[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .
It is favorable to promote spore formation .
适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌
3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)
KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g
MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1ｇ
Ｎa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g
Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)
Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g
Adjust (调) pH to 7.2
适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌
4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)
Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g
Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml
[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。)
5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基I )
Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g
Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g
Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml
Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0
适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌
6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ(乳酸菌培养基Ⅱ)
Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g
Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g
Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g
Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g
MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g
Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8
适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）
7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）Peptone（蛋白胨）10g Yeast extract （酵母膏）5g
Glucose （葡萄糖）1g Distilled water （蒸馏水）1L
8. Glycerol Agar （甘油琼脂）
Peptone （蛋白胨）5g Beef extract （酵母膏）3g
Glycerol （甘油）20g Top water （自来水）1000ml
Agar （琼脂）15g pH 7.0-7.2
9. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9
Yeast eztract （酵母膏）1g Soil eztract （土壤浸提液）200ml
Mannitol （甘露醇）10g Agar （琼脂）15g
Distilled water （蒸馏水）800ml pH 7.2
[Note]：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃, then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围：大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、
大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌
10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂)
Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g
Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml
11. Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂）
Glucose （葡萄糖）10g Asparagine （天门冬素）0.5g
K2HPO4 0.5g Water （水）1000ml
适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）
12. Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂）
KNO3 1g Soluble starch（可溶性淀粉）20g
K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g
NaCl 0.5g FeSO4 0.01g
Agar （琼脂）20g water （水）1000ml
适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌
13. Wort Agar （麦芽汁琼脂）
Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释至12柏林，加琼脂15克，溶化后分装。15磅灭菌30分钟。)
适用范围：克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊酵母、伯顿毕赤酵母、膜醭毕赤酵母、粘红酵母、小红酵母、胶红酵母、深红酵母、卡尔斯伯酵母、酿酒酵母、椰园酿酒酵母、发酵性酵母、洛格酵母、罗斯酵母、鲁氏酵母多形鲁氏酵母、威尔酵母、酵母、路德类酵母、栗酒裂殖酵母、掷抱酵母、贝雷丝孢酵母、皮状丝孢酵母、糙孢曲霉、无壳曲霉、鲜橙曲霉、红曲霉、紫红曲霉、红色红曲霉、红曲霉菌
14. Potato Dextrose Agar PDA (马铃薯、葡萄糖琼脂)
Potato extract (马铃薯汁) 1000ml Dextrose(glucose) (葡萄糖) 20g
Agar (琼脂) 20g
[Note]: Potato extract: Slice potatoes thin. Add 1000ml of water, immediately to prevent Oxidtion of juice and boil until soft. (approximately 30min.). Filter through cotton-cloth. Autoclave at 115℃for 20 minutes.（注：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。）适用范围：酵米面假单胞菌（酵米面黄杆菌）、白色链霉菌、烬灰链霉菌、青色链霉
菌、球孢链霉菌、灰色链霉菌、龟裂链霉菌、伞枝梨头霉、雅致放射毛霉、棒曲霉、米曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛壳、长刺毛壳、橄榄包毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、束状刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地生翅孢壳、串珠镰孢、尖镰孢、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、玉蜀黍长蠕孢、深黄被孢霉、小被孢霉、多头被孢、拉曼被孢霉、葡萄色被孢霉、生香毛霉、卷枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟青霉、拟青霉、球形阜孢、白腐菌、少根根霉、华根霉、科恩根霉、戴尔根
霉、日本根霉、爪哇根霉、米根霉、点头根霉、绿穂霉、簇孢匍柄霉、雅致枝霉、康宁木霉、绿色木霉、黄萎枝孢、大丽花枝孢
15. Czapek′s Agar（察氏琼脂）
Sucrose （蔗糖）30g NaNO3 3g
MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g
FeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1g
Agar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
适用范围：红霉素链霉菌、洋葱曲霉、金头曲霉、泡盛曲霉、泡盛曲霉烟色变种、亮白曲霉、炭黑曲霉、鹿皮色曲霉、棒曲霉、无花果曲霉、黄柄曲霉、黄曲霉、烟曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、赭曲霉、米曲霉、寄生曲霉、酱油曲霉、土曲霉、宇佐美曲霉、焦曲霉、杂色曲霉、温特曲霉、阿达青霉、产黄青霉、黄绿青霉、桔青霉、顶青霉、园弧青霉、绳状青霉、灰黄青霉、岛青霉、淡紫青霉、特异青霉、赭绿青霉、产紫青霉、娄地青霉、小刺青霉、荨麻青霉、
16. Concentrated Sucrose Czapek′s (浓糖察氏琼脂)
Sucrose (蔗糖) 200g NaNO3 3g
MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g
FeSO4.4H2O 0.01g K2HPO4 1g
Agar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
适用范围：谢瓦曲霉
17. Synthetic Potato Medium (综合马铃薯培养基)
20%Potato extract (马铃薯汁) 1L Glucose (葡萄糖) 20g
KH2PO4 3g MgSO4.7H2O 1.5g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace (微量) Agar (琼脂) 15g
适用范围：米曲霉、酱油曲霉、栖土曲霉、宇佐美曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛客、长刺毛壳、球毛壳、橄榄包毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、多主枝孢、束状刺盘孢、葫芦科刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地生翅孢壳、串珠镰孢、蚀脉镰孢霉、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、瓶毛壳、金龟子绿僵菌、生香毛霉、卷枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟青霉、淡紫色拟青霉、拟青霉、白腐菌、少根根霉、根霉属的菌、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、台湾根霉、日本根霉、爪哇根霉、黑根霉、雪白根霉、少根根霉、米根霉、点头根霉、三宝垄根霉、根霉属的种、绿穂霉、康宁木霉、木素木霉、拟康氏木霉、木霉、粉红木霉、绿色木霉、黄萎枝孢、大丽花枝孢、双孢蘑菇、大肥菇、发光假蜜环菌、木耳、皱木耳、毛木耳、大秃马勃、长根菇、金针菇、棘托竹荪、短裙竹荪、短裙竹荪东北变种（暂定）、长裙竹荪、白鬼笔、无裙竹荪、宽鳞大孔菌、凸圆灵芝（白芝）、紫芝、灵芝（红芝，赤芝，日本灵芝，韩国灵芝）、灰树花、猴头菌、香菇、粗毛斗菇、洁丽香菇、豹皮菇、玉蕈、真姬菇、安络小皮伞菌、鬼毛针、黑柄皮伞菌、尖顶羊肚菌、圆锥羊肚菌、高羊肚菌、黑脉羊肚菌、羊肚菌、滑菇、光帽黄伞、尖鳞黄伞、金顶側耳、榆黄磨、金顶磨、白黄側耳、紫孢平菇、姬菇、裂皮側耳、拟囊体側耳（鲍鱼菇）、真线側耳短孢变种、真线側耳、扇形平菇、扁形平菇、佛罗里达无孢子側耳、佛罗里达側耳、蚝菇、糙皮側耳、平菇、贝形側耳、鹰翅菌、肺形側耳、柳树菌、树窝、扁柄側耳、美味側耳、紫孢側耳、粉褶側耳、粉红側耳、凤尾菇、漏斗状側耳、榆干側耳、大榆磨、側耳、茯苓、黑菇、烟色红菇、裂褶菌、鸡纵、金耳、黄木耳、银耳、白木耳、紫晶口磨、银丝菇、丝盖小包脚菇、草菇
18. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)
Mix corn meal with water [20:100(W/V)] well . Distribute the mixture into 100ml bottles , each bottle contains about 30ml of the mixture . Autoclave at 121℃for 30minutes . (20%玉米粉装瓶，15磅灭菌30分钟。)
19. Filter Paper Medium （滤纸培养基）
（NH4）2SO4 1g KH2PO4 1g
MgSO4.7H2O 0.7g NaCl 0.5g
Distilled water （蒸馏水）1000ml A strip of filter paper （滤纸条）6ⅹ1cm （厘米）20. Soybean Cake Meal Agar (黄豆饼粉琼脂)
10% infusion of soybean cake meal (10%黄豆饼粉浸汁) 1000ml
Glucose (葡萄糖) 10g NaCl 2.5g
21. Sawdust，Wheat-bran Medium （木屑、麸皮培养基）
Sawdust of broad leaf tree 75g Wheat bran 25g
Preparation：Mix these two ingredients well . Add appropriate water and blend (the amount of water added may be becided by kneading with fingers ). Fill the mixture into broad mouth of bottles . Stick a hole on the filling, put the cotton pulg in bottle mouth .
