic cerebral circulation insufficiency，CCCI）是目前临床上发病率较高的疾病之一，常见于老年患者，多继发于高血压、糖尿病、血脂异常等疾病。大量临床证据显示[1]，慢性脑供血不足是短暂性脑缺血发作（TIA）甚至脑梗死的高危因素或病理基础，如果对其不采取有效干预措施，即可能继续进展，引发更严重的心脑血管事件。但目前针对CCCI的治疗多针对其原发病，尚缺乏针对性的治疗药物。 为观察银杏叶提取物（GBE）治疗慢性脑供血不足的临床疗效，为慢性脑供血不足寻求不良反应小、疗效确切的治疗药物提供临床依据，笔者选取2017年1月—2018年6月在我院治疗的160例慢性脑供血不足患者，对观察组患者在常规用药的基础上采用银杏叶提取物治疗，获得了满意疗效，现将临床资料报告如下。 1.资料和方法 1.1 临床资料 选取2017年1月—2018年6月在我院治疗的160例60岁以上老年慢性脑供血不足患者，所有患者均符合《中国脑供血不足的诊治指南（2010版）》中慢性脑供血不足的诊断标准[2]，排除急性脑卒中、脑肿瘤患者及严重肝肾功能不全者。并将其随机分为观察组和对照组。观察组80例，其中男性46例，女性34例，年龄61～79岁，平均（67.1±6.2）岁；对照组80例，其中男性48例，女性32例，年龄60～81岁，平均（68.2±7.3）岁。两组患者在年龄、原发疾病、合并症、身体一般情况等方面差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。 1.2 治疗方法 两组患者均给予常规抗血小板治疗及营养神经药物，并针对患者存在的高危因素（如高血压、糖尿病、血脂异常）用药。观察组在此基础上加用银杏叶提取物片（商品名称：金纳多，德国威玛舒培博士药厂生产）口服，2片/次，连用2周。 1.3 疗效判定 参照卫生部颁布的《中药新药临床研究指导原则》进行疗效判定。 1.4 统计学处理 采用SPSS10.0软件进行处理分析，计量资料采取t检验，对计数资料采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。 2.结果 2.1 两组患者治疗效果比较 两组相比，差异总有效率具有统计学意义（P＜0.05），详见表1。显示观察组与对照组相比慢性脑缺血症状的改善更为明显。 表1 两组患者治疗效果对比[n（%）] 3.讨论 慢性脑供血不足（CCCI）系因各种原因导致大脑长期慢性缺血引发的一种病理状态[2]，是中老年多发性疾病，直接威胁中老年人的心身健康，如果治疗不及时或治疗不当，进一步发展可出现“短暂脑缺血发作（TIA）”，出现这种病症的患者在1～5年内患脑中风、心肌梗塞等严重病变的机率及其死亡率都要大大高于一般人群，还可造成痴呆和脑萎缩或帕金森氏综合征[3]。因此，针对CCCI选择疗效确切的治疗药物，预防其向严重脑血管病进一步进展具有非常重要的临床意义。 银杏叶提取物（GBE）是从银杏叶中提纯的、具有特殊药理作用的天然活性物质，含有黄酮类、萜类、聚异戊烯醇类等多种化学活性成分[4]，具有抗氧化、调节血脂、抑制血小板活化因子、改善微循环、增加肾小球血液供应等药理作用，主要用于脑部、周边等血液循环障碍。研究显示[5]，GBE可选择性地作用于大脑血管，可减少血管阻力，抑制血小板聚集，降低血液黏稠度，使大脑血供增加，同时增进脑血管血液流动性、改善微循环，保障大脑的养分和氧气供给。 本次研究结果显示，银杏叶提取物（GBE）治疗慢性脑供血不足治疗总有效率明显高于常规治疗组。说明这一疗法有助于预防慢性脑供血不足的继续进展，值得临床推广。 【参考文献】 [1]李华军，李威，陈弈菲.130例慢性脑供血不足患者脑电图及经颅多普勒检测结果分析[J].中风与神经疾病杂志，2008，25(5):589-
2015年第3期江苏调味副食品总第142期 银杏叶提取物的化学成分、生物活性及应用研究进展 丁东1，张展鹏2，权美平1 （1．渭南师范学院化学与生命科学学院，陕西渭南714000； 2．渭南职业技术学院医学院，陕西渭南714026） 摘要：银杏叶提取物有多种化学成分和药理功能，在药品、食品行业有巨大的开发潜能。查阅大量文献，对现有的关于不同条件下银杏叶提取物的化学成分、生物活性及其具体应用的资料进行分析、研究和综合，以期为今后银杏资源的开发利用和更深层次的研究做参考。 