名词解释
蛋白质的一级结构、蛋白质的二级结构、模体、解链温度（Tm），DNA变性、酶、酶的活性中心、同工酶、Km值、变构调节、糖酵解、有氧氧化、糖异生，必需脂肪酸、脂肪动员、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（HSL）、酮体、呼吸链、氧化磷酸化、底物水平磷酸化、P/O 比值、必需氨基酸、一碳单位、联合脱氨基作用、基因、DNA的半保留复制、中心法则、冈崎片段、、突变、转录、外显子、内含子、启动子、核酶、翻译、遗传密码、密码的摆动性、、框移突变、基因表达、操纵子、启动子、增强子、顺式作用元件、反式作用因子、限制性核酸内切酶、载体、质粒、cDNA、PCR、受体、第二信使、G蛋白、蛋白激酶
答案：
蛋白质的一级结构,蛋白质的一级结构(primary structure)就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序(sequence),也是蛋白质最基本的结构.它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的.各种氨基酸按遗传密码的顺序,通过肽键连接起来,成为多肽链,故肽键是蛋白质结构中的主键.
蛋白质的二级结构,指蛋白质多肽链本身的折叠和盘绕的方式.二级结构主要有α-螺旋,β-折叠,β-转角.常见的二级结构有α-螺旋和β-折叠.二级结构是通过骨架上的羰基和酰胺基团之间形成的氢键维持的,氢键是稳定二级结构的主要作用力.
模体,属于蛋白质的超二级结构,由2个或2个以上具有二级结构的的肽段,在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象,并发挥专一的功能.一种类型的模体总有其特征性的氨基酸序列.
解链温度(Tm),DNA的解链温度(Tm)是引物的一个重要参数,它是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度,一种DNA分子的Tm值大小与其所含碱基中的G+C比例相关,G+C比例越高,Tm值越高.
DNA变性,加热或用碱处理双链DNA,使氢链断裂,结果DNA变成为单链,此称为DNA的变性.所谓的变性温度是指当DNA双链有一半解开时的温度,用T m表示变性温度.由于鸟嘌呤和胞嘧啶含量高的DNA是3个氢键,所以鸟嘌呤和胞嘧啶丰富的DNA其变性温度也较高.变性的结果DNA的紫外线吸收增加,比旋光度和粘度降低,密度也增加.这种效应叫做增色效应.如果在加热后慢慢冷却,则DNA可以再次恢复成双螺旋结构.此过程称为退火.
酶,是一种具有生物活性的蛋白质,有单纯酶和结合酶两种.单纯酶只含蛋白质,不含其它物质,其催化活性仅由蛋白质的结构决定.结合酶则由单纯蛋白质和辅基组成,辅基是结合酶催化活性中不可缺少的部分.
酶的活性中心，酶分子中直接与底物结合,并和酶催化作用直接有关的区域叫酶的活性中心(active center)或活性部位(active site).
同工酶,广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶.按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会(CBN)的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶.
Km值,一般由一个数乘以测量单位所表示的特定量的大小. 对于不能由一个
数乘以测量单位所表示的量,可参照约定参考标尺,或参照测量程序,或两者都参照的方式表示.
变构调节,变构调节就是指小分子化合物与酶蛋白分子活性中心以外的某一部
位特异结合,引起酶蛋白分子构像变化,从而改变酶的活性.
糖酵解,是指细胞在细胞质中分解葡萄糖生成丙酮酸的过程,此过程中伴有少量ATP的生成.这一过程是在细胞质中进行,不需要氧气,每一反应步骤基本都由特异的酶催化.在缺氧条件下丙酮酸被还原为乳酸,有氧条件下丙酮酸可进一步氧化分解生成乙酰CoA进入三羧酸循环,生成CO2和H2O.糖酵解总共包括10个连续步骤,均由对应的酶催化.
有氧氧化,系指糖,脂肪,蛋白质在氧的参与下分解为二氧化碳和水,同时释放大量能量,供二磷酸腺苷再合成三磷酸腺苷.
糖异生,糖异生(Gluconeogenesis gluco-指糖, neogenesis是希腊语νεογννηση, neojénnissi - 重新生成):由简单的非糖前体(乳酸,甘油,生糖氨基酸等)转变为糖(葡萄糖或糖原)的过程.糖异生不是糖酵解的简单逆转.虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七步进似平衡反应的逆反应,但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应,绕过酵解过程中不可逆的三个反应.糖异生保证了机体的血糖水平处于正常水平.糖异生的主要器官是肝.肾在正常情况下糖异生能力只有肝的十分之一,但长期饥饿时肾糖异生能力可大为增强必需脂肪酸,通常将具有两个或两个以上双键的脂肪酸称为高度不饱和或多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,缩写PUFA).凡是体内不能合成,必须由饲粮供给,或能通过体内特定先体物形成,对机体正常机能和健康具有重要保护作用的脂肪酸称为必需脂肪酸(essential fatty acids,缩写EFA).因为人体可以合成最多一个不饱和键的脂肪酸,故必须脂肪酸含两个或多个不饱和键. 必需脂肪酸共有三种,亚油酸,亚麻酸和花生四烯酸.但是只要亚油酸供给充足,人体也可以利用亚油酸合成亚麻酸和花生四烯酸.
脂肪动员,在病理或饥饿条件下,储存在脂肪细胞中的脂肪,被脂肪酶逐步水解为游离脂酸(FFA)及甘油并释放入血以供其他组织氧化利用,该过程称为脂肪动员 .在脂肪动员中,脂肪细胞内激素敏感性甘油三酯脂肪酶(HSL)起决定作用,它是脂肪分解的限速酶.
激素敏感性甘油三酯脂肪酶(HSL),
酮体,酮体(ketone body):在肝脏中,脂肪酸氧化分解的中间产物乙酰乙酸,β-羟基丁酸及丙酮,三者统称为酮体.肝脏具有较强的合成酮体的酶系,但却缺乏利用酮体的酶系.
酮体是脂肪分解的产物,而不是高血糖的产物.进食糖类物质也不会导致酮体增多
呼吸链,呼吸链又称电子传递链,是由一系列电子载体构成的,从NADH或FADH2向氧传递电子的系统.
氧化磷酸化,氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)是指在生物氧化中伴随着ATP生成的作用.有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型.即ATP生成方式有两种.一种是代谢物脱氢后,分子内部能量重新分布,使无机磷酸酯化先形成一个高能中间代谢物,促使ADP变成ATP.这称为底物水平磷酸化.如3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,再降解为3-磷酸甘油酸.另一种是在呼吸链电子传递过程中偶联ATP的生成.生物体内95%的ATP来自这种方式. 底物水平磷酸化,底物水平磷酸化(substrate level phosphorlation):物质在生物氧化过程中,常生成一些含有高能键的化合物,而这些化合物可直接偶联ATP
或GTP的合成,这种产生ATP等高能分子的方式称为底物水平磷酸化
P/O比值,指物质氧化时,每消耗1mol氧原子所消耗无机磷的摩尔数(或ATP摩尔数),即生成ATP的摩尔数
必需氨基酸,必需氨基酸(essential amino acid):人体(或其它脊椎动物)必不可少,而机体内又不能合成的,必须从食物中补充的氨基酸,称必需氨基酸.
对成人来说,这类氨基酸有8种,包括赖氨酸,蛋氨酸,亮氨酸,异亮氨酸,苏氨酸,缬氨酸,色氨酸和苯丙氨酸.对婴儿来说,组氨酸和精氨酸也是必需氨基酸.
一碳单位,指某些氨基酸分解代谢过程中产生含有一个碳原子的基团,包括甲基,亚甲基,甲烯基,甲炔基,甲酚基及亚氨甲基等.
一碳单位具有一下两个特点:1.不能在生物体内以游离形式存在;2.必须以四氢
叶酸为载体.
联合脱氨基作用,转氨基作用和氧化脱氨基作用配合进行的叫做联合脱氨基作用.由转氨酶和L-谷氨酸脱氢酶联合催化.
基因,基因(遗传因子)是遗传的物质基础,是DNA(脱氧核糖核酸)分子上具有
遗传信息的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段.基因通过
复制把遗传信息传递给下一代,使后代出现与亲代相似的性状.人类大约有几万
个基因,储存着生命孕育生长,凋亡过程的全部信息,通过复制,表达,修复,完成
生命繁衍,细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程.基因是生命的密码,记录和传递着遗传信息.生物体的生,长,病,老,死等一切生命现象都与基因有关.它同时
也决定着人体健康的内在因素,与人类的健康密切相关.
DNA的半保留复制,Watson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时即推测,DNA 在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开,然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链,这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种复制方式为半保留复制(semiconservative replication). 中心法则,是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗
传信息的转录和翻译的过程.也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程.
这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则.在某些病毒中的RNA自我复制(如烟
草花叶病毒等)和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程(某些致癌病毒)是对中心法则的补充.RNA的自我复制和逆转录过程,在病毒单独存在时是不
能进行的,只有寄生到寄主细胞中后才发生.逆转录酶在基因工程中是一种很重
要的酶,它能以已知的mRNA为模板合成目的基因.在基因工程中是获得目的基因的重要手段.
冈崎片段, DNA复制过程中,两条新生链都只能从5'端向3'端延伸,前导链连
续合成,滞后链分段合成.这些分段合成的新生DNA片段称冈崎片段
突变,从达尔文的自然选择学说可以看出,生物在繁衍后代的过程中,会产生各种各样的可遗传的变异,这些可遗传的变异为生物进化提供了原材料.现代遗传
学的研究表明,可遗传的变异来源于基因突变,基因变异和染色体变异.其中,基
因突变和染色体变异常称为突变.
转录,转录(Transcription)是蛋白质生物合成的第一步,也是tRNA和rRNA的合成步骤.转录 (transcription)是以DNA中的一条单链为模板,游离碱基为原料,在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程.与DNA的复制相比,有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点.转录中,一个基因会被读取被复制为
mRNA,就是说一特定的DNA片断作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂的合成前体mRNA.在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段.转录可产生DNA复制的引物.在反转录病毒感染中也起到重要作用.转录仅以DNA的一条链作为模板.DNA上的转录区域称为转录单位
外显子,外显子(英语expressed region) 是真核生物基因的一部分,它在剪接 (Splicing)后仍会被保存下来,并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质.
内含子,内含子是基因内的间隔序列,不出现在成熟的RNA分子中,在转录后通过加工被切除.大多数真核生物的基因都有内含子.
启动子,RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.
核酶,核酶一词用于描述具有催化活性的RNA, 即化学本质是核糖核酸(RNA), 却具有酶的催化功能.核酶的作用底物可以是不同的分子, 有些作用底物就是同一RNA分子中的某些部位.核酶的功能很多,有的能够切割RNA, 有的能够切割DNA, 有些还具有RNA 连接酶,磷酸酶等活性.与蛋白质酶相比,核酶的催化效率较低,是一种较为原始的催化酶.