壳斗科植物或阔叶树的木屑75克麸皮25克
制法：加水适量充分混匀，水量以手捏时指间有水珠为宜，装瓶并压紧，在中心处扎一小洞，堵上棉塞，20磅灭菌1小时。
22. Pine Block or Pine Sowdust Medium （松木条或松木屑培养基）
1. Cut 1021 cm pine biocks and immerse them in 1-2% sucrose solution . Alow the biocks fully absorbing suger solution .Fill the biocks into broad month of bottle . Park the bottle with paper . Autoclave at 20 lbs for 1 hr . (将10ⅹ2ⅹ1厘米的松木条浸泡在1-2%的蔗糖水中。使木条吸足糖水，装瓶不宜过紧，用纸包好，20磅灭菌1小时。)
2. Pine Sawdust Medium
Pine Sawdust (松木屑) 75% Rice bran (米糠) 23-24%
Socrose (蔗糖) 1-2% Water (appropriate)水（适量）
Autoclave at 20 lbs for 1 hr.(20磅灭菌1小时）
23. Rice Straw. Dung Medium (稻草、马粪培养基)
Dried horse dung (or cow dung) （干马粪或牛粪）65%
Died straw （干稻草）35% Urea （尿素）0.5%
Calcium superhosphate （过磷酸钙）0.7% Gypsum powder（石膏粉）1%
Ammonium sulphate （硫酸铵）0.3%
[Note]: Add appropriate water, pile them up and cause them fermentation. （水适量进行堆积发酵）
24. Straw Rice Bran Medium （稻草、米糠培养基）
Dried straw （干稻草）75-80% Rice bran （米糠）20-25%
[Note]：Select no mouldy straw and cut them about 3 cm in length. Immerse them in fresh water for 12 hr. Allow the straw fully (the amount of water added may be decided by kneading with fingers. It is right when a drop of water appeared between fingers). ( [注]：选无霉稻草，切成长约3厘米的小段，用清水浸泡12小时，使充分吸水，然后倾去水，加米糠和水，水量以用手捏时指间有水珠为宜。)
25. Rice Medium (米饭培养基)
Fill 10g of rice into a 50ml of Erlenmeyer flask. Add 20-30ml water. Autoclave at 121℃for 30 minutes (or fill 2g of rice into a 15ⅹ150mm tube). Add 6 ml of water. Autoclave at 121℃for 30 minutes. (取大米10克，入50毫升椎形瓶中，水20-30毫升于15磅灭菌30分钟即成，或取大米2克，装入15ⅹ150毫米试管中，加水6毫升，于15磅灭菌30分钟。)
26. Filter Paper Medium (滤纸条培养基)
(NH4)2SO4 1g KH2PO4 1g
MgSO4.7H2O 0.5g Yeast Extract (酵母膏) 0.1g
Distilled Water (蒸馏水) 1000ml
Strip of filter paper 1ⅹ7 cm (滤纸条1ⅹ7 厘米)
[Note]：Siddolve the above ingredients. Distribute the liqid medium into tubes (each tube contains 1ml of the broth). Autoclave at 121℃for 30 minutes. Then put one or two sterilized strips of filter paper into a tube aseptically. (将上述溶液分配成溶液后分装入试管，每管1毫升，15磅灭菌30分钟。再将灭菌的滤纸条（1条或2条）投入试管中即好使用。)
27. Yeast Extract-Medium Extract Agar I (酵母膏、麦芽膏琼脂)
Yeast extract (酵母膏) 10g Mall extract (麦芽膏) 10g
Glucose (葡萄糖) 4g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
Agar (琼脂) 20g pH 7.0
适用范围：红霉素链霉菌
28. Yeast Extract Peptone （酵母膏、蛋白胨琼脂）
Yeast extract （酵母膏）1g Multi-peptone（多蛋白胨）2g
Beef extract （牛肉膏）1g Glucose （葡萄糖）10g
Agar （琼脂）20g Distilled water （蒸馏水）1L
29. Glucose Yeast Extract Starch Agar （葡萄糖、酵母、淀粉琼脂）
Glucose （葡萄糖）10g Yeast extract （酵母膏）10g
Starch （淀粉）10g NaCl 5g
CaCO3 3g Agar （琼脂）20g
Distilled water （蒸馏水）1L pH 7.0
30. Wheat Bran Medium （麸皮培养基）
Wheat bran （麸皮）36g （NH4）2HPO4 10g
K2HPO4 0.2g MgSO4。7H2O 0.1g
Agar （琼脂）20g Distilled water （蒸馏水）1L
31. Yeast Sporulation Medium (酵母菌产生子囊孢子培养基)
(1) Kleyn Medium
KH2PO4 0.012% K2HPO4 0.02%
Sodium acetate (醋酸钠) 0.5% Glucose (葡萄糖) 0.062%
NaCl 0.062% Peptone (蛋白胨) 0.25%
Biotin (生物素) 2μg% Agar (琼脂) 2%
Trace element solution (混合盐类) 1ml/100ml
[Note]: Trace element solution （混合盐类溶液）：MgSO4.7H2O 0.4%, NaCl 0.4%, CuSO4.5H2O 0.002%, MnSO4.4H2O 0.2%, FeSO4.4H2O 0.2%
(2) Gorodkowa Medium
Glucose (葡萄糖) 0.1% Peptone (蛋白胨) 1%
NaCl 0.5% Agar (琼脂) 2%
(3) McClary Medium
Glucose (葡萄糖) 0.1% KCl 0.18%
Yeast juice (酵母汁) 0.25% Sodium actate (醋酸钠) 0.82%
Agar (琼脂) 1.5%
32. BPY Medium (BPY 培养基)
Beef extract (牛肉膏) 5g Prptone (蛋白胨) 10g
NaCl 5g Yeast extract (酵母膏) 5g
Glucose (葡萄糖) 5g Agar (琼脂) 1-2%
Distilled (蒸馏水) 1000ml pH 7.0
适用范围：大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、恶臭假单胞菌
33. LB Medium (LB 培养基)
Yeast extact (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 10g
NaCl 10g Agar (琼脂) 1-2%
Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.0
适用范围：大肠埃希氏菌（大肠杆菌）
34. Penssay Broth (Penssay 肉汤)
Beef extract (牛肉膏) 1.5g Yeast extract (酵母膏) 1.5g
Tryptone (胰蛋白胨) 5g NaCl 3.5g
Glucose (葡萄糖) 1g K2HPO4.3H2O 4.8g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.2
35. Blond Agar (血琼脂培养基)
Peptone (蛋白胨) 10g Glucose (葡萄糖) 2g
NaCl 5g NaH2PO4 2.5g
Sodium citrate (柠檬酸钠) 5g Brain infusion (脑浸汁) 800ml
Pig heart infusion (猪心浸) 200ml Sleep Blood (羊血) 10%
[Note]：Preparation of pig brain and pig heart infusion：
（1）Smash up 100g fresh pig heart （without fat and blood vessel）.Add distilled water up to 1000ml；
（2）Cut 200g fresh pig brain (without blood vessel). Add distilled water up to 1000ml；
（3）Keep the two infusions at 50℃for 1 hr , then boil for 15 minutes；
（4）Cool and filtrate through gauze . [注]猪心和猪脑浸汁法：（1）新鲜猪心除去心头和脂肪，搅碎100克加蒸馏水至1000毫升；（2）新鲜猪脑除去血管，取200克加蒸馏水至1000毫升；（3）50℃保温1小时，然后煮开15分钟；（4）冷却后用纱布过滤备用。
36. Cellulose﹣decomposing Bacteria Synthetic Medium (纤维细菌合成培养基)
NaCl 6g MgSO4.7H2O 0.1g
KH2PO4 0.5g CaCl2 0.1g
K2HPO4 2.0g Yeast extract (酵母膏) 1.0g
(NH4)2SO4 2.0g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
Filter paper strip: one strip (滤纸条：一片) pH 7.0-7.4
[Note]: So；id medium for cellulose-decomposing bacteria: Carboxymethyl Cellulose 2% Agar 2%. （斜面培养基去滤纸条用2%琼脂及2%羧甲基纤维素钠CMCNa ）
37. Clostridium Pasreurianum Synthetic Medium （巴氏梭状芽孢杆菌合成培养基）
Glucose （葡萄糖）1% MnSO4 0.001%
KH2PO4 0.05% FeSO4 0.001%
K2HPO4 0.05% Yeast extract（酵母膏）0.1%
MgSO4.7H2O 0.02% Peptone (蛋白胨) 0.01%
NaCl 0.001% CaCO3 0.5%
Distille water (蒸馏水) 100% pH 7.0
38. Yeast Extract-Medium Extract Agar Ⅱ(酵母膏、麦芽膏琼脂Ⅱ)
Yeast extract （酵母膏）4g Mall extract （麦芽膏）10g
Glucose （葡萄糖）4g Agar （琼脂）17g
Distilled water （蒸馏）1000ml pH 7.3
39. Oatemeal Agar （燕麦粉琼脂）
Oatemeal（infusion）[燕麦粉浸液] 20g Agar （琼脂）18%
Trace element solution （迹量盐溶液）1ml
Distilled water up to （用蒸馏水补充至1000毫升）1000ml pH 7.2
[Note]：Trace element solution (迹量盐溶液)：
FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g
ZnSO4.7H2O 0.1g Distilled water (蒸馏水) 100ml
40. Calcium Malate Agar (苹果酸钙琼脂)
Calium malate (苹果酸钙) 10g K2HPO4 0.5g
NH4Cl 0.5g Glycerol (甘油) 10g
Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
41. Thiobacillus Ferrooxidans Medium (氧化亚铁硫杆菌培养基)
(NH4)2SO4 0.15g KH2PO4 0.05g
KCl 0.05g MgSO4.7H2O 0.5g
Ca(NO3)2.4H2O 0.01g FeSO4.7H2O 50g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 2.0
42. Thiobacillus Thiooxidans Medium (氧化硫硫杆菌培养基)