关键词：银杏叶；提取物；化学成分；生物活性；应用 中图分类号：TQ91文献标志码：A文章编号：1006－8481（2015）03－0005－04 银杏属裸子植物，是银杏科银杏属唯一生存种，又名公孙树、白果树，是我国特有的珍贵孑遗植物，有裸子植物“活化石”之称，在我国江苏、山东、浙江、江西等地广泛种植，其外种皮、果实、树叶均有一定的药用价值。银杏叶提取物（Ginkgo Biloba Extract，简称GBE）是从银杏叶中分离纯化的提取物，主要含黄酮类及萜内酯化合物。现代药理学研究表明，GBE具有抗血小板活化因子、抗脑缺血、降血脂、抗氧化、抗炎、增强记忆等作用，能够改善心脑血管循环、保护肝脏、舒张动脉、抗炎、抗过敏，对心脑血管有保护作用，已广泛用于治疗冠心病、心绞痛、阿尔茨海默病、皮肤病等疾病［1-2］。近年来，有关GBE的研究较多，国际上的银杏制剂已有30多种，已上市的主要有片剂、胶囊、针剂、口服液等，同时，将GBE作为添加剂制成的保健食品、饮料、银杏叶茶等也已引起人们的广泛关注。本文就不同条件下银杏叶提取物的化学成分、生理活性及其应用情况等进行分析和综合，以期为今后银杏资源的开发利用和更深层次的研究做参考。 1GBE的化学成分 银杏的药用价值主要是指银杏叶的药用价值。银杏叶（Ginkgo Folium）为银杏科植物银杏的干燥叶，含有黄酮、萜内酯、酚酸、聚异戊烯醇等化学成分，其中主要有效成分是黄酮类化合物和萜类内酯，具有很强的药理活性，能有效改善心脑血管和末梢循环，用于治疗动脉硬化、高血压、脑卒中等心脑血管疾病。由于种属、产地、采收期、生长环境和提取方法等的不同，GBE提取物的化学成分也不一样，而其化学组成与生理功能紧密相关。 1．1黄酮类化合物 研究表明，黄酮类化合物是GBE的主要活性成分，其含量为2.5% 5.91%，其中95%以上为槲皮素、山萘酚和异鼠李素的糖苷，具有降血压、扩张血管、改善血清胆固醇、解除痉挛、抗氧化等功能，在治疗冠心病、心绞痛、糖尿病和脑血管疾病等方面有良好疗效。目前，关于以提高银杏叶黄酮提取率为目标而进行的提取工艺的报道较多。银杏叶黄酮作为一种天然抗氧剂，除了具有高效、安全、无毒的特点外，还具有一定的保健功能。因此，有关银杏叶中黄酮类化合物的提取和分离的研究对合理利用银杏叶资源、提高银杏产品附加值有重大意义。 赵一懿等采用超高效液相色谱法（UPLC）对所采集的2010年全年生长期内的北京产的4株银杏 收稿日期：2014－12－28 基金项目：渭南师范学院大学生创新创业训练计划项目（2014XK087） 作者简介：丁东（1991—），男，渭南师范学院化学与生命科学学院； 张展鹏（1981—），男，渭南职业技术学院医学院教师，硕士； 权美平（1978—），女，渭南师范学院化学与生命科学学院副教授，博士。
由此说明单用雌激素是不够的。 盐酸氟西汀(百忧解)是一种选择性52羟色胺回收抑制剂,可选择性抑制中枢神经元系统突触前52羟色胺释放后的回收再摄取,从而提高突触间隙52羟色胺的浓度,产生明显的抗抑郁效应[7];而雌激素可促进52 H T等神经递质合成[2];二者合用既可改善潮热等症状又可改善抑郁症状。本文结果显示,盐酸氟西汀联合HR T治疗围绝经期抑郁症,效果显著优于单用HR T。 参考文献 [1] 王爱铃,鞠雪涛,石紫云,等.超声在绝经后激素补充治疗 评估中的临床价值.陕西医学杂志,2006,35(10):11672 1168. [2] 张惜阴,戴钟英,于传鑫,等.实用妇产科学.第2版.北京: 人民卫生出版社,2003:846. [3] 孙 静.抗抑郁药的临床应用.临床精神医学杂志,2008, 18(3):216.[4] Soares CN,A l m eida O P,Joffe H,et al.Effcacy of esteadi o l fo r the teratm ent of deperssive diso rders in peri m enopausal w om en:a doubieblind,random ized, p lacebo2contro lled trial.A rch Gen P sych iatry,2001,58: 5292534. [5] Saletu B,B randstatter N,M etka M,et al.Double2blind, p lacebo2con2tro lled ho r monal,syndrom al and EEG m app ing studies w ith transdder m al oestradi o l therapy in m enopausal dep ressi on.P sychopar m co logy(Berl),1995, 122:3212329. [6] Joffe H,Groninger H,Soares C,et al.A n open trial of m irtazap ine in m enopausal w om en w ith dep ressi on unresponsive to estrogen rep lace2m ent therapy.W om ens H ealth Gend Based M ed,2001,10:99921004. [7] 石 玉,王汝娟.