翻译,
遗传密码,遗传密码,又称密码子,遗传密码子,三联体密码.指信使RNA(mRNA)分子上从5'端到3'端方向,由起始密码子AUG开始,每三个核苷酸组成的三联体.它决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始,终止信号.
密码的摆动性,1966年,Crick(克里克爵士)根据立体化学原理提出摆动学说(webblehypothesis),解释了反密码子中某些稀有成分(如I)的配对.
摆动学说认为,在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自由度,可以"摆动",因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子
框移突变,DNA损伤可以分为四种类型:错配,缺失,插入和重排.缺失指的是DNA链上一个或一段核苷酸的消失,插入指的是原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA分子中间.在为蛋白质编码的序列中如果缺失或插入核苷酸,则发生读框移动,使其后译读的氨基酸序列全部混乱,这种现象称框移突变.
基因表达,基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA 顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子.生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的.
操纵子,指包含结构基因,操纵基因以及调节基因的一些相邻基因组成的DNA 片段,其中结构基因的表达受到操纵基因的调控
启动子,启动子是基因(gene)的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.启动子(Promoters)就像"开关",决定基因的活动.既然基因是成序列的核苷酸(nucleotides),那么启动子也应由核苷酸组成.启动子本身并不控制基因活动,而是通过与称为转录(transcription)因子的这种蛋白质(proteins)结合而控制基因活动的.转录因子就像一面"旗子",指挥着酶(enzymes)(RNA聚合酶polymerases) 的活动.这种酶指导着RNA复制.基因的启动子部分发生改变(突变),则会导致基因表达的调节障碍.这种变化常见于恶性肿瘤.
增强子,增强子(enhancer)指增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列.增强
子是通过启动子来增加转录的.有效的增强子可以位于基因的5'端,也可位于基因的3'端,有的还可位于基因的内含子中.增强子的效应很明显,一般能使基因转录频率增加10～200倍,有的甚至可以高达上千倍.例如,人珠蛋白基因的表达水平在巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)增强子作用下可提高600～1 000倍.增强子的作用同增强子的取向(5'一3'或3'一5')无关,甚至远离靶基因达几千kb也仍有增强作用.
顺式作用元件,顺式作用元件在分子遗传学领域,相对同一染色体或DNA分子而言为"顺式"(cis);对不同染色体或DNA分子而言为"反式"(trans
反式作用因子,是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质.
限制性核酸内切酶,一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶.Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解.
载体,在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子.三种最常用的载体是细菌质粒,噬菌体和动植物病毒质粒,质粒是细菌染色体外的遗传物质,为环形闭合的双股DNA,存在于细胞质中,质粒编码非细菌生命所必须的某些生物学性状,如性菌毛,细菌素,毒素和耐药性等.质粒具有可自主复制,传给子代,也可丢失及在细菌之间转移等特性,与细菌的遗传变异有关.
cDNA,为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementary DNA 之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链.与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA 聚合酶(反转录酶)的作用而合成,并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA 聚合酶的作用合成双链cDNA.真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程方面广为应用.在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来基因的DNA(基因组DNA,genomic DNA)不同而无内含子;相反地对应于在原来基因中没有的而在mRNA 存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上,与exon序列,先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构.cDNA同样可以被克隆.
PCR,是一种体外快速扩增DNA的方法,用于放大特定的DNA片段,数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个拷贝的分子生物学技术.一个反应常有25~35个循环,一个循环包含3个步骤,首先使模板DNA双链在94~95℃变性为单链,然后在较低温度下,使引物与模板结合,接着在引物的引导及Taq酶的作用下,于72℃合成模板DNA互补链.可看作生物体外的特殊DNA复制.
受体,受体在药理学上是指糖蛋白或脂蛋白构成的生物大分子,存在于细胞膜,胞浆或细胞核内.不同的受体有特异的结构和构型.
第二信使,第二信使学说是E.W.萨瑟兰于1965年首先提出.他认为人体内各种含氮激素(蛋白质,多肽和氨基酸衍生物)都是通过细胞内的环磷酸腺苷(cAMP)而发挥作用的.首次把cAMP叫做第二信使,激素等为第一信使.已知的第二信使种类很少,但却能转递多种细胞外的不同信息,调节大量不同的生理生化过程,这说明细胞内的信号通路具有明显的通用性
G蛋白,在细胞内信号传导途径中起着重要作用的GTP结合蛋白,由α,β,γ三
个不同亚基组成.激素与激素受体结合诱导GTP跟G蛋白结合的GDP进行交换结果激活位于信号传导途径中下游的腺苷酸环化酶.G蛋白将细胞外的第一信使肾上腺素等激素和细胞内的腺苷酸环化酶催化的腺苷酸环化生成的第二信使cAMP 联系起来.G蛋白具有内源GTP酶活性.
蛋白激酶，一类催化蛋白质磷酸化反应的酶.
到目前为止,已发现的蛋白激酶约有300种左右,分子内都存在一个同源的由约270氨基酸残基构成的催化结构区.在细胞信号传导,细胞周期调控等系统中,蛋白激酶形成了纵横交错的网络.这类酶催化从ATP转移出磷酸并共价结合到特定蛋白质分子中某些丝氨酸,苏氨酸或酪氨酸残基的羟基上,从而改变蛋白质,酶的构象和活性.
试题一
一、选择（20×2=40分）
1.正常成人每天的尿量为（C ）
A 500ml
B 1000 ml
C 1500 ml D2000 ml
2：下列哪种氨基酸属于亚氨基酸（B ）
A 丝氨酸B脯氨酸C 亮氨酸D 组氨酸
3：维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是（C ）
A 盐键B疏水键C 氢键D 二硫键
4处于等电点状态的蛋白质（C ）
A分子不带电荷B 分子最不稳定，易变C 总电荷为零D 溶解度最大
5.试选出血浆脂蛋白密度由低到高的正确顺序（B ）
A.LDL 、VLDA、CM
B.CM、VLDL、LDL、HDL
C. CM、VLDL、LDL、IDL
D. VLDL、LDL、CM、HDL
6.一碳单位不包括（C ）
A．—CH3 B. —CH2— C. CO2 D.—CH=NH
7.不出现蛋白质中的氨基酸是（B ）
A. 半胱氨基酸
B. 瓜氨酸
C. 精氨酸
D. 赖氨酸
8.维系蛋白质一级结构的最主要的化学键是（C ）
A.离子键
B.二硫键
C.肽键
D.氢键
9、关于α—螺旋的概念下列哪项是错误的（D ）
A. 一般为右手螺旋
B. 3.6个氨基酸为一螺旋
C.主要以氢键维系
D.主要二硫键维系
10.结合酶在下列哪种情况下才有活性( D )
A.酶蛋白单独存在
B.辅酶单独存在
C.酶基单独存在
D.全酶形式存在
E.有激动剂存在
11.关于Km值的意义，不正确的是( C )
A.Km是酶的特性常数
B.Km值与酶的结构有关
C.Km等于反应为最大速度一半时的酶的浓度
D.Km值等于反应速度为最大度一半时的底物浓度
12.维生素B2是下列哪种辅基或辅酶的组成成分（D ）
A .NAD???+ B.NADPH C.磷酸吡哆醛 D. FAD
13、1 mol乙酰CoA彻底氧化生成多少mol ATP（B ）
A. 11
B.1 2
C.13
D.14
14、合成DNA的原料是( A )
A、dATP、dGTP、dCTP、dTTP
B、ATP、dGTP、CTP、TTP
C、ATP、UTP、CTP、TTP
D、dATP、dUTP、dCTP、dTTP
15、合成RNA的原料是( A )
A、ATP、GTP、UTP、CTP
B、dATP、dGTP、dUTP、dCTP
C、ATP、GTP、UTP、TTP
D、dATP、dGTP、dUTP、dTTP
16、嘌呤核苷酸分解的最终产物是( C )
A、尿素
B、酮体
C、尿酸
D、乳酸
17、糖的有氧氧化终产物是( C )
A、乳酸
B、尿素
C、二氧化碳和水 2O
D、酮体
18、酶原指的是( A )
A、没有活性的酶的前身
B、具有催化作用的酶
C、温度高时有活性的酶
C、PH高时有活性的酶
19、肝脏患者出现蜘蛛痣或肝掌是因为( B )
A.胰岛素灭活减弱
B.雌性激素灭活减弱
C.雄性激素灭活减弱
D.雌性激素灭活增强
20、胆红素主要来源于( A )
A.血红蛋白的分解
B.肌红蛋白的分解
C.球蛋白的分解
D．肌蛋白的分解
二．多项选择题（2×5=10分）
1. 下列哪些是必需脂肪酸（ABC ）。
A．亚油酸 B.亚麻油酸 C.花生四烯酸 D.硬脂酸 E.软脂酸
2. 下列哪些核苷酸是合成RNA的原料（ABCE ）。
A. ATP
B. GTP
C. CTP
D. TTP
E. UTP
3.下列有关糖的无氧氧化的叙述，哪些是正确的（BD ）
A．从葡萄糖或糖原开始 B.一分子葡萄糖经过无氧氧化可净得2分子ATP
C．一分子糖原经过无氧氧化可净得3分子ATP
D．最终产物是乳酸
E.二氧化碳和水
4.有关核苷酸叙述哪些是正确的（ABCD ）
A．是DNA、RNA组成的基本单位 B. ATP是能量直接供给者
C．UTP参加糖原的合成代谢 D. CTP参加磷脂的合成代谢
5．酶蛋白和辅酶之间有下列关系( ABD )
A.不同的酶蛋白可使用相同辅酶，催化不同的反应
B.只有全酶才有催化活性，二者缺一不可
C.在酶促反应中两者具有相同的任务
D.一种酶蛋白通常只需一种辅酶
三．名词解释（4*5 =20分）
1、蛋白质的盐析：在含有蛋白质的水溶液中，加入高浓度中性盐，使蛋白质析出的过程。
2、脂肪动员：贮存的脂肪被组织细胞内的脂肪酶逐步水解，释放出脂肪酸和甘油，供给其他组织氧化利用的过程。
3、糖异生：由非糖物质转变成葡萄糖的过程。
4、血糖：血液中的葡萄糖
四．问答（30分）
1、请你写出RNA的种类及其功能？（6分）
第24页
2、长期饥饿时为什么会发生酮症酸中毒？（5分）
第89页
3、按照超速离心法分离血浆脂蛋白的基本原理、分类及其功能？（10分
第82页
4、血糖的正常值及血糖的来源与去路。（9分）
第72，73页
试题二
一、选择（20×2=40分）
1、我国在_______年，首先用人工的方法合成了具有生物活性的胰岛素（A ）
A.1965
B.1951