(NH4)2SO4 0.3g KH2PO4 3-4g
CaCl2 (anhydrous) [无水] 0.25g MgSO4.7H2O 0.5g
FeSO4.7H2O 0.001g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
43. Plasma Substitute Medium (代血浆培养基)
Sucrose (蔗糖) 12.5-15% Peptone (蛋白胨) 0.5%
KH2PO4 0.03% Na2HPO4.12H2O 0.14%
44. Skim Milk Medium (脱脂牛奶培养基) ATCC 183
脱脂牛奶100g 去离子水1000ml
适用范围：保加利亚乳杆菌、嗜热乳酸链球菌
45. Pea Agar (豌豆琼脂)
Glucose (葡萄糖) 1% Peptone (蛋白胨) 0.5%
NaCl 0.5% Agar (琼脂) 2.0%
Pea infusion (counted by NH2) [豌豆浸汁(以NH2计)] 12-14 mg∕100
pH (before sterilization) [消前] 7.2-7.5
[Note]: Preparetion of pea infusion (豌豆浸汁的制法) :
Preparetion 900g of pea. Put them into a 5L bottle, and add 3L of tap water. Adjust pH to 4.3-4.5 by using of sulphuric acid. Add 30ml of chloroform for antisepsis. Plug with rubber stopper and bind up the bottle mouth with gauge in order to avoid that the stopper fall off due to gas pressure. Place the bottle at 37℃for 7-10 days. Filter the infusion, then boil the filtrate to escape the chloroform. Filter again Distribution and autoclave at 120℃for 30 minutes. Store at cool contition . (称取白豌豆900克，置于5公升广口瓶中，加自来水3公升，用硫酸调pH至4.3-4.5，再加氯仿30毫升（防腐），加胶塞并用纱布扎口（防止冲脱），放37℃恒温室7-10天。取出用滤纸过滤，滤液煮沸20分钟，以除氯仿，并再次以滤纸过滤，除沉淀。滤液分装，于120℃30分钟灭菌。后冷藏备用。) The standard quality of pea infusion as following (豌豆浸汁质量标准)：
Aminonitrogen（氨基酸）: 160-200 mg∕100ml
Soluble phosphoruse（溶磷）: 400-600 μg∕ml
Color（色泽）: auratus,transparent （金黄、透明）
46. Wheat Bran Medium (麦麸琼脂)
Wheat bran (麦麸) 3.6% (NH4)2HPO4 0.3%
K2HPO4 0.02% MgSO4.7H2O 0.01%
Agar (琼脂) 2% pH 7.0
适用范围：金霉素链霉菌、红霉素链霉菌
47. Glucose Yeast Extract Agar (葡萄糖、酵母膏琼脂)
Glucose (葡萄糖) 10g Yeast extract (酵母膏) 10g
Water (水) 1000ml Agar (琼脂) 15g
48. MMN Medium (MMN培养基)
CaCl2 0.05g MgSO4 0.15g
NaCl 0.025g FeCl3 (1%) 1.2ml
KH2PO4 0.5g Vitamib B1 (硫胺素) 100μg
(NH4)2HPO4 0.25g Wort (12 Be′) 100ml
Glucose (葡萄糖) 10-15g Citric acid (柠檬酸) 0.2g
Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 5.5 (左右)
适用范围：蜜环菌
49. Starch Agar (淀粉琼脂)
Soluble starch (可溶性淀粉) 10g NaNO3 1g
MgCO3 1g K2HPO4 0.3g
NaCl 0.5g Agar (琼脂) 20g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml
50. 5 Be′Wort Agar (5 Be′麦芽汁琼脂)
适用范围：园弧青霉、少根根霉、日本根霉、爪哇根霉51. 5 Be′Koji Extract Agar (5 Be′米曲汁琼脂)
适用范围：华根霉、三宝垄根霉
52. 发根农杆菌培养基（YEB）
Beef extract (牛肉浸膏) 5g/L Yeast extract (酵母膏) 1g/L Peptone (蛋白胨) 5g/L Sucrose (蔗糖) 5g/L
MgSO4.7H2O 0.4g/100ml Agar (琼脂) 1.5g/100ml
适用范围:青枯假单胞菌
53. 青枯菌培养基(Tm)
Peptone (蛋白胨) 10g Casein (干酪素水解物产) 1g Glucose (葡萄糖) 5g Ddhro (纯水) 1000ml
Agar(琼脂) 15g pH 7.0
54. YM (Yeast Malt Agar)
酵母膏 3.0g 麦芽汁 3.0g
蛋白胨 5.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml
可溶性淀粉10.0g K2HPO4 1.0g
MgSO4.7H2O 1.0g NaCl 1.0g
(NH4)2SO4 2.0g CaCO3 2.0g
FeSO4.7H2O 0.001g MnCl2.7H2O 0.001g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
56. Trypton Soy Agar
胰蛋白胨17.0g 大豆胨 3.0g
葡萄糖 2.5g 琼脂20.0g
NaCl 5.0g K2HPO4 2.5g
蒸馏水1000ml
57. NA (Nutrient Agar)
牛肉膏 3.0g 蛋白胨 5.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
58. 甘露(糖)醇琼脂(ATCC 1)
酵母膏 5.0g 蛋白胨 3.0g
甘露(糖)醇25.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
59. Marine琼脂2216 (ATCC 2)
蛋白胨 5.0g 酵母膏 1.0g
柠檬酸铁0.1g 溴化钾0.08g
NaCl 19.45g MgCl2 8.8g
Na2SO4 3.24g CaCl2 1.8g
KCl 0.55g NaHCO3 0.16g
NH4NO3 0.0016g Na2HPO4 0.008g
氯化锶0.034g 硼酸0.022g
硅酸钠0.004g 氟化钠0.0024g
琼脂15.0g 蒸馏水1000ml
60. 兔血琼脂(ATCC 4)
牛心(取其浸液) 500.0g 胰蛋白胨(Tryptose) 10.0g
NaCl 5.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml pH 6.6-7.0
61. 孢子形成培养基(ATCC 5)
酵母膏 1.0g 牛肉膏 1.0g
胰蛋白胨 2.0g 葡萄糖10.0g
FeSO4 微量琼脂15.0g
蒸馏水1000ml pH 7.2
62. Trypticase Soy Agar (ATCC 18)
Trypticase Soy Broth 30.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
63. YPAD (ATCC 109)
酵母膏10.0g 蛋白胨20.0g
葡萄糖20.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 7.0
64. SP (ATCC 432)
棉子糖 1.0g 蔗糖 1.0g
半乳糖1g 可溶性淀粉5g
水解酪蛋白 2.5g 琼脂20.0g
MgSO4.7H2O 0.5g K2HPO4 0.25g
蒸馏水1000ml pH 自然
65. 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)
胰蛋白胨15.5g 大豆蛋白胨 5.0g
NaCl 5.0g 酵母膏 6.5g
琼脂15.0g 蒸馏水1000ml
蛋白胨 5.0g 酵母膏15.0g
K2HPO4 3.0g 葡萄糖 2.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
67. TY (Yeast Tryptone Agar)
蛋白胨10.0g 酵母膏 5.0g
葡萄糖 1.0g NaCl 5.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
68. 硫醇(Thiol)培养基(ATCC 49)
示蛋白胨(Proteose Peptone No.3,Difco) 10.0g 酵母膏 5.0g 葡萄糖 1.0g NaCl 5.0g
硫醇复合物8.0g 琼脂 1.0g
p-氨基苯甲酸0.05g pH 6.9-7.3
69. Czapek＇Dox 琼脂培养基(ATCC 134)
Czapek＇Dox Broth 35.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
蛋白胨 5.0g 甘露醇 5.0g
谷氨酸钠 1.15g 生物素0.0001g
K2HPO4 0.25g NaCl 0.1g
MgSO4.7H2O 0.1g 酵母膏 2.5g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
氯霉素(终浓度) 50μg/ml
71. Eclb Broth
蛋白胨10.0g 酵母膏 5.0g
NaCl 5.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml 氨苄青霉素(终浓度) 300μg/ml 72. Bennetts Agar (IFO 228)
酵母膏 1.0g 牛肉膏 1.0g
NZ Amine,type A 2.0g 葡萄糖10.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
73. Harroldˊs M40Y (ATCC 319)
麦芽膏20.0g 酵母膏 5.0g
蔗糖400.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml
74. PSA (Potato Sucrose Agar)
土豆200g 蔗糖20g
蒸馏水1000ml 琼脂20g
牛肉膏300g 水解酪蛋白17.5g
可溶性淀粉 1.5g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml 磺胺嘧啶(终浓度) 100μg/ml 氨苄青霉素(终浓度) 100μg/ml pH 7.3-7.4 76. 马铃薯牛肉汁培养基
麦芽糖20.0g 牛肉膏 5.0g
蛋白胨 3.0g 马铃薯200.0g
酵母膏 4.0g 麦芽汁10.0g
葡萄糖 4.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 7.0
78. BHI (Brain Heart Infusion)
牛脑200.0g 牛心浸出汁250.0g
蛋白胨10.0g 葡萄糖 2.0g
NaCl 5.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 6.8-7.2
79. YPG （Yeast Peptone Glucose）
酵母膏10.0g 蛋白胨20.0g
葡萄糖20.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 7.0
80. 兔食琼脂培养基（ATCC 340）
兔食（商店出售）25.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml
*煮沸兔食，并浸泡1/2小时，用多层纱布过滤，加琼脂于滤液中。
81. 土豆琼脂(ATCC 423)
200克去皮土豆切成小块于1000ml自来水中煮沸1小时,用细棉布过滤.加进5.0mgMnSO4,pH调至6.8,用自来水定容至1000ml。加进15.0g琼脂，溶化，分装并灭菌。82. 土豆浸汁加无机盐培养基(ATCC 470)
土豆2000g MnSO4.5H2O 0.02g
MgSO4.7H2O 0.4g ZnSO4.7H2O 0.01g
CuSO4. 5H2O 0.01g FeSO4.7H2O 0.1g
CaCl2.2H2O 0.1g K2HPO4 0.5g
* 称取200g去皮块状土豆,加入1000ml蒸馏水煮沸30分钟,多层纱布过滤,滤液中加入以上成分,溶解后定容至1000ml。
83. 无机盐淀粉琼脂培养基（ATCC 527）
可溶性淀粉10.0g K2HPO4 1.0g
MgSO4 1.0g NaCl 1.0g
（NH4）2SO4 2.0g CaCO3 2.0g
FeSO4.7H2O 0.001g MnCl2.7H2O 0.001g