百优解治疗抑郁症的双盲对照研究.陕 西医学杂志,2002,31(8):9052908. (收稿:2009203223) 银杏叶提取物治疗脑供血不足临床疗效 西电集团医院(西安710077) 陈风慧 徐 璐 摘 要 目的:探讨银杏叶提取物治疗脑供血不足临床疗效。方法:100例脑供血不足患者,银杏叶和对照组(丹参注射液)各50例,每天静滴1次治疗15d。结果:银杏叶组起效快总有效率94%,对照组起效慢,总有效率70%,两组比较差异有非常显著意义(P<0.01)。结论:银杏叶提取物治疗脑供血不足疗效明显。 主题词 脑缺血 药物疗法 银杏叶 对比研究 脑供血不足是临床常见的急性脑血管病,具有高致残率高致死率,且复发率高,治疗上有一定的难度。我院从2003年7月至2007年12月应用银杏叶提取物治疗脑供血不足50例,取得良好效果,现报告如下。 资料与方法 1 一般资料 本组100例患者均系我院急诊科留观和神经内科住院患者,所有病例均有脑供血不足的症状,全部患者治疗前后均行血常规、尿常规、肝肾功能、血糖、心电图、TCD、CT检查并排除心、肝、肾、内分泌及代谢疾病,随机将患者分为银杏叶提取物组和对照组。银杏叶提取物组50例,男28例,女22例,年龄28～78岁,视物旋转31例,合并高血压34例,冠心病30例,颈椎病23例,糖尿病10例。对照组50例,男27例,女23例,年龄30～72岁,头昏35例,合并高血压25例,冠心病22例,高血压15例,颈椎病26例。两组年龄、性别、病情程度、既往史均无显著性差异(P>0. 05),具有可比性。 2 给药方法 银杏叶提取物组:银杏叶提取物10m l,溶于0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液静 脉滴注,每日1次,共15d。对照组:复方丹参注射液溶于0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液静脉滴注,每日1次,共15d。 3 疗效评定标准 显效:治疗后临床症状、体症完全消失或起效时间≤3d。有效:眩晕等症状减轻,可正常工作或生活,或起效时间3～7d。无效:治疗前后无变化;或起效时间大于7d。 4 统计学处理 采用?2检验。 结 果 两种临床疗效比较见表1,两种药物起效时间见表2。从表1、表2可见银杏叶提取物组疗效优于对照组;在起效时间上银杏叶提取物组也先于对照组。两组比较有非常显著意义。 表1 两组治疗疗效比较[例(%)]组 别n显效有效无效总有效率%银杏叶提取物组504163994对照组5010251570 注:与对照组比较,P<0.01
亲爱的朋友，很高兴能在此相遇！欢迎您阅读文档银杏叶片说明书，这篇文档是由我们精心收集整理的新文档。相信您通过阅读这篇文档，一定会有所收获。假若亲能将此文档收藏或者转发，将是我们莫大的荣幸，更是我们继续前行的动力。 银杏叶片说明书 银杏叶片(健民)活血化瘀通络。用于瘀血阻络引起的胸痹、心痛、中风、半身不遂、舌强语蹇;下面是我们整理的，希望对大家有所帮助。 银杏叶片商品介绍 通用名：银杏叶片 生产厂家:武汉健民集团随州药业有限公司 批准文号：国药准字Zxx7960 药品规格：24片 药品价格：￥19.89元 【通用名称】银杏叶片 【商品名称】银杏叶片(健民) 【拼音全码】YinXingYePian(JianMin) 【主要成份】银杏叶提取物。 【性状】本产品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后显浅棕黄
