选修一《生物技术实践》学习资料
一．微生物的培养和利用
基本概念
培养基：配制出来的供微生物生长繁殖的营养基质。
一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐等。
还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
分液体培养基、固体培养基等。
选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
消毒：指使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。
方法：煮沸消毒法；利用化学药剂消毒，如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等
灭菌：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
灼烧灭菌：如将微生物接种工具在酒精灯上充分燃烧层灼烧
干热灭菌：160~170℃加热1~2h
高压蒸汽灭菌：100 ℃以上，100kPa，15~30min
无菌技术：
1．对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
2．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
筛选菌株：人为地提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。例如：从70~80℃的热泉中筛选出水生耐热细菌Taq
统计菌落数目：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
（一）微生物的实验室培养
实验目的
1．了解有关培养基的基础知识。
2．学习无菌技术的操作。
3．学习微生物的实验室培养方法。
实验原理
1．微生物能在适宜的温度下，在培养基上传代生长。
2．无菌技术是获得纯净的培养物和防止外来杂菌入侵的关键。
实验仪器与用具
高压灭菌锅、恒温水浴锅、恒温培养箱、超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的涂布器、酒精棉球、接种环、电子天平、称量纸、药匙、量筒、烧杯、培养皿、锥形瓶。
实验材料与试剂
牛肉膏、琼脂粉、NaCl、蛋白胨、大肠杆菌菌种。
方法步骤
①配制培养基
在电子天平上称量牛肉膏0.5g，将牛肉膏连同称量纸一同放入250mL的锥形瓶中，再依次加入已经称好的蛋白胨1g 、NaCl 0.5g、琼脂粉2 g，最后加入100 mL蒸馏水。将锥形瓶放在水浴
锅中加热、搅拌，使上述各种成分溶解，待完全溶解后挑出称量纸。将溶解好的固体培养基加上封口膜备用。如需配制牛肉汤，则无需加入琼脂粉。
②培养基和实验用具灭菌
在灭菌锅中加入适量的水后，放入包好的培养皿和装有培养基的锥形瓶，之后在121℃、0.1兆帕压力下灭菌20min。冷却后取出锅内物品，放置在超净工作台上。
③倒平板（培养基）
用酒精棉球擦试超净台和实验者的双手。待锥形瓶内培养基冷却至50℃，点燃酒精灯，在酒精灯的火焰附近打开锥形瓶的封口膜，右手持封口膜和锥形瓶口，左手持培养皿，向培养皿中倒入培养基约20mL，在超净台上轻轻摇匀后冷却，倒置备用。
④接菌种
取大肠杆菌斜面试管一支，在酒精灯的火焰上灼烧接种环，将接种环放入斜面试管内稍稍冷却，之后用接种环轻刮一圈菌体，将菌体划线接种到固体培养基上。划线时，先在培养皿的一个区域内划线，然后转动培养皿90度，在酒精灯的火焰上将接种环上的余菌杀灭，冷却后再在第一次划线的后端往第二区域内划线，如此重复操作4次。划线时注意不要将培养基划破。总共划3个平板和1个空白对照。
⑤培养和观察
将上述4个平板放入恒温培养箱内，30℃培养24h。取出平板，可以看到已经分离的单个培养基菌落，而空白培养基上没有任何菌落生长。
微生物接种方法
平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后，可以分离到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。
稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
（二）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
实验目的
1．从土壤中分离出能够分解尿素的细菌。
2．统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。
实验原理
1．利用以尿素作为唯一氮源的尿素分解菌选择培养基从土壤中分离尿素分解菌。
2．对土壤样品进行稀释涂布培养，计算每克土壤样品中含有多少利用尿素的分解菌。
实验仪器与用具
高压灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的涂布器、酒精棉球、接种环、电子天平、称量纸、药匙、微量可调移液器与吸头、量筒、烧杯、培养皿、锥形瓶（100 mL 、500 mL）、玻璃棒、试管架、试管。
实验材料与试剂
琼脂粉、葡萄糖、MgSO4、KH2PO4、Na2HPO4、尿素、农田或者厕所附近的土样。
方法步骤
（三）分解纤维素的微生物的分离
实验目的
1．利用特定的选择培养基和鉴定培养基从土壤中分离出能够分解纤维素的微生物。
2．掌握刚果红染色的机理和操作。
实验原理
1．以纤维素作为唯一碳源的培养基能选择分离出分解纤维素的微生物。
2．刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
实验仪器与用具
高压灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的涂布器、酒精棉球、接种环、电子天平、称量纸、药匙、微量可调移液器与吸头、量筒、烧杯、培养皿、锥形瓶（100 mL 、500 mL）、玻璃棒、试管架、试管、恒温振荡培养箱。
实验材料与试剂
取自湿地或原生林地的土样、羧甲基纤维素钠、酵母粉、蛋白胨、琼脂粉、KH2PO4、NaCl、NaNO3、FeSO4、MgSO4、Na2HPO4、纤维素粉（或秸秆粉）、蔗糖、刚果红。
二．植物的组织培养技术
（一）菊花的组织培养
实验目的
1．了解植物组织培养技术在生产中的应用。
2．熟悉植物组织培养的基本过程。
3．了解影响植物组织培养的各种因素。
4．掌握培养基制备、外植体消毒和接种、培养、移栽以及栽培等基本操作技术。
实验原理
当植物细胞脱离了原来所在植物体的组织或器官而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件作用下，就可能表现出全能性，发育成完整植株。
植物全能性的表达包括脱分化和再分化。
脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
再分化：脱分化产生的愈伤组织继续分化，有可能重新分化成根或芽等器官。
实验仪器与用具
超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的镊子和手术刀、酒精棉球、培养架、高压灭菌锅、电子天平、称量纸、药匙、封口膜、橡皮圈、锥形瓶、玻璃棒、玻璃漏斗、量筒、铁架台、吸水纸、pH试纸。
实验材料与试剂
菊花茎段（生长旺盛的嫩枝）、蔗糖、琼脂、母液（大量元素10×、微量元素100×、有机物100×、铁盐200×）、0.1 g/mL的NAA、0.1 g/mL的IAA、0.1%的升汞、70%酒精。
MS培养基配制方法
取称量好的10 g琼脂加入800mL的蒸馏水中，熔化后依次加入蔗糖30g、大量元素母液100mL、微量元素10mL、铁盐5 mL、有机物10mL、蒸馏水75 mL、BA5 mL、IAA5 mL。调节pH为5.8。
在MS培养基中BA与NAA比例适中。如果在MS培养基配方中上添加不同质量浓度的BA、NAA，可配制成丛芽培养基（BA效应大于NAA）、生根培养基（NAA效应大于BA）。
20d
（二）月季的花药培养
实验目的
1．了解植物的花药培养在育种上的特殊意义。
2．了解被子植物花粉发育的过程以及花药培养产生花粉植株的两种途径。 3．学习花药培养的基本技术。 实验原理
花粉是单倍体生殖细胞，和体细胞一样，在离体条件下也具有发育成完整植株的潜能。通过花粉培养产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两条途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株；二是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化出植株。
在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。
通过镜检确定花药中花粉发育时期的方法有醋酸洋红法（常用）和焙花青—铬矾法。 实验仪器与用具
超净工作台、酒精灯、浸泡在75%酒精中的镊子和手术刀、酒精棉球、培养架、高压灭菌锅、电子天平、称量纸、药匙、封口膜、橡皮圈、锥形瓶、玻璃棒、玻璃漏斗、量筒、铁架台、吸水纸、pH 试纸。
实验材料与试剂
月季花蕾（完全未开放）、蔗糖、琼脂、母液（大量元素10×、微量元素100×、有机物100×、铁盐200×）、0.1 g/mL 的 IAA 、0.1 mg/mL 的KT 、0.1 mg/mL 的2，4—D 、0.1%的升汞、70%酒精、1%的醋酸洋红溶液。 培养基配方
月季花药培养基配方：1LMS 培养基添加2，4—D 0.4 mL 、KT 0.2 mL 、IAA 4 mL 。调节pH 为5.8。 诱导丛芽培养基配方：MS 培养基添加GA 、IBA 和BA ，质量浓度分别为0.1 mg/L 、0.5mg/L 、1 mg/L 。
10—20d
（一）果胶酶在果汁生产中的作用
实验目的
探讨温度和pH值对果胶酶活性的影响以及酶的最小用量。
实验原理
相同重量的苹果泥在不同的反应温度、pH值和不同果胶酶用量下，加入体积的果胶酶溶
液后反应相同的时间，通过衡量得到的过滤果汁体积大小来比较果胶酶活性，从而确认果胶酶的最适反应温度、pH值范围和酶的最小用量。
实验仪器和用具
电子天平、榨汁机、水浴锅、吸头盒和吸头、微量可调移液器、移液器架、定性滤纸、pH试纸、量筒、烧杯、玻璃棒、药匙、定时器、小刀、铁架台、三角漏斗。
实验材料和试剂
蒸馏水、1 moLHCl、1moLNaOH、2%果胶酶溶液、苹果。
1. 探究温度对果胶酶活性的影响
方法步骤
①将苹果去皮、籽、柄，切成小块，放入匀浆杯中，利用榨汁机制取苹果泥。
②称取20g苹果泥放入小烧杯中，加入1 mL2%果胶酶溶液，搅拌均匀。将烧杯放入45℃水浴锅中，
不停搅拌，20min后取出并过滤苹果泥，将取得的苹果汁收集到10 mL量筒中，过滤10min后记录果汁的体积。
③在25℃、35℃下分别重复步骤②，记录所得果汁的体积。
步加入试剂或处理方法烧杯试管
实验结果
在45℃条件下获取的果汁最多，表明果胶酶的活性较高。
2．探究pH对果胶酶活性的影响
方法步骤