ZnSO4.7H2O 0.001g 琼脂20.0g
新鲜鸡蛋15-16 蒸馏水375ml
2%孔雀(石)绿10.0g K4HPO4 1.5g
MgSO4.7H2O 0.375g 天冬酰胺 2.25g
甘油7.5ml 土豆粉18.8g
85. 燕麦片(Oatmeal)琼脂培养基
燕麦片60.0g 琼脂12.5g
蒸馏水1000ml
* 将燕麦片加600ml水中，制成匀浆，加热至45-50oC，然后加入已溶化琼脂的另400ml水，121oC灭菌90分钟。
86. 细菌培养基（ATCC 573）
（NH4）2SO4 1.3g K2HPO4 0.37g
MgSO4.7H2O 0.25g CaCl2.2H2O 0.07g
FeCl3 0.02g 葡萄糖 1.0g
酵母膏 1.0g 蒸馏水1000ml
用10N H2SO4 调pH至4.0。若配制固体培养基，为增强上述溶液的强度，pH需调至3.5，琼脂水溶液浓度为40g/L。两者分别高压灭菌，冷却至约50oC，无菌操作将两种溶液等体积混合，这一过程可避免琼脂被酸水解。
87. 碎肉培养基（ATCC 593）
牛肉（去脂肪）500.0g 蒸馏水1000ml
* 所用瘦牛肉或马肉（碾）磨碎前需去脂肪和周围的组织。将肉、水、NaOH混合后边搅拌边加热，冷至室温，去掉表面油脂，过滤，留下肉末和滤液。滤液加蒸馏水至1000ml。滤液中加下列成分：
蛋白胨30.0g 酵母膏 5.0g
K2HPO4 5.0g 0.025%刃天青（Resazurin）溶液4.0ml
然后煮沸，冷却，加0.5g L-半胱氨酸HCl。H2O，pH调至7.0。在氧气、氮气（O2-freenitrogen）和3%氢气条件下，按1份碎肉加4-5份以上溶液的比例分装于每支试管。在氮气和氢气条件下，使用橡皮塞，快排气，高压灭菌15分钟。
酵母膏 3.0g 麦芽汁 3.0g
蛋白胨 5.0g 葡萄糖10.0g
FeSO4.7H2O 0.1g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 6.8
灭菌：110oC，35分钟
89. TGYM培养基(ATCC 679)
胰蛋白胨 5.0g 葡萄糖 1.0g
酵母膏 3.0g 蒸馏水1000ml
DL-蛋氨酸(DL-Meth 0.5g
90. TYG培养基(ATCC 741)
胰蛋白胨 3.0g 酵母膏 3.0g
葡萄糖 3.0g K2HPO4 1.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
Na2HPO4 12.8g KH2PO4 3.0g
NaCl 0.5g NH4Cl 0.5g
葡萄糖(单独灭菌) 10.0g 维生素B1(单独灭菌) 1μg/ml 92. ISP3 (IFO 245)
燕麦粉20.0g 微量元素溶液1ml
FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g
ZnSO4.7H2O 0.1g
93. Oatmeal Agar
琼脂 5.0g 蒸馏水500ml
加热溶化速溶燕麦粉40.0g 蒸馏水250ml
加热溶化后与琼脂液混合加水至1000ml pH 5.8
94. V8-Juice Agar (AYCC 343)
V-8 果汁200g CaCO3 3.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
95. Czapek-Dox Agar (ATCC 312)
NaNO3 3.0g K2HPO4 1.0g
MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g
FeSO4.7H2O 0.01g 蔗糖(单独灭菌) 30.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
96. GC培养基(ATCC 814)
琼脂 5.0g GC琼脂培养基(BBL 11275) 36.0g
蒸馏水500.0ml
干燥色牛血红蛋白(BBL 11871) 10.0g 蒸馏水500.0ml Iso Vitale X (BBL 11876) 10.0ml
97. 固氮螺菌培养基(ATCC 838)
K2HPO4 0.1g KH2PO4 0.4g
MgSO4.7H2O 0.2g NaCl 0.1g
CaCl2 0.02g FeCl3 0.01g
NaMoO4.2H2O 0.002g 苹果酸钠(Na malate) 5.0g
酵母膏0.05g 蒸馏水1000ml
NaNO3 1.5g K2HPO4 0.04g
MgSO4.7H2O 0.075g CaCl2.7H2O 0.036g
Na2CO3 0.02g 柠檬酸0.006g
柠檬酸铁0.006g *微量元素溶液A5 1ml
氨苄青霉素(终浓度) 50μg/ml 蒸馏水1000ml
* 微量元素溶液A5
H3BO4 2.86g MnCl2.4H2O 1.81g
ZnSO4 0.222g Na2MoO4 0.39g
CuSO4.5H2O 0.079g Co(NO3)2.6H2O 49.4g
99. (Marine Agar)
蛋白胨 5.0g 酵母膏 1.0g
柠檬酸铁0.1g NaCl 19.45g
MgSO4.7H2O 5.9g KCl 0.55g
Na2SO4 3.24g CaCl2 1.8g
NaHCO3 0.16g KI 0.08g
微量元素10ml pH 7.0-7.6
* 微量元素溶液：
氯化锶0.034g 硅酸钠0.004g
蒸馏水1000ml H3BO4 0.022g
NaCl 0.0024g NaNO3 0.0016g
NaHPO4 0.008g 蒸馏水1000ml
100.(Yeast Starch Agar)
酵母膏 2.0g 可溶性淀粉10.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
葡萄糖 4.0g 酵母膏 2.0g
麦芽汁20.0g 琼脂20.0g
CaCO3 1.5g 蒸馏水1000ml
乳糖15.0g 玉米浆 5.0g
蛋白胨 5.0g NaCl 4.0g
MgSO4.7H2O 0.5g KH2PO4 0.6g
FeCl3.6H2O 0.005g CuSO4.5H2O 0.002g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
相对湿度65% pH 4.8
103.高氏1号(G)
可溶性淀粉20.0g KNO3 1.0g
K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g
NaCl 0.5g FeSO4.7H2O 0.01g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
104.葡萄糖-酵母膏琼脂(ATCC 846)
酵母膏 5.0g 蛋白胨 1.0g
KH2SO4 1.0g NaCl 1.0g
琼脂20.0g 蒸馏水950.0ml
补加50ml10%葡萄糖(葡萄糖溶液单独过滤灭菌)。105.Tep尿液(Uric Acid)琼脂(ATCC 894)
Na2HPO4.12H2O 9.0g KH2PO4 1.5g
MgSO4.7H2O 0.2g 柠檬酸铁铵(绿色) 1.2g
CaCl2 20.0mg MnCl2.4H2O 1.0mg
Trypticcase Soy Broth (BBL 11768) 3.0g 尿素4.0g 琼脂20.0 蒸馏水1000ml
106.增强梭菌生长的培养基(ATCC 1053)
胰蛋白胨10.0g 牛肉膏10.0g
NaCl 5.0g 可溶性淀粉 1.0g
半胱氨酸盐酸盐0.5g 醋酸钠 3.0g
琼脂15.0g 蒸馏水1000ml
107.酵母膏-甘露(糖)醇琼脂(ATCC 1205)
K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.2g
NaCl 0.1g 甘露(糖)醇10.0g
酵母膏0.4g 蒸馏水加至1000ml
108.Tomato Dextrin Agar (ATCC 965)
番茄汁20.0g 糊精20.0g
酵母膏10.0g CoCl2.6H2O 5.0mg
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
109.嗜热菌无机盐溶液(ATCC 1554)
FeSO4 1.0mg MgSO4.7H2O 200.0mg
Na2HPO4 210.0mg NaH2PO4 90.0mg
KCl 40.0mg CaCl2 15.0mg
NaNO3 0.25g NH4Cl 0.25g
微量元素溶液(见下面) 10.0ml
n-Heptadecane(C17) 0.1%(v/v) 蒸馏水1000ml
微量元素溶液：
CuSO4.5H2O 500mcg H3BO4 1.0mg
MnSO4.5H2O 7.0mcg ZnSO4.7H2O 7.0mg
MoO3 1.0mg CoSO4.7H2O 18.0mcg
蒸馏水1000ml
110.醋杆菌培养基(AS 1)
葡萄糖100.0g 酵母膏10.0g
CaCO3 20.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml pH 6.8
111. 葡萄糖天冬酰胺琼脂培养基(AS 11)
葡萄糖10.0g 天冬酰胺(Asparagine) 0.5g
K2HPO4 0.5g 蒸馏水1000ml
112.麦芽汁琼脂(AS13)
稀释去除啤酒花的麦芽汁至浓度为12Brix(白利-糖浓度单位)。按1.5%的比例将琼脂加进上述麦芽汁中，加热溶解，然后将此培养基分装试管中。高压灭菌：110℃，30分钟。
113.（ATCC 805）
酵母膏 1.0g K2HPO4 0.7g
MgSO4.7H2O 1.0g 甘露糖醇 5.0g
KH2PO4 0.1g 蒸馏水1000ml
琼脂20.0g pH 7.4
114.Todd-Hewitt Medium
牛心脏500.0g 蛋白胨20.0g
葡萄糖 2.0g NaCl 2.0g
Na2HPO4 0.4g Na2CO3 2.5g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
116.土豆葡萄糖琼脂培养基（AS 14）
土豆500g 葡萄糖20.0g
* 称取500克土豆，去皮切成丁，立即加入1000ml水，充分煮沸，用棉布过滤。滤液用水定容至1000ml，再加入其它成分。高压灭菌：115℃，20分钟。
117.PCA （ATCC 343）
土豆20.0g 胡萝卜20.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
118.（Mueller-Hinton Agar）
牛肉膏300.0g 水解酪蛋白17.5g
淀粉 1.5g 磺胺嘧啶（终浓度）50μg/ml
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
氨苄青霉素（终浓度）50μg/ml
119.豆饼粗粉琼脂培养基（AS 20）
10%豆饼粗粉浸液1000g 葡萄糖10.0g
NaCl 2.5g 琼脂15.0g
120.北京棒状杆菌噬菌体培养基（AS 48）
（1）牛肉膏 3.0g 蛋白胨 5.0g
NaCl 5.0g 葡萄糖10.0g
蒸馏水1000ml pH 7.0
（2）葡萄糖20.0g 玉米浆8.0g
K3PO4.3H2O 1.0g MgSO4.7H2O 0.4g
尿素（Urea） 5.0g Fe+,Mn+分别为 2 ppm
蒸馏水1000ml pH 7.0
121. 营养肉汤和葡萄糖培养基(AS 100)
牛肉膏10.0g 蛋白胨10.0g
葡萄糖10.0g NaCl 5.0g
琼脂15.0-20.0g 蒸馏水1000ml
122.(Trypticase Soya Agar)
胰蛋白胨17.0g 大豆胨 3.0g
葡萄糖 2.5g NaCl 5.0g
K2HPO4 2.5g 甘油(50%)
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
123.尿囊素无机盐培养基(DSM 6)
K2HPO4 0.8g KH2PO4 0.2g
MgSO4.7H2O 0.5g CaCl2.2H2O 0.05g
FeSO4.7H2O 0.01g MnSO4.H2O 1.0mg
尿囊素（Allantion）20.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
124.碱性营养琼脂培养基（DSM 31）
蛋白胨 5.0g 牛肉膏 3.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
灭菌后,加入无菌的1M Na - Sesquicar - bonate溶液：(1:10v/v)，至pH9.7。
Na - Sesquicarborbonate 溶液：
NaHCO3 4.2g Na2CO3 5.3g
蒸馏水100.0ml
125.Trypticase Soy 琼脂培养基（DSM 220）
酪蛋白胨（Peptone from casein）5.0g 豆粉蛋白胨（Peptone from soymeal）5.0g
NaCl 5.0 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml pH 7.3
126.（IFO 203）
蛋白胨10.0g 酵母膏 5.0g
肝浸出液25.0g 葡萄糖 3.0g
甘油（Glycerol）15.0g NaCl 3.0g
琼脂20.0g 蒸馏水定容至1000ml
* Wako Pure Chemicals Ind.Lte.，Osaka Japan.