色至棕褐色;味微苦。 【适应症/功能主治】活血化瘀通络。用于瘀血阻络引起的胸痹、心痛、中风、半身不遂、舌强语蹇;冠心病稳定型心绞痛、脑梗死见上述证侯者。 【规格型号】24s 【用法用量】口服。一次2片，一日3次;或遵医嘱。 【不良反应】尚不明确。 【禁忌】尚不明确。 【注意事项】尚不明确。 【药物相互作用】如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用，详情请咨询医师或药师。 【贮藏】密封。 【包装】药品包装用铝箱/聚氯乙烯固体药用硬片包装，12s*2板/盒。 【有效期】24月 【批准文号】国药准字Zxx7960 【生产企业】武汉健民集团随州药业有限公司 银杏叶片(健民)的功效与作用银杏叶片(健民)活血化瘀通络。用于瘀血阻络引起的胸痹、心痛、中风、半身不遂、舌强语蹇;冠心病稳定型心绞痛、脑梗死见上述证侯者。
Platelet-Activating Factor 即血小板活化因子。 一种强效生物活性磷脂，由白细胞、血小板、内皮细胞、肺、肝和肾等多种细胞和器官产生。PAF通过与靶细胞膜上的PAF受体结合而发挥作用。可引起血小板聚集，中性粒细胞聚集和释放；产生大量活性氧、白三烯等炎性介质。PAF阻断药 PAF通过与细胞膜受体结合发挥作用， PAF受体阻断药能阻止PAF与受体结合，因此对与PAF生成过量有关的疾病如哮喘、败血性休克等应当具有治疗意义。 银杏黄酮 银杏黄酮亦称银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E. [本品来源]本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶提取物。 [植物分布]全国大部分地区有产，主产湖北、江苏、广西、四川、河南、山东、辽宁等地。. [产品性状]银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E为浅黄棕色可流动性棕黄色粉末，略有银杏叶香味。 [产品含量]总黄酮甙含量：24-26%（HPLC法）,总萜内酯含量8-10%（HPLC法）白果内酯≥2.5% 银杏内酯A≥1.4% 银杏内酯B≥1.2%，银杏内酯C≥0.9% ，银杏酸≤1-5ppm重金属含量≤20ppm AS≤1PPM 干燥失重≤3%，炽灼残渣≤1.5%，溶济残留≤1% 。 [产品用途]适用于制药、保健品、日用品、化妆品等各个领域 [适用范围]增加脑血管流量，降低脑血管阻力，改善脑血管循环功能，保护脑细胞，免受缺血损害，扩张冠状动脉，防止心绞痛及心肌梗塞，抑制血小板聚集，防止血栓形成，清除有害的氧化自由基，提高免疫能力，具有防癌抗衰功能。对治疗冠心病、心绞痛、脑动脉硬化、老年性痴呆、高血压等病有神奇疗效。 1. 促进循环 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.能同时促进大脑和身体肢体的循环。银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.的一个主要保健功能就是抑制一种称为血小板活化因子（PAF）的物质，PAF是一种从细胞中释放的介质，其会导致血小板聚集（堆积在一起）。高含量的PAF会导致神经细胞损伤，中枢神经系统血流量降低，发炎，和支气管收缩。与自由基非常相似，高PAF水平也会导致衰老。银杏内酯和白果内酯可在缺血（体内组织缺少氧气）时期内保护中枢神经系统的神经细胞不受损伤。该功能可能能对苦于中风的患者有辅助治疗的作用。除了抑制血小板粘着外，银杏提取物调节血管张力和弹力。换句话说，其可令血管循环更加有效率。该提升循环效率作用对循环系统中的大血管（动脉）和较小血管（毛细血管）都有同样作用。 2. 抗氧化作用 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.可能在大脑，眼球视网膜和心血管系统中可发挥抗氧化特性。其在大脑和中枢神经系统中的抗氧化作用可能有助于防止因年龄导致的大脑功能衰落。银杏叶提取物在大脑中的抗氧化功能特别使人感兴趣。大脑和中枢神经系统特别易受自由基攻击。自由基导致大脑损伤被广泛认为是导致伴随衰老而来的多种疾病的影响因素，其中甚至包括阿兹海默症。 3. 抗衰老功能 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.提升大脑血流量并对神经系统有极好的滋补作用。包含上万患者的数百次科学研究证实了银杏叶提取物的功效对包括大脑血流不足和老年患者的智力衰退在内的诸多问题的效力。银杏对许多衰老的可能症状都有很好的效果，例如：焦虑和忧郁、记忆损伤、难以集中注意力，机敏度下降、智力下降、眩晕、头痛、耳鸣（耳中鸣响）、视网膜黄斑部退化（成人失明的最普遍原因）、内耳骚动（其会导致部分失聪）、末端循环不良、阴茎血流不良导致的阳痿。 4. 