天然的苹果汁的pH值一般为4~5。分别用1 moLHCl和1moLNaOH将苹果泥的pH值调至3、4、5、6、7，在45℃条件下分别重复实验1，记录所得果汁的体积。
实验结果
较适pH值为3~5。（为了不影响果汁的口味，一般生产果汁时不调pH值。）
3．探究果胶酶的用量
随着酶用量增加，过滤到的果汁的体积也增加；当酶的用量增加到某个值后，再增加酶的用量，过滤到的果汁的体积不再改变，说明酶的用量已经足够，这个值就是酶的最低用量（最适用量）。
方法步骤
①按实验1的方法制取苹果泥。
②准备5
③将各个烧杯放置于45℃恒温水浴锅中保温30min。
④过滤出果汁，记录果汁的体积。
（二）探讨加酶洗衣粉的洗涤效果
实验目的
1．探讨温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响。
2．探讨不同种类的加酶洗衣粉对同一污物洗涤效果的区别。
实验原理
1．酶作为一种蛋白质，其作用效果与温度有关。加酶洗衣粉的洗涤效果受温度影响。
2．洗衣粉中酶的种类不同，对污物的洗涤效果也不同，即不同的酶水解不同的污渍。
实验仪器和用具
恒温水浴锅、电子天平、药匙、称量纸、吹风机、秒表、滴管、玻璃棒、量筒、烧杯、镊子、植物油、小方块棉布。
实验材料和试剂
普通洗衣粉、蛋白酶洗衣粉、复合酶洗衣粉。
1. 探索复合酶洗衣粉在不同温度下的洗涤效果
方法步骤
①将4份称量好的复合酶洗衣粉中的一份（5g），加入到放置在35℃的恒温水浴锅内的大烧杯中，再加入500mL自来水，搅拌溶解。取4块沾有相同血渍的小棉布中的一块放入大烧杯中，开始计时，均匀搅拌。5min后用镊子夹出小棉布，放入另一烧杯的自来水中漂洗，尽量洗去泡沫。之后取出，展开放直晾干。
②其他条件不变，在25℃、15℃、5℃的水浴锅中分别洗涤第2、3、4块小棉布。
③晾干后，观察比较各棉布的干净程度。
实验结果
35℃条件下洗涤效果最好，25℃条件下次之，5℃条件下最差。
2. 探究不同洗衣粉对同一污物的洗涤效果
方法步骤
①称取普通洗衣粉、蛋白酶洗衣粉、复合酶洗衣粉各5g。取三块相同的小棉布，分别滴上植物油10
滴，用吹风机吹干。
②取一个烧杯，加入5g普通洗衣粉，再加入500mL自来水，放入1块小棉布后不断搅拌，0.5min
检查一次，记录洗涤干净耗费的时间。
③先后向另两个烧杯中加入5g蛋白酶洗衣粉、5g复合酶洗衣粉，重复步骤②。
④对比记录下的时间，分析不同洗衣粉的洗涤效果
实验结果
用普通洗衣粉将棉布上的油渍洗涤干净耗时约4.5min，用蛋白酶洗衣粉将棉布上的油渍洗涤干净耗时约3min，用复合酶洗衣粉将棉布上的油渍洗涤干净耗时约2min。表明复合酶洗衣粉对同一污物的洗涤效果最好。
（三）酵母细胞的固定化
固定化酶或固定化细胞是利用物理或化学方法将酶
或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合
法和物理吸附法。
固定化酶技术实现了酶制剂的反复利用，从而
大大降低了生产成本。
实验目的
1．了解固定化酶和固定化细胞的作用原理。
2．尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。
实验原理
海藻酸钠溶液遇到钙离子，会形成凝胶，从而将酵母细胞包埋在凝胶中，达到固定化效果。
实验仪器和用具
恒温水浴锅、电子天平、称量纸、药匙、恒温培养箱、250 mL锥形瓶、烧杯、玻璃棒、量筒、注射器、橡皮筋、塑料膜。
实验材料和试剂
10%葡萄糖溶液、无水氯化钙、干酵母、海藻酸钠。
四．DNA 和蛋白质技术 （一）DNA 的粗提取和鉴定
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA 的粗提取而言，就是要利用DNA 与RNA 、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA ，去除其他成分。
①DNA 的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分 在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同（右图）， 利用这一特点，选择适当的NaCl 浓度就能使DNA 充分溶解，而杂质沉淀，或者相反，以达到分离的 目的。
DNA 不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则 溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA 与蛋白质
进一步分离。
②DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80℃高温，而DNA 在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA 没有影响。
（本实验目的、原理及方法步骤等见实验复习资料。）
（二）多聚酶链式反应扩增DNA 片段
实验目的
通过尝试PCR （DNA 多聚酶链式反应）技术的基本操作，了解PCR 这一常规的分子生物学实验方法，理解PCR 原理，了解PCR 的应用。 实验原理
PCR 是体外迅速扩增DNA 片段的技术。它能以少量的DNA 作为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA 拷贝。PCR 每个循环包括变性、退火和延伸三个步骤。实验以大肠杆菌基因组中编码16SrRNA 的DNA 作为模板，在PCR 仪中扩增DNA ，用琼脂糖凝胶电泳检测PCR 结果。
DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基（—OH）末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。
实验仪器和用具
微量可调移液器、电子天平、吸头和吸头盒、高速离心机、恒温水浴锅、超净工作台、高压灭菌锅、恒温振荡器、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、DNA电泳观察仪、酒精灯、火柴、镊子、酒精棉、离心管、称量纸、药匙、点样膜、带封口膜的锥形瓶、量筒。
实验材料和试剂
大肠杆菌菌种、已灭菌的LB液体培养基、裂解液、PCR试剂盒、加样缓冲液、模板（在实验中制得）、DNAMarker、1倍TAE缓冲液、琼脂糖。
方法步骤
①模板的制备②PCR（变性→复性→延伸）③DNA琼脂糖凝胶电泳
（三）血红蛋白的提取和分离
实验目的
通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。
实验原理
1．凝胶色谱法可根据蛋白分子大小不同而流出色谱柱的顺序不同，将分子大小不同的蛋白分开。
2．聚丙烯酰胺凝胶电泳根据蛋白分子大小、所带电荷多少以及形状的不同在电泳时的泳动速度不同，而将蛋白分开；SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳则只根据蛋白分子的大小将蛋白分开。
实验仪器和用具
色谱柱、铁架台、滴管、玻璃棒、试管、试管架、洗瓶、试剂瓶、烧杯、定性滤纸、玻璃漏斗、剪刀、透析袋、透析袋夹、离心管、低速离心机、托盘天平、电子天平、分液漏斗、吸头、微量可调移液器、电泳仪、电泳槽、一次性手套、微量进样器、培养皿、吸水纸。
实验材料和试剂
pH为7.0的0.02moL/L磷酸缓冲液、甲苯、10%柠檬酸钠、生理盐水、交联葡聚糖凝胶G-75、鸡血（预加入1倍的10%柠檬酸钠）、10%过硫酸铵溶液、TEMED、30%丙烯酰胺混合液、1moL/L Tris 缓冲液（pH为6.8）、1.5 moL/L Tris缓冲液（pH为8.8）、水、电解缓冲液、染色液、脱色液、2×加样缓冲液、蛋白Marker。
方法步骤
40% 10min，红细胞破
电泳：
电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
高二理综生物选修一专题训练
专题1 传统发酵技术的应用
1.下列有关果酒，果醋和腐乳制作的叙述，正确的是( )
A. 参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体
B. 果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋
C. 在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物参与
D. 在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量
2.图甲是果醋发酵装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸
菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示
整个发酵过程培养液pH变化的曲线是( )
A．① B．② C．③ D．④
3．下列关于相关实验描述正确的是（）
A．制作腐乳的卤汤时，料酒加的量较多，造成豆腐腐败变质
B．制作泡菜时，放盐的比例过大，造成泡菜腐烂发霉
C．制作果醋时，通氧不足或温度过低，造成发酵失败
D．利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌
4.下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述 正确的是（）
A.腐乳制作所需要的适宜温度最高
B.果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C.使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D.使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
5.下列评价果酒和果醋制作是否成功的方法中 不合理的是（）
A.通过观察相关微生物的存在或数量变化进行鉴定
B.通过向果酒发酵液中加入重铬酸钾试剂进行鉴定
C.通过检测果醋发酵前后发酵液的pH变化进行鉴定
D.通过检测果酒发酵前后发酵液的温度变化进行鉴定
（2013江苏卷）6. 某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是( )
A. 酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B. 先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C. 与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D. 适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
7.下列有关传统发酵的叙述,正确的是( )
Ａ.在氧气不充足条件下制作果醋,选用醋酸菌Ｂ.在无氧条件下制作果酒,选用毛霉
Ｃ.在无氧条件下制作泡菜,选用乳酸菌Ｄ.在氧气充足条件下制作腐乳,选用酵母菌
8.在“探究果酒制作过程中影响酵母菌种群数量变化因素”时，获得下图所示的实验结果(图中O、