C.1953
D.1958
2.蛋白质变性的化学本质是( D )
A.不易被胃蛋白酶水解
B.溶解度增加
C.粘度下降
D.原有生物活性的丧失
3. 患者血清ALT活性明显升高，可协助诊断（A）
A．肝性脑病 B．心肌梗塞C．急性胰腺炎 D．痛风症
4.磷酸与核苷中戊糖是以哪种键连接的( A )
A.糖苷键
B.磷酸酯键
C.酸酐键
D.3?，5?—磷酸二酯键
17、糖的有氧氧化终产物是( C )
A、乳酸
B、尿素
C、二氧化碳和水 2O
D、酮体
二．填空题（每空0.5分，共10分）
21.组成蛋白质的基本单位是（_氨基酸。）
22.组成人体蛋白质的氨基酸共有_（_20种.）
23.蛋白质的平均氮含量是（16%），其最大紫外线吸收峰在（280）nm。
24.蛋白质的特征性元素是（N）。
25.属于芳香族氨基酸的是(_苯丙氨酸)，(色氨酸)，（酪氨酸）_。
26.根据酶的专一性程度不同，酶的专一(特异性)性可以分为（绝对特异性）、（相对特异性）和（立体异构特异性）。
27.葡萄糖在体内主要分解代谢途径有（糖酵解）、（糖的有氧氧化）、（磷酸戊糖途径）
28.脂肪酸的β-氧化在细胞的（线粒体）内进行，它包括_脂肪酸的活化、脂肪酰CoA进入线粒体、β-氧化过程、酮体的生成和利用四个连续反应步骤。
29.大肠杆菌RNA聚合酶中辨认起始点的亚基是（德尔特亚基）
三．名词解释（5题，共20分）
34、复制：亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下合成与亲代相同的DNA或RNA的过程。试题三
一、单选题（共35题，每题1分，共35分）
1.下列对蛋白质的含氮量的叙述正确的是（ D ）。
A. 18%
B. 20%
C. 22%
D. 16%
2.蛋白质在下列哪一波长中有特征性吸收（B C ）。
A. 200nm
B. 260nm
C. 280nm
D. 300nm
3.下列对维生素的叙述哪项是正确的（ B ）。
A.维持生命所必需的，体内能合成的。
B.维持生命所必需的，体内不能合成的，必需由食物提供。
C.维持生命所必需的，不需要食物提供的。
D. 维持生命不需要的，需要食物提供。
4.下列对酶原的叙述哪项是正确的（B ）
A. 酶原是具有催化活性的
B.酶原可转变成无活性的酶
C. 酶原是在一定条件下可转变成有活性的酶的前体
D.温度越高，酶原活性越高
5. 下列那种维生素是FAD的组成成分？（E ）
A. VitB6
B. VitD
C. VitK
D.泛酸
E. VitB2
6.下列哪项是血糖的主要去路（D ）
A.合成肝糖原储存
B.合成肌糖原储存
C.转变成脂肪储存
D.进行氧化供能
7.有关血脂含量叙述哪项是正确的（B ）
A.不受饮食的影响
B.随着年龄的增加而增加
C.男女都一样
D.不受糖尿病、肝病等疾病的影响
8.下列对氮平衡的叙述哪项是正确的（A ）
A.成年健康的人应是总平衡
B. 儿童应是总平衡
C. 儿童应是负平衡
D. 成年健康的人应是正平衡
9.蛋白质变性的化学本质是( D )
A.不易被胃蛋白酶水解
B.溶解度增加
C.粘度下降
D.原有生物活性的丧失
11.胆固醇合成的最基本的原料是（B ）
A.葡萄糖
B.乙酰CoA
C.脂肪酸 D .蛋白质
12.尿嘧啶用下列哪个英文字母表示( B )
A.G
B.U
C.T
D.C
13.蛋白质中多肽链形成?-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（C ）
A、疏水键
B、肽键
C、氢键
D、二硫键
14．关于米氏常数Km的说法，哪个是正确的？（ D ）
A、饱和底物浓度时的速度
B、在一定酶浓度下，最大速度的一半
C、饱和底物浓度的一半
D、速度达最大速度一半时的底物浓度
15.核酸分子的一级结构指的是其分子中（C）
A．核苷酸的结构 B．各种核苷酸之间的比例
C．核苷酸排列顺序 D．核苷酸的组成
16．人体内可以合成的氨基酸是（C）
A．赖氨酸B．苏氨酸
C．天冬氨酸D．蛋氨酸
17．人血中尿酸浓度过高时可导致（B）
A．夜盲症B．痛风症 C．糙皮病D．脚气病
18．一碳单位的载体是（ B ）
A、叶酸
B、四氢叶酸
C、生物素
D、焦磷酸硫胺素
19．在呼吸链中把电子直接传递给细胞色素b的是（D）
A．Cytaa3 B．Cytc C．FAD D．CoQ
20. 患者血清AST活性明显升高，可协助诊断（B）
A．肝性脑病 B．心肌梗塞C．急性胰腺炎 D．痛风症
21．NH3经鸟氨酸循环形成尿素的主要生理意义是（ A ）
A、可消除NH3毒性，产生尿素由尿排泄B.是NH3贮存的一种形式
C、是鸟氨酸合成的重要途径
D、是精氨酸合成的主要途径
23. 酶具有高效催化能力是由于下列何种效应：（C ）
A、提高反应的温度
B、降低反应的自由能变化
C、降低反应的活化能
D、降低底物的能量水平
25.决定蛋白质营养价值高低的是( D )
A.氨基酸的种类
B.氨基酸的数量
C.必需氨基酸的数量
D.必需氨基酸的数量，种类及比例
26.识别转录起始点的是( D )
A. ρ因子
B.核心酶
C.RNA聚合酶的α亚基
D.σ因子
27．维持DNA双螺旋结构稳定的因素有( B )
A.分子中的3.5磷酸二酯键 B．碱基对之间的氢键
C.肽键 D．盐键
28．一分子葡萄糖糖酵解净得的ATP克分子数和有氧氧化所得ATP克分子数之比为( D ) A。l：9 B．1：16
C．1：10 D．1：19
29．能在线粒体中进行的代谢过程有( A )
A.糖酵解 B．类脂合成
C氧化磷酸化 D．脂肪酸合成
30．参加DNA复制的是( D )
A.RNA模板
B.四种核糖核苷酸
C.异构酶 D．DNA指导的DNA聚合酶
31．tRNA分子二级结构的特征是( C )
A 3端有多聚A B．5端有C-C-A
C有反密码子环 D．有氨基酸残基
32．基因表达产物是( D )
A．DNA B．RNA C．蛋白质D大部分是蛋白质和RNA
33. 内源性固醇主要由血浆中哪种脂蛋白运输( B )
A、HDL
B、LDL
C、VLDL
D、CM
34．关于胆色素的叙述，正确的是( A )
A是铁卟啉化合物的代谢产物
B．血红索还原成胆红素
C胆红素还原变成胆绿素
D胆素原是肝胆红素在肠道细菌作用下与乙酰CoA形成的
35. 下列关于蛋白质结构叙述不正确的是( B )
A、三级结构即具有空间构象
B、各种蛋白一定具有一、二、三、四级结构
C、一级结构决定高级结构
D、α螺旋结构属二级结构形式
三.填空题（每空0.5分，15分）
42蛋白质的二级结构形式有（α螺旋），（ρ折叠），（ρ转角）和（无规则卷曲）四种。
43核酸可分为DNA和RNA两大类。
44.脂溶性维生素包括A/D/E/K/四种。
45. 血氨主要去路是（在肝中合成尿素）。
46．在DNA复制时，连续合成的链称为（）链，不连续合成的链称为（）链。47．RNA的转录过程分为（起始、延长和终止）三阶段。
48．酶的非竞争性抑制剂可使Km（不变），使Vmax（降低）。 ?
49.（肝脏）_是糖异生的最主要器官，（肾脏）也具有糖异生的能力。
50．糖原合成的限速酶是（糖原合成酶）_____；糖原分解的限速酶是__（糖原磷酸化酶）____
51．三羧酸循环过程中有__4___次脱氢；__2___次脱羧反应，产生__12___ATP。52．脂肪酸氧化的β—氧化包括__脱氢____，__加水_____，__再脱氢____，__硫解____。
53.酮体合成的主要器官是__肝脏____。
四.名词解释（每题4分，共20分）
54.同工酶：能催化同一化学反应，但酶蛋白的分子组成、结构、理化性质都不同的一组酶。
56.酮体：脂肪酸在肝脏氧化分解的特有中间产物。
57．蛋白质的变性：在理化因素的作用下，蛋白质的一级结构不变，空间结构破坏，理化性质改变，生物活性丧失。
五．问答题（4题，共20分）
61.什么是必需氨基酸，主要有哪几种？（4分）
《生物化学》试题四
一、单项选择题(每题1分，共20分)
l.盐析沉淀蛋白质的原理是( B )
A中和电荷，破坏水化膜
B与蛋白质结合成不溶性蛋白盐
c．降低蛋白质溶液的介电常数
D．调节蛋白质溶液的等电点
E．使蛋白质溶液的pH值等于蛋白质等电点
2.下列具有四级结构的蛋白质是( )
A．纤维蛋白 B.肌红蛋白
C.清蛋白
D.乳酸脱氢酶
E．胰岛素
3. 催化软脂酸碳链延长的酶存在于( A )
A、胞液
B、细胞质膜
C、线粒体
D、溶酶体
E、高尔基复合体
4.关于酶的竞争性抑制作用的说法正确的是( D )
A.使Km值不变
B.抑制剂结构一般与底物结构不相似
C. Vm增高
D.增加底物浓度可减弱抑制剂的影响
E.使Km值降低
6. 1、糖原分子中葡萄糖单位之间存在什么类型链？( C )
A、只有β-1、4糖苷键
B、有β-1、4糖苷键与β-1、6糖苷键
C、α-1、4糖苷键与α-1、6糖苷键
D、有β-1、6糖苷键
E、以上都不是
7．糖原分子中葡萄糖残基酵解时的限速酶有( B )
A糖原合成酶 B．磷酸化酶
C．3—磷酸甘油醛脱氢酶 a丙酮酸激酶
E葡萄糖磷酸激酶
9．一分子丙酮酸进入三羧酸循环彻底氧化( E )
A.生成4分子C02
B．生成6分子H20
C生成18个ATP
D有5次脱氢，均通过NADH开始的呼吸链生成H20
E．反应均在线粒体内进行
10.嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸合成时，共同需要的物质是 D
A、延胡索酸
B、甲酸
C、天冬酰胺
D、谷氨酰胺
E、核糖-1-磷酸
12．能在线粒体中进行的代谢过程有( C )
A.糖酵解 B．类脂合成
C氧化磷酸化 D．脂肪酸合成
巳胆固醇合成
E．结合蛋白酶
15．肽链合成后的可能的加工方式包括A
A切除肽链起始的氨基酸 B．部分肽段延长
C甲基化 D．磷酸化
E．乙酰化
17. 内源性胆固醇主要由血浆中哪种脂蛋白运输B
A、HDL
B、LDL
C、VLDL
D、CM
18．关于胆色素的叙述，正确的是( A )
A是铁卟啉化合物的代谢产物
B．血红索还原成胆红素
C胆红素还原变成胆绿素
D胆素原是肝胆红素在肠道细菌作用下与乙酰CoA形成的
E．胆红素与胆色素实际是同一物质，只是环境不同，而有不同命名
二、多项选择题(每题2分，共10分)
1．对酶的正确叙述是( BE )
A能催化热力学上不能进行的反应 B．是由活细胞产生的一种生物催化剂 C催化的反应只限于细胞内 D．其本质是含辅酶或辅基的蛋白质
E．能降低反应活化能
2．代谢过程的中间产物是HMGCoA的是( BC )
A合成脂肪酸 B．合成酮体
C合成胆固醇 D．酮体氧化
E，胆固醇降解…
3．酶蛋白和辅酶之间有下列关系( BDE )
A.两者以共价键相结合
B.只有全酶才有催化活性，二者缺一不可
C.在酶促反应中两者具有相同的任务
D.一种酶蛋白通常只需一种辅酶
E．不同的酶蛋白可使用相同辅酶，催化不同的反应
4．胞嘧啶核苷酸从头合成的原料，包括( ABCE )
A. 5—磷酸核糖 B .谷氨酰胺
C. C02 D．一碳单位
E．天冬氨酸
5．关于RNA分子中“尾”的正确叙述是( C,D )
A是tRNA的加工过程 B．存在于tRNA的3末端
C是由多聚腺苷酸(polyA)组成 D．仅存在于真核细胞的mRNA上
E．是7甲基鸟嘌呤核苷三磷酸上
三、填空题[每空1分，共25分)
1．在DNA复制时，连续合成的链称为（全导链）链，不连续合成的链称为（半导链）。
3．蛋白质合成的原料是_（_氨基酸_）_，细胞中合成蛋白质的场所是（_核糖体_）__
6．结合蛋白酶类必需由_（_酶蛋白_）__和_（_辅助因子）_相结合才具有活性。
10．脂肪酸的合成在（肝脏）进行，合成原料中碳源是（），供氢体是（），它主要来自_（____）_。
11．氨在血液中主要是以（丙氨酸和谷氨酰胺）两种形式被运输。
四、名词解释(每题3分，共15分)
1．酶的活性中心：必须基团形成具有特定空间结构的区域，能与底物特异的结合，并将底物转化为产物，这一区域称…
4.呼吸链：代谢物脱下的成对的H，通过一些辅基或辅酶的催化作用，最终于O结合，生成水的过程，次过程与细胞呼吸有关，故称为……
5.从头合成途径：
五、问答题(共30分)
1．简述体内氨的来源、去路（8分）。
2．核小体由什么组成，如何形成？（4分）
3．简述蛋白质的四级结构及其维持各级结构的键或力是什么(12分)?