痴呆，阿兹海默症和记忆力提升 科学家回顾了所有已出版的对银杏和轻微记忆损伤的高质量研究，并得出结论：银杏在提升记忆力和感知功能方面较安慰剂明显更加有效。银杏在欧洲被广泛用于治疗痴呆。银杏被认为可有助于防止或治疗这些脑部紊乱的原因是其可增加脑部血流量及其抗氧化功能。尽管许多临床试验有科学上的缺陷，银杏可能增加阿兹海默症患者思考能力，学习能力和记忆力的证据仍被抱以很大期望。 5. 月经前不快症状 一次评价银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.对有月经前不快症状妇女益处的双盲受控安慰剂研究，该试验包括143名年龄在 18-45岁的妇女，并跟踪她们两个月经周期。在第一个周期的第16天每个妇女都收到银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.（每天
一、银杏叶提取物的主要成分 目前银杏叶提取物质量控制标准主要在两种有效成分（黄酮和内酯）和一种毒性成分（银杏酸）上。中国药典对银杏叶提取物质量标准如下：总黄酮含量≥24%,内酯含量≥6%，银杏酸含量＜10ppm。这是提取物在每次临床试验中提取物显示实质功效的等级。 二、银杏叶提取物市场需求分析 2013年中国银杏叶提取物产量达到348.6吨，下图为2009-2014年中国银杏叶提取物产量统计。 国际市场上银杏叶提取物制剂总销售额估计达20亿～25亿美元，而我国每年出口银杏叶粗提取物金额在2000万美元左右。2012年，国内银杏叶提取物的市场表现出供应稳定的态势，辽宁产含量为100%黄酮的银杏叶提取物出口报价为46美元/公斤。 三、银杏在全国的分布量 中国的银杏资源主要分布在山东、浙江、安徽、福建、江西、河北、河南、湖北、江苏、湖南、四川、贵州、广西、广东、云南等省的60多个县市，另外台湾也有少量分布。从资源分布量来看，以山东、浙江、江西、安徽、广西、湖北、四川、江苏、贵州等省最多，而各省资源分布也不均衡，主要集中在一些县或市，详见下表。 省份市（县） 江苏泰兴、邳州、吴县、泰县、泰州 山东郯城、海阳、文登 广西灵川、兴安、临贵、桂林 湖北随州、安陆、南潭、孝感、京山 河南新县、光山、信阳、峡县、嵩县 浙江长兴、诸暨、临安、富阳、安吉 贵州盘县、正安、务川、道真 安徽金寨、霍山、舒城、歙县、宁国、广德
湖南祁阳、宁远、道县、资兴、新化、洞口、桑植 四川安县、北川、彭州、都江堰 广东南雄 福建浦城、崇安、龙溪、建阳、上杭 江西婺源、德兴、上饶、分宜 河北遵化、易县 辽宁丹东 我国五大银杏基地： 1、邳州是全国五大银杏基地最大种植基地。现有银杏树成片园21万亩，银杏果年产量900吨，占全国的十分之一；银杏士青叶产量1.2万吨，约占全国部产量的60％。银杏酮生产能力250吨，占全国总量的80％。 2、“天下银杏第一乡”的山东省郯城县新村乡。 3、宋店银杏基地为全国五大银杏基地之一。曾被林业部、国家科委誉以“银杏第一园”，“优质高产银杏示范基地”、等各种称号。 4、泰兴，古银杏、银杏定植数、银杏产量、银杏品质均居全国之冠，享有华夏“银杏第一市”美誉。目前泰兴银杏产量约占全国三分之一。 5、中国银杏之乡：广东韶关南雄市。 四、银杏叶提取物的功效 1、促进循环 银杏叶提取物能同时促进大脑和身体肢体的循环。除了抑制血小板粘着外，银杏提取物调节血管张力和弹力，可令血管循环更加有效率。 2、抗氧化 银杏叶提取物可能在大脑、眼球视网膜和心血管系统中可发挥抗氧化特性。其在大脑和中枢神经系统中的抗氧化作用可能有助于防止因年龄导致的大脑功能衰落。 3、抗衰老 银杏叶提取物提升大脑血流量并对神经系统有极好的滋补作用。银杏对许多衰老的可能症状都有很好的效果，例如：焦虑和忧郁、记忆损伤、难以集中注意力、机敏度下降、智力下降、眩晕、头痛耳鸣、视网膜黄斑部退化（成人失明的最普遍原因）、内耳骚动（其会导致部分失聪）、末端循环不良、阴茎血流不良导致的阳痿。 4、抵抗痴呆、阿兹海默症和记忆力提升 银杏在提升记忆力和感知功能方面较安慰剂明显更加有效。银杏在欧洲被广泛用于治疗痴呆。银杏被认为可有助于防止或治疗这些脑部紊乱的原因是其可增加脑部血流量及其抗氧化功能。 5、调解经前不快 银杏明显地减轻月经前不快症状的主要征候，特别是乳房疼痛和情绪不稳。 6、改善性功能 尽管目前没有关于此功能的双盲试验根据，但病例报告和开放研究提出银杏能使因扑洛扎克类药物及其它抗抑郁药物而来的性功能不良好转。 7、眼部问题