M、N、P代表相应发酵时间)。下列相关分析
正确的是( )
A. M点前酵母菌不进行细胞呼吸
B．终止发酵时间应选择在P点时
C．酒精浓度的增加会抑制酵母菌繁殖
D．N点时酵母菌种群增长率最大
9. （双选）下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，不合理的是
A 在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长
B 条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸
C 果酒发酵过程中发酵液密度不变
D 将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量
（2013新课标卷Ⅰ）10．回答下列有关泡菜制作的习题：（15分）
（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌的中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。
（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是：。
专题2 微生物的培养与应用
1.甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（）
A.甲、乙、丙都是异养微生物
B.甲、乙都足自养微生物、丙是异养微生物
C.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物
D.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
注：固氮微生物是指能够还原分子态氮为氨态氮的微生物
（2013江苏卷）2.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( ) A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
3.在培养酵母菌时，培养基中加入下列哪种特殊物质，可以抑制其他杂菌的繁殖（）
A.生长因子
B.食盐
C.高浓度蔗糖溶液
D.青霉素
4.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是( )
A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．碳源物质也是该微生物的能源物质
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一
5. 下列叙述错误的是（）
Ａ．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素Ｂ．培养霉菌时需将培养基的PH调至碱性
Ｃ．培养细菌时需将PH调至中性或微碱性Ｄ．培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件
6.产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）
A．一个细菌，液体培养基 B．许多细菌，液体培养基
C．一个细菌，固体培养基 D．许多细菌，固体培养基
7. 下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是（）
A．微生物培养前，需对培养基进行消毒
B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法
C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度
D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
8．下列有关生物学的研究方法中，不正确的是（）
A．用鲜葡萄制作果酒时,需给发酵装置适时排气 B．用稀释涂布平板法测定土壤溶液活菌数C．用龙胆紫溶液染色，观察洋葱表皮细胞的染色体形态、数目
D．用刚果红染色法可以筛选纤维素分解菌
9.(双选)稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是（）A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格干热灭菌处理
（2013新课标卷II）10.临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_______法或_________法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。
11. 有机磷农药杀虫能力强，在粮食增产、传染病防治等方面作用显著，但污染环境并危害人体健康。在众多的有机磷农药残留物降解技术中，生物降解有高效、彻底、无二次污染的优势，其中，微生物由于具有较复杂多样的代谢途径，是有机磷农药降解的主力军。
（1）在富含有机磷农药残留成分的土壤中，更容易分离到能降解农药的微生物。根据达尔文的理论，这是因为有机磷农药对于此类微生物具有作用。
（2）微生物具有复杂多样的代谢途径，从根本上说，是由微生物的所决定的。（3）微生物主要通过酶促反应，将有机磷农药分解为无毒或者低毒的化合物。研究发现，利用有机磷农药降解酶净化农药比利用微生物菌体更有效。
①微生物群体中，最初的降解酶基因是由于而产生的。从微生物中提取到一种降解酶后，需要确定在何种环境中该酶的活性高，检测酶活性高低的指标可以是。
②从天然菌株中提取降解酶的含量低，成本高，难以大量应用，科学家通过基因工程解决了这一难题。他们在获得降解酶基因后，通过技术对该基因进行大量扩增，再利用
酶、酶和运载体等作为基本工具，通过一定的手段构建________________________，并将其导入大肠杆菌体内，从而实现了高效表达。
③天然的降解酶对有机磷农药的降解率比较低，不能达到预期效果，科学家对降解酶特定部位的氨基酸序列进行重新设计、改造，显著提高了其降解能力，这项技术称为。
专题3 植物的组织培养技术专题4 酶的研究与应用
（2013江苏卷）1. 下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（）
A. 可用包埋法制备固定化酵母细胞
B. 反应产物对固定化酶的活性没有影响
C. 葡萄糖异构酶固定前后专一性不同
D. 固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
2.下列关于果胶酶的作用叙述错误的是（）
A．果胶酶是一种催化剂，可以改变反应速度
B．果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层
C．在果汁中加入果胶酶后可使果汁变得澄清
D．果胶酶能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸
3．水稻的花药通过无菌操作，接入试管，经过如下过程培育试管苗。据图分析下列叙述正确的是（）
A．a、b、c、d中的植物细胞都具有全能性，且全能性的表达程度相同
B．a、b、c的培养基中都有琼脂、有机物、水、植物生长调节剂等物质
C．水稻花药经a～d发育成试管苗的过程涉及有丝分裂、减数分裂等细胞分裂方式
D．只要调节培养基中各种营养物质的比例就能诱导b中的愈伤组织分化成试管苗
4.(双选)酵母菌是许多生物实验的材料，以下叙述正确的是（）
A．在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌
B．果汁发酵后是否产生酒精，可以用溴麝香草酚蓝试剂来检验
C．果酒发酵成功后，只需添加足够糖源，可以继续发酵果醋
D．将酵母细胞固定化后进行酒精发酵，固定化酵母细胞可以反复使用
5. （18分）请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的，繁殖种苗的速度。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部。
（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免的污染。（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗，而与配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需尊使用的生长调节剂是(脱落酸、2，4-D)。
（4）用四倍体和二倍体西瓜，获得三倍体西瓜的植株，给其雌蕊柱头授以二倍体西瓜花粉，子房发育成无籽西瓜。现有某地方来年需种植大批无籽西瓜，请用最经济快捷方式为其解决秧苗问题。
专题5 DNA和蛋白质技术
1.下列有关生物工程(技术)的叙述中，错误的是（）
A．利用PCR技术进行DNA扩增时不需要加入解旋酶
B．进行胚胎分割时应选用发育及形态正常的桑椹胚或囊胚
C．稀释涂布平板法可以纯化微生物，也可以用于微生物计数
D．凝胶色谱法主要根据分子带电性质的差异实现分子分离
2.关于DNA的复制，下列叙述正确的是（）
A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5′端延伸DNA链
B．DNA复制不需要引物C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合
D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸
3.关于高中生物学实验的基本原理，叙述不正确
．．．的是（）
A.噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统
B.提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异
C.成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透（过）性
D.PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应的模板
4.某同学用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验，操作错误的是
A. 加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨
B. 用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNA
C. 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌
D. 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热
5. （双选）下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有（）