127.（IFO 231）
酵母膏 1.0g 牛肉膏 1.0g
NZ胺（Amine），typeA 2.0g 麦芽糖（Maltose）10.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
* Sheffield Chemical Co.，San Ramon，CA 94583，USA or wako Pure Chemical Ind.Ltd.，Osaka，Japan. 128.胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂（TSA - YE）
胰蛋白胨15.5g 大豆蛋白胨 5.0g
NaCl 5.0g 酵母膏 6.5g
琼脂15.0g 蒸馏水1000ml
蛋白胨10.0g 牛肉膏10.0g
酵母膏 5.0g 葡萄糖10.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
蔗糖10.0g K2HPO4 0.5g
MgSO4.7H2O 0.2g MgCl2 0.2g
CaCO3 1.0g 酵母膏0.4g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
注：用无水MgSO4量减半
131.（无氮M）
酵母膏 1.0g 土壤浸汁液200g
琼脂20.0g 蒸馏水800g
甘露醇10.0g pH 7.2
土壤浸汁液制法：取沃土50g加水200ml，15磅灭菌1小时，过滤取滤液，加水到200ml。
牛肉膏 5.0g 酵母膏 5.0g
葡萄糖 5.0g 蛋白胨10.0g
NaCl 5.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 7.2
胰蛋白胨50.0g 大豆胨50.0g
牛肉膏50.0g 酵母膏25.0g
抗坏血酸 5.0g MgSO4.7H2O 2.5g
蔗糖10.0g 磷酸甘油二钠190.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
134.（乳酸钠M）
乳酸钠10.0g K2HPO4 1.67g
MgSO4.7H2O 0.1g KH2PO4 0.87g
NaCl 0.05g CaCl2 40mg
FeCl3 4mg 酵母膏 1.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
苹果酸 4.0g （NH4）2SO4 1.0g
MgSO4.7H2O 120mg CaCl2.2H2O 75mg
Na2EDTA 20mg 磷酸缓冲液（钾盐）10mM
生物素15μg 维生素B1 1mg
微量元素溶液1ml
* 微量元素溶液：
HBO3 0.7g MnSO4.H2O 398mg
ZnSO4.7H2O 60mg NaMoO.2H2O 188mg
Ca（NO3）2.3H2O 10mg NaCl 3.0g
蔗糖103.0g K2SO4 0.25g
MgCl2.6H2O 10.12g 葡萄糖10.0g
水解酪蛋白0.1g 微量元素溶液 2.0g
酵母膏 5.0g TES缓冲液57.3ml
KH2PO4（0.5%）10ml CaCl2.2H2O（5M）4ml
L-脯氨酸（20%）150ml NaOH（1N）7ml
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
* 微量元素溶液（每升）
ZnCl2 40mg FeCl2.6H2O 200mg
CuCl2.2H2O 10mg MnCl2.4H2O 10mg
Na2B4O7.10H2O 10mg （NH4）6Mo7O24.4H2O 10mg 后4种试剂单独灭菌，使用时加入。
137.MRS （DSM 11）
水解酪蛋白10.0g 酵母膏 5.0g
葡萄糖20.0g 吐温80 1.0g
柠檬酸铵 2.0g K2PO4 2.0g
NaAc 2.0g MnSO4.7H2O 0.2g
MgSO4 0.05g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 6.2-6.5
138.ISP5 （IFO 265）
L-天门冬氨酸 1.0g 甘油10.0g
K2HPO4 1.0g 微量元素溶液1ml
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
* 微量元素溶液：
FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g
ZnSO4.7H2O 0.1g
139. 羧基纤维素酵母培养基
羧甲基纤维素15.0g 酵母浸膏 1.0g
MgSO4.7H2O 0.5g KH2PO4 1.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
* 各成分依次溶于水中，121℃灭菌15分钟
140.（ATCC 464）
蛋白胨 5.0g 胰蛋白胨 5.0g
酵母膏 5.0g 葡萄糖 5.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
141.（IFFI 24 M）
牛肉膏 5.0g 酵母膏 5.0g
蛋白胨10.0g 葡萄糖10.0g
乳糖 5.0g NaCl 5.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
142.（IFFI 8 M）
麦芽汁或麦芽浸膏 3.0g 酵母膏 5.0g
CaCO3 6.0g 蒸馏水1000ml
琼脂20.0g pH自然
143. 土壤浸汁-蛋白胨牛肉膏培养基（ATCC 654）
蛋白胨 5.0g 牛肉膏 3.0g
琼脂15.0g 土壤浸汁1000ml
土壤浸汁：取干燥去杂石的土壤400g加入960ml自来水中。121℃高压灭菌1小时，到达压力后，至少保压30分钟。棉布初滤，再用滤纸过滤。再次灭菌121℃，20分钟。滤液用于配制培养基。
摘要：1、营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。用途：作普通琼脂平皿。2、血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养 1、营养琼脂（普通琼脂) 成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤) 100毫升 琼脂（视天气，琼脂质量而定) 制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。 用途：作普通琼脂平皿。 2、血琼脂平板（BA) 制法：取营养琼脂（PH7．6)，加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。 用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。 2．尿液，脓液 3．分离细菌标本用。 3、基础培养基（肉膏汤BB) 成份：蛋白胨10克牛肉膏5克 氯化钠5克水1000毫升 制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。 用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。 2 作普通琼脂斜面。 4、血液培养基（大管肉汤培养基) 成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升 2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升 3 MgSO 4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升 4 枸椽酸钠0．3g 制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。 用途：作血，骨髓培养用。 5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂) 成份：蛋白胨10克乳糖10克 氯化钠5克琼脂25（22)克 水1000毫升2%伊红溶液20毫升 0．5%美兰溶液20毫升 制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟)，冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。（高压以后方可再加乳糖) 用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。 1 6、罗文斯坦培养基 成份：磷酸二氢钾2．4克硫酸镁0．24克 枸椽酸钠0．6克天门冬素3．6克 纯甘油（丙三醇) 12毫升水600毫升 马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤) 2%孔雀绿水溶液20毫升 制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿)。可将其它物品称好，放入大三角瓶包扎好，高压灭菌。 2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟，灭菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。 3 将各成份按比例配好，分装每管约5毫升。 4 间歇灭菌第一次90℃1小时，第二次80℃半小时，第三次80℃半小时（或放85℃烤箱内连续二次)。 质控标准： 1 灭菌试验合格。 2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。 用途：作结核分枝杆菌培养用。
培养基 培养基(medium或culturemedium)是一种人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合养料。因此任何培养基都应具备微生物所需要的六大营养要素，且其间的比例是合适的。任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌，否则很快引起杂菌丛生，并破坏其固有成分和性质。 一、选用和设计培养基的原则和方法 在微生物学研究和生产实践中，配制合适的培养基是一项最基本的工作。但是，许多工作不但要求我们去选用一种现成的培养基，而且还经常要求亲自去设计一种更合适的培养基，这就要求人们除了熟悉微生物的营养知识和规律外，还要有一套科学的设计培养基所应遵循的基本原则和方法。不巧的是，在一般的书籍中，这方面的内容不易找到。为此，这里根据自己的体会，提出了四个原则和四种方法，以作为总结这类工作的一个尝试。 (一)四个原则 1．目的明确在设计新培养基前，首先要明确配制该培养基的目的，例如，要培养何菌？获何产物？用于实验室作科学研究还是用于大规模的发酵生产？作生产中的“种子”，还是用于发酵？等等。 如果某培养基将用于实验室研究，则一般不必过多地计较其成本。但必须明确对该培养基是作一般培养用，还是作精细的生理、代谢或遗传等研究用。如属前者，可尽量按天然培养基的要求来设计，如系后者，则主要应考虑设计一种组合培养基(即“合成培养基”，详后)。拟培养的微生物对象也十分重要。不同大类的微生物，对培养基中碳源与氮源间的比例、pH的高低、渗透压的大小、生长因子的有无以及特殊成分的添加等都要作相应的考虑。 如果某培养基将用于大规模的发酵生产上，则用作“种子”的培养基，一般其营养成分宜丰富些，尤其氮源的含量应较高(即C/N比低)；相反，如拟用作大量生产代谢产物的发酵培养基，则从总体来说，它的氮源含量宜比“种子”培养基稍低(即C/N比高)。除了对不同类型的微生物应考虑其特定条件外，在设计发酵培养基时，还应特别考虑到生产的代谢产物是主流代谢产物，或是次生代谢产物。如属主流代谢产物(一般指通过主要代谢途径产生的那些结构较简单、产量较高、价值较低的降解产物)，则生产不含氮的有机酸或醇类时，培养基中所含的碳源比例自然要比生产含氮的氨基酸类产物时高，反之，生产氨基酸类含氮量高的代谢产物时，氮源的比
按照培养基的成分来分 培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。 (1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 养基三类。 (1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。 (2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。 (3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
培养基和霉菌培养基等四类。 常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)琼脂培养基和察氏培养基等。 养基。 (1)加富培养基。是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用以培养要求比较苛刻的某些微生物。 (2)选择性培养基。是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。 (3)鉴别培养基。是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。