银杏的功效 1、促进血液循环、因此能预防心脑血管疾病、脑血栓心血栓与中风、 2、预防冠心病、心绞痛、高血压、高血脂、高血糖、 3、增加记忆力预防和治疗老年痴呆症、 4、延缓衰老、增强细胞繁殖力、延长细胞寿命、人体寿命延长 可达120岁 5、抗辐射、转基因影响、污染导致人体变异、能有效缓解辐射 对骨骼细胞增殖抑制作用、 6、含丰富的维生素和优质的水溶蛋白、有良好的护肝解毒、修 复肝组织损伤功效、 7、银杏果根据人体每天需要0.2毫克黄铜维持干细胞使用量、 8、抑制和杀伤肿瘤细胞、减轻肿瘤患者化疗、放疗后的副作用、 对升高白细胞有确切功效、 9、养颜护肤、美容佳品、柔嫩皮肤防止粗糙、延缓细胞衰老。
白果的功效与作用 1、祖国医学认为，白果能敛肺气、定痰喘、止带浊、止泻泄、解毒、缩小便，主治哮喘痰嗽、带下白浊、小便频数、遗尿等。 2、白果具有通畅血管、保护肝脏、改善大脑功能、润皮肤、抗衰老、治疗老年痴呆症和脑供血不足等功效。 3、白果含有多种营养元素，除了含有非常风的蛋白质、脂肪、糖类之外，还含有维生素C、维生素B2、胡萝卜素、钙、磷、铁、钾、镁等微量元素，以及白果酸、白果酚、多糖等成分。这些成分对人的健康都非常有帮助。 4、白果可治疗座疮。白果中有一种成分苦内脂，这种成分对脑血栓、高血压、冠心病等有特殊的疗效。适用分量每次10克左右。 一般人均可食用，因此，被广泛运用到临床上，很多的治疗心脑血管疾病的终成药都有这个成分。特别适合尿频者，体虚白带的女生。 有实邪者忌服。生食或炒食过量可致中毒，小儿误服中毒尤为常见。 5、白果可以滋阴养颜抗衰老，使人肌肤、面部红润。 6、白果可用于治疗肺结核。这个方法很简单，具体用法，在中秋节前夕，将半青带黄的白果(选取外表丝毫无损的大颗粒)摘下，不用水洗，亦不去柄，随即浸入生菜油内，浸满100天后即可
银杏叶提取物的药用及食用价值 对银杏叶提取物的有效成分、质量标准，药效学的研究成果、药用价值和食用价值作一综述，以进一步了解银杏的综合价值。 银杏（ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．）又名白果、公孙树、鸭掌树，系最古老的中生代孑遗稀有植物之一，仅存一科一属一种，有裸子植物“活化石”之称。银杏为我国特产，主产于河南、湖北等地。银杏的种子、根、叶均可药用。《本草纲目》记载：银杏性平味甘苦涩，有小毒入肺，有益肺气、定痰喘、止带浊、缩小便、通经、杀虫等功效。２０世纪６０年代，德国对银杏叶的成分进行了分析，发现银杏叶中的类黄酮物质对动物循环系统、改善脑功能有良好的作用，从此开始了银杏叶药理及应用的现代研究。１９９０年，在新加坡和马来西亚举行的两次大脑老化新趋势和治疗脑缺血的学术会议上，法国和德国科学家介绍了银杏叶提取物有延缓细胞老化、抗衰老、防治中老年脑功能不足的保健功效。目前，世界各地相继开展了药理、保健、临床、食品等理论及技术研究，我国已有大量的银杏叶提取物、药品、食品出口和上市，为心血管疾病患者提供了新的治疗药品。１银杏叶提取物的有效成分、质量标准及测定方法银杏叶提取物的有效成分主要是黄酮苷类和萜类物质。黄酮苷占２４％，以槲皮素、山奈素、异鼠李素为主；萜类占６％，以银杏内酯、白果内酯为主；微量元素有Ｆｅ、Ｃｕ、Ｍｎ、Ｚｎ及常量元素Ｃａ、Ｍｇ等
目前，国际上对银杏叶提取物的质量要求是：黄酮苷＞２４％，银杏内酯＞６％，银杏叶酸＜５ｍｇ／ｋｇ［１］。按中华人民共和国药典２００５年版一部附录ⅥＤ规定的ＨＰＬＣ法测定银杏叶提 取物中的总黄酮。２银杏叶提取物的药效学研究２．１改善心脑血循环药理实验表明，银杏叶提取物有通过降低血液黏性改善微循环系统的功能［２］。银杏酮可抑制血管紧张素酶（ＡＣＥ）［３］。ＡＣＥ的作用是将血管紧张素Ⅰ转变为血管紧张素Ⅱ，而血管紧张素Ⅱ可使外周小动脉强烈收缩使血压升高。ＡＣＥ被抑制后，不但减少血管紧张素Ⅱ生成和醛固酮及儿茶酚胺的分泌，且延缓了舒缓激肽的降解灭活，从而扩张脑血管、冠状动脉，降低血管阻力。银杏酮用于豚鼠离体心脏灌流，可引起冠状血管扩张，注射于豚鼠后肢动脉，可扩张后肢血管。银杏叶提取物能改善小鼠的长期记忆功能，并对大鼠的帕金森综合征有一定的疗效［４］。目前，临床应用银杏叶治疗冠心病和高血脂症，已取得了较好的疗效。 ２．２抗病毒 银杏叶甲醇提取物十七碳烯水杨酸、氯仿提取物白果黄素有抑制ＥＢ病毒活性、ＴＰＡ致癌启动因子的作用，且活性很强［其效果超过了维生素Ａ酸。２．３抗菌消炎银杏叶水煎液对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌及铜绿假单胞菌均有抑制作用［６］。银杏叶中双黄酮物质参与了炎症反应，从中分离出的几种抗炎成分，其效果为：穗花杉双黄酮（ａｍｅｎｔｏｆｌａｖｏｎｅ）＞银杏双黄酮（ｇｉｎｋｇｅｎｔｉｎ）＞金松双黄酮（ｓｃｉａｄｏｐｉｔｙｓｉｎ）。２．４解