A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞
B ．用不同浓度NaCl 溶液反复溶解与析出DNA 可去除蛋白质
C ．蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNA
D ．蛋白质和DNA 都可以用电泳的方法进行分离纯化 6. （双选）下列有关生物技术的叙述,不正确的是 （ ） A.制作果醋时，为保证醋酸菌的生长，不能向发酵装置补充氧气 B.制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长 C.固定化酵母细胞分解葡萄糖速度要比酵母菌快 D.使用透析法可以去除样品中相对分子量较小的杂质
7.（双选）酒精是生物实验常用试剂之一，下列实验中关于酒精的使用，正确的是（ ） A ．用酒精消毒时，无水酒精的杀菌效果最好
B ．制作洋葱根尖细胞装片时，用体积分数为95℃的酒精对解离后的根尖漂洗
C ．色素的提取和分离实验中，用无水酒精作有机溶剂提取色素
D ．DNA 粗提取过程中，用体积分数为95℃的冷酒精进一步纯化DNA
(2013四川卷)8.（12分）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽胞杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。 ⑴图甲中，过程①需要的酶有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以 作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是 。
⑵某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。
⑶以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种 菌的发酵罐需要先排气，其原因是 。
⑷用凝胶色谱法分离α-淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较 。
液体培养菌种
重组质粒图甲
图乙
高中生物选修测试题文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
选修1生物技术实践 一、单项选择题(本题包括16小题，每小题3分，共48分) 1．如下图所示，在适宜的温度条件下，在下列装置中都放入干酵母(内有活酵母菌)，其中适于产生酒精的装置是 ( ) 2．下列关于腐乳制作的叙述，错误的是 ( ) A．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳 B．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与 C．卤汤中的酒应控制在12%左右 D．装瓶时，应将瓶口通过酒精灯火焰 3．在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有关叙述正确的是 ( ) A．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入 B．腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的酒精以抑制细菌的增殖 C．利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌D．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些 4．下列关于生物技术实践的叙述中，错误的是 ( ) A．各种微生物的培养基配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐 B．与斐林试剂检测相比，用尿糖试纸检测尿液中的葡萄糖，特异性更强、灵敏度更高 C．利用PCR技术扩增目的基因时，引物Ⅰ和引物Ⅱ的碱基序列应互补 D．腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和盐，均可以抑制杂菌的生长 5．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙
述错误的是 ( ) A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理 8．检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是 ( ) A．将未接种的培养基放在实验桌培养 B．将未接种的培养基放在窗台培养 C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养 D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养 9．植物细胞表现出全能性的必要条件是 ( ) A．给予适宜的营养和外界条件 B．导入其他植物的基因 C．脱离母体并给予适宜的营养和外界条件 D．将成熟的筛管的细胞移到去核的卵细胞中 10．能够测定样品活菌数的方法是 ( ) A．稀释涂布平板法B．直接计数法 C．重量法 D．比浊法 11．在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是 ( ) A．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株 B．利用花药培养得到单倍体植株 C．利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株 D．利用细胞工程培育“番茄－马铃薯”杂种植株 12．关于发酵过程产物检验的说法，正确的是 ( ) A．果汁发酵是否产生酒精，可用NaOH来检验 B．检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定 C．泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量不能测定
选修3《现代生物科技专题》知识点总结 专题1 ? 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 操作水平：DNA分子水平 原理：基因重组 优点：1.突破物种界限 2.定向改造生物的遗传特性 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点切割，因此具有专一性。 （3）作用的化学键：切割磷酸二酯键 (4)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)作用：将两个具有相同粘性末端的DNA片段连接起来，形成重组DNA （2）连接的化学键：磷酸二酯键 （3）与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶DNA聚合酶 不同点连接的DNA 双链 模板不要模板 连接的对象2个DNA片段单 相同点作用实质形化学本质 3.“分子运输车”——运载体 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳 ②具有一至多个限制酶切点 ③具有标记基因，供重组D ④对受体细胞无害。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种环状DNA分子（3）其它载体：噬菌体、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.从基因文库中获取（不知道目的基因的核苷酸序 2.人工合成。 常用方法有：（1）反转录法（已经获得mRNA的情 （2）化学合成法（知道目的基因的核3.PCR技术扩增目的基因（知道目的基因两端的核苷（1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA （2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程：第一步：变性，加热至90～95℃DNA解
生物选修一<生物技术实践>知识点总结 专题一传统发酵技术的应用 *几种常用发酵菌种的比较 菌种 项目 酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧最适温度18℃～25℃30℃～35℃15℃～18℃常温 时间控制10～12天7～8天腌制8天左 右 腌制10天左 右 其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用 量 控制盐水比例 课题一果酒和果醋的制作 1、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。 C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O 在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O6→2C2H5OH＋6CO2 2、在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈 酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。 3、醋酸菌是单细胞细菌.，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O 4、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵 ↓↓ 果酒果醋 7、酒精检验：在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。 8. 实验装置 充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来 排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与 瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目的是有利于二 氧化碳的排出。使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连 接气泵，输入氧气。 课题二腐乳的制作 1、多种微生物参与了发酵，起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌。生殖方式是孢子生殖。 2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪 水解为甘油和脂肪酸。 3、实验流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制 4、所用豆腐的含水量为70％左右，水分过多则腐乳不易成形。* 5.毛霉的生长条件：将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的控制在15～18℃，并保持一定的温度。