培养基的类型及应用 培养基种类繁多, 根据其成份、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。 1．按成份不同划分 (1)天然培养基(complex medium) 这类培养基主要以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成, 牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。基因克隆技术中常用的 LB(Luria-Bertani) 培养基也是一种复合培养基,其组成见表4-10。 常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏( 表4-11 ) 、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡罗卜汁、椰子汁等, 嗜粪微生物(coprophilous microorganisms) 可以利用粪水作为营养物质。复合培养基成本较低, 除在实验室经常使用外, 也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。 (2)合成培养基(synthetic medium) 合成培养基是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemically defined medium), 高氏1 号培养基和查氏培养基就属于此种类型。配制合成培养基时重复性强, 但与天然培养基相比其成本较高, 微生物在其中生长速度较慢, 一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。 2．根据物理状态划分 根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少, 可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。 (1)固体培养基(solid medium) 在液体培养基中加入一定量凝固剂即为固体培养基。理想的凝固剂应具备以下条件:1. 不被所培养的微生物分解利用;2. 在微生物生长的温度范围内保持固体状态。在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化, 通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;3. 凝 固剂凝固点温度不能太低, 否则将不利于微生物的生长;4. 凝固剂对所培养的微生物无毒害作 用;5. 凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;6. 透明度好,粘着力强;7. 配制方便且价格低廉。常 用的凝固剂有琼脂(agar) 、明胶(gelatin) 和硅胶(silica gel) 。表4-12 列出琼脂和明胶的一些主要特征。 对绝大多数微生物而言, 琼脂是最理想的凝固剂, 琼脂是由藻类(海产石花菜) 中提取的一种高度分支的复杂多糖；明胶是由胶原蛋白制备得到的产物, 是最早用来作为凝固剂的物质, 但由于其凝固点太低, 而且某些细菌和许多真菌产生的非特异性胞外蛋白酶以及梭菌产生的特异性胶原酶都能液化明胶, 目前已较少作为凝固剂；硅胶是由无机的硅酸钠(Na2SiO3) 及硅酸钾(K2SiO3) 被盐酸及硫酸中和时凝聚而成的胶体,它不含有机物, 适合配制分离与培养自养型微生物的培养基。 除在液体培养基中加入凝固剂制备的固体培养基外, 一些由天然固体基质制成的培养基 也属于固体培养基。例如, 由马铃薯块、胡罗卜条、小米、麸皮及米糠等制成固体状态的培养基就 属于此类。如生产酒的酒曲，生产食用菌的棉子壳培养基。 在实验室中，固体培养基一般是加入平皿或试管中，制成培养微生物的平板或斜面。固体培养 基为微生物提供一个营养表面，单个微生物细胞在这个营养表面进行生长繁殖，可以 形成单个菌落。固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏等。
第四章微生物营养试题 一．选择题： 40680 大多数微生物的营养类型属于： A. 光能自养 B. 光能异养 C. 化能自养 D. 化能异养 答 :( ) 40681 蓝细菌的营养类型属于: A．光能自养 B. 光能异养 C．化能自养 D. 化能异养 答 :( ) 40682 的营养类型属于： A．光能自养 B. 光能异养 C. 化能自养 D. 化能异养 答 :( ) 40683 碳素营养物质的主要功能是: A. A.构成细胞物质 B. B.提供能量 C. C.A,B 两者 答 :( ) 40684 占微生物细胞总重量 70%-90% 以上的细胞组分是: A. A.碳素物质 B. B.氮素物质 C. C.水 答 :( ) 40685 能用分子氮作氮源的微生物有： A.酵母菌 B.蓝细菌 C.苏云金杆菌 答 :( ) 40686 腐生型微生物的特征是： A.以死的有机物作营养物质 B.以有生命活性的有机物作营养物质 ,B 两者 答 :( ) 40687 自养型微生物和异养型微生物的主要差别是： A. A.所需能源物质不同 B. B.所需碳源不同 C. C.所需氮源不同 答 :( ) 40688 基团转位和主动运输的主要差别是： A. A.运输中需要各种载体参与 B. B.需要消耗能量 C. C.改变了被运输物质的化学结构 答 :( ) 40689 单纯扩散和促进扩散的主要区别是： A. A.物质运输的浓度梯度不同 B. B.前者不需能量 , 后者需要能量
C. 前者不需要载体 , 后者需要载体 答 :( ) 40690 微生物生长所需要的生长因子 ( 生长因素 ) 是： A. A.微量元素 B. B.氨基酸和碱基 C. C.维生素 D. D.B,C 二者 答 :( ) 40691 培养基中使用酵母膏主要为微生物提供：A．生长因素 B．C 源 C. N 源 答 :( ) 40692 细菌中存在的一种主要运输方式为： A. A.单纯扩散 B. B.促进扩散 C. C.主动运输 D. D.基团转位 答 :( ) 40693 制备培养基中常用的碳源物质是： A. A.糖类物质 B. B.碳酸盐 C. C.农副产品 答 :( ) 40694 微生物细胞中的 C 素含量大约占细胞干重的： A. A.10% B. B.30% C. C.50% D. D.70% 答 :( ) 40695 用牛肉膏作培养基能为微生物提供： A. A. C 源 B. B.N 源 C. C.生长因素 D. D.A,B,C 都提供 答 :( ) 40696 协助扩散的运输方式主要存在于： A. A.细菌 B. B.放线菌 C. C.真菌 答 :( ) 40697 主动运输的运输方式主要存在于： A. A.厌氧菌 B. B.兼性厌氧菌 C. C.好氧菌 答 :( ) 40698 基团转位的运输方式主要存在于： A. A.厌氧菌 B. B.兼性厌氧菌 C. C.好氧菌 D. D. A 和 B 答 :( ) 40699 缺少合成 AA 能力的微生物称为：
1．培养基应具备微生物生长所需要的六大营养要素是_碳源___、__氮源__、__能源__、___无机盐___、__生长因子__和???????????____水___。 2．碳源物对微生物的功能是__提供碳素来源__和__能量来源__，微生物可用的碳源物质主要有___糖类_、___有机酸_、__脂类_、__烃__、__ CO2及碳酸盐__等。 ３．微生物利用的氮源物质主要有_蛋白质_、_铵盐_、_硝酸盐__、_分子氮__、__酰胺_等，而常用的速效Ｎ源如__玉米粉__，它有利于___菌体生长___；迟效Ｎ源如__黄豆饼粉__、__花生饼粉_，它有利于___代谢产物的形成______。 ４．无机盐对微生物的生理功能是__作为酶活性中心的组成部分_、__维持生物大分子和细胞结构的稳定性_____ 、_调节并维持细胞的渗透压平衡__ 和 _控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质等_。 ５．微生物的营养类型可分为__光能无机自养型__、__光能有机异养型__、_化能无机自养型和_化能有机异养型_。微生物类型的可变性有利于_提高微生物对环境条件变化的适应能力_。 ６．生长因子主要包括_维生素_、__氨基酸_和__嘌呤及嘧啶_，它们对微生物所起的作用是__作为酶的辅基或辅酶参与新陈代谢_、_维持微生物正常生长_、_为合成核柑、核苷酸和核酸提供原料__。 ７．在微生物研究和生长实践中，选用和设计培养基的最基本要求是__选择适宜的营养物质_、_营养物的浓度及配比合适_、_物理、化学条件适宜_、_经济节约_和__精心设计、试验比较_。 ８．液体培养基中加入CaCO３的目的通常是为了__调节培养基的pH值___。 ９．营养物质进入细胞的方式有__单纯扩散__、__促进扩散__、_主动运输__和___基团移位_，而金黄色葡萄球菌是通过___主动运输__方式运输乳糖，大肠杆菌又是通过_基团移位__方式运输嘌呤和嘧啶的。 10．影响营养物质进入细胞的主要因素是_营养物质本身__、__微生物所处的环境__和___微生物细胞的透过屏障___。 11．实验室常用的有机氮源有__蛋白胨__和__牛肉膏__等，无机氮源有__硫酸铵__和_硝酸钠等。为节约成本，工厂中常用___豆饼粉__等作为有机氮源。 12．培养基按用途分可分为基础培养基、增殖培养基、鉴别培养基和选择培养基四种类型。 二．是非题 1、在固体培养基中，琼脂的浓度一般为—%．（×）
第四章微生物的营养和培养基 一、名词解释 C/N比：微生物培养基中所含碳源中的C原子的摩尔数与氮源中的N原子的摩尔数之比。 EMB培养基：伊红美蓝乳糖培养基。 氨基酸自养型微生物：不需要利用氨基酸作氮源的微生物，它们能把尿素、 铵盐、硝酸盐甚至氮气等简单氮源自行合成所需要的 一切氨基酸。 单纯扩散：指疏水性双分子层细胞膜（包括孔蛋白在内）在无载体蛋白参与下，单纯依靠物理扩散方式让许多小分子、非电离分子尤其是亲 水性分子被动通过的一种物质运送方式。 单细胞蛋白：单细胞蛋白，也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。 氮源：凡能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源。 的微生物。 光能自养型：光为能源，无机物为氢供体，基本碳源是CO 2 化能异养型：有机物为能源，有机物为氢供体，基本碳源是有机物的微生物。 的微生物。 化能自养型：无机物为能源，无机物为氢供体，基本碳源是CO 2基本培养基：仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基。 基团移位：指一类既需要特异性载体蛋白的参与，又需耗能的一种物质要运送方式。 鉴别培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中 找出目的菌菌落的培养基。 培养基：指由人工配制的、含有六大营养素、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。 生长因子：是一类对调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的微量有机物。 水活度：在天然或人为环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。 速效氮：可以直接被植物根系吸收的氮。 碳源：一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养源。
培养基的类型及应用 培养基种类繁多,根据其成份、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。 1．按成份不同划分 (1)天然培养基(complexmedium) 这类培养基主要以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成,牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。基因克隆技术中常用的LB(Luria-Bertani)培养基也是一种复合培养基,其组成见表4-10。 常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表4-11)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡罗卜汁、椰子汁等,嗜粪微生物(coprophilousmicroorganisms)可以利用粪水作为营养物质。复合培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。 (2)合成培养基(syntheticmedium) 合成培养基是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemicallydefinedmedium),高氏1号培养基和查氏培养基就属于此种类型。配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。 2．根据物理状态划分 根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少,可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。 (1)固体培养基(solidmedium) 在液体培养基中加入一定量凝固剂即为固体培养基。理想的凝固剂应具备以下条件:1.不被所培养的微生物分解利用;2.在微生物生长的温度范围内保持固体状态。在培养嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;3.凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;4.凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;5.凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;6.透明度好,粘着力强;7.配制方便且价格低廉。常用的凝固剂有琼脂(agar)、明胶(gelatin)和硅胶(silicagel)。表4-12列出琼脂和明胶的一些主要特征。 对绝大多数微生物而言,琼脂是最理想的凝固剂,琼脂是由藻类(海产石花菜)中提取的一种高度分支的复杂多糖；明胶是由胶原蛋白制备得到的产物,是最早用来作为凝固剂的物质,但由于其凝固点太低,而且某些细菌和许多真菌产生的非特异性胞外蛋白酶以及梭菌产生的特异性胶原酶都能液化明胶,目前已较少作为凝固剂；硅胶是由无机的硅酸钠(Na2SiO3)及硅酸钾(K2SiO3)被盐酸及硫酸中和时凝聚而成的胶体,它不含有机物,适合配制分离与培养自养型微生物的培养基。 除在液体培养基中加入凝固剂制备的固体培养基外,一些由天然固体基质制成的培养基也属于固体培养基。例如,由马铃薯块、胡罗卜条、小米、麸皮及米糠等制成固体状态的培养基就属于此类。如生产酒的酒曲，生产食用菌的棉子壳培养基。 在实验室中,固体培养基一般是加入平皿或试管中，制成培养微生物的平板或斜面。固体培养基为微生物提供一个营养表面,单个微生物细胞在这个营养表面进行生长繁殖,可以形成单个菌落。固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏等。