4．讨论三种RNA在蛋白质合成过程中的作用(6分)。
试题二
5.下列那种维生素是NAD+的组成成分？（D ）
A. VitB1
B. VitB2
C. VitE
D. VitPP
E. VitA
12. 一分子乙酰CoA经三羧酸循环彻底氧化后产物是:C
A、草酰乙酸
B、草酰乙酸和CO2
C、CO2+H2O
D、CO2,NADH和FADH2
13.胆固醇合成的最基本的原料是（A ）
A. 葡萄糖
B. 乙酰CoA
C. 脂肪酸
D. 蛋白质
14.尿嘧啶用下列哪个英文字母表示( B )
A.G
B.U
C.T
D.C
15.蛋白质中多肽链形成?-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（ C ）
A、疏水键
B、肽键
C、氢键
D、二硫键
17．蛋白质经煮沸变性后其生物学活性（A）
A．丧失 B．升高C．不变D．降低
21. 蛋白质分子中氨基酸属于下列哪一项？（C）
A. L-β-氨基酸
B. D-β-氨基酸
C. L-α-氨基酸
D. D-α-氨基酸
E. L-D-α氨基酸
22．一碳单位的载体是（B ）
A、叶酸
B、四氢叶酸
C、生物素
D、焦磷酸硫胺素
25．NH3经鸟氨酸循环形成尿素的主要生理意义是（ A ）
A、可消除NH3毒性，产生尿素由尿排泄
B、是NH3贮存的一种形式
C、是鸟氨酸合成的重要途径
D、是精氨酸合成的主要途径
二．多项选择题（每空2分，共10分，每项多答或少答，都不给分）
4.下列有关酮体的代谢哪些是正确的（CDE ）
A．酮体是在肌肉中合成 B. 酮体是在肝脏中氧化
C．酮体是在肝中合成D．酮体合成的原料是乙酰CoA
E. 酮体过多可导致酸中毒
一. 填空题（每空0.5分，10分）
1. 在核酸分子中的嘌呤碱基主要有(嘌呤和嘧啶)两种。
7．血脂包括有甘油三脂、磷脂、胆固醇、胆固醇脂、游离脂肪酸。
四.名词解释（每题4分，共20分）
1.等点电：在某一PH值的水溶液中，加入某种氨基酸，该氨基酸解离成阴离子和阳离子的趋势相等，变成兼性离子，次PH值称…
3.腐败：肠道未被消化的蛋白质和未被吸收的氨基酸，在肠道细菌作用下进行的氧化分解的反应过程，产生一系列对人体有害的物质，称…
五．问答题（每题6分，共30分）
5.三羧循环有何重要生理意义？
15.属于芳香族氨基酸的是（苯丙氨酸，色氨酸，酪氨酸）
中国农业大学研究生入学考试复习资料 《生物化学》重点大题 1．简述Chargaff 定律的主要内容。 答案：(1）不同物种生物的DNA 碱基组成不同，而同一生物不同组织、器官的DNA 碱基组成相同。(2）在一个生物个体中，DNA 的碱基组成并不随年龄、营养状况和环境变化而改变。 (3）几乎所有生物的DNA 中，嘌呤碱基的总分子数等于嘧啶碱基的总分子数，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T) 的分子数量相等，鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子数量相等，即A＋G=T＋C。这些重要的结论统称 为Chargaff 定律或碱基当量定律。 2．简述DNA 右手双螺旋结构模型的主要内容。 答案：DNA 右手双螺旋结构模型的主要特点如下： (1）DNA 双螺旋由两条反向平行的多核苷酸链构成，一条链的走向为5′→3′，另一条链的走向为3′→5′;两条链绕同一中心轴一圈一圈上升，呈右手双螺旋。 (2）由脱氧核糖和磷酸构成的骨架位于螺旋外侧，而碱基位于螺旋内侧。 (3）两条链间A 与T 或C 与G 配对形成碱基对平面，碱基对平面与螺旋的虚拟中心轴垂直。 (4）双螺旋每旋转一圈上升的垂直高度为3.4nm(即34?），需要10 个碱基对，螺旋直径是2.0nm。(5）双螺旋表面有两条深浅不同的凹沟，分别称为大沟和小沟。 3．简述DNA 的三级结构。 答案：在原核生物中，共价闭合的环状双螺旋DNA 分子，可再次旋转形成超螺旋，而且天然DNA 中多为负超螺旋。真核生物线粒体、叶绿体DNA 也是环形分子，能形成超螺旋结构。真核细胞核内染色体是DNA 高级结构的主要表现形式，由组蛋白H2A、H2B、H3、H4 各两分子形成组蛋白八聚体，DNA 双螺旋缠绕其上构成核小体，核小体再经多步旋转折叠形成棒状染色体，存在于细胞核中。 4．简述tRNA 的二级结构与功能的关系。 答案：已知的tRNA 都呈现三叶草形的二级结构，基本特征如下：(1）氨基酸臂，由7bp 组成，3′末端有-CCA-OH 结构，与氨基酸在此缩合成氨基酰-tRNA，起到转运氨基酸的作用;(2）二氢尿嘧啶环(DHU、I 环或D 环），由8～12 个核苷酸组成，以含有5，6-二氢尿嘧啶为特征;(3）反密码环，其环中部的三个碱基可与mRNA 的三联体密码子互补配对，在蛋白质合成过程中可把正确的氨基酸引入合成位点;(4)额外环，也叫可变环，通常由3～21 个核苷酸组成;(5)TψC 环，由7 个核苷酸组成环，和tRNA 与核糖体的结合有关。 5．简述真核生物mRNA 3′端polyA 尾巴的作用。 答案：真核生物mRNA 的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴，长约20～300 个腺苷酸。该尾巴与mRNA 由细胞核向细胞质的移动有关，也与mRNA 的半衰期有关;研究发现，polyA 的长短与mRNA 寿命呈正相关，刚合成的mRNA 寿命较长，“老”的mRNA 寿命较短。 6．简述分子杂交的概念及应用。 答案：把不同来源的DNA(RNA）链放在同一溶液中进行热变性处理，退火时，它们之间某些序列互补的区域可以通过氢键重新形成局部的DNA-DNA 或DNA-RNA 双链，这一过程称为分子杂交，生成的双链称杂合双链。DNA 与DNA 的杂交叫做Southern 杂交，DNA 与RNA 杂交叫做Northern 杂交。 核酸杂交已被广泛应用于遗传病的产前诊断、致癌病原体的检测、癌基因的检测和诊断、亲子鉴定和动
[化学发光]美国Beckman公司UniCel DxI800免疫分析仪 迎接PG级超微量检测时代的来临 免疫定量分析的发展历程 1960年代以前人工免疫检测阶段 1960-70年代非标记免疫发展阶段放射标记免疫发展阶段 1970-80年代免疫分析新项目不断产生临床应用领域迅速拓展荧光免疫发展阶 段 1980-90年代免疫检测逐渐常规化检测原理发展阶段化学发光，电化学发光1990-2000年标记免疫检测原理日臻成熟优化系统均衡，清洗分离手技术的发展2000-2003年免疫自动化发展阶段；进一步吸收大生化检测的自动化技术成就，采用系统叠加的方式以寻求更快的检测速度 免疫分析技术的自动化智能化发展，是临检领域继生化全自动分析时期的又一个标志性的重要阶段。其推动力源自一些大型实验室在免疫检测应用方面的进一步拓展和规模化，对免疫分析系统的检测速度、自动化和智能化性能提出了更高的要求。 智能化方面 提高了系统流程管理的智能化程度，将系统的自动化性能推进到了一个新的智能化阶段，并进一步强化了全方位的系统监控功能，保证了自动化的可控性。 自动化方面 进一步完善系统的自动化性能，加强系统的简便性、灵活性和前赡性，例如多种的进样方式、尽可能简洁的日常保养程序等，并提高了与轨道自动化的顺应性。 系统化方面 改变了原有检测仪器将系统进行简单并连组合以提高检测速度的做法，在继承原有分系统的独立性优点的基础上，采用同一套分析和探测系统，保证系统的整体性和结果的统一性。 UniCel TM DxI 800 展现自动化非凡成就引领智能免疫时代 DxI 800智能化整系统运行，突破分系统简单组合的传统方式，采用分立一体化整系统的专利设计
一。 核酸的结构和功能 脱氧核糖核酸（ deoxyribonucleic acid, DNA ）:遗传信息的贮存和携带者，生物的主要遗传物质。在真核细胞中，DNA 主要集中在细胞核，线粒体和叶绿体中均有各自的DNA 。原核细胞没有明显的细胞核结构，DNA 存在于称为类核的结构区。 核糖核酸（ribonucleic acid, RNA ）：主要参与遗传信息的传递和表达过程，细胞的RNA 主要存在于细胞质中，少量存在于细胞核中。 DNA 分子中各脱氧核苷酸之间的连接方式（3′-5′磷酸二酯键）和排列顺序叫做DNA 的一级结构，简称为碱基序列。一级结构的走向的规定为5′→3′。 DNA 的双螺旋模型特点： 两条反向平行的多聚核苷酸链沿一个假设的中心轴右旋相互盘绕而形成。 ?磷酸和脱氧核糖单位作为不变的骨架组成位于外侧，作为可变成分的碱基位于侧，链间碱基按A —T ，G —C 配对（碱基配对原则，Chargaff 定律） ?螺旋直径2nm ，相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对（base pair, bp ）重复一次，间隔为3.4nm DNA 的双螺旋结构稳定因素 ? 氢键 ?碱基堆集力 ?磷酸基上负电荷被胞组蛋白或正离子中和 DNA 的双螺旋结构的意义 该模型揭示了DNA 作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA 复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。该模型的提出是本世纪生命科学的重大突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石。 DNA 的三级结构 在细胞，由于DNA 分子与其它分子（主要是蛋白质）的相互作用，使DNA 双螺旋进一步扭曲形成的高级结构. RNA 类别： ?信使RNA （messenger RNA ，mRNA ）：在蛋白质合成中起模板作用； ?核糖体RNA （ribosoal RNA ，rRNA ）：与蛋白质结合构成核糖体（ribosome ）,核糖体是蛋白质合成的场所； ?转移RNA （transfor RNA ，tRNA ）：在蛋白质合成时起着携带活化氨基酸的作用。 rRNA 的分子结构 特征：? 单链，螺旋化程度较tRNA 低 ? 与蛋白质组成核糖体后方能发挥其功能