选修1《生物技术实践》知识归纳图解 果酒和果醋的制作 挑选葡萄 冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵注意： ①要先清洗后除枝梗 (避免除去枝梗时引 起葡萄破损，增加被 杂菌污染的机会，同 注意： 注意： ①榨汁机要清洗干净， 并晾干(防杂菌污染) 原理：主要菌种是酵母菌。 酵母菌是异养兼性 厌氧微生物 C6H12O6→C2H5OH＋C02 果酒果醋 注意： ①发酵装置要清洗干净，并用体积分数为70％的酒精消毒 ②发酵瓶装入葡萄汁后留有l/3的空间(目的是先让酵母菌 进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽氧气后再进行酒精发酵；其 次，防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液的溢出) ③如用带盖的瓶子制葡萄酒，每隔12 h左右将瓶盖拧松一次 (注意不是打开瓶盖，防杂菌污染)，之后再将瓶盖拧紧(目 的:排出多余的气体放炸裂) ④装入葡萄汁封闭充气口(无氧环境和放杂菌污染) 3mL/L的H2SO43滴→混匀→ 3mL/L的H2SO43滴→混匀→ 原理：主要菌种是醋酸杆菌(异养需氧型) ①当氧气糖源均充足时，糖→醋酸 注意：需适时通入空气 高考警示： ①由于醋酸菌和乳酸菌属于原 核生物，所以在利用者两类 微生物时，其环境中一定不 11
微生物的实验室培养 （一）培养基的基本知识 1．培养基的营养成分 2．培养基的配制原则 (1)目的明确。要根据微生物的种类、培养目的等选择原料、配制培养基。 (2)营养要协调。各种营养物质要保证适当的浓度和比例。营养物质比例过低，不能满足微生物生长；浓度过高则会抑制微生物的正常生长。营 养物质的浓度比(如C/N)还会直接影响某些微生物的代谢产物，如谷氨酸生产，C/N=4∶1时，菌体大量繁殖，谷氨酸产量少；而 22
人教版高中生物选修一练习题（含答案） 第I卷（选择题） 1．在制果酒、果醋、泡菜、腐乳时,所用微生物的代谢类型分别是 A. 兼性厌氧型、需氧型、厌氧型、需氧型 B. 厌氧型、厌氧型、厌氧型、需氧型 C. 兼性厌氧型、需氧型、需氧型、厌氧型 D. 厌氧型、兼性厌氧型、需氧型、厌氧型 2．下列关于“DNA粗提取与鉴定”的实验，叙述正确的是 A. 酵母、菜花和猪的红细胞均可作为提取DNA的材料 B. DNA易溶于氣化钠溶液，不溶于酒精溶液 C. 向切碎的植物组织中加入适量蒸馏水，可获得含大量DNA的溶液 D. 将提取的丝状物溶解后，加入二苯胺试剂后水浴呈蓝色 3．下列有关生物技术实践应用的叙述，正确的是 A. 固定化酶技术在多步连续催化反应方面优势明显 B. 牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基，可用高压蒸汽灭菌法灭菌 C. 相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉 D. 向鸡血细胞中加入冷却的95%的酒精，可以获得无杂质的DNA 4．下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述中，正确的是 A. 一般含糖量较高的水果可用来制作果酒 B. 果醋发酵包括有氧发酵和无氧发酵 C. 制作腐乳时，应防止毛霉以外的其它微生物生长 D. 都是利用微生物胞内酶催化获得最终产品 5．果胶酶能使果胶水解，使榨取果汁变得更容易，提高水果的出汁率。某同学为探究温度对果胶酶活性的影响，在不同温度下，将等量的果胶酶加入到等量的苹果泥中，在反应同样时间后，再将反应液过滤同样时间，用量筒测出滤出苹果汁的体积。下列能正确反映实验结果的曲线是 6．相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中哪一个（） 【注：图中大圆点代表相对分子质量大的蛋白质】 7．下列有关酵母细胞固定化实验操作目的及结果分析，错误的是（）
生物选修1知识点总结 专题1传统发酵技术的应用 课题1果酒和果醋的制作 【补充知识】发酵 1.概念：利用微生物或其他生物的细胞在有氧或无氧条件下繁殖或积累其代谢产物的过程。 2.类型： (1)根据是否需要氧气分为：需氧发酵和厌氧发酵。 (2)根据产生的产物可分为：酒精发酵、乳酸发酵、醋酸发酵等。 一.基础知识 (一)果酒制作的原理 1.菌种是酵母菌，属于真核生物，新陈代谢类型异养兼性厌氧型，有氧时，进行有氧呼吸， 大量繁殖，反应式为：C 6H 12O 6+6H 2O+6O 2 →6CO 2+12H 2O+能量；无氧时， 能进行酒精发酵，反应式为：C 6H 12O 6→2C 2H 5OH+2CO 2+能量。 酶 酶
2.酵母菌繁殖的最适温度20℃左右，酒精发酵一般控制在18～25℃。 3.自然发酵过程中，起作用的主要是附着于葡萄皮上的野生型酵母菌。也可以在 果汁中加入人工培养的酵母菌。(二)果醋制作的原理 1.菌种是醋酸菌，属于原核生物，新陈代谢类型为异养需氧型。只有在氧气充足时，才能进行旺盛的生命活动。变酸的酒表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖形成的。 2.当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，当缺少糖源时， 醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应简式为C 2H 5OH+O 2→CH 3COOH+H 2O 。 3.醋酸菌的最适合生长温度为30～35℃。 4.菌种来源：到生产食醋的工厂或菌种保藏中心购买，或从食醋中分离醋酸菌。二.实验设计 1.流程图 挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵 ↓↓ 果酒 果醋 2.制作实例 (1)实验材料葡萄、榨汁机、纱布、醋酸菌(或醋曲)、发酵瓶(如右图)、气泵、体积分数为70%的酒精等。 (2)实验步骤 酶
2018届选修1《生物技术实践》真题汇编 1、（2013全国课标卷Ι）回答下列有关泡菜制作的习题： （1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是。 （2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌的中。 （3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、 和等。 （4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是：。 2、（2013全国课标卷Ⅱ）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题： （1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用____ ___法或______ ___法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。 （2）取该单菌落适当稀释，用_____ _法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。 （3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___ ____；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明____ ____；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的____ _。（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。 3、（2013四川卷）由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。 (1)图甲中，过程①需要的酶有_____________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________。 (2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。 (3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。 4、（2014新课标Ⅱ卷）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
人教版高中生物选修一复习试题及答案全套 选修1第1讲 1．(2017年江苏卷)下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是() A．控制发酵温度的主要目的是腐乳调味 B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D．成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生 【答案】B 【解析】本题考查“腐乳的制作”实验的相关问题。在腐乳制作过程中，需要控制温度，以保证毛霉的生长以及密封后相关酶的活性，A错误。加入香辛料和料酒，既有抑制杂菌的作用，又能调节腐乳的风味，B正确。毛霉的主要作用是产生蛋白酶和脂肪酶，以分解豆腐制品中的蛋白质和脂肪，C错误。成品腐乳表面的粘性物质，主要是由毛霉的菌丝形成的，能固定腐乳的形状，D错误。 2．(2017年江苏卷)(多选)如图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关叙述正确的是() A．改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响 B．果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸 C．果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关 D．气体入口与气体出口可以交换使用 【答案】ABC 【解析】由图可知，若通入氧气，可研究有氧呼吸对发酵的影响，若不通入气体或通入氮气可研究无氧呼吸对发酵的影响，A正确；发酵中期装置中的氧气被消耗完，通入氮气，酵母菌无法利用，其呼吸类型由有氧呼吸转为无氧呼吸，B正确；温度通过影响相关酶的活性来影响酵母菌细胞呼吸速率，C正确；气体入口通入液面以下，气体出口需在液面以上，故两者不能交换使用，D错误。 3．(2016年江苏卷)下列关于中学“腐乳的制作”实验，叙述正确的是() A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长 B．加料酒主要是为了灭菌，避免腐乳变质 C．发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌 D．实验室制作的腐乳不宜直接食用 【答案】D 【解析】加盐主要是为了抑制微生物的生长，防止豆腐腐败变质，A错误；加料酒主要是为了使腐乳具有独特的香味，B错误；发酵过程中起主要作用的是毛霉，C错误；实验室制作的腐乳可能灭菌不彻底，