银杏叶提取物可行性分析报告
目录1 银杏叶研究概况 1.1功效成分简述 1.2 银杏叶主要成分研究情况 1.1.1 黄酮类化合物 1.1.2 银杏萜内酯 1.1.3 聚异戊烯醇 1.1.4 有机酸类 1.1.5 酚酸、烷基酚及烷基酚酸类 2 银杏产品开发情况 2.1国内情况 2.2.1 药品 2.2.2 保健品 2.2.3 化妆品 2.2 国外情况 3 项目市场前景分析
1 银杏叶研究概况 1.1功效成分简述 银杏树是目前发现的当今世界上最奇特、对人类贡献最大的植物，特别是银杏叶具有五大成分五大功效，银杏叶将是世界上最有发展前景的中药材，能够治疗世界上很多的疑难杂症： （1）黄酮苷类：对心脑血管疾病，高血脂，高血压，清除氧自由基具有显著的疗效，是目前世界上治疗该类疾病最显著的药物。 （2）银杏内酯A、B、C、M类：是血小板活化因子（PAF）拮抗剂，是银杏叶中最重要的活性成分，是治疗神经系统疾病的特效药物。 （3）白果内酯类：白果内酯有很强的生物活性，为神经精神病药物，对因年老的呆傻症有奇异的疗效，它能抗神经末梢的衰老，被誉为真正抗衰老化学物质。 （4）银杏酚酸类：可促进胃液和胆汗的分泌；具有抗细菌和消炎的作用；制成无残留农药；含有抗真菌物质，能够真正刺激神经中枢系统的作用。 （5）聚异戊烯醇类：促进造血功能，改善肝脏机能，对再生障碍性贫血（白血病），对各种肝病、糖尿病具有最显著的疗效，是治疗这类疾病最具有开发前景的药物。 1.2 银杏叶主要成分研究情况 自20世纪60年代开始，许多国家采用现代分离技术对银杏叶的化学成分进行研究，经药理实验和临床验证，发现银杏叶的多方面生物活性与其所含特定化学成分有关。德国Willamar Schwabe首次注册了银杏叶的一种简单提取物，并于1972年申请了专利（W Schwabe DE 176708和DE 2117429），定名为EGb761，将其用于治疗心脑血管疾病和神经系统疾病，具有显著疗效，且无毒副作用；银杏内酯类化合物（ginkgolides）具有显著疗效，且无毒副作用；银杏内酯类化合物具有增强血小板活化因子（PAF）拮抗的作用。将银杏制剂列为治疗药物的国家有德国、法国和中国，其他国家均只将其用为保健食品或非处方用药。美国开发出的银杏保健食品已经获得FDA的批准，使人们对银杏叶的保健药用价值更加重视，对银杏叶化学成分研究也越来越深入。最近不断从银杏叶中发现一些
银杏叶片的功效及毒副作用 银杏叶，是银杏科植物银杏的叶，又名白果叶。据《食疗本草》记载，银杏叶可用于心悸怔忡、肺虚咳喘等病症。本世纪60年代，西德即开始了银杏叶的研究。他们发现，银杏叶中以黄酮为主的有效成份，具有保护毛细血管通透性、扩张冠状动脉、恢复动脉血管弹性、营养脑细胞及其它器官的作用，而且还有使动脉、末梢血管、毛细血管中的血质与胆固醇维持正常水平的奇特功效。 随着现代药理研究的不断深入，发现银杏中不但含有黄酮类物质，而且还有萜内酯类、酚类等化合物，它们卓越的药理作用已被人们逐渐认识。 银杏叶的功效 : 1、降低人体血液中胆固醇水平，防止动脉硬化。对中老年人轻微活动后体力不支、心跳加快、胸口疼痛、头昏眼花等有显著改善作用。 2、通过增加血管通透性和弹性而降低血压，有较好的降压功效。 3、消除血管壁上的沉积成份，改善血液流变性，增进红细胞的变形能力，降低血液粘稠度，使血流通畅，可预防和治疗脑出血和脑梗塞。对动脉硬化引起的老年性痴呆症亦有一定疗效。 4、银杏叶制剂与降糖西药合用治疗糖尿病有较好疗效，可用于糖尿病的辅助药。 5、能明显减轻经期腹痛及腰酸背痛等症状。 6、用于支气管哮喘的治疗，也有较好疗效。
7、降低脂质过氧化水平，减少雀斑，润泽肌肤，美丽容颜。 8、预防冠心病心绞痛 银杏叶提取物对预防冠心病心绞痛有明显的作用，可改善心脏血流、保护缺血心肌的功能，可降低胆固醇、甘油三酯、升高高密度脂蛋白，改善血液流变学的某些指标，对预防心脑务管疾病有重要意义，可明显改善冠心病患者的临床症状，如对头晕、胸闷、心悸、气短、乏力均有较好的改善作用。 9、预防高脂血症 银杏叶提取物对高脂血症有预防作用，可明显降低血脂水平，降低中老年人冠心病的发病率。 10、预防脑血管疾病 通过对银杏叶提取物制剂的临床应用，发现它能够改善细胞血液循环、活化细胞代谢，因而对老年痴呆症、脑损伤后遗症、脑血栓等疾病的疗效显著。 11、抗癌作用 银杏叶提取物还能抑制亚硝胺等物质的致癌作用。