第六章脂类代谢 一、知识要点 （一）脂肪的生物功能： 脂类是指一类在化学组成和结构上有很大差异,但都有一个共同特性,即不溶于水而易溶于乙醚、氯仿等非极性溶剂中的物质。通常脂类可按不同组成分为五类，即单纯脂、复合脂、萜类和类固醇及其衍生物、衍生脂类及结合脂类。 脂类物质具有重要的生物功能。脂肪是生物体的能量提供者。 脂肪也是组成生物体的重要成分，如磷脂是构成生物膜的重要组分，油脂是机体代谢所需燃料的贮存和运输形式。脂类物质也可为动物机体提供溶解于其中的必需脂肪酸和脂溶性维生素。某些萜类及类固醇类物质如维生素A、D、E、K、胆酸及固醇类激素具有营养、代谢及调节功能。有机体表面的脂类物质有防止机械损伤与防止热量散发等保护作用。脂类作为细胞的表面物质，与细胞识别，种特异性和组织免疫等有密切关系。 （二）脂肪的降解 在脂肪酶的作用下，脂肪水解成甘油和脂肪酸。甘油经磷酸化和脱氢反应，转变成磷酸二羟丙酮，纳入糖代谢途径。脂肪酸与ATP和CoA在脂酰CoA合成酶的作用下，生成脂酰CoA。脂酰CoA在线粒体内膜上肉毒碱：脂酰CoA转移酶系统的帮助下进入线粒体衬质，经β-氧化降解成乙酰CoA，在进入三羧酸循环彻底氧化。β-氧化过程包括脱氢、水合、再脱氢和硫解四个步骤，每次β-氧化循环生成FADH2、NADH、乙酰CoA和比原先少两个碳原子的脂酰CoA。此外，某些组织细胞中还存在α-氧化生成α羟脂肪酸或CO2和少一个碳原子的脂肪酸；经ω-氧化生成相应的二羧酸。 萌发的油料种子和某些微生物拥有乙醛酸循环途径。可利用脂肪酸β-氧化生成的乙酰CoA 合成苹果酸，为糖异生和其它生物合成提供碳源。乙醛酸循环的两个关键酶是异柠檬酸裂解酶和苹果酸合成酶前者催化异柠檬酸裂解成琥珀酸和乙醛酸，后者催化乙醛酸与乙酰CoA生成苹果酸。 （三）脂肪的生物合成 脂肪的生物合成包括三个方面：饱和脂肪酸的从头合成，脂肪酸碳链的延长和不饱和脂肪酸的生成。脂肪酸从头合成的场所是细胞液，需要CO2和柠檬酸的参与，C2供体是糖代谢产生的乙酰CoA。反应有二个酶系参与，分别是乙酰CoA羧化酶系和脂肪酸合成酶系。首先，乙酰CoA在乙酰CoA羧化酶催化下生成，然后在脂肪酸合成酶系的催化下，以ACP作酰基载体，乙酰CoA为C2受体，丙二酸单酰CoA为C2供体，经过缩合、还原、脱水、再还原几个反应步骤，先生成含4个碳原子的丁酰ACP，每次延伸循环消耗一分子丙二酸单酰CoA、两分子NADPH，直至生成软脂酰ACP。产物再活化成软脂酰CoA，参与脂肪合成或在微粒体系统或线粒体系统延长成C18、C20和少量碳链更长的脂肪酸。在真核细胞内，饱和脂肪酸在O2的参与和专一的去饱和酶系统催化下，进一步生成各种不饱和脂肪酸。高等动物不能合成亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸，必须依赖食物供给。 3-磷酸甘油与两分子脂酰CoA在磷酸甘油转酰酶作用下生成磷脂酸，在经磷酸酶催化变成二酰甘油，最后经二酰甘油转酰酶催化生成脂肪。 （四）磷脂的生成 磷脂酸是最简单的磷脂，也是其他甘油磷脂的前体。磷脂酸与CTP反应生成CDP-二酰甘油，在分别与肌醇、丝氨酸、磷酸甘油反应，生成相应的磷脂。磷脂酸水解成二酰甘油，再与CDP-胆碱或CDP-乙醇胺反应，分别生成磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺。 二、习题
全自动生化分析仪贝克曼AU2700 生化分析仪是根据光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。它属于光学式分析仪器，基于物质对光的选择性吸收，即分光光度法。分光光度法基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起来的方法，属于分子吸收光谱分析。单色器将光源分成单色光，特定波长的单色光通过盛有样品的比色池，光电转化器将透射光转换为电信号后送入信号处理系统进行分析。 从全自动生化分析仪的发展来看，以进样个反应方式分为连续流动式、离心式和分立式三大类。目前分立式技术成熟，全面取代连续流动式和离心式成为主流。分立式全自动生化分析仪能以样本为单位检测，因此使用灵活，客服了离心式的大部分缺陷，并随着技术的进步，分立式的测试速度和稳定性都有较大的提高。我院新引进的贝克曼AU2700测试速度是五年前引进的德林Dimension max的3倍多，而且测试成本低，故障率低，自动化程度高，易保养。其诸多优势得益于其优秀的设计和先进的技术的引入。 全自动生化分析仪由加样和试剂系统、比色系统、清洗系统和程序控制系统组成。 一加样和试剂系统一套加样和试剂系统由一根样品探针，两个试剂探针，三个注射器，三个阀门，三个加样臂，试剂仓与转盘和样本传送装置组成。普通生化仪只有一套，二AU2700有两套，为达到1600个测试/小时提供了硬件保障。同时应用最新的数字加样系统和数字光路系统，加样更精确更精细，最小加样量可达1μL,步进达到0.1μL，最低反应容量仅120μL，减小了试剂用量，而且可以用国产试剂，ISE电解质分析电极寿命长，无需保养，从而极大的减少了测试成本，间接增加了医院收入。自动跟踪微量采样技术根据吸样量大小自动跟踪液面而下降，从而减少探针吸附，降低携带污染。为适应临床需要，AU2700
1．糖异生和糖酵解的生理学意义: 糖酵解和糖异生的代谢协调控制，在满足机体对能量的需求和维持血糖恒定方面具有重要的生理意义。 2.简述蛋白质二级结构定义及主要类别。 定义：指多肽主链有一定周期性的，由氢键维持的局部空间结构。 主要类别：α-螺旋，β-折叠，β-转角，β-凸起，无规卷曲 3.简述腺苷酸的合成途径. IMP在腺苷琥珀酸合成酶与腺苷琥珀酸裂解酶的连续作用下，消耗1分子GTP，以天冬氨酸的氨基取代C-6的氧而生成AMP。 4．何为必需脂肪酸和非必需脂肪酸？哺乳动物体内所需的必需脂肪酸有哪些？ 必需脂肪酸：自身不能合成必须由膳食提供的脂肪酸常见脂肪酸有亚油酸、亚麻酸非必须脂肪酸：自身能够合成机单不饱和脂肪酸 5.简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性？ 共性:能显著的提高化学反应速率，是化学反应很快达到平衡 个性：酶对反应的平衡常数没有影响，而且酶具有高效性和专一性 6．简述TCA循环的在代谢途径中的重要意义。 1、TCA循环不仅是给生物体的能量，而且它还是糖类、脂质、蛋白质三大物质转化的枢纽 2、三羧酸循环所产生的各种重要的中间产物，对其他化合物的生物合成具有重要意义。 3、三羧酸循环课供应多种化合物的碳骨架，以供细胞合成之用。 7．何为必需氨基酸和非必需氨基酸？哺乳动物体内所需的必需氨基酸有哪些？ 必需氨基酸：自身不能合成，必须由膳食提供的氨基酸。（苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸） 8．简述蛋白质一级、二级、三级和四级结构。 一级：指多肽链中的氨基酸序列，氨基酸序列的多样性决定了蛋白质空间结构和功能的多样性。 二级：指多肽主链有一定周期性的，由氢键维持的局部空间结构。 三级：球状蛋白的多肽链在二级结构、超二级结构和结构域等结构层次的基础上，组装而成的完整的结构单元。 四级：指分子中亚基的种类、数量以及相互关系。 9.脂肪酸氧化和合成途径的主要差别？ β-氧化：细胞内定位（发生在线粒体）、脂酰基载体（辅酶A）、电子受体/供体（FAD、NAD+）、羟脂酰辅酶A构型（L型）、生成和提供C2单位的形式（乙酰辅酶A）、酰基转运的形式（脂酰肉碱） 脂肪酸的合成：细胞内定位（发生在细胞溶胶中）、脂酰基载体（酰基载体蛋白（ACP））、电子受体/供体（NADPH）、羟脂酰辅酶A构型（D型）、生成和提供C2单位的形式（丙二酸单酰辅酶A）、酰基转运的形式（柠檬酸） 10.酮体是如何产生和氧化的？为什么肝中产生酮体要在肝外组织才能被利用？ 生成：脂肪酸β-氧化所生成的乙酰辅酶A在肝中氧化不完全，二分子乙酰辅酶A可以缩合成乙酰乙酰辅酶A：乙酰辅酶A再与一分子乙酰辅酶A缩合成β-羟-β-甲戊二酸单酰辅酶A（HMG-CoA），后者分裂成乙酰乙酸；乙酰乙酸在肝线粒体中可还原生成β-羟丁酸，乙酰乙酸还可以脱羧生成丙酮。 氧化：乙酰乙酸和β-羟丁酸进入血液循环后送至肝外组织，β-羟丁酸首先氧化成乙酰乙酸，然后乙酰乙酸在β-酮脂酰辅酶A转移酶或乙酰乙酸硫激酶的作用下，生成乙酰乙酸内缺乏β-酮脂酰辅酶A转移酶和乙酰乙酸硫激酶，所以肝中产生酮体要在肝外组织才能被