选修1《生物技术实践》 第一部分微生物的利用 实验 1 大肠杆菌的培养和分离 一、大肠杆菌 1．大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌，为兼性厌氧的肠道杆菌。2．用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 二、本实验的内容是将大肠杆菌扩大培养和划线分离。分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。 本实验用LB液体培养基（通用的细菌培养基）扩大培养大肠杆菌，培养后用LB固体平面培 养基进行划线分离。 三、细菌的培养和分离 1．细菌的培养： （ 1 ）繁殖方式：细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20min 分裂一次。 （2）培养的方法：需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中，一般用接种环来转移带菌的培养物。 2．细菌的分离 分离的方法与特点： 划线分离法：操作简单。（接种环） 涂布分离法：操作复杂，单菌落更易分开。（玻璃刮刀） 四、灭菌操作 1．灭菌操作的原因：获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌的入侵污染。 2．无菌操作的条件： （1）各种器皿必须是无菌的。（首要条件） （2）各种培养基必须是无菌的。 “细菌喜荤，霉菌喜素” 细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透 压。在中性偏碱的环境中生长（制备培养基时需调节培养基的酸碱度）。 霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。在中性偏酸的环境中生长（制备培养基时需调节培养基的酸碱度）。
如果培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm2压力(90 C以上)灭菌30min. 3．灭菌的方法：是指杀灭病原微生物的方法。 ( 1)灼烧灭菌 (2)干热灭菌：160-170 C下加热1-2h。 (3)高压蒸气灭菌：100kPa、121 C (1kg/cm 2)下维持15min. (4)过滤灭菌：G6玻璃砂漏斗过滤(用于有些不能加热灭菌的化合物，如尿素加热会分解) 4．消毒的方法：是指杀灭或清除环境中一切微生物(包括芽胞、孢子)的方法 (1)煮沸消毒法：100 C煮沸5-6min (2)巴氏消毒法：70-75 C下煮30min或80 C 下煮15min (3)化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒; 氯气消毒水源 ( 4) 紫外线消毒 五、大肠杆菌的培养和分离实验 1 ．实验步骤： (1)培养基灭菌：将50mlLB液体培养基、50mlLB固体培养基加上封口膜和培养皿用牛皮纸包好 进行高压蒸汽灭菌。(封口膜的作用是既通气又不使菌进入) (2)倒平板：将有培养基的三角瓶和培养皿放到超净台上，打开紫外灯和过滤风 (3)接种：接种环接种，在37C振荡培养12h ( 4)划线分离：在酒精灯火焰上灼烧接种环，接种环只在菌液中蘸菌液一次，然后在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿，将培养皿倒置，放在37 C恒温培养箱中培养 12-24h ，可看到在划线的末端出现不连续的单个菌落。 (5)菌种保存：用接种环取出单菌落，用划线法接种在斜面上，37 C培养24h后，置于4 C冰箱 中保存
重点高中生物选修一测试题
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高二生物第二学期月考试卷1 一、单项选择题：本大题共25小题，每小题2分，共50分。每小题给出的四个选项中， 只有一个选项最符合题目要求，请将你的答案填在后面选择题答题区内。 1.下列关于果酒制作过程的叙述，正确的是 A、先除去葡萄的枝梗，再反复冲洗以便除去杂菌 B、发酵装置温度控制在20℃左右，装置最好要安装出气口 C、发酵过程中，应从充气口不断通入新鲜的空气 D、酵母菌繁殖能力很强，短时间内就可形成优势菌种，所以不需对所用装置进行消毒 2.下列关于发酵产物检验的说法，错误的是 A、果汁发酵是否产生酒精可以用重铬酸钾来检验 B、检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝 C、泡菜制作产生的亚硝酸盐可以用对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺盐酸盐检验 D、发酵产生乳酸的量可以用比色法测量 3.下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是 A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下 B.过程①和都③只发生在酵母细胞的线粒体中 C.过程③和④都需要氧气的参与 D.过程①～④所需的最适温度基本相同 4.利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇。使用燃料乙醇减少 了对石油资源的依赖．下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的一项是 A．要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样 B．图中②过程常用的微生物B是酵母菌 C．微生物A和微生物B可利用的碳源相同 D．微生物A的新陈代谢类型是异养需氧型 5.将酵母菌研磨、离心分离后，得到上清液（含细胞质基质）和沉淀物（含细胞器）。把 等量的上清液、沉淀物和未经离心的匀浆分别放入甲、乙、丙3支试管中，然后向3支试管分别滴加等量的葡萄糖溶液，则乙试管的最终产物是 A.葡萄糖 B.CO2、H2O C.C2H5OH、CO2 D.C3H4O3 6.酵母菌无氧呼吸产生A摩尔CO2，人在正常情况下消耗同样量的葡萄糖，可形成CO2 A.2A摩尔 B.1/12A摩尔 C.6A摩尔 D.3A摩尔 7.下图中分别表示在发酵罐中培养酵母菌时各环境因素对酵母菌繁殖速率的影响，其中不 正确的是
专题1传统发酵技术的应用 本专题围绕传统发酵食品的制作展开，主要操作技术归纳如下。 1.果酒与果醋的制作技术。 2.腐乳的制作技术。 3.泡菜的腌制与亚硝酸盐含量的测定。 课题1果酒和果醋的制作 一、基础知识 （一）果酒制作的原理 知识要点：1.酵母菌的兼性厌氧生活方式；2.发酵需要的适宜条件；3.传统发酵技术所使用的酵母菌的来源。 （二）果醋制作的原理 知识要点：1.酒变醋的原理；2.控制发酵条件的作用；3.制醋所利用的醋酸菌的来源。 二、课题成果评价 （一）果酒的制作是否成功 发酵后取样，通过嗅味和品尝进行初步鉴定。此外，还可用显微镜观察酵母菌，并用重铬酸钾检验酒精的存在。如果实验结果不理想，请学生分析失败原因，然后重新制作。 （二）果醋的制作是否成功 首先通过观察菌膜的形成、嗅味和品尝进行初步鉴定，再通过检测和比较醋酸发酵前后的pH作进一步的鉴定。此外，还可以通过在显微镜下观察发酵液中是否有醋酸菌，并统计其数量作进一步鉴定。 三、答案和提示 （一）旁栏思考题 1.你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？ 答：应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。
2.你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？ 提示：需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。例如，榨汁机、发酵装置要清洗干净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。 3.制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～25℃？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～35℃？ 答：温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20℃左右最适合酵母菌繁殖。因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～35℃，因此要将温度控制在30～35℃。 4.制葡萄醋时，为什么要适时通过充气口充气？ 答：醋酸菌是好氧菌，在将酒精变为醋酸时需要氧的参与，因此要适时向发酵液中充气。 （二）［资料］发酵装置的设计讨论题 请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？结合果酒、果醋的制作原理，你认为应该如何使用这个发酵装置？ 答：充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出CO2的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是防止空气中微生物的污染，其作用类似巴斯德的鹅颈瓶。使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应将充气口连接气泵，输入氧气。 （三）练习 2.提示：大规模生产时需要进行更为全面周详的考虑，如原料的来源与选择、菌种的培育与选择、发酵的设备、发酵条件的自动化控制，以及如何严格控制杂菌污染；等等。此外，无论是葡萄酒或葡萄醋，实验时所检测的发酵液，并非商品意义上的产品。在实际生产中还需沉淀过滤、灭菌装瓶等获得成品酒或醋。葡萄酒还需在一定设施和条件下（如橡木桶和地窖）进行后续发酵，以获得特定的风味和色泽。 3.提示：需考虑厂房、设备投资、原材料采购、工人人数及工资、产品种类、生产周期、销售渠道、利润等问题。 课题2腐乳的制作 一、基础知识 知识要点：相关的微生物，如毛霉等在腐乳制作中的作用。
选修1生物技术实践知识点整理