第五章微生物的营养和培养基 一、选择题 1. 大多数微生物的营养类型属于：（） A. 光能自养 B. 光能异养 C. 化能自养 D. 化能异养 2. 蓝细菌的营养类型属于：（） A．光能自养 B. 光能异养C．化能自养 D. 化能异养 3. 碳素营养物质的主要功能是：（） A. 构成细胞物质 B. 提供能量 C. A，B 两者 4. 占微生物细胞总重量70%-90% 以上的细胞组分是：（） A. 碳素物质 B. 氮素物质 C. 水 5. 能用分子氮作氮源的微生物有：（） A. 酵母菌 B. 蓝细菌 C. 苏云金杆菌 6. 大肠杆菌属于（）型的微生物。 A. 光能无机自养 B. 光能有机异养 C. 化能无机自养 D. 化能有机异养 7. 自养型微生物和异养型微生物的主要差别是：（） A. 所需能源物质不同 B. 所需碳源不同 C. 所需氮源不同 8. 基团转位和主动运输的主要差别是：（） A. 运输中需要各种载体参与 B. 需要消耗能量 C. 改变了被运输物质的化学结构 9. 单纯扩散和促进扩散的主要区别是：（） A. 物质运输的浓度梯度不同 B. 前者不需能量，后者需要能量 C. 前者不需要载体，后者需要载体 10. 微生物生长所需要的生长因子（生长因素）是：（） A. 微量元素 B. 氨基酸和碱基 C. 维生素 D. B，C二者 11. 培养基中使用酵母膏主要为微生物提供：（） A. 生长因素 B. C 源 C. N 源 12. 细菌中存在的一种主要运输方式为：（） A. 单纯扩散 B. 促进扩散 C. 主动运输 D. 基团转位 13. 微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的：（） A. 10% B. 30% C. 50% D.70%
第四章微生物的培养与生长 所有生物为了生存都必须不断地从外界环境中吸收所需的各种物质从中获得原料和能量以便合成新的细胞物质，生物所需的这些物质称之为营养物质。生物吸收利用营养物质的过程一般称为营养。营养物质是生物进行一切生命活动的物质基础，失去这个基础，一切生物都无法生存，微生物也不例外。可见，营养对微生物的重要性。 第一节微生物的营养 一、微生物细胞的化学组成 分析微生物细胞化学组成是了解微生物营养物质的基础。主要成分：C、H、N、O和无机成分。其中主要是水分、蛋白质、碳水化合物、脂肪、核酸和无机盐。水分占90-97，其余占3-10%。 二、营养物质及其生理功能 微生物所需的营养物质，主要包括碳素化合物、氮素化合物、水分、无机盐类和生长素。这些物质对微生物的生命活动主要有三方面的作用：（1）、供给微生物合成细胞物质的原料； （2）、合成代谢和生命活动所需的能量； （3）、调节新陈代谢。 （一）、碳源 碳源主要用来供给菌体生命活动所需的能量，构成军菌体细胞及代谢产物。常用的碳源有：糖类、脂肪和某些有机酸、部分醇类。 在某些特殊情况（如碳源贫乏），蛋白质水解产物或氨基酸等也可以被某些菌种作为碳源使用。由于菌种所含煤系统并不完全相同，所以，各种菌能利用的碳源亦不相同。 葡萄糖、麦芽糖、乳糖等单糖和双糖是绝大部分细菌、酵母菌、放线菌及霉菌可利用的碳源，大多数霉菌、放线菌和部分细菌可直接利用糊精和淀粉作为碳源。 （二）、氮源 氮源主要用来构成菌体细胞物质（如氨基酸、核酸、蛋白质）和含氮代谢产物。常用的氮源可分为两类：有机氮源和无机氮源。黄豆饼粉、花生饼粉、棉籽饼粉、玉米浆、蛋白胨、鱼粉等属于有机氮源；氨水、硫酸铵、尿素、硝酸钠、硝酸铵和磷酸氢二铵等为无机氮源。
第五章微生物营养习题及参考答案 一、名词解释 1．生长因子： 2．选择培养基(seclected media)： 3．基础培养基 4．合成培养基 5．化能异养微生物 6．化能自养微生物 7．光能自养微生物 8．光能异养微生物 9.单纯扩散 10.促进扩散 11.主动运输 12.基团移位 13.pH的内源调节 14.渗透压 15.水活度 二、填空题 1．微生物生长繁殖所需六大营养要素是、、、、 和等。 2．碳源物质为微生物提供和，碳源物质主要
有、、 、、等。 3．生长因子主要包括、和，其主要作用是、。 4．根据，微生物可分为自养型和异养型。 5．根据，微生物可分为光能营养型和化能营养型。 6．根据，微生物可分为无机营养型和有机营养型。 7．根据碳源、能源和电子供体性质的不同，微生物的营养类型可分为、、 和。 8．按用途划分，培养基可分为、、和等4种类型。 9．常用的培养基凝固剂有、和。 10．营养物质进入细胞的方式有、、和。 三、选择题（4个答案选1） 1．下列物质可用作生长因子的是（）。 A.葡萄糖 B.纤维素 C.NaGl D.叶酸 2．大肠杆菌属于（）型的微生物。 A.光能无机自养 B.光能有机异养 C.化能无机自养 D.化能有机异养 3．硝化细菌属于（）型的微生物。 A.光能无机自养 B.光能有机异养 C.化能无机自养 D.化能有机异养 4．某种细菌可利用无机物为电子供体而有贾稀为碳源，属于（）型的微生物。 A.兼养型 B.异养型 C.自养型 D.原养型 5、化能无机自养微生物可利用（）为电子供体。
A.CO 2 B.H 2 C.O 2 D.H 2 O 6．用来分离产胞外蛋白酶菌株的酪素培养基是一种（）。 A.基础培养基 B.加富培养基 C.选择培养基 D.鉴别培养基 7、固体培养基中琼脂含量一般为（）。 8．用来分离固氮菌的培养基中缺乏氮源，这种培养基是一种（）。 A.基础培养基 B.加富培养基 C.选择培养基 D.鉴别培养基 9．水分子可通过（）进入细胞。 A.主动运输 B.扩散 C.促进扩散 D.基团转位 10．被运输物质进入细胞前后物质结构发生变化的是（）。 A．主动运输 B.扩散 C.促进扩散 D.基团转位 四、是非题 1．某些假单胞菌可以利用多达90多种以上的碳源物质。 2．碳源对配制任何微生物的培养基都是必不可少的。 3．氨基酸在碳源缺乏时可被微生物用作碳源物质，但不能提供能源。 4．培养营养缺陷型微生物的培养基必须同时加入维生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。 5．为使微生物生长旺盛，培养基中营养物质的浓度越高越好。 6．对含葡萄糖的培养基进行高压蒸汽灭菌时可以121.3℃加热20min即可。 7．半固体培养基常用来观察微生物的运动特征。 8．基础培养基可用来培养所有类型的微生物。 9．伊红美蓝（EMB）培养基中，伊红美蓝的作用是促进大肠杆菌的生长。 10．在促进扩散过程中，载体蛋白对被运输物质具有较高的专一性，一种载体蛋白只能运输一种物质。 五、简答题 1．能否精确地确定微生物对微量元素的需求，为什么？ 2．为什么生长因子通常是维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶，而葡萄糖通常不
第四章 微生物的营养与培养基 目的要求： 通过本章的课堂教学，使学生了解微生物营养类型的特点及多样性，以及根据不同微生物各自的营养要求，配制相应的培养基对微生物培养的理论知识，为今后对微生物的研究与利用打下基础。 教学内容： 1、微生物的6类营养要素 2、微生物的营养类型 3、营养物质进入细胞的方式 单纯扩散(simple diffusion) 促进扩散(facilitated diffusion) 主动运输(active transport) 基团移位(group translocation) 4、培养基(media)配制的原则 5、培养基的种类 重点内容： 微生物 营养类型 营养物质进入细胞的方式 培养基(media)配制的原则及主要培养基类型 营养（nutrition）：微生物CUN 从外部环境中摄取对其生命活动必须的能量和物质，以满足其生长和繁殖等生理活动的过程。 营养物质（nutrient）：那些能够满足机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需要的物质称为营养物质。营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。 第一节 微生物的六种营养要素 一、微生物细胞的化学组成 细胞化学元素组成： 主要元素: 包括碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等，碳、氢、氧、氮、磷、硫等 微量元素: 包括锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。 微生物细胞组成：有机物、无机物和水。 有机物：主要包括蛋白质、糖、脂、核酸、维生素以及它们的降解产物和一些代谢产物等物质。 无机物：是指与有机物相结构或单独存在于细胞中的无机盐(inorganic salt)等物质。 水：细胞维持正常生命活动所不可少的，一般可占细胞重量的70%-90%。
第四章微生物的营养和培养基习题参考答案 A部分习题参考答案 一、选择题 1-5. DACCB；6-10. ABCCD；11-15. ACCDC 二、是非题 1-5. TFTTT；6-10. TTTTF 三、填空题 1.CO2，糖类，醇类，有机酸类 2.氮气，硝态氮，铵态氮，有机氮化物 3.光，CO2，有机物，CO2 4.氧化无机物，CO2 5.光能自养型，光能异养型，化能自养型，化能异养型 6.基团转位. 7.NH3，CO2，化能自养型 8.碳素，氮素，矿质元素，生长因素，水. 9.有机物，无机物，水. 10.主动输送，基团转位 11.主动运输，基团移位. 12.光能，CO2，，有机物，H2O，，有机物 13.0.63-0.99，5:1 14.病毒，立克次氏体，人工配制的培养基，活体培养 15.糖，氨基酸，某些阳离子 四、解释题 1.微生物营养：指微生物获得与利用营养物质的过程。 2.光能自养型：以日光为能源，以CO2为碳源合成细胞有机物的营养类型。 3.化能自养型：通过以氧化无机物释放出的能量还原CO2成为细胞有机物的营养类型。 4.化能异养型：用有机物分解时释放出的能量将有机物分解的中间产物合成新的有机物的营养类型。 5.有机营养型微生物：只以适宜的有机化合物作为营养物质的微生物。 6.无机营养型微生物：以CO2作唯一碳源，不需要有机养料的微生物。 7.生长因子：微生物生长不可缺少的微量有机物，包括维生素，氨基酸及碱基等。 8.单纯扩散：营养物质进入微生物细胞时不需要载体参加，也不消耗代谢能量，而是顺营养物的浓度梯度由高浓度向低浓度运输营养物质进入微生物细胞的运输方式。
常见微生物培养基 培养基 Medium 是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料 一般都含有碳水化合物、含氮 物质、无机盐 包括微量元素 以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。 按所用原料不同 可分为两类 应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的 称为天然培养基 应用化学药品配成并标 明成分的 称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基 大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保 管 现在均改制成粉末。培养基由于配制的原料不同 使用要求不同 而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在 受热、吸潮后 易被细菌污染或分解变质 因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培 养基 如组织培养基 较长时间的贮存 必须放在2~6。C的冰箱内。 常见培养基有 1、细菌培养基 配方一牛肉膏琼脂培养基 牛肉膏0.3克 蛋白胨1.0克 氯化钠0.5克 琼脂 1.5克 水100毫升 在烧杯内加水100毫升 放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠 用蜡笔在烧杯外作上记号后 放在火上加热。待烧杯内各 组分溶解后 加入琼脂 不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水 用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH 值到7.2 7.6,分装在各个试管里 加棉花塞 用高压蒸汽灭菌30分钟。 配方二马铃薯培养基 取新鲜牛心 除去脂肪和血管 250克 用刀细细剁成肉末后 加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好 记号 煮沸 转用文火炖2小时。过滤 滤出的肉末干燥处理 滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升 肉汤和少量碎末状的干牛心 灭菌 备用。 配方三根瘤菌培养基 葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克 碳酸钙3克硫酸镁0.2克 酵母粉0.4克琼脂20克 水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升 先把琼脂加水煮沸溶解 然后分别加入其他组分 搅拌使溶解后 分装 灭菌 备用。