第一章蛋白质的结构与功能 1.20种基本氨基酸中,除甘氨酸外,其余都是L-α-氨基酸. 2.支链氨基酸(人体不能合成:从食物中摄取):缬氨酸亮氨酸异亮氨酸 3.两个特殊的氨基酸：脯氨酸：唯一一个亚氨基酸甘氨酸：分子量最小，α-C原子不是手性C原子，无旋光性. 4.色氨酸：分子量最大 5.酸性氨基酸：天冬氨酸和谷氨酸碱性氨基酸：赖氨酸、精氨酸和组氨酸 6.侧链基团含有苯环：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸 7.含有—OH的氨基酸：丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸 8.含有—S的氨基酸：蛋氨酸和半胱氨酸 9.在近紫外区（220—300mm）有吸收光能力的氨基酸：酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸 10.肽键是由一个氨基酸的α—羧基与另一个氨基酸的α—氨基脱水缩合形成的酰胺键 11.肽键平面：肽键的特点是N原子上的孤对电子与碳基具有明显的共轭作用。使肽键中的C-N键具有部分双键性质，不能自由旋转，因此。将C、H、O、N原子与两个相邻的α-C 原子固定在同一平面上，这一平面称为肽键平面 12.合成蛋白质的20种氨基酸的结构上的共同特点：氨基都接在与羧基相邻的α—原子上 13.是天然氨基酸组成的是：羟脯氨酸、羟赖氨酸，但两者都不是编码氨基酸 14.蛋白质二级结构的主要形式：①α—螺旋②β—折叠片层③β—转角④无规卷曲。α—螺旋特点：以肽键平面为单位，α—C为转轴，形成右手螺旋，每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈，螺径为0.54nm，维持α-螺旋的主要作用力是氢键 15.举例说明蛋白质结构与功能的关系 ①蛋白质的一级结构决定它的高级结构 ②以血红蛋白为例说明蛋白质结构与功能的关系：镰状红细胞性贫血患者血红蛋白中有一个氨基酸残基发生了改变。可见一个氨基酸的变异（一级结构的改变），能引起空间结构改变，进而影响血红蛋白的正常功能。但一级结构的改变并不一定引起功能的改变。 ③以蛋白质的别构效应和变性作用为例说明蛋白质结构与功能的关系：a.别构效应，某物质与蛋白质结合，引起蛋白质构象改变，导致功能改变。协同作用，一个亚基的别构效应导致另一个亚基的别构效应。氧分子与Hb一个亚基结合后引起亚基构象变化的现象即为Hb的别构（变构）效应。蛋白质空间结构改变随其功能的变化，构象决定功能。b.变性作
1．目的：规范贝克曼DXC600操作 2．适用范围：贝克曼DXC600检测过程 3．支持性文件：《全国临床检验操作规程》(第三版)、《临床检验操作规程编写要求》（WS/T227-2002） 4．操作规程： Ⅰ仪器开机程序 1．开机运行 开机检查MC部分试剂量是否充足，真空压力，水压，空气压力是否处在正常范围。 注意事项：日程维护保养（详见贝克曼保养手册） 例：每日保养工作：开机前用70%酒精擦洗试剂针和搅拌针。 2．安装试剂 a．首先检查试剂状态。在主菜单选定Rgts/Cal。 b．安装试剂 从主菜单选择Rgts/Cal，显示试剂状态屏幕 ↓ 点击试剂名称旁的Pos(1,2,3……)，选定试剂放置的位置 ↓ 按F1 Load键，打开试剂舱闸门 ↓ 放入试剂，扫描试剂条码，关闭试剂舱闸门 ↓ 仪器自动检测试剂液面、较准日期等，并显示相应信息。 注意事项： a．AST、ALT、CK试剂需预处理：步骤将C孔试剂全部加打入A孔然后充分混匀。b．TBIL试剂需预处理：将C孔试剂吸取200微升到B孔然后充分混匀。 Ⅱ样品前运行程序 1．清除昨天的测试结果：
选Sample ↓ 选Clear F7 ↓ 输入昨天的日/月/年 ↓ 确定，即清除样品结果 2．冲洗仪器管道： 选Utils ↓ 选Prime F1 ↓ Prime all，清洗5次 Ⅲ仪器校准程序 定标： 选择Rgts/Cal，显示试剂状态屏幕 ↓ 点击试剂名称旁的Pos(1,2,3……)，选择需要定标的项目 ↓ 按F7 Assign，选择定标液的类型，并输入试剂架号及位置 ↓ Cancel退出保存，放入定标液架，RUN。 注意事项： a．注有“＊”的试剂都需要定标 b．K、Na、Cl、Ca离子项目每隔24小时需要定标一次。 C．贝克曼原装试剂校准周期严格参照贝克曼试剂说明书规定。 *如有项目校准失败必须查找分析原因并要快速解决问题* Ⅳ生化室内质控 取贝克曼高低两个浓度水平质控品，室温放置10-20分钟，摇匀后进行测定，随后将质控值输入质控分析软件进行质控分析。要质控在控后才能开机检测病人标本。 每天做二次质控，开机运行后做一次，中午仪器运行时再做一次。 注意事项： 如有项目失控首先要根该项目的失控类型判断是系统误差还是随机误差引起的，再查找失控原因，解决问题，最后必需重做质控在控后才能做该项目。 Ⅴ样本运行程序
一、蛋白质 1.蛋白质的概念：由许多氨基酸通过肽键相连形成的高分子含氮化合物，由C、H、O、N、S元素组成，N的含量为16%。 2.氨基酸共有20种，分类：非极性疏水R基氨基酸、极性不带电荷R基氨基酸、带正电 荷R基氨基酸（碱性氨基酸）、带负电荷R基氨基酸（酸性氨基酸）、芳香族氨基酸。 3.氨基酸的紫外线吸收特征：色氨酸和酪氨酸在280纳米波长附近存在吸收峰。 4.氨基酸的等电点：在某一PH值条件下，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相同，溶液中氨基酸的净电荷为零，此时溶液的PH值称为该氨基酸的等电点；蛋白质等电点： 在某一PH值下，蛋白质的净电荷为零，则该PH值称为蛋白质的等电点。 5.氨基酸残基：氨基酸缩合成肽之后氨基酸本身不完整，称为氨基酸残基。 6.半胱氨酸连接用二硫键（—S—S—） 7.肽键：一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸α-氨基脱水缩合形成的化学键。 8.N末端和C末端：主链的一端含有游离的α氨基称为氨基端或N端；另一端含有游离的 α羧基，称为羧基端或C端。 9.蛋白质的分子结构：（1）一级结构：蛋白质分子内氨基酸的排列顺序，化学键为肽键和二硫键；（2）二级结构：多肽链主链的局部构象，不涉及侧链的空间排布，化学键为氢键， 其主要形式为α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲；（3）三级结构：整条肽链中，全部氨基 酸残基的相对空间位置，即肽链中所有原子在三维空间的排布位置，化学键为疏水键、离子键、氢键及范德华力；（4）四级结构：蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和 相互作用。 10.α螺旋：(1)肽平面围绕Cα旋转盘绕形成右手螺旋结构，称为α螺旋；(2).螺旋上升一圈，大约需要3.6个氨基酸，螺距为0.54纳米，螺旋的直径为0.5纳米；(3).氨基酸的R基分布在 螺旋的外侧；(4).在α螺旋中，每一个肽键的羰基氧与从该羰基所属氨基酸开始向后数第五个氨基酸的氨基氢形成氢键，从而使α螺旋非常稳定。 11.模体：在许多蛋白质分子中可发现两个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象，被称为模体。 12.结构域：大分子蛋白质的三级结构常可分割成一个或数个球状或纤维状的区域，折叠得较为紧密，各行使其功能，称为结构域。 13.变构效应：蛋白质空间结构的改变伴随其功能的变化，称为变构效应。 14.蛋白质胶体结构的稳定因素：颗粒表面电荷与水化膜。 15.什么是蛋白质的变性、复性、沉淀？变性与沉淀关系如何?导致蛋白质的变性因素？举 例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子？ 蛋白质的变性：在理化因素的作用下，蛋白质的空间构象受到破坏，其理化性质发生改变，生物活性丧失，其实质是蛋白质的次级断裂，一级结构并不破坏。 蛋白质的复性：当变性程度较轻时，如果除去变性因素，蛋白质仍能恢复或部分恢复其原 来的构象及功能，这一现象称为蛋白质的复性。
蛋白质的高级结构即蛋白质的构象问题。（构型的改变伴随着共价键的短裂和重新形成，构象的改变不需要共价键的短裂和重新形成。） 肽键C-N键介于单键和双键之间，具有部分双键性质，不能自由旋转，其中绝大多数都形成刚性的酰胺平面（由肽键周围的6个原子组成的刚性平面）结构。虽是单键却有双键性质，周边六个原子在同一平面上，前后两个a-carbon在对角(trans) α-螺旋结构的主要特点（P53）： 1）肽链中的酰胺平面绕Cα相继旋转一定角度形成α-螺旋，并盘绕前进。每隔3.6个氨基酸残基，螺旋上升一圈；每圈间距0.54nm，即每个氨基酸残基沿螺旋中心轴上升0.15nm，旋转100°。 2）螺旋体中所有氨基酸残基侧链都伸向外侧；肽链上所有的肽键都参与氢键的形成，链中的全部C=O和N-H几乎都平行于螺旋轴,氢键几乎平行于中心轴; 3）绝大多数天然蛋白质都是右手螺旋。每个氨基酸残基的N-H都与前面第四个残基C=O形成氢键。 侧链在a-螺旋结构中的作用： 4）* α-螺旋遇到Pro就会被中断而拐弯，因为脯氨酸是亚氨基酸。 * R为Gly时，由于Ca上有2个氢，使Ca-C、Ca-N的转动的自由度很大，即刚性很小，所以使螺旋的稳定性大大降低。 * 带相同电荷的氨基酸残基连续出现在肽链上时，螺旋的稳定性降低。 β-折叠是由两条或多条伸展的多肽链靠氢键联结而成的锯齿状片状结构。侧链基团与Cα间的键几乎垂直于折叠平面，R基团交替地分布于片层平面两侧。 ①β-折叠分平行式（N端在同一端。氨基酸之间沿轴相距0.325nm）和反平行式（N端不在同一端。氨基酸之间沿轴相距0.35nm），后者更为稳定。 ②维持β-折叠结构稳定性的力——氢键由一条链上的羰基和另一条链上的氨基之间形成，即氢键是在链与链之间形成的。 β-转角存在于球状蛋白中，β-转角都在蛋白质分子的表面。其特点是肽链回折180°，使得氨基酸残基的C=O和与第四个残基的N-H形成氢键。 无规则卷曲是指没有一定规律的松散肽链结构。酶的功能部位常常处于这种构象区域。无规卷曲常出现在α-螺旋与α-螺旋、α-螺旋与β-折叠、β-折叠与β-折叠之间。它是形成蛋白质三级结构所必需的。 ⑶超二级结构指蛋白质中相邻的二级结构单位(即单个α-螺旋或β-转角、β折叠)组合在一起，形成有规则的在空间上能辩认的二级结构组合体。基本组合形式为αα，βαβ，βββ 结构域指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体，称为结构域（domain）或功能域。