银杏叶提取物的药理作用及其研究进展 摘要：银杏是最古老的中生代植物，我国自古以来就将其用作中药，银杏叶提取物近年来引起了国内外高度关注。本文对银杏叶提取物防治中枢神经系统、心脑血管系统；肝脏、肿瘤等疾病研究资料进行了分类概述。从银杏叶提取物的药理作用、作用机制等进行综述，为银杏叶的临床应用提供参考依据。 关键词：银杏叶、银杏叶提取物、药理作用 银杏(GinkgobilobaL)又名白果、公孙树、鸭脚子、鸭掌树，为落叶高大乔木，最早出现于3.45亿年前的石炭纪，第四纪大陆冰川之后成为中国的特有树种，是世界上最古老的孑遗植物之一，原产于中国，于1710年左右引入欧洲，素有“活化石”、“植物界的熊猫”之称[1]。 银杏叶的化学成分很复杂，迄今已发现170多种化合物，银杏叶提取物(GinkgoBilobaextract，GBE)中主要活性成分为黄酮类和萜类内酯[2-3]，这使得银杏叶兼具有黄酮类与萜类内酯的药理作用，所以银杏叶提取物的药用价值极为广泛，药理学研究表明银杏叶提取物除具有显著的抗血小板活化因子(PAF)外，还具有抗脑缺血、清除自由基、抗炎、抗肿瘤及增强神经系统活性等作用，对冠心病、高血压、动脉粥样硬化、脑功能减退、老年性痴呆、记忆减退、衰老等与心脑血管循环有关的疾病有显著的预防和治疗效果。中医中，银杏叶常用于治疗记忆丢失，胃部疼痛，痢疾，高血压、精神紧张和呼吸道问题如哮喘，支气管炎和循环不良及其引起的焦虑[4]。 1.对心血管系统的作用 银杏叶提取物被广泛用于缺血性心、脑血管病的防治中并取得了良好效果。应用GBE 治疗于动物及人体的研究中，均显示出较好的心功能改善作用。银杏叶提取物有保护心脏，扩张血管的作用，对心脏缺血和感染性休克等均有显著的疗效[5]。 1.1对心脏保护作用熊年，韦晟等[6]实验发现，在缺血再灌注前连续给药银杏内酯B(GB)能缩小缺血再灌注损伤造成的梗死面积，改善心功能。这一保护作用可能是通过抗氧化和抗凋亡信号通路综合作用实现的。宋贵栎等[7]的研究表明GBE可显著抑制血浆及心肌组织中脂质过氧化物的产生，保持机体总SODCuZnSOD的水平缺血再灌注所导致组织中的t-PA
第一章引言 第一章引言 术语和定义：总黄酮醇苷：包括槲皮素(Quercetin)、山奈素(Kaempferel)、异鼠李素(Isorhamnetin)的糖苷类。 银杏叶提取物(EGB)因其具有抗氧化，拮抗血小板活化因子，改善血液流变学特性等药理活动，因而引起了广大研究者的兴趣，不论是衡量提取工艺的优劣和控制EGB的质量，还是为后续药理药效的实验研究提供可靠数据，一种能稳定，可靠的定量分析其主要药效物质黄酮类化合物的方法是十分必要的。国内主要以铝盐显色然后比色的方法或直接进行比色的方法测定黄酮含量，但因此法受酚类物质干扰比较大，准确性和专属性比较差，只能做定性或半定量分析。样品经酸水解后，通过高效液相色谱法测定槲皮素，山奈素，异鼠李素3种苷元的含量，在乘以一定的因子换算成总黄酮醇苷的方法，因其准确，快速等优点一逐渐被广泛接受，也是国际上公认的分析银杏叶总黄酮含量的方法。应用范围：本方法采用高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量，本方法适用于银杏叶经加工制成的提取物[1]。 1.1银杏叶提取物简介[2] [本品来源] 本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶提取物。 [植物性状] 落叶乔木，可高达40m。树干直立，树皮灰白。枝有长短两种，叶在短枝上簇生，在长枝上互生。叶片扇形，长4-8cm，宽5-10cm，先端中间2浅裂，基部楔形，叶脉平行，叉形分歧；叶柄长2.5-7cm。花期4-5月，果期7-10月。9-10月间采收，晒干。 [植物分布] 全国大部分地区有产，主产广西、四川、河南、山东、湖北、辽宁、江苏等地。 [产品性状] 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E为浅黄棕色可流动性粉末，有本品固有的香气，味苦。 [产品含量] 按干燥品计，银杏总黄酮含量≥24.0%。 1.2银杏叶提取物的功效[3] [药理作用] 银杏叶目前仍被中国医药用于治疗记忆丢失，胃部疼痛，痢疾，高血压、精神紧张和呼吸道问题如哮喘，支气管炎和循环不良及其引起的焦虑。银杏的活性成分是萜烯部分，其中包括银杏内酯和白果内酯。这些银杏黄酮－糖甙成分具有强大的抗氧化与自由基能力。