选修1《生物技术实践》 第一部分微生物的利用 实验1大肠杆菌的培养和分离 一、大肠杆菌 1．大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌，为兼性厌氧的肠道杆菌。 2．用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 二、本实验的内容是将大肠杆菌扩大培养和划线分离。分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。 本实验用LB液体培养基（通用的细菌培养基）扩大培养大肠杆菌，培养后用LB固体平面培养基进行划线分离。 三、细菌的培养和分离 1．细菌的培养： （1）繁殖方式：细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20min分裂一次。（2）培养的方法：需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中，一般用接种环来转移带菌的培养物。 2．细菌的分离 分离的方法与特点： 划线分离法：操作简单。（接种环） 涂布分离法：操作复杂，单菌落更易分开。（玻璃刮刀） 四、灭菌操作 1．灭菌操作的原因：获得纯净的培养物的关键是防止外来杂菌的入侵污染。 2．无菌操作的条件：
（1）各种器皿必须是无菌的。（首要条件） （2）各种培养基必须是无菌的。 “细菌喜荤，霉菌喜素” 细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压。在中性偏碱的环境中生长（制备培养基时需调节培养基的酸碱度）。 霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。在中性偏酸的环境中生长（制备培养基时需调节培养基的酸碱度）。 如果培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm2压力（90 ℃以上）灭菌30min. 3．灭菌的方法：是指杀灭病原微生物的方法。 （1）灼烧灭菌 （2）干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 （3）高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃(1kg/cm2)下维持15min. （4）过滤灭菌：G6玻璃砂漏斗过滤（用于有些不能加热灭菌的化合物，如尿素加热会分解） 4．消毒的方法：是指杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽胞、孢子）的方法（1）煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min （2）巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃下煮15min （3）化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源（4）紫外线消毒 五、大肠杆菌的培养和分离实验
2015--2016学年度第二学期树人高级中学5月考 高二年级生物试卷 命题人：赵建华 一、单项选择题：本题共30题，每小题2分，共60分。在题目所给的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1、酵母菌、乳酸菌和醋酸菌异化作用的类型依次是( ) ①需氧型②厌氧型③兼性厌氧型 A．①②①B．③②①C．③②②D．②②③ 2．变酸的酒表面长的一层膜和泡菜坛内长的一层白膜分别是由哪种菌的繁殖造成的（）· A．醋酸菌、酵母菌B．酵母菌、毛霉 C．醋酸菌、乳酸菌D．酵母菌、醋酸菌 3．制作四川泡菜时要用特殊的坛子，坛子需加水密封，密封坛口的目的是（）A．隔绝空气，抑制细菌繁殖B．阻止尘埃，防止污染 C．造成缺氧环境，利于乳酸菌发酵D．防止污染，利于醋酸菌发酵 4．下列关于腐乳制作过程相关的操作，错误的是（） A．在腐乳制作过程中要有能产生蛋白酶的微生物参与 B．豆腐块装瓶时，为了避免影响口味，逐层加盐量应大致相等 C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长 | D．装瓶时，要将瓶口通过酒精灯火焰，迅速用胶条密封保存 5．下列关于发酵产物检验的说法，错误的是（） A．果汁发酵是否产生酒精可以用重铬酸钾来检验 B．检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝 C．泡菜制作产生的亚硝酸盐可以用对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺盐酸盐检验 D．发酵产生乳酸的量可以用比色法测量 6．豆腐上长出了毛霉之后，下一步要加盐腌制，其中不属于加盐作用的是（）A．调味B．可使豆腐析出水分，使豆腐块变硬 C．促进毛霉的继续生长D．抑制微生物的生长，避免豆腐变质
（ 7．在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是（） A．让发酵装置接受光照B．给发酵装置适时排气 C．向发酵装置通入空气D．将发酵装置放在45℃处 8．下列哪种条件下，醋酸菌将葡萄汁中的糖分分解成醋酸（） A．氧气、糖源充足B．氧气充足、缺少糖源C．缺少氧气、糖源充足D．氧气、糖源都缺少 9．.为保证加酶洗衣粉的洗涤效果，应注意( ) A.使用沸水先冲泡洗衣粉 B.用含氯较高的自来水 、 C.和其他洗涤剂混合使用 D.室温时用软水先溶解洗衣粉 10．在适宜的温度条件下，如图所示装置中都放入干酵母(内有活酵母菌)，其中适于产生酒精的装置是( ) 11．我们平时饮用的葡萄酒呈红色，其原因是（） @ A．酒精发酵前榨汁时榨出的红色葡萄皮中的色素B．在发酵的最后程序中，加入了红色的食用色素 C．是红色葡萄球菌分泌的色素D．随着酒精度数的提高，红色葡萄皮中的色素溶解在发酵液中 12下列关于果酒制作过程中的叙述，正确的是（） A．应先除去葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得彻底 B．使发酵装置的温度维持在20℃左右最好 C．在发酵过程中，需从充气口不断通入空气 D．由于酵母菌的繁殖能力很强，不需对所用装置进行消毒处理 13．下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是（） { A．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡 B．温度对酵母菌酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌的发酵影响不大 C．在变酸的果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的 D．制作果酒和果醋时都应用70%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作
专题二微生物的培养与应用 课题一微生物的实验室培养 ·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 ·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。 ·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。 ·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。 ·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。 ·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。
·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 ·培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件 ·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 ·消毒与灭菌的区别 消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。
高中生物选修一《生物技术实践》历年高考试题选 一、全国卷 1．（2017?新课标Ⅰ卷.37）（15分） 某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题：（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生________________________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是________________________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是________________________（答出两点即可）。（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择____________________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是________________________。 （3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2 HPO4，其作用有________________________（答出两点即可）。 【答案】（1）脲酶分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞生物生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 （2）尿素其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用 （3）为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定2．（2017?新课标Ⅱ卷.37）（15分）
豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题： （1）该实验的自变量是____________________、__________________________。（2）如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌是______________________。 （3）如果在实验后，发现32 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是__________________________。 （4）从大豆到豆豉，大豆中的成分会发生一定的变化，其中，蛋白质转变为__________________________，脂肪转变为__________________________。【答案】（1）菌种发酵时间（2）好氧菌 （3）延长发酵时间，观测发酵效果，最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间 （4）氨基酸和肽脂肪酸和甘油 3．（2017?新课标Ⅲ卷.37）（15分） 绿色植物甲含有物质W，该物质为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。其提取流程为：植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收