结构域之间有一段肽链相连——铰链区；各个结构域可以相似或不相同；结构域一般为酶活性中心 ⑷三级结构指的是多肽链在二级结构、超二级结构和结构域的基础上，主链构象和侧链构象相互作用，进一步盘曲折叠形成球状分子结构。球状蛋白的三级的结构特怔：蛋白质的三级结构具有明显的折叠层次；大多数非极性侧链埋在分子部，形成疏水核；而极性侧链在分子表面，形成亲水面；分子表面往往有一个陷的空隙，它常常是蛋白质的活性中心。 维持三级结构的作用力：二硫键——共价键；（疏水作用，氢键，离子键，德华力）——非共价键（次级键） 肌红蛋白由—条多肽链和一个血红素（heme）辅基构成，分子量为16700，含153个氨基酸残基。血红素能与O2,CO,NO,H2S结合 ⑸四级结构由两条或两条以上具有三级结构的多肽链聚合而成、有特定三维结构的蛋白质构象。每条多肽链又称为亚基。 血红蛋白由四条多肽链形成，是一种寡聚蛋白质。这四条链主要通过非共价键相互作用缔合在一起。血红蛋白分子上有四个氧的结合部位，因为每条链上含有一个血红素辅基。 维持四级结构的作用力：疏水作用，氢键，离子键，德华力 9、蛋白质结构与功能关系 1）一级结构与功能的关系 ①一级结构与细胞进化以细胞色素C为例：细胞色素C广泛存在于真核生物细胞的线粒体中，是一种含有血红素辅基的单链蛋白质。在生物氧化时，细胞色素C在呼吸链的电子传递系统中起传递电子的作用，使血红素上铁原子的价数发生变化。在分子进化过程中，细胞色素C分子中保持氨基酸残基不变的区域称为保守部位。保守部位的氨基酸都是细胞色素C完成其生物学功能所必需的。 ②一级结构变异与分子病所谓分子病是指由于遗传基因突变导致蛋白分子中某些氨基酸残基被更换所造成的一种遗传病。镰刀状细胞贫血病是因病人的红细胞在氧气不足的情况下变形而呈镰刀状。Glu 和Val 分子的侧链在性质上有很大的不同。Glu 侧链带负电荷，而Val侧链是一个非极性基团，所以使得HbS分子表面的负电荷减少，这种变化使患者的血红蛋白容易发生聚集并形成杆状多聚体，这就是导致红细胞变形的原因。
生物化学 一、名词解释 1.蛋白质变性与复性： 蛋白质分子在变性因素的作用下，高级构象发生变化，理化性质改变，失去生物活性的现象称为蛋白质的变性作用。 变性蛋白质在除去变性因素后，可缓慢地重新自发折叠成原来构象，并恢复原有的理化性质和生物活性，这种现象称为蛋白质的复性。 2.盐析与盐溶： 在蛋白质的水溶液中，加入大量高浓度的强电解质如硫酸铵、氯化钠、硝酸铵等，使蛋白质凝聚而从溶液中析出的现象叫盐析。 在蛋白质的水溶液中，加入低浓度的盐离子，会使蛋白质分子散开，溶解性增大的现象叫盐溶。 3.激素与受体： 激素是指机体内一部分细胞产生，通过扩散、体液运送至另一部分细胞，并起代谢调节控制作用的一类微量化学信息分子。 受体是指细胞中能识别特异配体（神经递质、激素、细胞因子）并与其结合，从而引起各种生物效应的分子，其化学本质为蛋白质。 4.增色效应与减色效应： 增色效应是指DNA变性后，溶液紫外吸收作用增强的效应。 减色效应是指DNA复性过程中，溶液紫外吸收作用减小的效应。 5.辅酶与辅基： 根据辅因子与酶蛋白结合的紧密程度分为辅酶和辅基， 与酶蛋白结合较松、用透析法可以除去的辅助因子称辅酶。 与酶蛋白结合较紧、用透析法不易除去的辅因子称辅基。 6.构型与构象： 构型是指一个分子由于其中各原子特有的固定空间排布，使该分子所具有的特定的立体化学形式。 构象是指分子中，不改变共价键结构，仅单键周围的原子旋转所产生的空间排布。即分子中原子的三维空间排列称为构象。 7.α-螺旋与β-折叠： α-螺旋是指多肽链的主链原子沿一中心轴盘绕，借助链内氢键维持的右手螺旋的稳定构象。
β-折叠是指两条或多条几乎完全伸展的多肽链(或同一肽链的不同肽段)侧向聚集在一起，相邻肽链主链上的NH和C=0之间形成氢链，这样的多肽构象即β-折叠。 8.超二级结构与结构域： 超二级结构是指蛋白质中相邻的二级结构单位(α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规卷曲)组合在一起，形成有规则的在空间上能辩认的二级结构组合体。又称为花样或模体称为基元。 结构域是指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体。 9.酶原与酶原激活： 酶原是指某些活性酶的无活性前体蛋白。 酶原激活是指无活性的酶原形成活性酶的过程。 10.Tm值与Km值： 通常把增色效应达到一半时的温度或DNA双螺旋结构失去一半时的温度叫DNA的熔点或熔解温度，用Tm 表示。 Km是酶促反应动力学中间产物理论中的一个常数，Km值的物理意义在于它是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。 二、填空题 1、20世纪50年代，Chargaff等人发现各种生物体DNA碱基组成有种的特异性，而没有组织的特异性。 2、DNA变性后，紫外吸收能力增强，生物活性丧失。 3、构成核酸的单体单位称为核苷酸，构成蛋白质的单体单位氨基酸。 4、嘌呤核苷有顺式、反式两种可能，但天然核苷多为反式。 5、X射线衍射证明，核苷中碱基与糖环平面相互垂直。 6、双链DNA热变性后，或在pH2以下，或pH12以上时，其OD260增加，同样条件下，单链DNA的OD260不变。 7、DNA样品的均一性愈高，其熔解过程的温度范围愈窄。 8、DNA所处介质的离子强度越低，其熔解过程的温度范围越宽。熔解温度越低。 9、双链DNA螺距为3.4nm，每匝螺旋的碱基数为10，这是B型DNA的结构。 10、NAD+，FAD和CoA都是的腺苷酸（AMP）衍生物。 11、酶活力的调节包括酶量的调节和酶活性的调节。 12、T.R.Cech和S.Altman因各自发现了核酶而共同获得1989年的诺贝尔化学奖。 13、1986年，R.A.Lerner和P.G.Schultz等人发现了具有催化活性的抗体，称为抗体酶。 14、解释别构酶作用机理的假说有齐变模型和序变模型。 15、固定化酶的理化性质会发生改变，如Km增大，Vmax减小等。 16、脲酶只作用于尿素，而不作用于其他任何底物，因此它具有绝对专一性，甘油激酶可以催化甘油磷酸
什么是蛋白质的变性作用？引起蛋白质变性的因素有哪些？有何临床意义？在某些理化因素作用下, 使蛋白质严格的空间结构破坏，引起蛋白质理化性质改变和生物学活性丧失的现象称为蛋白质变性。引起蛋白质变性的因素有：物理因素，如紫外线照射、加热煮沸等；化学因素，如强酸、强碱、重金属盐、有机溶剂等。临床上常常利用加热或某些化学士及使病原微生物的蛋白质变性，从而达到消毒的目的，在分离、纯化或保存活性蛋白质制剂时，应采取防止蛋白质变性的措施。 比较蛋白质的沉淀与变性 蛋白质的变性与沉淀的区别是：变性强调构象破坏，活性丧失，但不一定沉淀；沉淀强调胶体溶液稳定因素破坏，构象不一定改变，活性也不一定丧失，所以不一定变性。 试述维生素B1的缺乏可患脚气病的可能机理 在体内Vit B1 转化成TPP，TPP 是α-酮酸氧化脱羧酶系的辅酶之一，该酶系是糖代谢过程的关键酶。维生素B1 缺乏则TPP 减少，必然α-酮酸氧化脱羧酶系活性下降，有关代谢反应受抑制，导致ATP 产生减少，同时α-酮酸如丙酮酸堆积，使神经细胞、心肌细胞供能不足、功能障碍，出现手足麻木、肌肉萎缩、心力衰竭、下肢水肿、神经功能退化等症状，被通称为“脚气病”。 简述体内、外物质氧化的共性和区别 共性①耗氧量相同。②终产物相同。③释放的能量相同。
区别：体外燃烧是有机物的C 和H 在高温下直接与O2 化合生成CO2 和H2O，并以光和热的形式瞬间放能；而生物氧化过程中能量逐步释放并可用于生成高能化合物，供生命活动利用。 简述生物体内二氧化碳和水的生成方式 ⑴CO2 的生成：体内CO2 的生成，都是由有机酸在酶的作用下经脱羧反应而生成的。根据释放CO2 的羧基在有机酸分子中的位置不同，将脱羧反应分为: α-单纯脱羧、α-氧化脱羧、β-单纯脱羧、β-氧化脱羧四种方式。 ⑵水的生成：生物氧化中的H2O 极大部分是由代谢物脱下的成对氢原子(2H)，经一系列中间传递体(酶和辅酶)逐步传递，最终与氧结合产生的。 试述体内两条重要呼吸链的排练顺序，并分别各举两种代谢物氧化脱氢 NADH 氧化呼吸链：顺序：NADH→FMN/（Fe-S）→CoQ→Cytb→c1→c→aa3 如异柠檬酸、苹果酸等物质氧化脱氢，生成的NADH+H+均分别进入NADH 氧化呼吸链进一步氧化，生成2.5 分子ATP。 琥珀酸氧化呼吸链：FAD·2H/（Fe-S）→CoQ→Cytb→c1→c→aa3 如琥珀酸、脂酰CoA 等物质氧化脱氢，生成的FAD·2H 均分别进入琥珀酸氧化呼吸链进一步氧化，生成1.5 分子ATP。 试述生物体内ATP的生成方式 生物体内生成ATP 的方式有两种：底物水平磷酸化和氧化磷酸化。