江西农业大学生物科学与工程学院 第5章微生物营养和培养基练习题(A卷)试卷部分班级:___________学号:___________姓名:___________得分:___________ 题目部分，(卷面共有66题,146.0分,各大题标有题量和总分) 一、选择(12小题,共13.0分) (1分)[1]参与微生物基团移位运输方式的体系是： A.Hpr； B.酶1； C.酶2； D.Hpr+酶1+酶2 答：（） (1分)[2]微生物细胞吸收糖、核苷酸、脂肪酸和腺嘌呤等物质，通常采用的运输方式是：A.主动运输；B.促进扩散； C.基团移位； D.单纯扩散。答：（） (1分)[3]在鉴别性EMB培养基上，在反射光下大肠杆菌菌落呈现的颜色是： A.棕色； B.粉红色； C.绿色并带有金属光泽； D.无色。答：（） (1分)[4]培养放线菌的高氏一号培养基和培养真菌的察氏培养基属于下列培养基中的：A.天然培养基；B.组合培养基； C.半组合培养基； D.鉴别培养基。答：（） (1分)[5]微生物细胞吸收无机离子、有机离子、乳糖、蜜二糖或葡萄糖，通常采用的运输方式是： A.基团移位； B.单纯扩散； C.主动运输； D.促进扩散。答：（） (1分)[6]根据培养基上呈现菌落颜色的不同而能鉴别大肠杆菌和肠杆菌属几种细菌的培养基是： A.Ashby无氮培养基； B.Martin培养基； C.高氏一号培养基； D.EMB培养基。答：（） (1分)[7]为避免由于微生物生长繁殖过程中的产物而造成培养基pH值的变化，可采用的调节方法是： A.在配制培养基时加入磷酸盐缓冲液或不溶性CaCO3。 B.在配制培养基时应高于或低于最适pH值； C.在配制培养基时降低或提高碳、氮源用量；改变碳氮比。 D.在培养过程中控制温度和通气量。答：（） (1分)[8]微生物细胞吸收O2、CO2、乙醇和少数氨基酸分子，通常采用的运输方式是：A.促进扩散；B.单纯扩散； C.主动运输； D.基团移位。答：（） (2分)[9]微生物细胞吸收营养物质的促进扩散和主动运输方式最主要的差异在于： A.营养物质在运输前后均发生分子结构变化，促进扩散变化小，主动运输变化大。
高中生物详尽的培养基的分类 培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳源、氮源、无机盐（包括微量元素）水以及维生素等生长因子。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。 根据培养基成分的原料来源不同，分类合成培养基、半合成培养基与天然培养基 天然培养基：利用动、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。由化学成分不清楚或不衡定的天然有机物配制而成。成分复杂，但营养丰富全面。常用于实验研究和生产。例如，麦芽汁培养基、玉米粉培养基，以及生产中使用的麸皮、锯末等。 合成培养基：指一类由化学成分已知的有机物和无机物配制而成,又称为综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。但营养局限，微生物生长缓慢。适用于菌种分离、选育、遗传分析及生物测定等。如培养放线菌的高氏培养基、培养霉菌的察氏培养基以及各种化能自养菌培养基等。 例如，葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等。 半合成培养基：由某些天然物质与少量已知成分的化学物质配制而成。营养全面，能有效地满足微生物对营养的需求。广泛应用于微生物的培养。如培养细菌用的牛肉膏蛋白胨培养基，培养霉菌的土豆葡萄糖培养基，工业生产中常用的玉米粉等天然物质加无机盐配制的各种发酵培养基等。 例如，马铃薯蔗糖培养基。 按培养基外观的物理状态进行分类可分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基。 液体培养基：一类呈液态的培养基。用各种营养成分加水配成，或用天然物质的浸汁(麦芽汁、豆芽汁等)制成。组分均一，适宜各类微生物的营养生长。广泛应用于实验研究及大规模工业生产中，有利于广泛获得大量菌体或代谢产物。 固体培养基：一类外观呈固态的培养基。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。在液体培养基中加入凝固剂，或用麸皮等固体原料配制。常用的凝固剂是琼脂(又称琼胶、洋菜)，由石花菜等海藻中提取加工制成。市售琼脂为条状、片状或粉末状，主要成分为多聚半乳糖的硫酸酯，绝大多数微生物不能将其分解，在培养基中仅起支撑作用。其熔点约98℃，凝固点42℃，1.5～2％的水溶液在一般培养温度下呈凝胶状态。琼脂固体培养基广泛应用于微生物的分离培养、菌种鉴定和保藏。 半固体培养基：指液体培养基中加入0.2～0.5％琼脂制成半固体状态的培养基。用于观察细菌的运动、菌种鉴定及测定噬菌体的效价等。 根据培养基的用途(功能)，可分为选择培养基、鉴别培养基、加富培养
36种微生物常用培养基配制 1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，～。 2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl ，K2HPO4?3H2O ，MgSO4?，FeSO4?，水1000mL，～。配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。 3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌） K2HPO41g，MgSO4?，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。 4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养) 马铃薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下： 将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。 5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养) 蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4?，KCl ，FeSO4?，水1000mL，～。 培养基(用于支原体培养) 牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15g，～，分装每瓶70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)，以上混合后倾注平板。 *注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。 7.麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基) 葡萄糖, KCl ，酵母膏，醋酸钠，琼脂，蒸馏水l00mL。溶解后分装试管，1l5℃湿热灭菌15min。 8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于.反应和甲基红试验) 蛋白胨，葡萄糖，K2HPO4 ，水100mL，，1l5℃湿热灭菌20min。 9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验) 蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，～，121℃湿热灭菌20min。 10.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验) 蛋白胨，NaCl ，K2HPO4 ，水100mL，溴麝香草酚蓝(1%水溶液)，糖类lg。分别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中，调pH至，再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后，再加水配成1%水溶液)，加入糖类，分装试管，装量4～5cm高，并倒放入一杜氏小管(管口向下，管内充满培养液)。115℃湿热灭菌20min。灭菌时注意适当延长煮沸时间，尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为%)。
微生物培养基的分类方法 由于各种生物分子实验所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。就目前能提供的就有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、使用目的等而分成若干不同的类型。这里给大家大致介绍培养基的分类类型。 1.按照培养基的成分分类 培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。 (1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 2.按照培养基的物理状态分类 培养基按其物理状态可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三类。 (1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。 (2)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。 (3)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。 3.按照微生物的种类分类 培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、霉菌培养基和酵母菌培养基四类。
第四章微生物的营养和培养基 一、目的要求 掌握微生物细胞的组成、营养类型、物质进入细胞的方式及及培养基的配制。 二、教学内容 1．微生物的营养要素 2．微生物的营养类型 3．营养物质进入细胞的方式 4．培养基 三、重点内容 微生物的营养类型以及配制培养基的原则 四、教学方法 利用多媒体进行教学。 微生物同其他生物一样，为了生存必须从环境中吸收营养物质，通过新陈代谢将其转化成自身的细胞物质或代谢物，并从中获取生命活动所需要的能量，同时将代谢活动产生的废物排出体外。那些能够满足机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需要的物质称为营养物质。微生物获得和利用营养物质的过程称为营养。营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。 第一节微生物的六种营养要素 一、微生物细胞的化学组成 1．化学元素（chemical element） 构成微生物细胞的物质基础是各种化学元素。根据微生物对各类化学元素需要量的大小,可将它们分为主要元素和微量元素,主要元素包括碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等，碳、氢、氧、氮、磷、硫这六种主要元素可占细菌细胞干重的97%。微量元素包括锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。 组成微生物细胞的各类化学元素的比例常因微生物种类的不同而各异。不仅如此，微生物细胞的化学元素组成也常随菌龄及培养条
件的不同而在一定范围内发生变化，幼龄的比老龄的含氮量高，在氮源丰富的培养基生长的细胞比在氮源相对贫乏的培养基上生长的细胞含量高。 2. 化学成分及其分析 各种化学元素主要以有机物、无机物和水的形式存在于细胞中。有机物主要包括蛋白质、糖、脂、核酸、维生素以及它们的降解产物和一些代谢产物等物质。对细胞有机物成分的分析通常采用两种方式：一是用化学方法直接抽提细胞内的各种有机成分，然后加以定性和定量分析；二是先将细胞破碎，然后获得不同的亚显微结构，再分析这些结构的化学成分。无机物是指与有机物相结构或单独存在于细胞中的无机盐(inorganic salt)等物质。分析细胞无机成分时一般将干细胞在高温炉（550℃）中焚烧成灰，所得的灰分物质是各种无机元素的氧化物，称为灰分(ash constituent)。采用无机化学常规分析法可定性定量分析出灰分中各种无机元素的含量。 水是细胞维持正常生命活动所不可少的，一般可占细胞重量的70%-90%。细胞湿重(wet weight)与干重(dry weight)之差为细胞含水量，常以百分率表示。将细胞表面所吸附的水分除去后称量所得重量即为湿重，一般以单位培养液中所含细胞重量表示（g/L或mg/ml），但具体测量过程中，常由于细胞表面吸附水分除去程度的不同而导致测量结果有误差，聚集在一起的单细胞微生物表面吸附的水分难以除去，这些吸附的水分可占湿重的10%。采用高温（105℃）烘干、低温真空干燥和红外线快速烘干等方法将细胞干燥至恒重即为干重。值得注意的是：高温烘干会导致细胞物质分解，而利用后两种方法所得结果较为可靠。 二、微生物的营养要素 微生物生长所需要的元素主要以相应的有机物与无机物的形式提供的，也有小部分可以由分子态的气体物质提供。营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可以将它们区分成碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。 1.碳源在微生物生长过程中能为微生物提供碳素来源的物质称为碳源。碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的细胞物质（如糖类、脂类、蛋白质等）和代谢产物，碳可占一般细菌细胞干重的一半。同时绝大部分碳源物质在细胞内生化反应过程中还能为机体提供维持生命活动所需的能源，因此碳源物质通常