选修一生物技术实践知识点总结 专题一传统发酵技术的应用 课题一果酒和果醋的制作 (一)基本原理 1酵母菌是异养兼性厌氧菌型真菌，20℃左右最适宜酵母菌繁殖，所以酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃ 2、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。 C6H12O6＋6O2＋6H2O→6CO2＋12H2O+能量 在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2+能量 3、醋酸菌是异养需氧型细菌,醋酸菌最适生长温度为32℃，所以醋酸发酵时一般将温度控制在30℃-35℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。 4、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸； C6H12O6＋2O2→2CH3COOH＋2CO2＋2H2O 当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O （二）、实验流程： 挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋） （三）、实验装置： 1、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精 发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一 个长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污 染。开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用该装置制酒时， 应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。 2、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。 在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液2ML，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色 疑难解答： （1）你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？ 应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。 （2）你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？ 如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。 （3）制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～25℃？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在
生物选修1 生物技术实践 模块考试试卷 第Ⅰ卷 选择题 (共70分) 一、单选题（2分×20=40分）。 1. 现有一瓶混有酵母菌和葡萄糖的培养液,通入不 同浓度的氧气时,其产生的酒精和CO 2的量如图所示 (两种呼吸作用速率相等),问:在氧浓度为a 时（） §1 A.酵母菌只进行厌氧发酵 B.67%的酵母菌进行厌氧发酵 C.33%的酵母菌进行厌氧发酵 D.酵母菌停止厌氧发酵 2. 豆腐发酵过程中，毛霉消耗的能量主要来自于哪种物质的分解（） §2 A ．脂肪 B ．磷脂 C ．葡萄糖 D ．蛋白质 3. 泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜主要是由 的繁殖造成的…( ) §3 A ．酶母菌 B ．毛霉菌 C ．乳酸菌 D ．醋酸杆菌 4．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是（ ）§1 A.对比观察培养基有没有被微生物利用 B.对比分析培养基上是否生有杂菌 C.没必要放入未接种的培养基 D.为了下次接种时再使用 5．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是：（ ）§2 A 、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B 、以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C 、以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D 、以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 6. 要从土壤中将分解纤维素的细菌分离出来，应该将它们接种在§3 A 、加入指示剂的鉴别培养基上 B 、 含有蛋白胨的固体培养基上 C 、只有纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上 D 、 含四大营养要素的培养基上 7. 人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体，包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜的条件下能够发芽出苗的颗粒体。下列与人工种子形成过程无关的是（ ）3§1 A ．细胞的脱分化和再分化 B ．细胞的全能性 C ．细胞的有丝分裂 D ．细胞的减数分裂 8. 不能作为组织培养、细胞培养或克隆的生物材料是（ ）3§1 A ．花粉 B ．幼叶 C ．卵细胞 D ．人血中的成熟红细胞 9. 下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是（ ）§1 A ．融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜 B ．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C ．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 D ．植物体的任何一个体细胞经离体培养都能表现出全能性 10. 以下四组是影响酶活性的主要因素，正确的是4§1 A ．底物浓度、酸碱度、温度 B ．光照、酸碱度、温度 C ．底物浓度、压力、酸碱度 D ．温度、压力、酸碱度 11. 下列说法正确的是（） 4§2 A ．加酶洗衣粉就是将酶直接加到洗衣粉中 B ．目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶；脂肪酶；淀粉酶；蔗糖酶 C ．温度、酸碱度和表面活性剂都会影响酶的活性 D ．普通洗衣粉只是缺少酶，不会污染环境。 12. 下列关于固定化酶的说法不正确的是（）4§3 6 氧浓度% 二氧化碳 酒精 相 对 数量mol
一、拓展 1 在利用葡萄自然发酵产生果酒的过程中，未经杀菌，但其他杂菌不能生长的原因是（ C ） A.经冲洗后的葡萄上只有野生型酵母菌无其他杂菌 B.其他杂菌不能利用葡萄汁中的糖作碳源 C.在缺氧和呈酸性的发酵液中，酵母菌能大量繁殖，其他杂菌不适应环境而被抑制 D.酵母菌发酵产生大量酒精，杀死了其他杂菌 2 果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是（ D ） A. 葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵 B. 在葡萄酒发酵过程中，每隔12h左右打开瓶盖一次，放出CO2 C. 果酒发酵过程中温度控制在30℃，果醋发酵过程中温度控制在20℃ D. 在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢 3 下列关于果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作的叙述,正确的是( D ) A.发酵容器必须经过严格的消毒处理,常用体积分数为70%的盐酸进行消毒 B.制作果酒、果醋或腐乳时,所需适宜温度都是相同的 C.泡菜制作过程中,加入食盐的量要严格控制,而腐乳制作过程中加入食盐的量越多越好 D.果醋和腐乳的制作都需要氧气,二者所利用微生物的细胞结构不同 4 在果醋制作过程中，下列哪项操作会引起发酵液受污染（C） A. 榨汁机用沸水进行清洗并晾干 B. 发酵瓶用温水清洗，再用70%的酒精擦拭并晾干 C. 葡萄先去除枝梗，再冲洗多次 D. 每次排气时，只需拧松瓶盖，不能将盖完全揭开 5 泡菜是人们日常生活中比较喜欢食用的一种食品，但是泡菜中却含有亚硝酸盐。某研究性学习小组的同学为了探究泡菜在发酵过程中不同食盐浓度和发酵时间对亚硝酸盐含量变化的影响，设计了相关实验进行研究。请回答： （1）制作泡菜的原理是：。 （2）现有红萝卜和白萝卜，你认为更适合用作实验材料的是， 原因是。 （3）如图是该活动小组记录的三种食盐浓度的泡菜中的亚硝酸盐 含量与发酵天数的关系图。根据此实验结果，你认为比较适合制作 泡菜的食盐浓度为；原因是。 答案：（1）泡菜是利用乳酸菌在无氧条件下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸；（2）白萝卜比红萝卜更适合用作实验材料，因为红萝卜中含有色素，容易干扰显色反应；（3）从图中可看出，5%的实验浓度适合做泡菜，因为实验浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量降低最快。 6 蓝莓果实中富含花青素等营养成分,具有保护视力、防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管、增强机体免疫等功能。下面是获取蓝莓花青素、蓝莓酒和蓝莓醋的流程图。结合所学知识,回答下列问题: （1）酿制蓝莓酒时一般要先通气,目的是__ __ 。 通常不需要对蓝莓进行严格的消毒处理,是因为在缺氧、 呈酸性的发酵液中__ __ 。醋酸菌将乙醇变为醋 酸的环境条件是糖源____ (填“充足”或“缺少”)。酿制成功 的蓝莓果酒如果暴露在空气中会逐渐出现醋酸味,气温高 的夏天更易如此,其原因是__ __ 。 （2）若蓝莓果汁中已含有醋酸菌,在蓝莓果酒发酵旺盛时,醋酸菌__ __ (填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为