生化复习资料 第一章 一、蛋白质的生理功能 蛋白质是生物体的基本组成成分之一，约占人体固体成分的45%左右。蛋白质在生物体内分布广泛，几乎存在于所有的组织器官中。蛋白质是一切生命活动的物质基础，是各种生命功能的直接执行者，在物质运输与代谢、机体防御、肌肉收缩、信号传递、个体发育、组织生长与修复等方面发挥着不可替代的作用。 二、蛋白质的分子组成特点 蛋白质的基本组成单位是氨基酸 ?编码氨基酸:自然界存在的氨基酸有300余种，构成人体蛋白质的氨基酸只有20种，且具有自己的遗传密码。各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。 ?每100mg样品中蛋白质含量（mg%）：每克样品含氮质量（mg）×6.25×100。 氨基酸的分类 ?所有的氨基酸均为L型氨基酸（甘氨酸）除外。 ?根据侧链基团的结构和理化性质，20种氨基酸分为四类。 1．非极性疏水性氨基酸：甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、缬氨酸（Val）、亮氨酸（Leu）、异亮氨酸（Ile）、苯丙氨酸（Phe）、脯氨酸（Pro）。 2．极性中性氨基酸：色氨酸（Trp）、丝氨酸（Ser）、酪氨酸（Tyr）、半胱氨酸（Cys）、蛋氨酸（Met）、天冬酰胺（Asn）、谷胺酰胺（gln）、苏氨酸（Thr）。 3．酸性氨基酸：天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）。 4．碱性氨基酸：赖氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）、组氨酸（His）。 ?含有硫原子的氨基酸：蛋氨酸（又称为甲硫氨酸）、半胱氨酸（含有由硫原子构成的巯基－SH）、胱氨酸（由两个半胱氨酸通过二硫键连接而成）。 ?芳香族氨基酸：色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸。 ?唯一的亚氨基酸：脯氨酸，其存在影响α-螺旋的形成。 ?营养必需氨基酸：八种，即异亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、亮氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、赖氨酸。可用一句话概括为“一家写两三本书来”，与之谐音。 氨基酸的理化性质 ?氨基酸的两性解离性质：所有的氨基酸都含有能与质子结合成NH4＋的氨基；含有能与羟基结合成为COO－的羧基，因此，在水溶液中，它具有两性解离的特性。在某一pH环境溶液中，氨基酸解离生成的阳郭子及阴离子的趋势相同，成为兼性离子。此时环境的pH值称为该氨基酸的等电点（pI）， 氨基酸带有的净电荷为零，在电场中不泳动。pI值的计算如下：pI＝1/2（pK 1 + pK 2 ）,(pK 1 和pK 2 分 别为α-羧基和α-氨基的解离常数的负对数值)。 ?氨基酸的紫外吸收性质 ?吸收波长：280nm ?结构特点：分子中含有共轭双键 ?光谱吸收能力：色氨酸＞酪氨酸＞苯丙氨酸 ?呈色反应：氨基酸与茚三酮水合物共加热，生成的蓝紫色化合物在570nm波长处有最大吸收峰；蓝紫色化合物＝（氨基酸加热分解的氨）＋（茚三酮的还原产物）＋（一分子茚三酮）。 肽的相关概念 ?寡肽：小于10分子氨基酸组成的肽链。 ?多肽：大于10分子氨基酸组成的肽链。 ?氨基酸残基：肽链中因脱水缩合而基团不全的氨基酸分子。 ?肽键：连接两个氨基酸分子的酰胺键。 ?肽单元：参与肽键的6个原子Cα1、C、O、N、H、Cα2位于同一平面，组成肽单元。
自动化流水线 所属系列：贝克曼 PP 实验室自动化产品 美国贝克曼库尔特公司的实验室自动化系统是目前市场上唯一具有完备的前处理和后处理系统的生产厂家，完整的自动化流水线和相应的信息系统拥有全世界唯一符合NCCLS实验室自动化系统全部标准的荣耀。在美国实验室自动化产品市场中占有率第一，达到了55％（第二名仅为27％，CAP TODAY，2008年3月）。自从1994年第一条自动化流水线安装以来，贝克曼库尔特公司为临床实验室提供了最全面、最有质量保证的产品和服务。 贝克曼库尔特流水线采用创新的整体解决方案，使流程简单化、自动化，消除“瓶颈”，提高效率，保证质量，为临床提供及时、可靠、稳定的检测结果。使临床实验室达到国际一流水平。 简而言之，可从以下方面获得最大的收益： λ简化测试步骤，消除耗时、易出错的人工操作 λ降低潜在标本识别错误 λ有效的进行人力资源分配 λ缩短出报告时间（TAT），减少可变因素为临床提供最及时的检测结果 λ对当今信息技术完美应用 λ提供新的测试参数和可扩展的测试项目菜单 λ将各种新的特点如真正的随机任选上样，自动重检和折返测试，以及自动数据解释
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生物化学复习资料 第一章蛋白质化学 第一节蛋白质的基本结构单位——氨基酸 凯氏定氮法：每克样品蛋白质含量（g）=每克样品中含氮量x 6.25 氨基酸结构通式： 蛋白质是由许多不同的α-氨基酸按一定的序列通过肽键缩合而成的具有生物学功能的生物大分子。 氨基酸分类：（1）脂肪族基团：丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、脯氨酸（2）芳香族基团：苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸（3）含硫基团：蛋氨酸（甲硫氨酸）、半胱氨酸（4）含醇基基团：丝氨酸、苏氨酸（5）碱性基团：赖氨酸、精氨酸、组氨酸（6）酸性基团：天冬氨酸、谷氨酸（7）含酰胺基团：天冬酰胺、谷氨酰胺 必需氨基酸（8种）：人体必不可少，而机体内又不能合成，必需从食物中补充的氨基酸。蛋氨酸（甲硫氨酸）、缬氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸 氨基酸的两性性质：氨基酸可接受质子而形成NH3+，具有碱性；羧基可释放质子而解离成COO-，具有酸性。这就是氨基酸的两性性质。 氨基酸等电点：指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值。 蛋白质中的色氨酸和酪氨酸两种氨基酸具有紫外吸收特性，在波长280nm处有最大吸收值。镰刀形细胞贫血：血红蛋白β链第六位上的Glu→Val替换。 第二节肽 肽键：一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水综合而形成的酰胺键叫肽键。肽键是蛋白质分子中氨基酸之间的主要连接方式，它是由一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基缩合脱水而形成的酰胺键。 少于10个氨基酸的肽称为寡肽，由10个以上氨基酸形成的肽叫多肽。 谷胱甘肽（GSH）是一种存在于动植物和微生物细胞中的重要三肽，含有一个活泼的巯基。参与细胞内的氧化还原作用，是一种抗氧化剂，对许多酶具有保护作用。 化学性质：（1）茚三酮反应：生产蓝紫色物质（2）桑格反应 第三节蛋白质的分子结构 蛋白质的一级结构：是指氨基酸在肽链中的排列顺序。 蛋白质的二级结构：是指蛋白质分子中多肽链本身的折叠方式。二级结构有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲。 蛋白质的三级结构：指蛋白质在二级结构的基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的构象。 蛋白质的四级结构：指数条具有独立的三级结构的多肽链通过非共价键相互连接而成的聚合体结构。 维持蛋白质一级结构的化学键有肽键和二硫键，维持二级结构靠氢键，维持三级结构和四级结构靠次级键，其中包括氢键、疏水键、离子键和范德华力。 第四节蛋白质的重要性质书P16 蛋白质的等电点：当蛋白质解离的阴阳离子浓度相等即净电荷为零，此时介质的pH即为蛋白质的等电点。
蛋白质结构与功能的关系解答一 （1）蛋白质一级结构与功能的关系 ①一级结构是空间构象的基础 蛋白质一级结构决定空间构象，即一级结构是高级结构形成的基础。只有具有高级结构的蛋白质才能表现生物学功能。实际上很多蛋白质的一级结构并不是决定蛋白质空间构象的惟一因素。除一级结构、溶液环境外，大多数蛋白质的正确折叠还需要其他分子的帮助。这些参与新生肽折叠的分子，一类是分子伴侣，另一类是折叠酶。 ②一级结构是功能的基础 一级结构相似的多肽或蛋白质，其空间构象和功能也相似。相似的一级结构具有相似的功能，不同的结构具有不同的功能，即一级结构决定生物学功能。 ③蛋白质一级结构的种属差异与分子进化 对于不同种属来源的同种蛋白质进行一级结构测定和比较，发现存在种属差异。蛋白质一定的结构执行一定的功能，功能不同的蛋白质总是有不同的序列。如果一级结构发生变化，其蛋白质的功能可能发生变化。 ④蛋白质的一级结构与分子病 蛋白质的氨基酸序列改变可以引起疾病，人类有很多种分子病已被查明是某种蛋白质缺乏或异常。这些缺损的蛋白质可能仅仅有一个氨基酸发生异常所造成的，即所为的分子病。如镰状红细胞贫血症（HbS）。 （2）蛋白质高级结构与功能的关系 ①高级结构是表现功能的形式蛋白质一级结构决定空间构象，只有具有高级结构的蛋白质才能表现出生物学功能。 ②血红蛋白的空间构象变化与结合氧
血红蛋白（Hb）是由α2β2组成的四聚体。每个亚基的三级结构与肌红蛋白（Mb）相似，中间有一个疏水“口袋”，亚铁血红素位于“口袋”中间，血红素上的Fe2+能够与氧进行可逆结合。当第一个O2与Hb结合成氧合血红蛋白（HbO2）后，发生构象改变犹如松开了整个Hb分子构象的“扳机”，导致第二、第三和第四个O2很快的结合。这种带O2的Hb亚基协助不带O2亚基结合氧的现象，称为协同效应。O2与Hb结合后引起Hb构象变化，进而引起蛋白质分子功能改变的现象，称为别构效应。小分子的O2称为别构剂或协同效应剂。Hb则称为别构蛋白。 ③构象病因蛋白质空间构象异常变化——相应蛋白质的有害折叠、折叠不能，或错误折叠导致错误定位引起的疾病，称为蛋白质构象病。其中朊病毒病就是蛋白质构象病中的一种。 蛋白质结构与功能的关系解答二 (一)蛋白质一级结构与功能的关系要明白三点： 1.一级结构是空间构象和功能的基础，空间构象遭破坏的多肽链只要其肽键未断，一级结构未被破坏，就能恢复到原来的三级结构，功能依然存在。 2.即使是不同物种之间的多肽和蛋白质，只要其一级结构相似，其空间构象及功能也越相似。 3.物种越接近，其同类蛋白质一级结构越相似，功能也相似。 但一级结构中有些氨基酸的作用却是非常重要的，若蛋白质分子中起关键作用的氨基酸残基缺失或被替代，都会严重影响其空间构象或生理功能，产生某种疾病，这种由蛋白质分